熱帯多年生種や園芸樹木作物における遺伝子の生物学的機能を調べるためには、生体内遺伝学的手法が必要です。しかし、これらの種の多くは、すべての世代における変化に抵抗的です。本研究は、大型植物に適用可能な簡便かつ効率的な遺伝子組み換え法の開発を目的としています。
事を図解します。アグロバクテリウムを介した組織への浸潤が困難な植物の遺伝子組み換えは、真空ポンプを用いた強制浸潤によって可能になりました。しかし、現在使用されているプロトコルは、大型プラントを真空チャンバーに投入するという物理的および経済的な制約により、小規模プラントに限定されています。
通常、実験室の乾燥剤である真空チャンバーのサイズは、熱帯の木本植物の場合のように、乾燥剤に収まらない大きすぎる植物の真空浸透を防ぎます。我々は、熱帯木本植物の効率的な局所真空浸透のためのプロトコルを開発し、大型植物種のin vivo遺伝子形質転換研究を可能にしました。このプロトコルにより、カカオやアボカドなどの園芸樹木作物におけるアグロバクテリウムを介した真空浸潤に対する植物のサイズ制限を克服することができました。
組織培養フリー アグロバクテリウムを介した局所的な真空浸潤による付着葉の形質転換は、高価な機器を追加する必要がなく、同じポンプと真空容器を使用できるため、すでに真空浸潤を使用しているラボでも、迅速、簡単、かつ費用対効果の高い方法で行うことができます。