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Transwell 移行アッセイ

概要

化学手掛かりに応答細胞の移行は、がんなどの開発、免疫と疾患状態に不可欠です。 細胞遊走を定量化するには、簡易測定法は transwell 移行アッセイまたはボイデン室アッセイとして今知られている博士スティーブン ボイテンによって 1961 年に開発されました。この設定では、上部と下部のコンパートメントに multiwell プレートの井戸を隔てる挿入で構成されます。その移行検討するセルは、上部コンパートメントにシードし、走化性因子の解決が下部コンパートメントに置かれます。インキュベーション後、走化性による移行の定量化を下部コンパートメント内のセルをカウントできます。

このビデオは、細胞移行研究の一般的に使用される実験の設定を確認します。その後、いくつかの主要考慮事項を強調表示し、付着性のセルを含む実験を実行するための一般的なプロトコルの概要を説明します。最後に、現在移行に影響を与えるさまざまな要因を研究に使用されているこのセットアップの様々 な適応を確認します。

手順

Transwell 移行アッセイは、科学者が細胞運動を定量化することができる古典的な手法です。移行は個別に、またはクラスターを移動する細胞の能力を指します。細胞運動、細胞骨格の正確な再編を通じて可能し、移行は通常の手がかりとして行動刺激への応答で発生します。

今日、transwell 移行アッセイは、誘致キューへの応答での移行を評価する単純な商工会議所セットアップを利用して説明します。

我々 は、transwell 室に関するいくつかの背景情報を提供することによって開始されます。

装置は最初、白血球の遊走を研究に使用した 1961 年に博士スティーブン boyden 教授によって設計されました。したがって、このメソッドはボイデン室アッセイではまたとして知られています。

単純な boyden 教授室で外壁は井戸の 96 ウェル プレートのもののようです。各ウェル中円筒形インサートはの transwell が配置されます。Insert は、細孔サイズ定義のポリカーボネート膜をに。井戸に置かれたとき、2 つのコンパートメントに

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スキップ先...

0:00

Overview

0:42

Background on the Transwell Chamber

2:21

Experimental Considerations

3:43

Protocol for Measuring Migration of Adherent Cells

5:13

Applications

7:52

Summary

このコレクションのビデオ:

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