Funding by the University of East Anglia, the EPSRC (EP/L012855/1) and the EU (H2020-MSCA-IF-2014-EF-ST-658172) is gratefully acknowledged (MTQ).

注意：使用する前に、関連するすべての物質安全データシート（MSDS）を参照してください。 1. NMR試料の調製<ol><li> N、N-ジメチルアセトアミド5mgを秤量し、低温のための適切なNMRチューブに追加し、トルエンさd 8の0.6ミリリットルに溶解します。 </li></ol> 2. NMR実験のセットアップ25 <ol><li> NOEスペクトルの取得<ol><li> 1次元NOE（核オーバーハウザー効果）実験を実行します。26 注：NOE効果は任意の温度で起こることができます。 SSTD NMR実験で照射される信号を照射する1次元NOEスペクトルは、ここで使用したサンプル中の回転と磁化移動が最小化されたことを確認するために、-40℃で記録したところ、したがってNOE、存在しない場合、優勢になると、この実験で測定すること。理想的には、2つの間のNOE効果は核shoulを交換しますSSTD法との干渉を避けるために存在していないdは。 </li></ol></li><li> SSTD NMR実験のセットアップ<ol><li>空気の流れをオンにするソフトウェアのコマンドラインの最初のタイピングEJによって磁石のサンプルを挿入します。そして、磁石の上にサンプルを入れ、ijを入力します。サンプルは、磁石の内側にあるまで待ちます。 </li><li>サンプルたら、磁石にコマンドラインで型EDTEです。実験（この場合は295.5 K）を実行するために最初に選択された温度まで温度を変更します。サンプルを少なくとも20分間、選択された温度で安定してみましょう。 </li><li>サンプル上の1D 1 H-NMR実験を実行します。 <ol><li> 1 H-NMR実験の新しいデータセットを作成します。このためにFILE / NEWをクリックして新規の実験に名前を付けます。 </li><li>順次入力し、仕上げに前のコマンドを待っている： ロック 、 アートマ 、topshim、getprosolとRGA。 </li><li>タイプ&lt;em&gt;のプロトン実験を取得するZG。それはフーリエ変換型EFPとAPKを終了したら、それを変換し、位相を調整。 </li></ol></li><li> 1 H NMR実験、例えば、新しいデータセットを作成します。このためにFILE / NEWをクリックして新規の実験に名前を付けます。 </li><li>この新しいデータセットでは、コマンドラインでRPARと入力します。例えばSTDDIFFESGPのために、リストから「STDDIFF」パラメータセットのいずれかを選択し、「読み」、次に（ 図1）「すべてを読み込む」をクリックします。また、 すべてのRPAR STDDIFFESGPを入力してこれを行います。 注記：この実験は、このパルスシーケンスを用いて行うことができます。しかし、我々の実験で使用されるパルスプログラムがSTDDIFFました。 </li><li> STDDIFFパルスシーケンスを選択するには、PULPROGラインの3つのドット（ 図2、図 3）でボタンをクリックします。 </li><li> SSTD NMR実験を行う前に、1 H 90°ハードPULSをキャリブレーションE（P1）。この目的のために、サンプルを所望の温度（ステップ2.2.2）で、磁石であることを確認してください。コマンドラインで入力しpulsecalと高い電力（PL1 = -1デシベルこの場合）、 すなわち、最短パルス（ 図4）を与える1で90°パルスの値をコピーします。 </li><li>実験で校正ハードパルスの値を導入します。タイプgetprosol 1H（ステップ2.2.7で得られたP1の値）（PL1の値）（ 図5）。 </li><li>整形されたパルスの長さを設定します。タイプP13と50,000マイクロ秒（ 図6）の値を紹介します。 </li><li>選択パルス形状を設定します。これを行うには、電源に移動して（ 図7）を成形するために、次の「編集...」ボタンをクリックします。整形パルス13に移動し、選択します。GAUS 1.1000（ 図8）。 </li><li>選択パルス電力（SP13）を設定します。適切な何かにそれを設定し、 すなわち </em&gt; 40〜60 dBのこのシステム上で（ 図8）（約120ヘルツの電界強度に対応します）。過度の電界強度が許容できない飽和効果につながることができます。27-29 注：50デシベルは、我々の場合には最適でした。これは減衰スケールなので、小さい方の値が高い高周波のパワーであることを考慮してください。それは長い時間（数秒）に適用される飽和ガウスカスケードに対応するように、SP13は、（必要であれば、のような高電力で長パルスがプローブヘッドを損傷する恐れがあり、機器の仕様を参照してください）40デシベル以下に行くべきではありません。私たちの経験41から61で（この作業で-1デシベル）ハード1 H 90°パルスの減衰上記デシベルが正常に動作します。常に同様の飽和レベルにつながる可能な限り最高の減衰を選択してみてください。 </li><li> ナノ秒を入力し、8に設定し、DSを入力し、4に設定します。 </li></ol></li></ol> 3. NMRデータ集録ANd処理25 <ol><li> SSTD NMR実験獲得<ol><li>照射される信号がどこにあるか確認するために、ステップ2.2.3で行わ1 H NMR実験を開きます。このため、ソフトウェアのブラウザで実験を検索し、右データセット内をクリックし、「新しいウィンドウで表示」をクリックします。 </li><li> ppmでの化学シフトを照射し、書き留めて信号の中心にカーソル線を移動します。実験に使用されるスペクトル幅を選択します。 注：この場合、照射された信号は2.17 ppmになり、使用するスペクトル幅は1.46 ppmでした。何の化学シフト補正が使用されていないか、照射回数が誤って設定することができることを確認してください。 </li><li> 2.2節で述べたセットアップを使用して、以前に作成したSSTD NMR実験に移動します。 </li><li>照射の周波数のリストを作成します。このため、コマンドラインでfq2list入力し、既存のリストを選択します。 </li><li>リストを編集3最初の行（ 図9）で、次のデータを含む照射周波数の： 行1、Pは、（以下のデータはppmであることを示す）; 行2 3.1で測定して、ppmで照射される信号の周波数を。 1;行3.40 ppmの （遠いその周波数での照射がスペクトルに影響を与えないように、化合物の1 H信号からある周波数）。 </li><li>新しい名前でリストを保存し、コマンドラインでfq2list入力し、先ほど作成したリストを選択します。 </li><li> 、検討中の信号について実験を中心型o1pと実験の中心として照射される信号の化学シフトを選択します。 </li><li>スペクトル幅を選択するタイプのSW（この場合は1.46 ppmのが、他のスペクトル幅を選択することができます）。 注：スペクトル幅を変更した後に得られた収集時間が長すぎる場合（スペクトルにおけるより多くのノイズを導入します）それは、CAnは希望する自由誘導減衰（FID）解像度（FIDRES、この場合は0.25 Hz）を提供するために、AQを入力して調整すること。 </li><li>インタースキャン緩和遅延D1の値を選択してください。それはT最も遅いリラックスの1の少なくとも1から5倍の値であることを確認してください プロトン。 注：我々は、実験の中で最も長い飽和時間（D20）で40秒、それを設定します。このように、すべての実験は、「スキャンごとに &quot;同じ合計時間（遅延+飽和時間+パルス+取得時間）を維持します。 </li><li> D1を入力し、40秒に設定します。 </li><li> D20を入力し、40秒に設定することで飽和時間の最初の値を設定します。 RGAを入力して、自動的に受信機の利得（RG）を決定します 。 </li><li> iexpno入力して、次の実験を作成します。 D20を入力し、この実験では20秒の飽和時間を選択します。自動的にRGを決定するためにRGAを入力します。 </li> &lt;李は&gt; D20 = 10、5、2.5、1.25、0.625、0.3秒のための最後のステップを繰り返します。 </li><li>すべての実験が作成されると、最初の1を開き、コマンドライン型multizgで（ すなわち 、multizg 8）この場合の実験の数、8を指定します。 </li></ol></li><li> SSTD NMR実験処理<ol><li>セットのEXPNO 1からPROCNO 1（プロセス番号）（実験番号）（高い飽和時間との1）を開きます。 </li><li>コマンドライン型ポンドで1.5に値を設定します。 注意：非常に高い信号対雑音比を有するスペクトルの場合、この値を小さくすることができます。スペクトル分解能は厳しく影響されない場合逆に、それは、ノイズの多い実験のために増加させることができました。 </li><li> PROCNO = 2（ 図10）で、コマンドライン型EFPとプロセスFID番号= 1（「オンレゾナンス」スペクトル）で。 </li><li> インタラクティブ位相補正bをクリックすることで、実験の位相を修正uttonは、2D実験として保存します。保存して終了（ 図11）。 </li><li> PROCNO 1に移動するためのコマンドラインを入力担当者1。 </li><li> PROCNO = 3（ 図12）で、コマンドライン型EFPとプロセスFID番号= 2（「オフレゾナンス」スペクトル）で。 </li><li>コマンドライン型.mdで、その後の両方に処理スペクトルを有する複数の表示ウィンドウを表示する担当者2：2（中央飽和の信号と1）と3（飽和パルス列が40 ppmに適用した1 ）（ 図13）。 </li><li>差スペクトルを計算し、PROCNO 4.終了し、複数の表示窓にそれを保存するために、デルタ記号（ 図13）でボタンをクリックします。 </li><li>左（による化学交換プロセスに彩度の移動が観察された信号）の信号の積分範囲を選択します。常にPROCNO 3とPROCNO 4に同じ領域を統合します。 <br/&gt;注： - 2.67 ppmで、この実験で用いた積分範囲は2.55でした。 </li><li>統合後は、実験のそれぞれに「積分」タブに移動し、「インテグラ[ABS]」（ 図14）の値をコピーします。 </li><li> 40秒（ηSSTD =スピン飽和移動差パラメータ）の飽和時間のためのηSSTDの値であることPROCNO 3の積分でPROCNO 4で積分を分割します。21 </li><li>異なる飽和時間と実験の残りの手順を繰り返します。 </li></ol></li></ol> 4.データ解析30 <ol><li>データの分析は、動態パラメータを取得します<ol><li>飽和時間対得ηSSTD値をプロットします。21 </li><li>式に得られた曲線を調整するために、指数フィットを実行 <img alt="式（1）" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq1.jpg" /> <img aLT = &quot;数2&quot; SRC = &quot;/ファイル/ ftp_upload / 54499 / 54499eq2.jpg&quot; /&gt; <img alt="式3" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq3.jpg" /> = <img alt="式4" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq4.jpg" />非常に長い飽和時 トン=時間</li><li> ηSSTD MAXの値を計算し、δと以下の式に従って速度定数（k）と緩和時間（Tの1A）の値を計算するためにそれらを使用します： <img alt="式（5）" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq5.jpg" /> スピンAのT 1A =縦緩和時間定数 K =相互サイト為替反応速度定数<ol><li>により一定の運動速度を取得します。 <img alt="式6" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq6.jpg" /></li></ol></li></ol></li><li>熱力学パラメータを取得するためにアイリングプロット<ol><li>プロットLN 1 / T対（K / T）（T =絶対温度）、雌牛の値を用い<html>異なる温度でチック率。 </li><li>アイリング式に得られたデータを調整するための線形フィットを実行します。 <img alt="式（7）" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq7.jpg" /> <img alt="式8" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq8.jpg" /> <img alt="式9" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq9.jpg" /> <img alt="式10" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq10.jpg" /> R =気体定数 k個のB =ボルツマン定数 T =絶対温度</li><li> ≠ΔH熱力学的パラメータを計算≠とΔS。 </li><li>以下の式を用いて、E A（298）とΔG≠（298）の値を計算します。 <img alt="式11" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq11.jpg" /> <img alt="式12" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq12.jpg" /> S / ftp_upload / 54499 / 54499eq13.jpg &quot;/&gt; <img alt="式14" src="/files/ftp_upload/54499/54499eq14.jpg" /> </li></ol></li></ol>

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The authors declare that they have no competing financial interests.

One of the more obvious advantages of this methodology is that the rate constants and the relaxation time for a given temperature can be obtained with a single set of experiments, with a robust pulse sequence (the same used for STD experiments to study protein-ligand interactions, which is typically found within the available set of experiments from the spectrometer manufacturer). This simplifies the experimental setup since there is no need to measure T1 or reach steady state saturation. Besides, it is remarkable that this method does not depend on the magnet strength, as coalescence methods. On the other hand, the main limitation is that this technique cannot be applied to chemical exchange processes too fast or too slow, which would depend on the temperature range of the NMR machine or the solvents used.
This new technique for the calculation of kinetic parameters can be applied to a great variety of substrates and its applicability has already been demonstrated with some interesting molecules.21 The kinetic parameters of the 4-N,N-dimethylamido[2.2]paracyclophane, a challenging substrate in which the signal of one of the methyl groups of interest is overlapped with other signals from the molecule, were successfully calculated using SSTD NMR. Interestingly, this methodology can be applied as long as one of the signals of study is isolated. SSTD NMR is also a useful protocol for the calculation of kinetic parameters in molecules in which the coalescence temperature is so high that the molecule decomposes before reaching it. This is the case with PtCl2(dimethylallene)(pyridine), in which the methodology was successfully applied without the need of reaching coalescence. The choice of solvents and temperatures is critical to obtain good results, since the chemical exchange rates can vary significantly with these parameters. Moreover, in addition to the criteria in a normal NMR experiment, key steps in a SSTD NMR experiment are the selectivity of the irradiation as well as the temperature control. Both factors have to be precise to guarantee the success of the experiment.
The representative results presented here are for the kinetics of intramolecular chemical exchange, but the technique can also be applied to study the kinetics of intermolecular chemical exchange and also ligand exchange, common processes in the dynamic behavior of transition metal complexes. 
Finally, providing a proper modification of the equations is made,32 this method could be extended to deal with multi-site exchange and unequal populations, as it has been done in former double resonance experiments,8-9 increasing the usefulness of this technique for the study of chemical exchange processes in challenging compounds.

化学交換は、一般的に、核がNMRパラメータ（化学シフト、スカラーカップリング、双極子カップリング、緩和速度）が異なっている別の環境から移動する任意の分子間または分子内のプロセスを指します。多数の有機および有機金属分子で化学交換の例（ビアリールで例えば、回転障壁、リングの障壁と立体配座平衡をひっくり返す、窒素反転、リガンド結合、縮退した配位子交換及び互変異性）があります。1-3化学交換レートが関連するに交換プロセスの障壁の熱力学ため、その研究は、これらの系の分子動力学を理解するために決定的に重要です。 NMRでの動的交換の古典的な兆候は、温度変化などのNMR信号のライン形状の劇的な変化です。低い温度では、プロセスは遅く、二つの異なる化学シフトobserありますVED。高い温度では、2つの信号は、「合体」として知られている一つの信号、合流します。中間温度では、信号が非常に広いとなります。化学交換にNMRスペクトルのこの感度は、NMR溶液中の分子のダイナミクスを研究するための非常に強力な方法になります。二つの方法は、主に、溶液中の動的プロセスの研究に用いられてきた：4-7、ライン状の分析をし、スピン飽和移動実験8-9のほかに、それはまた、反転転送方法10とのためのCIFITプログラム11を言及する価値があります単純なシステムでの交換測定のための比較的効率的なアプローチである速度定数の直接抽出。これらの方法は、ほとんどの場合、非常に良好な結果を与えるが、それらは、しかしながら、多くの欠点を有しています。線状分析の主な欠点は、いくつかのサンプルで合体に到達するのに必要な高温である。12 CA考慮すべき主な問題アウトrryingスピン飽和移動実験は、次のとおり交換部位の間の定常状態の飽和移動に到達するために必要な非常に長い飽和時間、困難であることができる一定の縦緩和時間T 1を決定する必要性が、異なるの重なりがある場合に研究の領域における信号。13 有機金属機構における我々の調査の一環として、14-16私たちのグループは、溶液中の白金-アレン錯体の流動挙動を検討しています。これは、少なくとも3つの異なるプロセス、アレン軸の1の周りに金属のπ-顔交換又は回転され、それらのいずれかを含む複雑な作業です。私たちは、の合一温度を作った私たちの白金-アレン錯体中の非常に遅い回転に起因し、17-19は、私たちの研究に適していなかった、通常のVT実験と同様のシステムで以前に使用されてきたライン状の解析技術ことを検出しましたSIG錯体の分解温度よりも高い興味のあるのNAL。 この制限を克服するために、我々が開発し、最近相互サイトの化学交換の過程を研究するための新しいNMRプロトコル（SSTD NMR）を報告した。20名がこの方法を用いて、小分子のために使用されるスピン飽和移動方法を組み合わせ通り飽和移動差NMR法は、化学交換を受けている小分子で飽和時間（ビルドアップ曲線）を増加させるに沿って過渡スピン飽和移動を測定することによって、タンパク質-リガンド相互作用の研究、21-24のために使用します。 この新しい方法（SSTD NMR）で私たちは、伝統的なアプローチを超えるいくつかの追加の利点を持つ小さな有機および有機金属分子における分子内化学交換の動力学的パラメーターを得ることができることを示している：信号の合体が必要とされていないので、より柔軟な温度範囲をに使える研究では、交換共振の少なくとも一つは分離する必要がありますが、信号のオーバーラップは、干渉しません。 T 1を測定したり、定常状態の飽和に到達する必要はありません。速度定数の値は、直接測定され、T 1の値は、実験の唯一のセットを使用して、同じ実験で得られます。 SSTD NMR方法の別の顕著な利点は、分析を線形とは対照的に、動力学的速度定数の決意を高磁場に関連付けられた凝集温度の上昇によって制限されない、ということです。したがって、私たちの方法論は、その後、非常によく、低および高磁場の両方のために充当されます。この記事は、新しいユーザーが化学交換を受けて自分のシステムにこの新しい方法を適用して、試料調製、実験のセットアップ、データ収集、および単純な有機分子におけるデータ処理および分析の例を説明するためのものです。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1616">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">N,N-dimethylacetamide</td>
			<td style="width:691px;">Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">38840</td>
			<td style="width:167px;">Acute toxicity</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">Toluene-d8</td>
			<td style="width:691px;">Fluorochem</td>
			<td style="width:119px;">D-005</td>
			<td>Flammable and toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">500MHz 7&#34; Select Series NMR Tubes</td>
			<td style="width:691px;">GPE LTD</td>
			<td style="width:119px;">S-5-500-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">TopSpin 2.1</td>
			<td>TopSpin program, Bruker Corp., http://www.bruker.com/products/mr/nmr/nmr-software/software/topspin/ (2015).</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">Origin 6.0</td>
			<td>Origin 6.0 software, OriginLab Corp., http://originlab.com.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bruker Avance III 500 MHz fitted with 5mm broadband observed BBFOplus Z-gradient SmartProbeTM probe</td>
			<td style="width:691px;">&#160;Bruker Corp., http://www.bruker.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bruker Avance I 500 MHz Inverse Triple Resonance NMR spectrometer fitted with a 5mm TXI Z-gradient probe</td>
			<td style="width:691px;">&#160;Bruker Corp., http://www.bruker.com</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:639px;">Ceramic Spinner standardbore shimsystems (5 mm)</td>
			<td>&#160;Bruker Corp., http://www.bruker.com</td>
			<td style="width:119px;">H00804</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spin saturation transfer difference nmr (sstd nmr): a new tool to obtain kinetic parameters of chemical exchange processes

この詳細なプロトコールは、最近、従来の方法によって分析することが困難な相互サイトの化学交換の過程を研究するために、当社グループで開発された新しいスピン飽和移動差核磁気共鳴プロトコル（SSTD NMR）を、説明します。名前が示すように、この方法では、ビルド（飽和時間を増加さに沿って過渡スピン飽和移動を測定することにより、飽和移動差タンパク質 - リガンド相互作用の研究のために用いられる（STD）NMR法を用いて、小分子のために使用されるスピン飽和移動方法を組み合わせ化学交換を受けて、小さな有機および有機金属分子で-up曲線）。 既存のものの上に、この方法の利点は次のとおりです。交換信号の合体に到達する必要はありません。この方法であれば交換部位の一方の信号が分離されているように適用することができます。 T 1を測定したり、定常状態の飽和に到達する必要はありません。速度定数v梅毒は、直接測定され、T 1の値は、実験の唯一のセットを使用して、同じ実験で得られます。 メソッドをテストするために、我々は多くのデータを比較するために提供されているN、N個の -dimethylamidesの束縛回転のダイナミクスを研究しています。 SSTDを用いて得られた熱力学的パラメーターは、報告されたもの（スピン飽和移動技術及び線状分析）と非常に類似しています。この方法は、従来の方法によって研究することができない多くの困難な基材に適用することができます。 私たちは、簡単な実験を設定することを想定し、基板の多種多様にする方法の広い適用は、このNMRにおける豊富な専門知識のない有機および有機金属化学者の間で一般的な技術になります。

SSTD NMR技術は、N、N-ジメチルアセトアミドのアミド結合の回転における動態パラメータの計算のために適用した。21これは比較のために大規模なデータが文献に見出すことができるための単純な例である。31 アミド結合の周りの束縛回転、共振による形の部分の二重結合文字に、1 H-NMRスペクトル（2.61と22.5℃で2.17 ppm以下）で2つの信号に両方のメチル基を区別します。 2.17 ppmの（ME B）におけるメチル基のシグナルのスピン飽和は、1 H NMRでのシグナルの消失をもたらします。ミーB、他のメチル基（ME A）の飽和移動の飽和時に、内部回転処理に2.61 ppmのシグナルの1 Hの強度の減少によって観察することができます。 magnituデこの減少は、飽和時間に依存する。 図15は、Nの1 H NMRスペクトルは、22.5℃でのNジメチルアセトアミドを示し、拡張（a）はせずメチルの（b）は、飽和でスペクトルを示します2.17 ppmの基、ならびにηのSSTDの値を計算するために使用される差スペクトル（C）。 ηのSSTD係数は（A）は、のように、プロトコルで説明したスペクトルで私Aの積分値によってSSTD NMRスペクトル（C）の私の積分値を除算計算されます。異なる温度でそれぞれ飽和時間のためのηSSTDの得られた値を表1にまとめられている。飽和時間対ηSSTDの得られた値のプロットは、高原が高い飽和時間で到達した指数関数曲線を与えました。一定の温度については、曲線の指数関数的な適合は、速度の計算を可能に定数（k）と測定された信号（T 1A）（ 図16）の1 Hの緩和時間。フィットで得られたkおよびT 1A値とともに図17に示す全ての得られた曲線を図 。 最後に、1 / Tに対するlnのプロット（K / T）及びアイリングの方程式に当てはめた （ 図18）は、活性化のエンタルピーおよびエントロピーを計算するために使用しました。決定起動パラメータが一緒に異なる方法を使用して計算し、以前に報告されたパラメータを用いて、 表2に示します。 表2に見られるように、活性化パラメータの値は、スピン飽和移動差法（SSTD NMR）を用いて得られたデータとよく一致している、以前にそのようなSST NMR又は他の技術を使用して報告線形状解析。 ΔS‡のために報告された値の広い範囲が原因でNMR技術を使用してこのパラメータの測定の難しさにある。活性化パラメータの残りの部分については31、私たちの方法で得られた値だけではなく、既に報告されたものには本当に似ていますしかし、より正確な、私たちの誤差（SD）は、すべての場合に小さいからです。 <img alt="図1" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig1.jpg" /> 図 1：RPARを 入力した後、実験のリスト 。図は、STDDIFFESGPが選択されるべきであるその中の異なるパラメータセットを示している。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図2" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig2.jpg" /><br/&gt; 図2：取得パラメータボタンが赤い四角異なるパルスプログラムのリストにつながるで強調表示。。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図3" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig3.jpg" /> 図3： パルスプログラムの一覧図は実験（STDDIFF）で選択されたパルスプログラムを示し<a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig3large.jpg" target="_blank">、この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図4" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig4.jpg" /> 図4：ポップアップウィンドウが90°パルスのキャリブレーション後に出現した図は、較正された90の値を示しています。<html> ＃176;異なる電力レベルでのパルス。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig4large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図5" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig5.jpg" /> 図5： コマンドラインのスクリーンショットの図は、較正されたハードパルスの値を導入する方法を示しています。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図6" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig6.jpg" /> 図6：。 整形されたパルスの長さの値は、図は、整形パルスの長さの値を導入する方法を示しています。<html> g6large.jpg &quot;ターゲット=&quot; _空白 &quot;&gt;この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。 <img alt="図7" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig7.jpg" /> 図7： 取得パラメータの図は、電力パラメータを示している。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig7large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図8" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig8.jpg" /> 図8：パルス状のパラメータ整形パルスの値がライン13に導入される<a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig8large.jpg" target="_blank">。この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <html> PLOAD / 54499 / 54499fig9.jpg &quot;/&gt; 図9：照射周波数の一覧図は、最初の3行で、以下のデータが含まれています。 行1. Pは、（以下のデータはppmであることを示す）; ppmで照射される信号の ロウ2 周波数、測定されます 。 3.1.1で、行3.40 ppmで （その周波数での照射がスペクトルに影響を与えないように遠く化合物の1 H信号からある周波数）。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig9large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図10" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig10.jpg" /> 図10： 最初のFIDの処理図は、EFPを入力した後に表示されるポップアップウィンドウを示しています。<html> NK &quot;&gt;この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。 <img alt="図11" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig11.jpg" /> 図11： 位相補正スクリーンショットマニュアル位相補正用のウィンドウを示す<a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig11large.jpg" target="_blank">。この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図12" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig12.jpg" /> 図12： 第FIDの処理は、図は、EFPを入力した後に表示されるポップアップウィンドウを示している。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig12large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> 図13「SRC = &quot;/ファイル/ ftp_upload / 54499 / 54499fig13.jpg&quot; /&gt; 図13：赤い四角で強調表示されたスペクトル2と3ボタンの複数の表示は、差スペクトルを計算するためのものである。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig13large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図14" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig14.jpg" /> 図14：積分]タブの図は、絶対的および相対積分の値を示している。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig14large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図15" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig15.jpg" /> 図15： 構造と 1 </stron<html>グラム&gt; N のH NMRスペクトル 、 トルエン-D 8で22.5℃、Nジメチルアセトアミド （a）は、照射前2.13 2.66 ppmでの地域の1 H NMR展開。 （b）は 2.17 ppmのメチル基の照射後の同じ領域の拡大を。 （c）の差スペクトル[（A） - （B）]。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig15large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図16" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig16.jpg" /> 図16：ηSSTD と化学の王立協会から許可を得て、参照21の支持情報から278 K.再現で、その指数関数フィット のプロットの例 。http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig16large.jpg &quot;ターゲット=&quot; _空白 &quot;&gt;この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。 <img alt="図17" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig17.jpg" /> 図 17：ηSSTD 対 のプロット 異なる温度での飽和時間が。図は、N、N-ジメチルアセトアミド、得られた速度定数と緩和時間を持つテーブルのプロットを示している。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig17large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図18" src="/files/ftp_upload/54499/54499fig18.jpg" /> 図18： アイリングプロット図は、N、N-ジメチルアセトアミドのためのプロットを示しています。。 <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54499/54499fig18large.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2"> 座っトン（秒） </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td><td> SSTDη </td></tr><tr><td> （T = 278 K） </td><td> （T = 283 K） </td><td> （T = 285.5 K） </td><td> （T = 288 K） </td><td> （T = 290.5 K） </td><td> （T = 293 K） </td><td> （T = 295.5 K） </td></tr><tr><td> 40 </td><td> 0.2526 </td><td> 0.3957 </td><td> 0.4671 </td><td> 0.5461 </td><td> 0.626 </td><td> 0.6969 </td><td> 0.7535 </td></tr><tr><td> 20 </td><td> 0.2526 </td><td> 0.3957 </td><td> 0.4671 </td><td> 0.5461 </td><td> 0.626 </td><td> 0.6969 </td><td> 0.7535 </td></tr><tr><td> 10 </td><td> 0.2383 </td><td> 0.3806 </td><td> 0.4537 </td><td> 0.5355 </td><td> 0.6199 </td><td> 0.6969 </td><td> 0.7535 </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 0.1904 </td><td> 0.3193 </td><td> 0.3919 </td><td> 0.481 </td><td> 0.5734 </td><td> 0.6638 </td><td> 0.7318 </td></tr><tr><td> 2.5 </td><td> 0.1263 </td><td> 0.2204 </td><td> 0.2812 </td><td> 0.3589 </td><td> 0.4449 </td><td> 0.5461 </td><td> 0.626 </td></tr><tr><td> 1.25 </td><td> 0.0761 </td><td> 0.1353 </td><td> 0.171 </td><td> 0.2247 </td><td> 0.2868 </td><td> 0.3732 </td> &lt;TD&gt; 0.4449 </td></tr><tr><td> 0.625 </td><td> 0.0467 </td><td> 0.0739 </td><td> 0.099 </td><td> 0.1327 </td><td> 0.171 </td><td> 0.2291 </td><td> 0.2758 </td></tr><tr><td> 0.3 </td><td> 0.0238 </td><td> 0.044 </td><td> 0.0472 </td><td> 0.0644 </td><td> 0.0847 </td><td> 0.1169 </td><td> 0.1463 </td></tr></tbody></table> 表1：ηSSTDの値の表では、N、温度278から295.5 Kの範囲内のN個のジメチルアセトアミドに異なる飽和時間で得られた値を示しています。 <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="585"><colgroup><col /><col span="5" /></colgroup><tbody><tr height="34"><td height="34" style="height:34px;width:145px;"> 方法 </td><td style="width:88px;"> SSTD NMR </td><td rowspan="2" style="width:88px;"> SST NMR 31 </<html> TD&gt; <td style="width:88px;"> 線状分析 </td><td style="width:88px;"> 線状分析 </td><td style="width:88px;"> 線状分析 </td></tr><tr height="22"><td height="22" style="height:22px;width:145px;"> パラメーター </td><td style="width:88px;"> （この作品） </td><td style="width:88px;"> （1 H NMR）4 </td><td style="width:88px;"> （1 H NMR）5 </td><td style="width:88px;"> （13 C NMR）6 </td></tr><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:145px;"> E 298（KJのモル-1） </td><td style="width:88px;"> 79.7±0.1 </td><td style="width:88px;"> 73.1±1.4 </td><td style="width:88px;"> 70.5±1.7 </td><td style="width:88px;"> 82.0±1.3 </td><td style="width:88px;"> 79.5±0.4 </td></tr><tr height="21">21px;幅：145px; &quot;&gt;ΔH‡（KJモル-1） </td><td style="width:88px;"> 77.2±0.1 </td><td style="width:88px;"> 70.6±1.4 </td><td style="width:88px;"> 68 </td><td style="width:88px;"> 79.5±0.4 </td><td style="width:88px;"> 76.6±0.4 </td></tr><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:145px;"> ΔS‡（Jモル-1 K -1） </td><td style="width:88px;"> 11.5±0.4 </td><td style="width:88px;"> -10.5±5.0 </td><td style="width:88px;"> -15.0±5.1 </td><td style="width:88px;"> 13±8 </td><td style="width:88px;"> 3±4 </td></tr><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:145px;"> ΔG‡298（KJのモル-1） </td><td style="width:88px;"> 73.8±0.1 </td><td style="width:88px;"> 73.7±2.0 </td><td style="width:88px;"> 720.5 </td><td style="width:88px;"> 75.3±0.4 </td><td style="width:88px;"> 75.7±0.4 </td></tr><tr height="21"><td height="21" style="height:21px;width:145px;"> 溶媒 </td><td style="width:88px;"> D 8 Tol- </td><td style="width:88px;"> D 8 Tol- </td><td style="width:88px;"> 四塩化炭素</td><td style="width:88px;">アセトン-d 6 </td><td style="width:88px;">ニート</td></tr></tbody></table> 表2： 活性化パラメータは、テーブルは、Nの内部回転の起動パラメータは、Nは、分析のための別のNMR法を用いて得られた同じパラメータと比較SSTD NMR法によって得られたジメチルアセトアミドを示し、この表の4,5,6エラー。標準偏差誤差（SD）を参照してください。 （ロイヤルのSocからの許可を得て、基準21から再生化学のiety）。

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Spin Saturation Transfer Difference NMR SSTD NMR: A New Tool to Obtain Kinetic Parameters of Chemical Exchange Processes

A detailed protocol describing the SSTD NMR method is presented here to help new users apply this new method to obtain the kinetic parameters of their own systems undergoing chemical exchange.

化学Exchangeプロセスの動力学的パラメーターを取得するために新しいツール：飽和移動差NMR（SSTD NMR）をスピン

This detailed protocol describes the new Spin Saturation Transfer Difference Nuclear Magnetic Resonance protocol (SSTD NMR), recently developed in our ...

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Spin Saturation Transfer Difference NMR (SSTD NMR): A New Tool to Obtain Kinetic Parameters of Chemical Exchange Processes

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ビデオ: Spin Saturation Transfer Difference NMR SSTD NMR: A New Tool to Obtain Kinetic Parameters of Chemical Exchange Processes

Methods to Identify the NMR Resonances of the 13C-Dimethyl N-terminal Amine on Reductively Methylated Proteins

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy is a proven technique for protein structure and dynamic studies. To study proteins with NMR, stable magnetic isotopes are typically incorporated metabolically to improve the sensitivity and allow for sequential resonance assignment. Reductive 13C-methylation is an alternative labeling method for proteins that are not amenable to bacterial host over-expression, the most common method of isotope incorporation. Reductive 13C-methylation is a chemical reaction performed under mild conditions that modifies a protein&#39;s primary amino groups (lysine &#949;-amino groups and the N-terminal &#945;-amino group) to 13C-dimethylamino groups. The structure and function of most proteins are not altered by the modification, making it a viable alternative to metabolic labeling. Because reductive 13C-methylation adds sparse, isotopic labels, traditional methods of assigning the NMR signals are not applicable. An alternative assignment method using mass spectrometry (MS) to aid in the assignment of protein 13C-dimethylamine NMR signals has been developed. The method relies on partial and different amounts of 13C-labeling at each primary amino group. One limitation of the method arises when the protein&#39;s N-terminal residue is a lysine because the &#945;- and &#949;-dimethylamino groups of Lys1 cannot be individually measured with MS. To circumvent this limitation, two methods are described to identify the NMR resonance of the 13C-dimethylamines associated with both the N-terminal &#945;-amine and the side chain &#949;-amine. The NMR signals of the N-terminal &#945;-dimethylamine and the side chain &#949;-dimethylamine of hen egg white lysozyme, Lys1, are identified in 1H-13C heteronuclear single-quantum coherence spectra.

Methods to Identify the NMR Resonances of the 13C-Dimethyl N-terminal Amine on Reductively Methylated Proteins

Two methods for assigning the &#945;- and &#949;-dimethylamine nuclear magnetic resonance signals of a reductively 13C-methylated N-terminal lysine are described. One method utilizes the pH-induced selectivity of the reductive methylation reaction, and the other uses aminopeptidase to selectively remove the N-terminal lysine.

Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy is a proven technique for protein structure and dynamic studies. To study proteins with NMR, stable magnetic ...

化学

Ethylene Polymerizations Using Parallel Pressure Reactors and a Kinetic Analysis of Chain Transfer Polymerization

We demonstrate a method for high-throughput catalyst screening using a parallel pressure reactor starting from the initial synthesis of a nickel &#945;-diimine ethylene polymerization catalyst. Initial polymerizations with the catalyst lead to optimized reaction conditions, including catalyst concentration, ethylene pressure and reaction time. Using gas-uptake data for these reactions, a procedure to calculate the initial rate of propagation (kp) is presented. Using the optimized conditions, the ability of the nickel &#945;-diimine polymerization catalyst to undergo chain transfer with diethylzinc (ZnEt2) during ethylene polymerization was investigated. A procedure to assess the ability of the catalyst to undergo chain transfer (from molecular weight and 13C NMR data), calculate the degree of chain transfer, and calculate chain transfer rates (ke) is presented.

A protocol for the high-throughput analysis of polymerization catalyst, chain transfer polymerizations, polyethylene characterization, and reaction kinetic analysis is presented.

並列圧力反応器および連鎖移動重合の速度論的解析を使用してエチレン重合

We demonstrate a method for high-throughput catalyst screening using a parallel pressure reactor starting from the initial synthesis of a nickel ...

Highly Stereoselective Synthesis of 1,6-Ketoesters Mediated by Ionic Liquids: A Three-component Reaction Enabling Rapid Access to a New Class of Low Molecular Weight Gelators

In organic chemistry ionic liquids (ILs) have emerged as safe and recyclable reaction solvents. In the presence of a base ILs can be deprotonated to form catalytically active N-Heterocyclic Carbenes (NHCs). Here we have used ILs as precatalysts in the addition of &#945;,&#946;-unsaturated aldehydes to chalcones to form 1,6-ketoesters, incorporating an anti-diphenyl moiety in a highly stereoselective fashion. The reaction has a broad substrate scope and several functional groups and heteroaromatics can be integrated into the ketoester backbone in generally good yields with maintained stereoselectivity. The reaction protocol is robust and scalable. The starting materials are inexpensive and the products can be obtained after simple filtration, avoiding solvent-demanding chromatography. Furthermore, the IL can be recycled up to 5 times without any loss of reactivity. Moreover, the 1,6-ketoester end product is a potent gelator in several hydrocarbon based solvents. The method enables rapid access to and evaluation of a new class of low molecular weight gelators (LMWGs) from recyclable and inexpensive starting materials.

Ionic liquids (ILs) mediate fast, simple and cheap access to 1,6-ketoesters in high diastereoselectivities and good yields. The reaction protocol is robust and the 1,6-ketoesters can be obtained in gram scale after a simple filtration protocol. Moreover, the 1,6-ketoesters are potent gelators in hydrocarbon solvents.

イオン液体によって媒介1,6-ケトエステルの高立体選択的合成：低分子ゲル化剤の新しいクラスへの迅速なアクセスを有効にする三成分の反応

In organic chemistry ionic liquids (ILs) have emerged as safe and recyclable reaction solvents. In the presence of a base ILs can be deprotonated to form ...

Synthesis and Exfoliation of Discotic Zirconium Phosphates to Obtain Colloidal Liquid Crystals

Due to their abundance in natural clay and potential applications in advanced materials, discotic nanoparticles are of interest to scientists and engineers. Growth of such anisotropic nanocrystals through a simple chemical method is a challenging task. In this study, we fabricate discotic nanodisks of zirconium phosphate [Zr(HPO4)2&#183;H2O] as a model material using hydrothermal, reflux and microwave-assisted methods. Growth of crystals is controlled by duration time, temperature, and concentration of reacting species. The novelty of the adopted methods is that discotic crystals of size ranging from hundred nanometers to few micrometers can be obtained while keeping the polydispersity well within control. The layered discotic crystals are converted to monolayers by exfoliation with tetra-(n)-butyl ammonium hydroxide [(C4H9)4NOH, TBAOH]. Exfoliated disks show isotropic and nematic liquid crystal phases. Size and polydispersity of disk suspensions is highly important in deciding their phase behavior.

A two dimensional model material of discotic zirconium phosphate was developed. The inorganic crystal with lamellar structure was synthesized by hydrothermal, reflux, and microwave-assisted methods. On exfoliation with organic molecules, layered crystals can be converted to monolayers, and nematic liquid crystal phase was formed at sufficient concentration of monolayers.

コロイド液の結晶を得ることが合成とディスコティックリン酸ジルコニウムの剥離

Due to their abundance in natural clay and potential applications in advanced materials, discotic nanoparticles are of interest to scientists and ...

NMR Spectroscopy as a Robust Tool for the Rapid Evaluation of the Lipid Profile of Fish Oil Supplements

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential nutrients. The objective of this work is to demonstrate the qualitative and quantitative analysis of encapsulated fish oil supplements using high-resolution 1H and 13C NMR spectroscopy utilizing two different NMR instruments; a 500 MHz and an 850 MHz instrument. Both proton (1H) and carbon (13C) NMR spectra can be used for the quantitative determination of the major constituents of fish oil supplements. Quantification of the lipids in fish oil supplements is achieved through integration of the appropriate NMR signals in the relevant 1D spectra. Results obtained by 1H and 13C NMR are in good agreement with each other, despite the difference in resolution and sensitivity between the two nuclei and the two instruments. 1H NMR offers a more rapid analysis compared to 13C NMR, as the spectrum can be recorded in less than 1 min, in contrast to 13C NMR analysis, which lasts from 10 min to one hour. The 13C NMR spectrum, however, is much more informative. It can provide quantitative data for a greater number of individual fatty acids and can be used for determining the positional distribution of fatty acids on the glycerol backbone. Both nuclei can provide quantitative information in just one experiment without the need of purification or separation steps. The strength of the magnetic field mostly affects the 1H NMR spectra due to its lower resolution with respect to 13C NMR, however, even lower cost NMR instruments can be efficiently applied as a standard method by the food industry and quality control laboratories.

Here, high-resolution 1H and 13C Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy was used as a rapid and reliable tool for quantitative and qualitative analysis of encapsulated fish oil supplements.

魚油サプリメントの脂質プロファイルの迅速な評価のための強力なツールとしてNMR分光法

The western diet is poor in n-3 fatty acids, therefore the consumption of fish oil supplements is recommended to increase the intake of these essential ...

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the average content of fluorinated drugs in their formulated drug product forms: tablets or capsules. This method is specific to fluorinated drugs because it detects only the content of fluorine, avoiding interference from the excipients that lack fluorine. The advantages of measuring the active content of fluorinated drugs using low-field 19F TD-NMR versus high-field 19F solid-state (SS) NMR are the simplicity of the method; the low cost; and the non-destructive nature of the technique, with all samples recoverable in intact forms (e.g., powders, tablets, and capsules), making this technique affordable for any laboratory.
We have tested the method with three fluorinated drug products available on the market - cinacalcet, lansoprazole, and ciprofloxacin - with doses ranging from 15 to 500 mg. The results of the analyses, measured by low-field 19F TD-NMR, supported the reported label claims for the average drug content.
Based on the simplicity and reproducibility of the analysis, we envision this methodology being implemented in any laboratory, including manufacturing plants, as a process analytical technology (PAT) tool in the pharmaceutical industry.

Application and Methodology of the Non-destructive 19F Time-domain NMR Technique to Measure the Content in Fluorine-containing Drug Products

A simple and non-destructive technique that measures the average content of drug substances in formulated drug products containing fluorine using low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) is presented here. The technique can be applied to the development and manufacturing of drugs in the pharmaceutical industry.

フッ素含有医薬品の量を測定するアプリケーションと非破壊19F 時間ドメインの NMR 手法論

Here, we describe a protocol developed by our group that uses low-field fluorine-19 (19F) time-domain (TD) nuclear magnetic resonance (NMR) to measure the ...

Liquid-cell Transmission Electron Microscopy for Tracking Self-assembly of Nanoparticles

Drying a nanoparticle dispersion is a versatile way to create self-assembled structures of nanoparticles, but the mechanism of this process is not fully understood. We have traced the trajectories of individual nanoparticles using liquid-cell transmission electron microscopy (TEM) to investigate the mechanism of the assembly process. Herein, we present the protocols used for liquid-cell TEM studies of the self-assembly mechanism. First, we introduce the detailed synthetic protocols used to produce uniformly sized platinum and lead selenide nanoparticles. Next, we present the microfabrication processes used to produce liquid cells with silicon nitride or silicon windows and then describe the loading and imaging procedures of the liquid-cell TEM technique. Several notes are included to provide helpful tips for the entire process, including how to manage the fragile cell windows. The individual motions of nanoparticles tracked by liquid-cell TEM revealed that changes in the solvent boundaries caused by evaporation affected the self-assembly process of nanoparticles. The solvent boundaries drove nanoparticles to primarily form amorphous aggregates, followed by flattening of the aggregates to produce a 2-dimensional (2D) self-assembled structure. These behaviors are also observed for different nanoparticle types and different liquid-cell compositions.

Here we introduce experimental protocols for the real-time observation of a self-assembly process using liquid-cell transmission electron microscopy.

ナノ粒子の自己集合の追跡のため液晶セルの透過電子顕微鏡観察

Drying a nanoparticle dispersion is a versatile way to create self-assembled structures of nanoparticles, but the mechanism of this process is not fully ...

A New Straightforward Method for Lipophilicity (logP) Measurement using 19F NMR Spectroscopy

Fluorination has become an effective tool to optimize physicochemical properties of bioactive compounds. One of the applications of fluorine introduction is to modulate the lipophilicity of the compound. In our group, we are interested in the study of the impact of fluorination on lipophilicity of aliphatic fluorohydrins and fluorinated carbohydrates. These are not UV-active, resulting in a challenging lipophilicity determination. Here, we present a straightforward method for the measurement of lipophilicity of fluorinated compounds by 19F NMR spectroscopy. This method requires no UV-activity. Accurate solute mass, solvent and aliquot volume are also not required to be measured. Using this method, we measured the lipophilicities of a large number of fluorinated alkanols and carbohydrates.

A New Straightforward Method for Lipophilicity logP Measurement using 19F NMR Spectroscopy

A novel and straightforward variation of the shake-flask method was developed for accurate lipophilicity measurement of fluorinated compounds by 19F NMR spectroscopy.

新しい簡単な19F NMR 分光学を使用して親油性 (logP) 測定法

Fluorination has become an effective tool to optimize physicochemical properties of bioactive compounds. One of the applications of fluorine introduction ...

A Facile Synthetic Method to Obtain Bismuth Oxyiodide Microspheres Highly Functional for the Photocatalytic Processes of Water Depuration

Bismuth oxyhalide (BiOI) is a promising material for sunlight-driven-environmental photocatalysis. Given that the physical structure of this kind of materials is highly related to its photocatalytic performance, it is necessary to standardize the synthetic methods in order to obtain the most functional architectures and, thus, the highest photocatalytic efficiency. Here, we report a reliable route to obtain BiOI microspheres via the solvothermal process, using Bi(NO3)3 and potassium iodide (KI) as precursors, and ethylene glycol as a template. The synthesis is standardized in a 150 mL autoclave, at 126 &#176;C for 18 h. This results in 2-3 &#181;m-sized mesoporous microspheres, with a relevant specific surface area (61.3 m2/g). Shortening the reaction times in the synthesis results in amorphous structures, while higher temperatures lead to a slight increase in the porosity of the microspheres, with no effect in the photocatalytic performance. The materials are photo-active under UV-A/visible light irradiation for the degradation of the antibiotic ciprofloxacin in water. This method has demonstrated to be effective in interlaboratory tests, obtaining similar BiOI microspheres in Mexican and Chilean research groups.

This article describes a synthetic method to obtain bismuth oxyiodide microspheres, which are highly functional to perform the photocatalytic removal of organic pollutants, such as ciprofloxacin, in water under UV-A/visible light irradiation.

水洗水の光触媒プロセスのビスマス Oxyiodide 微粒子高機能を取得する簡便な合成法

Bismuth oxyhalide (BiOI) is a promising material for sunlight-driven-environmental photocatalysis. Given that the physical structure of this kind of ...

NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

NMR spectroscopy is often used for the identification and characterization of enzyme inhibitors in drug discovery, particularly in the context of fragment screening. NMR-based activity assays are ideally suited to work at the higher concentrations of test compounds required to detect these weaker inhibitors. The dynamic range and chemical shift dispersion in an NMR experiment can easily resolve resonances from substrate, product, and test compounds. This contrasts with spectrophotometric assays, in which read-out interference problems often arise from compounds with overlapping UV-vis absorption profiles. In addition, since they lack reporter enzymes, the single-enzyme NMR assays are not prone to coupled-assay false positives. This attribute makes them useful as orthogonal assays, complementing traditional high throughput screening assays and benchtop triage assays. Detailed protocols are provided for initial compound assays at 500 &#956;M and 250 &#956;M, dose-response assays for determining IC50 values, detergent counter screen assays, jump-dilution counter screen assays, and assays in E. coli whole cells. The methods are demonstrated using two nucleoside ribohydrolase enzymes. The use of 1H NMR is shown for the purine-specific enzyme, while 19F NMR is shown for the pyrimidine-specific enzyme. The protocols are generally applicable to any enzyme where substrate and product resonances can be observed and distinguished by NMR spectroscopy. To be the most useful in the context of drug discovery, the final concentration of substrate should be no more than 2-3x its Km value. The choice of NMR experiment depends on the enzyme reaction and substrates available as well as available NMR instrumentation.

NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC50 Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

NMR-based activity assays have been developed to identify and characterize inhibitors of two nucleoside ribohydrolase enzymes. Protocols are provided for initial compound assays at 500 &#956;M and 250 &#956;M, dose-response assays for determining IC50 values, detergent counter screen assays, jump-dilution counter screen assays, and assays in E. coli whole cells.

化合物阻害、IC50値、アーティフィファクト活性、ヌクレオシドリボヒドロラーゼの全細胞活性を決定するためのNMRベース活性アッセイ

NMR spectroscopy is often used for the identification and characterization of enzyme inhibitors in drug discovery, particularly in the context of fragment ...