このプロトコルは、生物学的問題の解決を支援するために物理的方法を採用することができることを示唆している。この技術は、最小限の切開で昆虫に材料を配置し、個人の発達に対するマイクロサージャリーの影響を研究する方法を提供する。この方法は、他の鱗翅目の幼虫および頭部および胸郭を含む昆虫の他の部分に適用することができる。
特定の材料に切開を行い、巧みに縫合する練習をすることが非常に重要です。まず、スポドプテラの典礼雄幼虫を6齢齢の4日目、またはL6D4を氷上に10〜30分間置き、手術中に麻酔をかけ続けます。麻酔をかけられた幼虫を背側を上にしてワックストレイの上に置きます。
幼虫の頭と尾をピンと糸で固定し、綿棒で3%のヨウ素チンキを表皮に塗布し、続いて70%のアルコールを塗布して手術領域を消毒する。9番目の身体セグメントで背部表皮に2ミリメートルの長さの切開を行い、滅菌綿棒を使用して漏れた血リンパおよび脂肪体を除去して、手術領域の明確な視界を得る。外科用ピンセットを使用して、精巣の間にアルミニウム箔を挿入し、実行中の縫合糸で表皮を閉じる。
ニードルホルダーと外科用ピンセットの助けを借りて、外科用正方形の結び目を結びます。ループテールから余分な縫合糸をハサミで切り取り、2ミリメートルの糸を残します。縫合後、幼虫を飼育箱に静かに敷き詰め、連続観察しながら清潔な環境シミュレーションチャンバに維持する。
マイクロサージャリー後のスポドプテラ典礼雄幼虫の成長および発達をモニターした。幼虫死亡率は外科群でわずかに高かったが、蛹化、成虫の出現、および交配の成功の割合は、対照群よりも外科群でわずかに低かった。実験群では、ユーピレンおよびアピレンの精子束における全精子束の数は、対照群および偽対照群よりも有意に低かった。
一方、ユーピレン精子束の割合は、3つの群すべてで有意差はなかった。幼虫の片側精巣を除去した後、微小手術群における全精子束およびユーピレンおよびアピレン精子束の数は、対照群よりも有意に少なかった。蛹期6日目のユーピレン精子束の割合は、3群すべてで同等であった。
創傷の位置に気付き、切開中に他の器官を損傷しないようにすることが非常に重要です。この技術は、臓器に薬物を適用することによって精巣融合の生物学的意義を研究するために使用することができる。標的器官に対する薬物の効果を調べることができる。
