これは、透析アクセス関連の手虚血の原因となるメカニズムを研究するために利用可能な唯一の動物モデルです。このモデルは、動脈静脈瘻手術に起因する血行力学的変化に起因する尿毒症と神経筋摂動の間の複雑な相互作用を調べるための堅牢なプラットフォームを提供します。アクセス関連の手の機能障害は、血液透析患者の最大60%に影響を及ぼし、患者の生活の質に深刻な影響を与える可能性があります。
このモデルは、障害を理解し、新しい治療法をテストするのに役立ちます。手順のデモンストレーションは、私たちの研究室のポスドク研究員であるレイモンド・キム博士です。まず、麻酔をかけたマウスを滅菌ドレープで覆われた手術台の仰臥位に置き、眼潤滑剤を塗布して、手術中の乾燥から目を保護します。
ペントリマーを使用して、手術用の腹毛と術後の灌流測定用の脚毛を剃り、手術野から毛を取り除きます。次に、輪ゴムと鋲で上肢と下肢を固定します。つま先のピンチ反射を監視して麻酔の深さを確認し、必要に応じて麻酔を滴定します。
麻酔レベルを調整するために、外科的処置を通して3〜5分ごとに呼吸パターン評価を実行します。胸骨縁の下端から恥骨結合まで正中線開腹を行い、恥骨脂肪パッドを解剖してより広い術野を得ます。腹腔切開を開いて腹膜の内容物にアクセスし、生理食塩水を浸した不織布スポンジで腸を覆います。
次に、血管周囲筋膜と脂肪組織を大動脈分岐部から約1センチメートル近位まで慎重に解剖し、まっすぐなデュモン鉗子と小さな両端の硬い先のとがった綿棒を使用して左腸骨分岐部の高さまで伸ばします。次に、角度を付けた鉗子の先端を左の総腸骨血管束の下に通し、ゆっくりと複数回広げて、下にある後腹膜筋組織から血管を動員します。孤立した左総腸骨動脈静脈束の周りに2本の4-0絹縫合糸を配置し、血管束の結紮糸として使用します。
次に、4-0のシルクネクタイごとに1つの結び目を作成し、順番に、近距離に、次に遠位に適用します。次に、4-0絹縫合糸をハンドルとして、左腸骨動脈静脈血管束を時計回りに回転させ、位置を微調整して静脈を動脈の前方に一時的に配置します。まっすぐなバンナススプリングハサミで約1ミリメートルの縦静脈切開を行い、0.9%生理食塩水で静脈内腔から残留血液を静かに洗い流します。
次に、静脈の後壁に10-0ナイロン縫合糸を通します。その後、関係する縫合糸の端をつかみ、穏やかな張力の下に置き、腸骨動脈の後壁から前壁を変位させます。次に、湾曲したバンナススプリングハサミを使用して約1.0 x 0.3ミリメートルのサイズの楕円形の切開を行い、腸骨動脈と静脈の両方の接着壁を取り除きます。
露出した動脈内腔の残留血液を0.9%生理食塩水とヘパリン化生理食塩水で穏やかに洗い流します。動脈静脈瘻の作成に続いて、中断された方法で2〜3本の10-0ナイロン縫合糸を使用して最初の前壁切開術を修復します。その後、血管束を元の解剖学的方向に復元し、生理食塩水を浸した吸収性ゼラチンスポンジの小片を修復された静脈切開術に隣接させて止血を促進します。
次に、4-0シングルノットクロスクランプ結紮糸を遠位から近位まで順番に緩め、静脈切開部位に過度の出血がないか注意深く監視します。血流の回復をさらに促進する小さな両端の硬く鋭い先のとがった綿棒で血管束をそっとこすります。次に、腸骨静脈に入り、後肢から戻ってくる暗色静脈血と混合する拍動性の真っ赤な酸素化血液を可視化し、手術の技術的成功を確認します。
ヘパリン化生理食塩水を全身抗凝固のために下大静脈に注入して動脈静脈瘻の開存性を改善し、ヘパリン化生理食塩水を注射した後の止血のために手術部位を再検査します。出血の懸念がない場合は、正中線筋膜を閉じてから、吸収性の5-0PGA縫合糸で皮膚切開部をランニング方式で閉じます。ドップラー超音波を使用して、動脈静脈瘻の開存性を検証しました。
カラードップラーは瘻孔部位の乱流を明らかにし、脈波ドップラー評価により拍動スペクトルの広がりを可視化した。瘻孔が特許を取得している場合、大動脈はピーク収縮期および拡張末期速度が上昇していますが、下大静脈はピーク速度の上昇とともに拍動を発達させます。大動脈と下大静脈の両方の血管拡張は、術前と術後の連続測定で明らかです。
手術後のBモードおよび脈波ドップラー超音波測定では、偽動物と比較して、流入および流出血管拡張およびピーク収縮期速度の増加が明らかになりました。後肢のレーザードップラー評価では、左POD灌流欠損は手術後の対側肢の約20%であり、時間の経過とともに徐々に回復することが示されました。前脛骨筋の灌流欠損は術後約60%であり、同様の回復を示した。
後肢の神経運動機能は、回復期間を通じて順次実施された握力テストとトレッドミル歩行パターン分析によって定量化されました。予想される片側握力は術後4日目の対側肢の約50%であり、徐々に回復します。各顕微手術のステップは、血行動態と四肢の病状の両方に実質的な変化を引き起こす可能性のある潜在的な神経または血管の外傷を避けるために、特別な注意を払って実行する必要があります。
モデルの特性評価の後、動静脈瘻の留置に起因する神経筋機能障害の生物学的要因を調べる多数の研究を調査することができました。