Author Spotlight: Detecting Low-Abundant Host Cell Proteins in Drug Products Using Enrichment Beads and Limited Digestion

私たちは、プロテオーム濃縮ビーズを用いて、医薬品由来の低存在量の宿主細胞タンパク質を検出する高感度法を開発しました。このアプローチは、医薬品に関連する根本原因とリスクを見つけるのに役立ちます。プロテインAの枯渇、消化の制限、分子量カットオフ、免疫沈降など、ノンターゲット法であるHCP分析の検出限界を改善する方法は複数あります。

液体クロマトグラフィー、多重反応モニタリング、非液体クロマトグラフィー並列反応モニタリングなど、宿主細胞タンパク質を検出するための標的を絞った方法。これらのHCP分析に関連する主な課題は、抗体薬物と宿主細胞タンパク質の間の大きなダイナミックレンジです。そのため、ほとんどの方法は、抗体ペプチドとHCPペプチドの間のダイナミックレンジを狭めるために、LCMS分析の前に抗体の量を減らし、HCPを濃縮することを目的としています。

そのため、ProteoMiner テクノロジーと限定消化プロトコルにより、他の方法と比較して HCP 分析の検出限界が大幅に向上します。免疫沈降法に比べてバイアスがなく、プロテインA枯渇法とは異なる薬物モジュールに適用できます。このプロトコルもシンプルで簡単です。

そのため、ProteoMiner テクノロジーと限定消化プロトコルは、ポリソルベートとフラグメント抗体薬物を分解する複数の HCP を特定するのに役立ちます。濃縮法は、ナノLCMPRM法と組み合わせることで、問題のある宿主細胞タンパク質の生物学的関連濃度を見つけるための定量的結果も提供できます。