Quantitative Screening of Nanoparticle-Treated Fabric: The Log Reduction Method

ナノ粒子処理された布を取り、それを50ミリメートル×50ミリメートル正方形の見本にカットします。単離されたコロニーを純度プレートから滅菌トリプチカーゼ大豆ブロスに接種することにより、目的の微生物の一晩培養を準備します。摂氏35度で18〜24時間インキュベートします。

一晩培養物をミリリットルあたり1億5000万CFU、または0.5マクファーランド標準の濁度に対応するように希釈します。次に、スパイクに適した培養量を決定するために、一連の量の希釈ブロス培養物を布見本に追加し、布見本が水を完全に吸収し、残留または遊離液体を残さないように体積を選択します。滅菌ペトリプレートに入れた見本に各培養物の量をスパイクします。

同様に、対応するテストごとに同じタイプの未処理の生地見本を使用してネガティブコントロールを実行します。生存可能なプレート数によって微生物を回収するには、ペトリプレート内の接種スウォッチを室温で風乾し、必要な接触期間をテストします。スウォッチを無菌的に移して滅菌遠心チューブを分離し、キャップをしっかりとねじ込みます。

Letheen Brothまたは関連する中和バッファーを加えて、1:100に希釈します。遠沈管を閉じた後、中速で1分間ボルテックスします。その後の1:10希釈で滅菌PBSで懸濁液を連続希釈し、未処理群のコロニー数が低すぎてカウントできなくなるようにします。

微生物の成長をサポートする適切な培地プレート、または成長を最適化し、良好なコントラストを提供してコロニーカウントを正確にする培地に希釈液を植えます。細菌プレートを摂氏35度で2日間インキュベートし、真菌プレートを室温で5日間インキュベートします。コロニーカウンターまたはイメージングソフトウェアを使用して、生存可能なコロニー形成単位を直接カウントします。

抗菌布による微生物対数減少Rを、画面上の式を用いて算出する。ここで、Aは未処理布から回収されたコロニー形成単位数の対数値であり、Bは処理布についても同様である。チモール封入キトサンナノ粒子でコーティングされた抗菌布を、血液寒天培地上の黄色ブドウ球菌、紫色ラクトース寒天培地上の大腸菌、セトリミド寒天培地上の緑膿菌、およびサブローデキストロース寒天培地上のC.アルビカンスに対して試験した結果をここに示します。

病原体を未処理および処理済みの見本に30分間スパイクし、中和および希釈メッキで回収しました。希釈比は、処理された系列と未処理の系列の間で示されます。ここでは、2つの生理活性化合物を含浸させた抗菌布の接触による3つの細菌と1つの真菌の対数減少を示します。

抗菌効果は、カルバクロールとチモールコーティングされた布地の両方の洗浄サイクル後に弱まります。