Facilitating Drug Discovery: An Automated High-content Inflammation Assay in Zebrafish

Zebrafish larvae are particularly amenable to whole animal small molecule screens1,2 due to their small size and relative ease of manipulation and ...

Karlsruhe Institute of Technology, Karlsruhe, Germany

Metameric &#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6811;&#x5E72;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x662F;&#x7531;&#x91CD;&#x590D;&#x5F62;&#x6210;&#x7684; somites &#x672A;&#x7EC6;&#x5206; presomitic &#x4E2D;&#x80DA;&#x5C42; (PSM) &#x4ECE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x5927;&#x578B;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5C4F;&#x6B21; &#xFF08;&#x5BF9;&#x9567;) &#x4E2D;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x5206;&#x5272;&#x7684;&#x521D;&#x6B65;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A; somites &#x6216;&#x4F53;&#x8282;&#x8FB9;&#x754C;&#x5B8C;&#x5168;&#x6216;&#x90E8;&#x5206;&#x6CA1;&#x6709;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E94;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x539F;&#x56E0;&#x7194; somites &#x6216; somites &#x4E0E;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x5F62;&#x72B6;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x5206;&#x6790;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5206;&#x5272;&#x65F6;&#x949F;&#x548C;&#x4E0A;&#x53E3;&#x524D;&#x540E; (A-P) &#x6781;&#x6027;&#x7684; somites &#x900F;&#x9732;&#x4E5D;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x53EF;&#x88AB;&#x7F16;&#x8BD1;&#x6210;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7FA4;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x7EC4; 1 &#x4E2D;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A; tailbud &#x5F62;&#x6210;&#x548C; PSM prepatterning &#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x800C;&#x5728; somites A P &#x6807;&#x8BC6;&#x662F;&#x5728;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x7EC4;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5B58;&#x5728;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x4E09;&#x79CD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; &#xFF08;planlos&#x3001; &#x9501;&#x76F8;&#x73AF; schnelles &#x6069;&#x5FB7;&#x3001; sne &#xFF1B; &#x4E94;&#x6708;&#x96E8;&#xFF0C;sam) &#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x51F9;&#x53E3;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6709;&#x522B;&#x4E8E;&#x90A3;&#x4E9B;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x5982;&#x5355;&#x72EC;&#x7194;&#x878D;&#x7684; somites &#x548C;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x4F53;&#x8282;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684; somitic &#x578B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9884;&#x8BA1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6B21;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E3A;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x7684;&#x63ED;&#x9732;&#x65B0;&#x578B;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7EBF;&#x7D22;&#x3002;

&#x5F71;&#x54CD;&#x4E2D; &#xFF08;&#x5BF9;&#x9567;) &#x6B21;&#x4F53;&#x8282;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

The metameric structure of the vertebrate trunk is generated by repeated formation of somites from the unsegmented presomitic mesoderm (PSM). We report the initial characterization of nine different mutants affecting segmentation that were isolated in a large-scale mutagenesis screen in Medaka (Oryzias latipes). Four mutants were identified that show a complete or partial absence of somites or somite boundaries. In addition, five mutations were found that cause fused somites or somites with irregular sizes and shapes. In situ hybridization analysis using specific markers involved in the segmentation clock and antero-posterior (A-P) polarity of somites revealed that the nine mutants can be compiled into two groups. In group 1, mutants exhibit defects in tailbud formation and PSM prepatterning, whereas A-P identity in the somites is defective in group 2 mutants. Three mutants (planlos, pll; schnelles ende, sne; samidare, sam) have characteristic phenotypes that are similar to those in zebrafish mutants affected in the Delta/Notch signaling pathway. The majority of mutants, however, exhibit somitic phenotypes distinct from those found in zebrafish, such as individually fused somites and irregular somite sizes. Thus, these Medaka mutants can be expected to provide clues to uncovering novel components essential for somitogenesis.

Mutations affecting somite formation in the Medaka (Oryzias latipes).

La structure m&#xE9;tam&#xE9;rique du tronc vert&#xE9;br&#xE9; est g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; par la formation r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9;e de somites du m&#xE9;soderme non segment&#xE9; presomitic (PSM). Nous rapportons la caract&#xE9;risation initiale de neuf diff&#xE9;rents mutants affectant la segmentation qui ont &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9;s dans un &#xE9;cran de mutagen&#xE8;se &#xE0; grande &#xE9;chelle dans m&#xE9;daka (Oryzias latipes). Quatre mutants ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;s qui montrent une absence totale ou partielle de somites ou limites de somites. En outre, cinq mutations ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;es qui causent somites fusionn&#xE9;s ou somites avec des tailles et des formes irr&#xE9;guli&#xE8;res. Dans l&#x26;#39;analyse d&#x26;#39;hybridation in situ en utilisant des marqueurs sp&#xE9;cifiques impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;horloge de segmentation et ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieur (AP) polarit&#xE9; des somites a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les neuf mutants peuvent &#xEA;tre compil&#xE9;es en deux groupes. Dans le groupe 1, les mutants pr&#xE9;sentent des d&#xE9;fauts dans la formation de bourgeon caudal et prepatterning PSM, alors que l&#x26;#39;identit&#xE9; AP dans les somites est d&#xE9;fectueux dans le groupe 2 mutants. Trois mutants (Planlos, pll; schnelles ende, sne; samidare, sam) ont des ph&#xE9;notypes caract&#xE9;ristiques qui sont semblables &#xE0; ceux de mutants affect&#xE9;s poisson z&#xE8;bre dans la voie de Delta / Notch. La majorit&#xE9; des mutants, cependant, pr&#xE9;sentent des ph&#xE9;notypes somitiques distincts de ceux trouv&#xE9;s dans le poisson-z&#xE8;bre, comme somites fusionn&#xE9;s individuellement et tailles irr&#xE9;guli&#xE8;res somites. Ainsi, ces mutants Medaka on peut s&#x26;#39;attendre &#xE0; fournir des indices &#xE0; d&#xE9;couvrir de nouveaux composants essentiels pour somitogen&#xE8;se.

Des mutations affectant formation des somites dans le m&#xE9;daka (Oryzias latipes)

Mutationen Somitenbildung im Medaka (Oryzias latipes).

La struttura metamerica del tronco vertebrato &egrave; generata da ripetute formazione dei somiti dalla non segmentato mesoderm presomitic (PSM). Riportiamo la caratterizzazione iniziale dei nove mutanti diversi che interessano la segmentazione che sono stati isolati in una schermata di mutagenesi su larga scala in Medaka (Oryzias latipes). Quattro mutanti sono stati identificati che mostrano una completa o parziale assenza di somiti o somite confini. Inoltre, sono state trovate cinque mutazioni che causa fuso metameri o somiti con forme e dimensioni irregolari. Analisi di ibridazione in situ utilizzando marcatori specifici coinvolti nell&#39;orologio di segmentazione e polarit&agrave; (A-P) antero-posteriore dei somiti ha rivelato che i nove mutanti possono essere compilati in due gruppi. Nel gruppo 1, mutanti presentano difetti nella formazione di tailbud e prepatterning PSM, considerando che A-P identit&agrave; in somiti &egrave; difettoso in mutanti di gruppo 2. Tre mutanti (planlos, pll schnelles ende, sne; samidare, sam) hanno caratteristici fenotipi che sono simili a quelli di mutanti di zebrafish colpiti nella Delta/Notch signaling pathway. La maggior parte dei mutanti, tuttavia, esibiscono somitic fenotipi distinti da quelli che si trovano in zebrafish, quali metameri fusi individualmente e dimensioni irregolari somite. Cos&igrave;, questi mutanti Medaka possono essere previsto per fornire indizi per scoprire nuovi componenti essenziali per somitogenesis.

Mutazioni che interessano la formazione somite Medaka (Oryzias latipes).

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4F53;&#x5E79;&#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x524D;&#x4F53;&#x7BC0;&#x4E2D;&#x80DA;&#x8449;&#xFF08;PSM&#xFF09;&#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#xFF08;Oryzias latipes&#xFF09;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;9&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3064;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x4F53;&#x7BC0;&#x3084;&#x4F53;&#x7BC0;&#x5883;&#x754C;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;5&#x3064;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x5F62;&#x72B6;&#x3068;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x4F53;&#x7BC0;&#x3084;&#x4F53;&#x7BC0;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x5206;&#x7BC0;&#x6642;&#x8A08;&#x3068;&#x524D;&#x90E8;&#x306E;&#x5F8C;&#x90E8;&#xFF08;AP&#xFF09;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;9&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;A&#x200B;&#x200B;P ID&#x304C;2&#x7FA4;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;1&#x306B;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;tailbud&#x5F62;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PSM prepatterning&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x4E09;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#xFF08;planlos&#x3001;PLL&#x3001;schnelles&#x30A8;&#x30F3;&#x30C7;&#x3001;SNE&#x3001;&#x4E94;&#x6708;&#x96E8;&#x3001;SAM&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;/ Notch&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x4F53;&#x7BC0;&#x3068;&#x4F53;&#x7BC0;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4F53;&#x7BC0;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5448;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x4F53;&#x7BC0;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x66B4;&#x304F;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x671F;&#x5F85;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x4F53;&#x7BC0;&#x5F62;&#x6210;&#xFF08;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#xFF09;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;

Metameric &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xCC99;&#xCD94; &#xD2B8;&#xB801;&#xD06C; &#xB3CC;&#xC544;&#xAC00;&#xB824;&#xBA74;&#xB41C; presomitic mesoderm (PSM)&#xC5D0;&#xC11C; somites&#xC758; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 9 &#xBA85;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC138;&#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC2A4; (Oryzias latipes)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; mutagenesis &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xADF8;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. 4 &#xBA85;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; somites &#xB610;&#xB294; somite &#xACBD;&#xACC4;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xC77C;&#xBD80; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, 5 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0;&#xC778; somites &#xB610;&#xB294; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xBAA8;&#xC591;&#xC73C;&#xB85C; somites &#xC735;&#xD569; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBD84;&#xC11D; &#xD2B9;&#xC815; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xD560; &#xD074;&#xB85D; &#xBC0F; somites&#xC758; antero &#xD6C4;&#xBD80; (A-P) &#xADF9;&#xC131; &#xBC1D;&#xD600; &#xB450; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC73C;&#xB85C; 9 &#xBA85;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCEF4;&#xD30C;&#xC77C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB8F9; 1, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; somites A P &#xC815;&#xCCB4;&#xC131;&#xC740; &#xADF8;&#xB8F9; 2 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xACB0;&#xD568; tailbud &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; PSM prepatterning&#xC5D0; &#xC804;&#xC2DC;. 3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (planlos, pll, schnelles &#xC5D4;&#xB370;, sne, samidare, sam) &#xB378;&#xD0C0;/&#xB178;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC801;&#xC778; &#xACE0;&#xAE30;&#xB294;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;,, somitic &#xACE0;&#xAE30; zebrafish &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC735;&#xD569;&#xB41C; somites &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; somite &#xD06C;&#xAE30; &#xB4F1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC804;&#xC2DC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2A4; &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xC7A0;&#xBCF5; &#xC18C;&#xC124; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xD544;&#xC218; somitogenesis&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC608;&#xC0C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4; (Oryzias latipes)&#xC5D0;&#xC11C; somite &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;.

La estructura metam&#xE9;rica del tronco vertebrados se genera por la formaci&#xF3;n repetida de somitas del mesodermo no segmentado presomitic (PSM). Se presenta la caracterizaci&#xF3;n inicial de nueve diferentes mutantes que afectan a la segmentaci&#xF3;n que fueron aislados en una pantalla de mutag&#xE9;nesis a gran escala en medaka (Oryzias latipes). Cuatro mutantes fueron identificados que muestran una ausencia total o parcial de los somitas o l&#xED;mites somite. Adem&#xE1;s, cinco se encontraron mutaciones que causan somitos fusionados o somitas con tama&#xF1;os y formas irregulares. En el an&#xE1;lisis de hibridaci&#xF3;n in situ utilizando marcadores espec&#xED;ficos que intervienen en el reloj de la segmentaci&#xF3;n y la polaridad antero-posterior (AP) de somitas revel&#xF3; que nueve de los mutantes pueden ser compilados en dos grupos. En el grupo 1, los mutantes presentan defectos en la formaci&#xF3;n de tailbud y prepatterning PSM, mientras que la identidad de la AP en los somitas es defectuoso en el grupo 2 mutantes. Tres mutantes (planlos, PLL, schnelles ende, experto nacional; samidare, sam) tiene fenotipos caracter&#xED;sticos que son similares a las de pez cebra mutantes afectados en la v&#xED;a de Delta / Notch de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. La mayor&#xED;a de los mutantes, sin embargo, exhiben fenotipos som&#xED;ticos distintas de las que se encuentran en el pez cebra, tales como somitas individualmente fusionados y tama&#xF1;os irregulares somite. As&#xED;, estos mutantes Medaka se puede esperar que proporcionan pistas para descubrir nuevos componentes esenciales para somitogenesis.

Las mutaciones que afectan la formaci&#xF3;n somitas en la Medaka (Oryzias latipes)

&#x6B21;&#x4EE3;&#x7406;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8FDB;&#x884C;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x7684;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5C4F;&#x5E55;&#x3002;&#x6765;&#x81EA; ENU &#x6CBB;&#x7597;&#x521B;&#x59CB;&#x4EBA;&#x7537;&#x6027;&#x7684;&#x5408;&#x5B50; F3 &#x540E;&#x4EE3;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x6D3B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x68C0;&#x67E5;&#x3001; &#x5176;&#x4ED6;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5F02;&#x5E38;&#xFF0C;&#x5728;&#x5668;&#x5B98;&#x53D1;&#x751F;&#x548C;&#x7279;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x675F;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x611F;&#x5B98;&#x5668;&#x5B98;&#x5206;&#x5316;&#x548C; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x3002;2031 &#x80DA;&#x80CE;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x53D8;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x5404;&#x5668;&#x5B98;&#x53D1;&#x751F;&#x9020;&#x6210;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684; 312 &#x5165;&#x9009;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#xFF0C;126 &#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0;&#x7279;&#x70B9;&#x548C;&#x5206;&#x914D;&#x7ED9; 105 &#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#x7684;&#x6B21;&#x548C;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4FBF;&#x5229;&#x7A81;&#x53D8;&#x578B;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x8BB8;&#x591A;&#x6B21;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#x51FA;&#x73B0;&#x7684;&#x65E0;&#x7EAA;&#x5F55;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9C7C;&#x7C7B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E00; eyed &#x9488;&#x5934;&#x6216;&#x964D;&#x843D;&#x4F1E;&#x7B49;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x751F;&#x7A81;&#x53D8;&#x65F6;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x6BD4;&#x6B21;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E;&#x8BB8;&#x591A;&#x6B21;&#x7A81;&#x53D8;&#x4EE3;&#x8868;&#x65B0;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x90FD;&#x662F;&#x5BF9;&#x96C6;&#x5408;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x5982;&#x6B64;&#x5B9D;&#x8D35;&#x7684;&#x63A2;&#x7D22;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8865;&#x5145;&#x3002;

&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x5668;&#x5B98;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x6B21;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x9567;&#x5C4F;&#x5E55;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3002;

A large-scale mutagenesis screen was performed in Medaka to identify genes acting in diverse developmental processes. Mutations were identified in homozygous F3 progeny derived from ENU-treated founder males. In addition to the morphological inspection of live embryos, other approaches were used to detect abnormalities in organogenesis and in specific cellular processes, including germ cell migration, nerve tract formation, sensory organ differentiation and DNA repair. Among 2031 embryonic lethal mutations identified, 312 causing defects in organogenesis were selected for further analyses. From these, 126 mutations were characterized genetically and assigned to 105 genes. The similarity of the development of Medaka and zebrafish facilitated the comparison of mutant phenotypes, which indicated that many mutations in Medaka cause unique phenotypes so far unrecorded in zebrafish. Even when mutations of the two fish species cause a similar phenotype such as one-eyed-pinhead or parachute, more genes were found in Medaka than in zebrafish that produced the same phenotype when mutated. These observations suggest that many Medaka mutants represent new genes and, therefore, are important complements to the collection of zebrafish mutants that have proven so valuable for exploring genomic function in development.

A systematic genome-wide screen for mutations affecting organogenesis in Medaka, Oryzias latipes.

Un &#xE9;cran mutagen&#xE8;se &#xE0; grande &#xE9;chelle a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e en Medaka pour identifier les g&#xE8;nes agissant dans divers processus de d&#xE9;veloppement. Des mutations ont &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;es dans la descendance F3 homozygote d&#xE9;riv&#xE9; de m&#xE2;les fondateurs ENU-trait&#xE9;s. En plus de l&#x26;#39;inspection morphologique des embryons vivants, d&#x26;#39;autres approches ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour d&#xE9;tecter des anomalies dans l&#x26;#39;organogen&#xE8;se et &#xE0; certains processus cellulaires, y compris la migration des cellules germinales, formation d&#x26;#39;un tractus nerveux, la diff&#xE9;renciation des organes sensoriels et r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN. Parmi 2031 embryonnaires mutations l&#xE9;tales identifi&#xE9;s, 312 d&#xE9;fauts causant dans l&#x26;#39;organogen&#xE8;se ont &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;lectionn&#xE9;s pour des analyses plus pouss&#xE9;es. De ce nombre, 126 ont &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9;es mutations g&#xE9;n&#xE9;tiquement et affect&#xE9;s &#xE0; 105 g&#xE8;nes. La similitude de l&#x26;#39;&#xE9;volution de m&#xE9;daka et le poisson z&#xE8;bre a facilit&#xE9; la comparaison des ph&#xE9;notypes mutants, ce qui indique que de nombreuses mutations dans Medaka provoquer des ph&#xE9;notypes uniques &#xE0; ce jour non enregistr&#xE9;e chez le poisson z&#xE8;bre. M&#xEA;me lorsque des mutations des deux esp&#xE8;ces de poissons provoquer un ph&#xE9;notype similaire, comme le borgne-t&#xEA;te d&#x26;#39;&#xE9;pingle ou en parachute, d&#x26;#39;autres g&#xE8;nes ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s dans Medaka que dans le poisson-z&#xE8;bre qui a produit le m&#xEA;me ph&#xE9;notype lorsqu&#x26;#39;il est mut&#xE9;. Ces observations sugg&#xE8;rent que de nombreux mutants Medaka repr&#xE9;sentent de nouveaux g&#xE8;nes et, par cons&#xE9;quent, sont des compl&#xE9;ments importants &#xE0; la collection de mutants de poisson z&#xE8;bre qui se sont av&#xE9;r&#xE9;es si pr&#xE9;cieuses pour explorer la fonction g&#xE9;nomique dans le d&#xE9;veloppement.

Une syst&#xE9;matique du g&#xE9;nome &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;chelle &#xE9;cran de mutations affectant l&#x26;#39;organogen&#xE8;se m&#xE9;daka, Oryzias latipes

Eine systematische genomweite Bildschirm f&#xFC;r Mutationen Organogenese in Medaka, Oryzias latipes.

Una schermata di mutagenesi su larga scala &egrave; stata eseguita in Medaka per identificare geni che agiscono in diversi processi di sviluppo. Sono state identificate mutazioni in omozigoti F3 progenie derivata da maschi trattati con ENU fondatore. Oltre l&#39;ispezione morfologica degli embrioni vivi, altri approcci sono stati utilizzati per rilevare anomalie nella organogenesi e in specifici processi cellulari, tra cui la migrazione delle cellule germinali, formazione delle vie nervose, differenziazione di organi sensoriali e del DNA di riparazione. Tra 2031 embrionali letali mutazioni identificate, 312 causando difetti nella organogenesi sono stati selezionati per ulteriore analisi. Da questi, 126 mutazioni sono state caratterizzate geneticamente e assegnate a 105 geni. La somiglianza dello sviluppo di Medaka e zebrafish facilitato il confronto dei fenotipi mutanti, che ha indicato che molte mutazioni Medaka causano fenotipi unici finora non registrati nello zebrafish. Anche quando le mutazioni delle specie due ittiche causano un fenotipo simile come one-eyed-pinhead o paracadute, pi&ugrave; geni sono stati trovati in Medaka rispetto nello zebrafish che ha prodotto lo stesso fenotipo quando mutati. Queste osservazioni suggeriscono che molti mutanti Medaka rappresentano nuovi geni e, quindi, sono importanti complementi per la collezione di mutanti di zebrafish si sono rivelati cos&igrave; prezioso per esplorare la funzione genomic in sviluppo.

Un sistematico genome-wide screen per mutazioni che colpiscono organogenesi in Medaka, Oryzias latipes.

&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x753B;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x50CD;&#x304F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x306F;ENU&#x51E6;&#x7406;&#x5275;&#x59CB;&#x8005;&#x306E;&#x7537;&#x6027;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;F3&#x5B50;&#x5B6B;&#x3067;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x80DA;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x691C;&#x67FB;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x5668;&#x5B98;&#x5F62;&#x6210;&#x3084;&#x751F;&#x6B96;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904A;&#x8D70;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x3068;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8B58;&#x5225;2031&#x80DA;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5668;&#x5B98;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;312&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x6B20;&#x9665;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x3053;&#x3068;&#x304B;&#x3089;&#x3001;126&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;105&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3068;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306F;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306B;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306B;&#x8A18;&#x9332;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x9B5A;&#x7A2E;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x4E00;&#x3064;&#x76EE;&#x306E;&#x3001;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x982D;&#x3084;&#x30D1;&#x30E9;&#x30B7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x5834;&#x5408;&#x3067;&#x3082;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x5909;&#x7570;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3088;&#x308A;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304C;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30EF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;

&#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; mutagenesis &#xD654;&#xBA74; &#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xD589;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; homozygous F3 &#xC790;&#xC190; ENU &#xCDE8;&#xAE09; &#xC124;&#xB9BD;&#xC790; &#xB0A8;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xAC80;&#xC0AC; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC811;&#xADFC; organogenesis &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xB4F1; &#xD2B9;&#xC815; &#xC138;&#xD3EC; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xAD00; &#xD615;&#xC131;, &#xAC10;&#xAC01; &#xAE30;&#xAD00; &#xBD84;&#xD654; &#xBC0F; DNA &#xBCF5;&#xAD6C;. 2031 &#xBC30;&#xC544; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD;&#xBCC4;, &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; 312 organogenesis &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0A4;&#xB294; &#xCD94;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC120;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C;, 126 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; 105 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2A4; &#xAC1C;&#xBC1C; zebrafish&#xC758; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131; &#xC2A4; &#xB9CE;&#xC740; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; zebrafish &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; unrecorded &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACE0;&#xAE30; &#xBE44;&#xAD50; &#xC6A9;&#xC774;. &#xB450; &#xC5B4; &#xC885;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; eyed &#xBA38; &#xC800;&#xB9AC; &#xD55C; &#xB099;&#xD558;&#xC0B0; &#xB4F1; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC; &#xB54C;&#xC5D0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB54C; &#xAC19;&#xC740; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294;&#xC5D0; &#xC2A4; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21;&#xC740; &#xB9CE;&#xC740; &#xC2A4; &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC644; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xAC8C;&#xB188; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xC785;&#xC99D; &#xB41C; zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158;&#xC5D0;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4;, Oryzias latipes&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; organogenesis&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; &#xD654;&#xBA74;.

Una pantalla de mutag&#xE9;nesis a gran escala se llev&#xF3; a cabo en medaka para identificar los genes que act&#xFA;an en diversos procesos de desarrollo. Las mutaciones se identificaron en la progenie derivada de homocigotos F3 machos tratados con ENU fundadores. Adem&#xE1;s de la inspecci&#xF3;n morfol&#xF3;gica de embriones vivos, otros enfoques se utiliza para detectar anomal&#xED;as en la organog&#xE9;nesis y en determinados procesos celulares, incluyendo la migraci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas germinales, la formaci&#xF3;n de las v&#xED;as nerviosas, la diferenciaci&#xF3;n de &#xF3;rganos de los sentidos y la reparaci&#xF3;n del ADN. Entre 2031 mutaciones letales embrionarias identificados, 312 defectos que causan en la organog&#xE9;nesis fueron seleccionados para el an&#xE1;lisis. De estos, 126 mutaciones fueron caracterizados gen&#xE9;ticamente y cedida a 105 genes. La similitud de la evoluci&#xF3;n de medaka y pez cebra facilita la comparaci&#xF3;n de fenotipos mutantes, lo que indica que muchas mutaciones en medaka provocar fenotipos &#xFA;nicos hasta ahora no registrada en el pez cebra. Aun cuando las mutaciones de las dos especies de peces de producir un fenotipo similar, como un solo ojo-cabeza de un alfiler o un paraca&#xED;das, m&#xE1;s genes se han encontrado en medaka que en el pez cebra que se produce el mismo fenotipo cuando est&#xE1; mutado. Estas observaciones sugieren que muchos mutantes Medaka representan nuevos genes y, por tanto, son un complemento importante a la colecci&#xF3;n de mutantes de pez cebra que han demostrado ser tan valioso para explorar la funci&#xF3;n gen&#xF3;mica en el desarrollo.

Una sistem&#xE1;tica de todo el genoma en busca de mutaciones que afectan a la organog&#xE9;nesis en medaka, Oryzias latipes

&#x7AEF;&#x8111;&#x548C;&#x95F4;&#x8111;&#xFF0C;&#x7531;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x524D;&#x8111;&#x5904;&#x7406;&#x611F;&#x89C9;&#x4FE1;&#x606F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x4EE5;&#x57FA;&#x56E0;&#x89E3;&#x5256;&#x524D;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x8111;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E0A;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x6B21;&#x524D;&#x8111;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x5B9A;&#x4E49; 25 &#x57FA;&#x56E0;&#x5F71;&#x54CD;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x524D;&#x8111;&#x7684;&#x4E09;&#x5341;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x88AB;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E24;&#x7C7B;&#x3002;1 &#x7C7B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x901A;&#x5E38;&#x663E;&#x793A;&#x5728;&#x524D;&#x8111;&#x7684;&#x5927;&#x5C0F;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x88AB;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5206;&#x4E3A;&#x5B50;&#x7C7B; 1A &#x81F3; 1 D&#x3002;&#x7C7B;&#x9020;&#x6210; bf1 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x8BC1;&#x660E;&#x7C7B; 1B &#x7A81;&#x53D8; &#xFF08;6 &#x57FA;&#x56E0;) &#x9635;&#x5217;&#x533A;&#x57DF;&#x6807;&#x8BB0;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5F02;&#x5E38;&#x8868;&#x8FBE;&#x6240;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x65E9;&#x671F;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8; 1A (1 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09;&#x3001; &#x7C7B; 1 C &#x7A81;&#x53D8; (1 &#x57FA;&#x56E0;) &#x5728;&#x7A0D;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x7C7B; 1 D &#xFF08;3 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09; &#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x72EC;&#x773C;&#x9488;&#x5934;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x4E2D;&#x7EBF;&#x7F3A;&#x635F;&#x3002;&#x7C7B; 2 &#x7A81;&#x53D8;&#x524D;&#x8111;&#x9020;&#x6210;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x5F02;&#x5E38;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x663E;&#x8457;&#x5F71;&#x54CD;&#x5176;&#x5927;&#x5C0F;&#x3001; &#x7C7B; 2A &#x7A81;&#x53D8; &#xFF08;6 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x9020;&#x6210;&#x5F02;&#x5E38;&#x3001; &#x7C7B; 2B &#x7A81;&#x53D8; &#xFF08;2 &#x57FA;&#x56E0;) &#x4E25;&#x91CD;&#x5F71;&#x54CD;&#x524D;&#x8FDE;&#x5408;&#xFF0C;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x524D;&#x8111;&#x5F62;&#x6001; 2 C &#x7C7B; &#xFF08;6 &#x57FA;&#x56E0;) &#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x663E;&#x793A;&#x5728; zona limitans intrathalamica (&#x5179;&#x5229;)&#xFF0C;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x58F0;&#x6CE2;&#x523A;&#x732C;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E3B;&#x5F20;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F85;&#x52A9;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5E94;&#x63D0;&#x4F9B;&#x91CD;&#x8981;&#x7EBF;&#x7D22;&#x5BF9;&#x57FA;&#x672C;&#x524D;&#x8111;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x9610;&#x660E;&#x548C;&#x63ED;&#x793A;&#x65B0; phylogenically &#x5B88;&#x6052;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x804C;&#x80FD;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;

&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x6B21;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x9567;&#x524D;&#x8111;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5256;&#x6790;&#x3002;

The forebrain, consisting of the telencephalon and diencephalon, is essential for processing sensory information. To genetically dissect formation of the forebrain in vertebrates, we carried out a systematic screen for mutations affecting morphogenesis of the forebrain in Medaka. Thirty-three mutations defining 25 genes affecting the morphological development of the forebrain were grouped into two classes. Class 1 mutants commonly showing a decrease in forebrain size, were further divided into subclasses 1A to 1D. Class 1A mutation (1 gene) caused an early defect evidenced by the lack of bf1 expression, Class 1B mutations (6 genes) patterning defects revealed by the aberrant expression of regional marker genes, Class 1C mutation (1 gene) a defect in a later stage, and Class 1D (3 genes) a midline defect analogous to the zebrafish one-eyed pinhead mutation. Class 2 mutations caused morphological abnormalities in the forebrain without considerably affecting its size, Class 2A mutations (6 genes) caused abnormalities in the development of the ventricle, Class 2B mutations (2 genes) severely affected the anterior commissure, and Class 2C (6 genes) mutations resulted in a unique forebrain morphology. Many of these mutants showed the compromised sonic hedgehog expression in the zona-limitans-intrathalamica (zli), arguing for the importance of this structure as a secondary signaling center. These mutants should provide important clues to the elucidation of the molecular mechanisms underlying forebrain development, and shed new light on phylogenically conserved and divergent functions in the developmental process.

Genetic dissection of the formation of the forebrain in Medaka, Oryzias latipes.

Le cerveau ant&#xE9;rieur, constitu&#xE9; du t&#xE9;lenc&#xE9;phale et dienc&#xE9;phale, est essentiel pour le traitement de l&#x26;#39;information sensorielle. Pour diss&#xE9;quer g&#xE9;n&#xE9;tiquement formation du cerveau ant&#xE9;rieur chez les vert&#xE9;br&#xE9;s, nous avons effectu&#xE9; un &#xE9;cran syst&#xE9;matique de mutations affectant la morphogen&#xE8;se du cerveau ant&#xE9;rieur dans m&#xE9;daka. Trente-trois mutations d&#xE9;finissant 25 g&#xE8;nes qui affectent le d&#xE9;veloppement morphologique du cerveau ant&#xE9;rieur ont &#xE9;t&#xE9; regroup&#xE9;s en deux classes. Classe 1 mutants couramment montrant une diminution de la taille du cerveau ant&#xE9;rieur, ont &#xE9;t&#xE9; divis&#xE9;s en sous-classes 1A &#xE0; 1D. Classe 1A mutation (1 g&#xE8;ne) a provoqu&#xE9; un d&#xE9;faut pr&#xE9;coce en t&#xE9;moigne l&#x26;#39;absence de BF1 expression, mutations de cat&#xE9;gorie 1B (6 g&#xE8;nes) des d&#xE9;fauts de structuration mis en &#xE9;vidence par l&#x26;#39;expression aberrante des g&#xE8;nes marqueurs r&#xE9;gionaux, la mutation la classe 1C (1 g&#xE8;ne) un d&#xE9;faut dans un plus tard, stade, et 1D classe (3 g&#xE8;nes) une anomalie m&#xE9;diane analogue &#xE0; du poisson-z&#xE8;bre borgne mutation t&#xEA;te d&#x26;#39;&#xE9;pingle. Classe 2 mutations a provoqu&#xE9; des anomalies morphologiques dans le cerveau ant&#xE9;rieur, sans affecter consid&#xE9;rablement sa taille, mutations de classe 2A (6 g&#xE8;nes) des anomalies caus&#xE9;es dans le d&#xE9;veloppement du ventricule, les mutations classe 2B (2 g&#xE8;nes) a durement affect&#xE9; la commissure ant&#xE9;rieure, et la classe 2C (6 g&#xE8;nes ) a entra&#xEE;n&#xE9; des mutations dans une morphologie du cerveau ant&#xE9;rieur unique. Beaucoup de ces mutants ont montr&#xE9; l&#x26;#39;compromise sonic hedgehog expression dans la zona-limitante-intrathalamica (ZLI), en soulignant l&#x26;#39;importance de cette structure comme un centre de signalisation secondaire. Ces mutants devraient fournir des indices importants &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;lucidation des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent le d&#xE9;veloppement du cerveau ant&#xE9;rieur, et apporter un nouvel &#xE9;clairage sur les fonctions conserv&#xE9;es phylog&#xE9;niquement et divergents dans le processus de d&#xE9;veloppement.

Dissection g&#xE9;n&#xE9;tique de la formation du cerveau ant&#xE9;rieur dans m&#xE9;daka, Oryzias latipes

Genetische Analyse der Bildung des Vorderhirn Medaka, Oryzias latipes.

Il proencefalo, consistente del telencefalo e diencefalo, &egrave; essenziale per l&#39;elaborazione di informazioni sensoriali. Per sezionare la formazione del proencefalo nei vertebrati geneticamente, abbiamo effettuato un sistematico schermo per mutazioni che colpiscono la morfogenesi del proencefalo in Medaka. Trenta-tre mutazioni definizione 25 geni che influenzano lo sviluppo morfologico del proencefalo erano raggruppate in due classi. Mutanti di classe 1 comunemente mostrando una diminuzione della dimensione del proencefalo, sono state ulteriormente suddivise in sottoclassi 1A d 1. Classe 1A mutazione (1 gene) ha causato un difetto precoce evidenziato dalla mancanza di espressione bf1, mutazioni del 1B di classe (6 geni) creazione di serie di difetti ha rivelati dall&#39;espressione aberrante di geni marcatori regionale, classe C 1 mutazione (1 gene) un difetto in una fase successiva e classe 1 D (3 geni) un difetto della linea mediana analogo per la mutazione di pinhead monocolo di zebrafish. Classe 2 mutazioni causate anomalie morfologiche nel proencefalo senza alterare notevolmente le dimensioni, mutazioni di 2A classe (6 geni) ha causato anomalie nello sviluppo del ventricolo, mutazioni di classe 2B (2 geni) gravemente colpito la commessura anteriore e le mutazioni di classe 2 C (6 geni) ha portato a una morfologia unica proencefalo. Molti di questi mutanti hanno mostrato l&#39;espressione di sonic hedgehog compromessa in zona-riconosciuto-intrathalamica (zli), sostenendo per l&#39;importanza di questa struttura come un centro secondario di segnalazione. Questi mutanti dovrebbero fornire importanti indizi per la delucidazione dei meccanismi molecolari sottostanti lo sviluppo del proencefalo e gettano nuova luce sulle funzioni phylogenically conservate e divergenti nel processo di sviluppo.

Dissezione genetica della formazione del proencefalo in Medaka, Oryzias latipes.

&#x7D42;&#x8133;&#x3068;&#x9593;&#x8133;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x8133;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x899A;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x51E6;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7684;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;25&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x4E09;&#x5341;&#x4E09;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x8133;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x200B;&#x200B;&#x3055;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;1D&#x306B;&#x30B5;&#x30D6;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1A&#x306B;&#x5206;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1B&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3001;BF1&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A3C;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1A&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#xFF08;6&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x5730;&#x57DF;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1C&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;1&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x4EE5;&#x964D;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;1D&#xFF08;3&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x76EE;&#x306E;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x982D;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x6B63;&#x4E2D;&#x7DDA;&#x6B20;&#x9665;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;2&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;2A&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;6&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x7570;&#x5E38;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;2B&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#xFF08;2&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524D;&#x4EA4;&#x9023;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;2C&#xFF08;6&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x8133;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x4E8C;&#x6B21;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5730;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x5E2F;&#xB7;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;-intrathalamica&#xFF08;ZLI&#xFF09;&#x4FB5;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#xB7;&#x30B6;&#xB7;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x8133;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x89E3;&#x660E;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;phylogenically&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3068;&#x767A;&#x6563;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5149;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x524D;&#x8133;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x89E3;&#x5256;

Telencephalon &#xBC0F; diencephalon, &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xAC1C; &#xAC10;&#xAC01; &#xC815;&#xBCF4; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615;&#xC131; &#xAC1C; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD574; &#xBD80;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C; morphogenesis&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; &#xD654;&#xBA74; &#xC2E4;&#xC2DC;. 30-3 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; 25 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xAC1C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC18C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC815;&#xC758; &#xB450; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xB85C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xD654; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD84;&#xD560; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xC11C;&#xBE0C; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 1A 1 d. 1A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (1 &#xC9C4;) &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 1B &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (6 &#xC720;&#xC804;&#xC790;) &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD0C8; &#xC120; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1D;&#xD600; &#xACB0;&#xD568; &#xD328;&#xD134;&#xD654; bf1 &#xC2DD;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC785;&#xC99D; &#xCD08;&#xAE30; &#xACB0;&#xD568; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 1 C &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (1 &#xC9C4;) &#xB098;&#xC911;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; 1 D &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; (3 &#xC720;&#xC804;&#xC790;) &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; zebrafish &#xD558;&#xB098; &#xBA38; &#xC800;&#xB9AC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC911;&#xAC04; &#xC120; &#xACB0;&#xD568;. 2 &#xBCC0;&#xC774; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xD06C;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xACE0; &#xAC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC18C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 2A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (6 &#xC720;&#xC804;&#xC790;)&#xC740; &#xC2EC; &#xC2E4; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC774;&#xC0C1;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558; &#xACE0; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 2B &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; (2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;)&#xB294; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; commissure&#xC5D0; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; 2 C (6 &#xC720;&#xC804;&#xC790;) &#xBCC0;&#xC774; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xAC1C; &#xD615;&#xD0DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; zona limitans intrathalamica (zli) &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC18C;&#xB2C9; &#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC870; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C;&#xC774; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB17C;&#xC7C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAC1C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xD574;&#xBA85;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; phylogenically &#xBCF4;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84;&#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBE5B;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0B0; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4;, Oryzias latipes&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xD574; &#xBD80;.

El cerebro anterior, que consiste en el telenc&#xE9;falo y el dienc&#xE9;falo, es esencial para procesar la informaci&#xF3;n sensorial. Para diseccionar gen&#xE9;ticamente la formaci&#xF3;n del cerebro anterior en los vertebrados, se llev&#xF3; a cabo una pantalla sistem&#xE1;tica de mutaciones que afectan a la morfog&#xE9;nesis del cerebro anterior en medaka. Treinta y tres mutaciones que definen 25 genes que afectan el desarrollo morfol&#xF3;gico del cerebro anterior se agruparon en dos clases. Clase 1 mutantes com&#xFA;nmente muestran una disminuci&#xF3;n en el tama&#xF1;o del cerebro anterior, se dividen en subclases 1A a 1D. Clase mutaci&#xF3;n 1A (1 gen) caus&#xF3; un defecto temprano evidenciado por la falta de BF1 expresi&#xF3;n, las mutaciones de la Clase 1B (6 genes) defectos de modelado revelados por la expresi&#xF3;n aberrante de genes marcadores regionales, mutaci&#xF3;n Clase 1C (1 gen) un defecto en un posterior etapa, y La Clase 1D (3 genes) de un defecto l&#xED;nea media an&#xE1;loga a la del pez cebra con un solo ojo mutaci&#xF3;n de una cabeza de alfiler. Clase 2 mutaciones causadas anomal&#xED;as morfol&#xF3;gicas en el cerebro anterior, sin afectar considerablemente su tama&#xF1;o, las mutaciones de la Clase 2A (6 genes) anormalidades causadas en el desarrollo del ventr&#xED;culo, las mutaciones Clase 2B (2 genes) afectado gravemente a la comisura anterior, y de la clase 2C (6 genes ) mutaciones result&#xF3; en una morfolog&#xED;a &#xFA;nica prosenc&#xE9;falo. Muchas de estas mutantes mostr&#xF3; el peligro de expresi&#xF3;n sonora erizo en la zona-limitante-intrathalamica (ZLI), con el argumento de la importancia de esta estructura como un centro de secundaria de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. Estos mutantes deber&#xED;an proporcionar importantes pistas para el esclarecimiento de los mecanismos moleculares que subyacen en el desarrollo del cerebro anterior, y arroja nueva luz sobre las funciones phylogenically conservadas y divergentes en el proceso de desarrollo.

La disecci&#xF3;n gen&#xE9;tica de la formaci&#xF3;n del cerebro anterior en medaka, Oryzias latipes

En una pantalla de escala de mutag&#xE9;nesis grande de medaka se identificaron 60 mutaciones recesivas cig&#xF3;ticos que afectan el desarrollo retina. Con base en la aparici&#xF3;n y el tipo de alteraciones fenot&#xED;picas, los mutantes se agruparon en cinco categor&#xED;as: la primera incluye 11 mutantes que se ven afectados en la placa neural y la formaci&#xF3;n de ves&#xED;cula &#xF3;ptica. El segundo grupo se compone de 15 mutantes que se da&#xF1;an en el crecimiento de ves&#xED;cula &#xF3;ptica. El tercer grupo incluye 18 mutantes que se ven afectados en el desarrollo de copa &#xF3;ptica. El cuarto grupo contiene 13 mutantes con defectos en la diferenciaci&#xF3;n de la retina. 12 de ellos tienen ojos m&#xE1;s peque&#xF1;os, mientras que una mutaci&#xF3;n da lugar a los ojos agrandados. El quinto grupo consta de tres mutantes con defectos en la pigmentaci&#xF3;n de la retina. La colecci&#xF3;n de mutantes se utilizar&#xE1; para hacer frente a los mecanismos moleculares gen&#xE9;ticos que subyacen a la formaci&#xF3;n de ojo de los vertebrados.

Las mutaciones que afectan al desarrollo de Retina en medaka

&#x5728;&#x6B21;&#x5927;&#x578B;&#x8BF1;&#x53D8;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A; 60 &#x5F71;&#x54CD;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x9690;&#x6027;&#x5408;&#x5B50;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x53D1;&#x75C5;&#x548C;&#x8868;&#x578B;&#x5F02;&#x5E38;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5206;&#x4E3A;&#x4E94;&#x7C7B;&#xFF1A; &#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x548C;&#x5149;&#x7EA4;&#x56CA;&#x6CE1;&#x5F62;&#x6210;&#x5305;&#x62EC; 11 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x7EC4;&#x662F;&#x5728;&#x89C6;&#x795E;&#x7ECF;&#x56CA;&#x6CE1;&#x589E;&#x957F;&#x800C;&#x53D7;&#x635F;&#x7684; 15 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x89C6;&#x676F;&#x53D1;&#x5C55;&#x5305;&#x62EC;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; 18 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x7B2C;&#x56DB;&#x7EC4;&#x5305;&#x542B; 13 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B; 12 &#x6709;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6269;&#x5927;&#x540E;&#x7684;&#x773C;&#x775B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E94;&#x7EC4;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x6C89;&#x7740;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x96C6;&#x5408;&#x5C06;&#x7528;&#x4E8E;&#x89E3;&#x51B3;&#x57FA;&#x7840;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x773C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x5F71;&#x54CD;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x6B21;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

In a large scale mutagenesis screen of Medaka we identified 60 recessive zygotic mutations that affect retina development. Based on the onset and type of phenotypic abnormalities, the mutants were grouped into five categories: the first includes 11 mutants that are affected in neural plate and optic vesicle formation. The second group comprises 15 mutants that are impaired in optic vesicle growth. The third group includes 18 mutants that are affected in optic cup development. The fourth group contains 13 mutants with defects in retinal differentiation. 12 of these have smaller eyes, whereas one mutation results in enlarged eyes. The fifth group consists of three mutants with defects in retinal pigmentation. The collection of mutants will be used to address the molecular genetic mechanisms underlying vertebrate eye formation.

Mutations affecting retina development in Medaka.

Dans un &#xE9;cran de mutagen&#xE8;se &#xE0; grande &#xE9;chelle de Medaka, nous avons identifi&#xE9; 60 mutations r&#xE9;cessives zygotiques qui affectent le d&#xE9;veloppement r&#xE9;tine. Sur la base de l&#x26;#39;apparition et le type d&#x26;#39;anomalies ph&#xE9;notypiques, les mutants ont &#xE9;t&#xE9; regroup&#xE9;s en cinq cat&#xE9;gories: la premi&#xE8;re comprend 11 mutants qui sont affect&#xE9;s dans la plaque neurale et la formation des v&#xE9;sicules optiques. Le deuxi&#xE8;me groupe est compos&#xE9; de 15 mutants qui sont d&#xE9;ficients dans la croissance des v&#xE9;sicules optiques. Le troisi&#xE8;me groupe comprend 18 mutants qui sont affect&#xE9;s dans le d&#xE9;veloppement cupule optique. Le quatri&#xE8;me groupe contient 13 mutants pr&#xE9;sentant des d&#xE9;fauts dans la diff&#xE9;renciation de la r&#xE9;tine. 12 d&#x26;#39;entre eux ont des yeux plus petits, tandis que l&#x26;#39;un des r&#xE9;sultats de mutation dans les yeux agrandis. Le cinqui&#xE8;me groupe se compose de trois mutants pr&#xE9;sentant des d&#xE9;fauts de pigmentation de la r&#xE9;tine. La collection de mutants sera utilis&#xE9;e pour traiter les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent la formation g&#xE9;n&#xE9;tiques &#x153;il des vert&#xE9;br&#xE9;s.

Mutations affectant le d&#xE9;veloppement Retina dans Medaka

Mutationen, welche die Netzhaut in Entwicklung Medaka.

In uno schermo di mutagenesi su larga scala di Medaka abbiamo identificato 60 mutazioni recessive zygotic che influenzano lo sviluppo della retina. Basato sull&#39;esordio e il tipo di anomalie fenotipiche, i mutanti sono stati raggruppati in cinque categorie: la prima comprende 11 mutanti che sono interessati nella formazione piastra neurale e vescicola ottica. Il secondo gruppo comprende 15 mutanti che sono alterati nella crescita della vescicola ottica. Il terzo gruppo comprende 18 mutanti che sono interessati in ottica Coppa sviluppo. Il quarto gruppo contiene 13 mutanti con difetti nella differenziazione della retina. 12 di questi hanno gli occhi pi&ugrave; piccoli, mentre una mutazione provoca occhi allargati. Il quinto gruppo &egrave; costituito da tre mutanti con difetti di pigmentazione retinica. La collezione di mutanti serviranno per affrontare i meccanismi molecolari genetici sottostanti vertebrate eye formation.

Mutazioni che interessano lo sviluppo della retina in Medaka.

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;60&#x306E;&#x52A3;&#x6027;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x7570;&#x5E38;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x3084;&#x30BF;&#x200B;&#x200B;&#x30A4;&#x30D7;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;5&#x3064;&#x306E;&#x30AB;&#x30C6;&#x30B4;&#x30EA;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x3068;&#x773C;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;11&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x773C;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;15&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E09;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x773C;&#x676F;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;18&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7B2C;&#x56DB;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x6B20;&#x9665;&#x3001;13&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;12&#x306F;&#x3001;&#x62E1;&#x5927;&#x306E;&#x76EE;&#x306B;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x76EE;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E94;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x8272;&#x7D20;&#x6C88;&#x7740;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3064;3&#x3064;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x773C;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;

&#xC2A4;&#xC758; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; mutagenesis &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; 60 &#xC5F4;&#xC131; zygotic &#xBCC0;&#xC774; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC1C;&#xBCD1; &#xBC0F; phenotypic &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB2E4;&#xC12F; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBC94;&#xC8FC;&#xB85C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xD654;: &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310;&#xACFC; &#xAD11; &#xAE30; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; 11 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xADF8;&#xB8F9; &#xAD6C;&#xC131; 15 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAD11; &#xAE30; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138; &#xBC88;&#xC9F8; &#xADF8;&#xB8F9; &#xAD11; &#xCEF5; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; 18 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB124; &#xBC88;&#xC9F8; &#xADF8;&#xB8F9; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; 13 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; 12 &#xD655;&#xB300; &#xB208;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC18;&#xBA74; &#xC791;&#xC740; &#xB208;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0;. &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC0C9;&#xC18C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; 3 &#xBA85;&#xC758; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB2E4;&#xC12F; &#xBC88;&#xC9F8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xCEEC;&#xB809;&#xC158; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCC99;&#xCD94; &#xB208; &#xD615;&#xC131; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xC804; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;.

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&#x5F71;&#x54CD;&#x809D;&#x53D1;&#x5C55;&#x53CA;&#x6B21;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x9567;&#xFF0C;&#x6309;&#x591A;&#x4E2A;&#x6761;&#x4EF6;&#x7B5B;&#x9009;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x3002;

We report here mutations affecting various aspects of liver development and function identified by multiple assays in a systematic mutagenesis screen in Medaka. The 22 identified recessive mutations assigned to 19 complementation groups fell into five phenotypic groups. Group 1, showing defective liver morphogenesis, comprises mutations in four genes, which may be involved in the regulation of growth or patterning of the gut endoderm. Group 2 comprises mutations in three genes that affect the laterality of the liver; in kendama mutants of this group, the laterality of the heart and liver is uncoupled and randomized. Group 3 includes mutations in three genes altering bile color, indicative of defects in hemoglobin-bilirubin metabolism and globin synthesis. Group 4 consists of mutations in three genes, characterized by a decrease in the accumulation of fluorescent metabolite of a phospholipase A(2) substrate, PED6, in the gall bladder. Lipid metabolism or the transport of lipid metabolites may be affected by these mutations. Mutations in Groups 3 and 4 may provide animal models for relevant human diseases. Group 5 mutations in six genes affect the formation of endoderm, endodermal rods and hepatic bud from which the liver develops. These Medaka mutations, identified by morphological and metabolite marker screens, should provide clues to understanding molecular mechanisms underlying formation of a functional liver.

Mutations affecting liver development and function in Medaka, Oryzias latipes, screened by multiple criteria.

Nous rapportons ici les mutations qui affectent divers aspects du d&#xE9;veloppement du foie et de la fonction identifi&#xE9;s par des tests multiples dans un &#xE9;cran de mutagen&#xE8;se syst&#xE9;matique dans m&#xE9;daka. Les 22 mutations r&#xE9;cessives identifi&#xE9;s assign&#xE9;s &#xE0; 19 groupes de compl&#xE9;mentation se r&#xE9;partissent en cinq groupes ph&#xE9;notypiques. Groupe 1, montrant d&#xE9;fectueux morphogen&#xE8;se du foie, comprend des mutations dans quatre g&#xE8;nes, qui peuvent &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de la croissance ou de la mod&#xE9;lisation de l&#x26;#39;endoderme intestinal. Le groupe 2 comprend des mutations dans trois g&#xE8;nes qui influent sur la lat&#xE9;ralit&#xE9; du foie; chez les mutants Kendama de ce groupe, la lat&#xE9;ralit&#xE9; du c&#x153;ur et le foie est d&#xE9;saccoupl&#xE9; et randomis&#xE9;e. Le groupe 3 comprend des mutations dans trois g&#xE8;nes modifiant la couleur de bile, ce qui indique des d&#xE9;fauts dans l&#x26;#39;h&#xE9;moglobine bilirubine m&#xE9;tabolisme et la synth&#xE8;se de globine. Groupe 4 comprend des mutations dans les g&#xE8;nes trois, caract&#xE9;ris&#xE9; par une diminution de l&#x26;#39;accumulation de fluorescente m&#xE9;tabolite d&#x26;#39;un phospholipase A (2) de substrat, PED6, dans la v&#xE9;sicule biliaire. Le m&#xE9;tabolisme des lipides ou le transport des m&#xE9;tabolites lipidiques peuvent &#xEA;tre touch&#xE9;s par ces mutations. Des mutations dans les groupes 3 et 4 peuvent fournir des mod&#xE8;les animaux pertinents pour les maladies humaines. Groupe 5 des mutations dans six g&#xE8;nes affectent la formation de l&#x26;#39;endoderme, tiges et des bourgeons endodermiques h&#xE9;patique &#xE0; partir de laquelle le foie se d&#xE9;veloppe. Ces mutations Medaka, identifi&#xE9;s par les &#xE9;crans marqueurs morphologiques et de son m&#xE9;tabolite, devraient fournir des indices &#xE0; la compr&#xE9;hension des m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent la formation d&#x26;#39;un foie fonctionnel.

Mutations affectant le d&#xE9;veloppement du foie et de la fonction de m&#xE9;daka, Oryzias latipes, projet&#xE9; par des crit&#xE8;res multiples

Mutationen, welche die Entwicklung und Funktion der Leber in Medaka, Oryzias latipes, nach mehreren Kriterien untersucht.

Riportiamo qui le mutazioni che interessano vari aspetti dello sviluppo fegato e funzione identificata da dosaggi multipli in una schermata di mutagenesi sistematica in Medaka. Il 22 identificato mutazioni recessive assegnate a complementazione 19 gruppi caddero in cinque gruppi fenotipici. Gruppo 1, mostrando la morfogenesi epatica difettoso, comprende le mutazioni in quattro geni, che possono essere coinvolti nella regolazione della crescita o modellatura dell&#39;endoderma dell&#39;intestino. Il gruppo 2 comprende le mutazioni di tre geni che possono influenzare la lateralit&agrave; del fegato; kendama mutanti di questo gruppo, la lateralit&agrave; del cuore e del fegato &egrave; disgiunto e randomizzati. Gruppo 3 include le mutazioni nei tre geni alterando il colore della bile, indicative di difetti nel metabolismo dell&#39;emoglobina bilirubina e la sintesi della globina. Gruppo 4 costituito da mutazioni di tre geni, caratterizzate da una diminuzione dell&#39;accumulo del metabolita fluorescente di un substrato di a (2) fosfolipasi, PED6, nella cistifellea. Metabolismo dei lipidi o il trasporto di metaboliti lipidici possa essere influenzato da queste mutazioni. Mutazioni nei gruppi 3 e 4 possono prevedere modelli animali di malattie umane. Gruppo 5 mutazioni in sei geni possono influenzare la formazione dell&#39;endoderma, canne endodermico ed epatica gemma da cui si sviluppa il fegato. Queste mutazioni Medaka, identificate dalla morfologica e schermi di metabolita marker, dovrebbe fornire indizi utili alla comprensione dei meccanismi molecolari che sottendono la formazione di un fegato funzionale.

Mutazioni che colpiscono fegato sviluppo e funzione di Medaka, Oryzias latipes, schermato da criteri multipli.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3067;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 19&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;22&#x8B58;&#x5225;&#x52A3;&#x6027;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;5&#x3064;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x843D;&#x3061;&#x305F;&#x3002;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;1&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8178;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3084;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;4&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;2&#x306F;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x5DE6;&#x53F3;&#x5DEE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;3&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x3051;&#x3093;&#x7389;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x3084;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x5DE6;&#x53F3;&#x5DEE;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x306E;&#x7121;&#x4F5C;&#x70BA;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;3&#x306F;&#x30D8;&#x30E2;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30EA;&#x30EB;&#x30D3;&#x30F3;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3068;&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x80C6;&#x6C41;&#x306E;&#x8272;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;3&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;4&#x306F;&#x3001;&#x80C6;&#x56A2;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30EA;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;A&#xFF08;2&#xFF09;&#x57FA;&#x677F;&#x3001;PED6&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;3&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8102;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3084;&#x8102;&#x8CEA;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7269;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;3&#x304A;&#x3088;&#x3073;4&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 6&#x3064;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;5&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x809D;&#x81D3;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x3053;&#x304B;&#x3089;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x3001;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3001;&#x809D;&#x82BD;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x7523;&#x7269;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x624B;&#x304C;&#x304B;&#x308A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x3001;&#x30E1;&#x30C0;&#x30AB;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xAC04; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801;&#xC778; mutagenesis &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB41C;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC54C;&#xB824;&#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. 22 &#xC2DD;&#xBCC4; &#xC5F4;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xADF8;&#xB8F9; 5 phenotypic &#xADF8;&#xB8F9;&#xC73C;&#xB85C; &#xB5A8;&#xC5B4;&#xC9C4; 19 &#xBCF4;&#xC644;&#xC131;&#xC5D0; &#xD560;&#xB2F9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB8F9; 1, &#xAC04; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; morphogenesis &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xC131;&#xC7A5; &#xADDC;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xC6A9;&#xAE30; endoderm&#xC758; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; 4 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC04;; &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xB294; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB8F9; 2 &#xC774; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; kendama &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xC2EC;&#xC7A5;&#xACFC; &#xAC04; &#xCE58;&#xB7EC;&#xC57C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; &#xBB34;&#xC791;&#xC704;. &#xADF8;&#xB8F9; 3 &#xBCC0;&#xACBD; &#xB2F4; &#xC999; &#xC0C9;, &#xD5E4;&#xBAA8;&#xAE00;&#xB85C;&#xBE48;-&#xBE4C;&#xB9AC; &#xB8E8;&#xBE48; &#xB300;&#xC0AC;&#xC640; globin &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB8F9; 4 phospholipase A(2) &#xAE30;&#xD310;, PED6, &#xB2F4; &#xC999; &#xBC29;&#xAD11;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC131; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xC9C8; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C;&#xC758; &#xC218;&#xC1A1; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB8F9; 3&#xACFC; 4&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xAD00;&#xB828; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. 6 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xADF8;&#xB8F9; 5 endoderm, endodermal &#xBD09; &#xAC04; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xAC04;&#xC7A5; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC774; &#xC2A4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0B0;&#xBB3C; &#xB9C8;&#xCEE4; &#xD654;&#xBA74; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAC04; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xC11C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCC0;&#xC774; &#xAC04; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC2A4;, Oryzias latipes, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0C1;&#xC601;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;.

Presentamos aqu&#xED; las mutaciones que afectan a diversos aspectos del desarrollo del h&#xED;gado y la funci&#xF3;n identificada por m&#xFA;ltiples ensayos en una pantalla de mutag&#xE9;nesis sistem&#xE1;tica en medaka. Los 22 identificadas las mutaciones recesivas asignados a 19 grupos de complementaci&#xF3;n cay&#xF3; en cinco grupos fenot&#xED;picos. Grupo 1, que muestra defectuosa morfog&#xE9;nesis del h&#xED;gado, comprende las mutaciones en cuatro genes, que pueden estar implicados en la regulaci&#xF3;n del crecimiento o el patr&#xF3;n del endodermo intestinal. Grupo 2 se incluyen las mutaciones en tres genes que afectan a la lateralidad del h&#xED;gado, en los mutantes Kendama de este grupo, la lateralidad del coraz&#xF3;n y el h&#xED;gado se desacopla y aleatorizado. El grupo 3 incluye las mutaciones en tres genes que alteran el color de bilis, lo que indica defectos en el metabolismo de la hemoglobina, la bilirrubina y la s&#xED;ntesis de globina. Grupo 4 se compone de tres mutaciones en los genes, que se caracteriza por una disminuci&#xF3;n en la acumulaci&#xF3;n de metabolitos fluorescente de una fosfolipasa A (2) del substrato, PED6, en la ves&#xED;cula biliar. El metabolismo lip&#xED;dico o el transporte de metabolitos de l&#xED;pidos puede ser afectado por estas mutaciones. Las mutaciones en los grupos 3 y 4 pueden servir como modelos animales para enfermedades importantes de los humanos. Grupo 5 mutaciones en seis genes afectan la formaci&#xF3;n de endodermo, varillas y yemas endod&#xE9;rmicas hep&#xE1;tica de la que el h&#xED;gado se desarrolla. Estas mutaciones medaka, identificados por las pantallas de los marcadores morfol&#xF3;gicos y metabolitos, deber&#xED;an proporcionar pistas para comprender los mecanismos moleculares que subyacen a la formaci&#xF3;n de un h&#xED;gado funcional.

Las mutaciones que afectan el desarrollo del h&#xED;gado y la funci&#xF3;n en medaka, Oryzias latipes, seleccionados por varios criterios

&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x57FA;&#x56E0;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x906D;&#x53D7;&#x4E86;&#x4E09;&#x4E2A;&#x95EE;&#x9898;&#xFF1A; &#x5EFA;&#x7B51;&#x590D;&#x6742;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6784;&#x9020;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E38;&#x89C4;&#x4E9A;&#x514B;&#x9686; &#xFF1B; &#x52B3;&#x52A8;&#x4F4E;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x9576;&#x5D4C;&#x5728;&#x77AC;&#x6001;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x884C;&#x6CE8;&#x518C; &#xFF1B;&#x548C;&#x67E5;&#x660E;&#x751F;&#x6B96;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FDB;&#x884C;&#x96C6;&#x6210;&#xFF0C;&#x9664;&#x975E;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x6807;&#x8BB0;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;Tol2kit &#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x57FA;&#x4E8E;&#x91CD;&#x7EC4;&#x514B;&#x9686; (&#x591A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7F51;&#x5173;&#x6280;&#x672F;) Tol2 &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x9AA8;&#x5E72;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x5FEB;&#x901F;&#x3001; &#x6A21;&#x5757;&#x5316;&#x5927;&#x4F1A; [&#x52A9;&#x5242;]-[&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;]-[3&#39; &#x6807;&#x8BB0;] &#x6784;&#x9020;&#x3002;&#x5B83;&#x5305;&#x62EC;&#x4E00;&#x4E2A;&#x76EE;&#x6807;&#x5411;&#x91CF;&#x4E0E; cmlc2:EGFP (&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6807;&#x8BB0;&#x548C;&#x5404;&#x5F0F;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x6709;&#x7528;&#x6761;&#x76EE;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x548C; &beta;-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x8005; &#xFF1B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x3001; &#x6838;&#x3001; &#x548C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x819C;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; &#xFF1B;&#x548C;&#x5185;&#x90E8;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x8FDB;&#x5165;&#x5E8F;&#x5217;&#x9A71;&#x52A8;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x5361;&#x5E26;&#x53CC;&#x987A;&#x53CD;&#x5B50;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;Tol2kit &#x6781;&#x5927;&#x5730;&#x65B9;&#x4FBF;&#x4E86;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x3001; &#x7B80;&#x5316;&#x4E86;&#x5206;&#x4EAB;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F;&#x5927;&#x578B;&#x9879;&#x76EE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6216;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x56FE;&#x4E66;&#x9986;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;

Tol2kit: Tol2 &#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6784;&#x9020;&#x7684;&#x591A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7F51;&#x5173;&#x7684;&#x5EFA;&#x8BBE;&#x5DE5;&#x5177;&#x5305;&#x3002;

Transgenesis is an important tool for assessing gene function. In zebrafish, transgenesis has suffered from three problems: the labor of building complex expression constructs using conventional subcloning; low transgenesis efficiency, leading to mosaicism in transient transgenics and infrequent germline incorporation; and difficulty in identifying germline integrations unless using a fluorescent marker transgene. The Tol2kit system uses site-specific recombination-based cloning (multisite Gateway technology) to allow quick, modular assembly of [promoter]-[coding sequence]-[3' tag] constructs in a Tol2 transposon backbone. It includes a destination vector with a cmlc2:EGFP (enhanced green fluorescent protein) transgenesis marker and a variety of widely useful entry clones, including hsp70 and beta-actin promoters; cytoplasmic, nuclear, and membrane-localized fluorescent proteins; and internal ribosome entry sequence-driven EGFP cassettes for bicistronic expression. The Tol2kit greatly facilitates zebrafish transgenesis, simplifies the sharing of clones, and enables large-scale projects testing the functions of libraries of regulatory or coding sequences.

The Tol2kit: a multisite gateway-based construction kit for Tol2 transposon transgenesis constructs.

Transg&eacute;n&egrave;se est un outil important pour &eacute;valuer la fonction des g&egrave;nes. Chez le poisson z&egrave;bre, la transg&eacute;n&egrave;se a souffert de trois probl&egrave;mes : le travail de construction constructions expression complexe utilisant subcloning conventionnel ; transg&eacute;n&egrave;se faible efficacit&eacute;, conduisant &agrave; un mosa&iuml;cisme dans transg&eacute;n&egrave;se transitoire et l&#39;incorporation de peu fr&eacute;quentes dans les cellules germinales ; et la difficult&eacute; &agrave; identifier les int&eacute;grations dans les cellules germinales &agrave; moins d&#39;utiliser un transg&egrave;ne marqueur fluorescent. Le syst&egrave;me Tol2kit utilise une in site recombinaison clonage (multisite portail technologie) pour permettre le montage rapide et modulaire de constructions [3&#39; tag] [promoteur]-[s&eacute;quence codante] - dans un squelette de transposon Tol2. Il comprend un vecteur de destination avec un marqueur de transg&eacute;n&egrave;se cmlc2:EGFP (prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e) et une vari&eacute;t&eacute; de clones d&#39;entr&eacute;e largement utile, y compris les stimulateurs hsp70 et beta-actine ; prot&eacute;ines fluorescentes cytoplasmiques, nucl&eacute;aires et membrane localis&eacute;e ; ribosome interne entr&eacute;e ax&eacute;e sur la s&eacute;quence EGFP cassettes d&#39;expression bicistronique et. Le Tol2kit facilite la transgen&egrave;se zebrafish, simplifie grandement le partage des clones et permet de contr&ocirc;ler les fonctions des biblioth&egrave;ques, des s&eacute;quences de codage ou de r&eacute;glementation des projets &agrave; grande &eacute;chelle.

Le Tol2kit : un kit de construction de bas&eacute;s sur passerelle multisite pour constructions de transg&eacute;n&egrave;se Tol2 transposon.

Transgenesi sono uno strumento importante per valutare la funzione del gene. In zebrafish, transgenesi ha sofferto tre problemi: il lavoro di costruzione di costrutti espressione complessa utilizzando subcloning convenzionali; transgenesi bassa efficienza, portando ad un mosaicismo transgenetica transitoria e l&#39;incorporazione di germline infrequenti; e difficolt&agrave; di identificazione linea germinale integrazioni a meno che usando un transgene marcatore fluorescente. Il sistema Tol2kit utilizza site specific basati su ricombinazione clonazione (multisita Gateway tecnologia) che consente un assemblaggio veloce, modulare di costrutti [3&#39; tag] [promoter]-[sequenza codifica] - in una spina dorsale transposon Tol2. Esso include un vettore di destinazione con un marcatore di transgenesi cmlc2:EGFP (enhanced proteina fluorescente verde) e una serie di cloni di entrata ampiamente utili, tra cui promotori hsp70 e beta-actina; proteine fluorescenti citoplasmatiche, nucleare e membrana localizzato; e internal ribosome entry sequenza-driven EGFP cassette per l&#39;espressione di bicistronic. La Tol2kit notevolmente facilita zebrafish transgenesi, semplifica la condivisione dei cloni e permette di progetti su larga scala le funzioni delle librerie di regolamentazione o codificante di sequenze di test.

Tol2kit: un kit di costruzione basata su gateway multisito per transgenesi transposon Tol2 costruisce.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x304B;&#x3089;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x305F;: &#x5F93;&#x6765; subcloning; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x5F0F;&#x69CB;&#x9020;&#x5EFA;&#x7BC9;&#x52B4;&#x50CD;&#x4F4E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x52B9;&#x7387;&#x3001;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x904E;&#x6E21;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x307F;&#x63DB;&#x3048;&#x3067;&#x9593;&#x6B20;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x6B96;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x306B; &#x3002;&#x751F;&#x6B96;&#x7D71;&#x5408;&#x86CD;&#x5149;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x9664;&#x304D;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x96E3;&#x3057;&#x3055;&#x3002;Tol2kit &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; (&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A4;&#x6280;&#x8853;) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30AF;&#x30A4;&#x30C3;&#x30AF;&#x3001;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EB; &#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA; [&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;]-[&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x756A;&#x53F7;]-[3&#39; &#x30BF;&#x30B0;] &#x69CB;&#x9020;&#x4F53;&#x306E; Tol2 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3; &#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DC;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A3;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; cmlc2:EGFP &#xFF08;&#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF09; &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068; hsp70 &#x3068; &beta;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306A;&#x3069;&#x5E83;&#x304F;&#x5F79;&#x306B;&#x7ACB;&#x3064;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x819C;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3002;&#x3084;&#x5185;&#x90E8;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x99C6;&#x52D5; EGFP &#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; bicistronic &#x5F0F;&#x3002;Tol2kit &#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x304C;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3092;&#x898F;&#x5236;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Tol2kit: Tol2 &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5C0E;&#x5165;&#x306E;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30B2;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A4;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x30AD;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Transgenesis &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Zebrafish, transgenesis 3 &#xBB38;&#xC81C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xD1B5; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;: &#xAE30;&#xC874;&#xC758; subcloning;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC2DD;&#xC744; &#xAD6C;&#xBB38; &#xAC74;&#xBB3C;&#xC758; &#xB178;&#xB3D9; &#xB0AE;&#xC740; transgenesis &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xC774;&#xB04C;&#xC5B4; mosaicism &#xACFC;&#xB3C4; &#xC81C; &#xB2C9;&#xC5D0; &#xB4DC;&#xBB38; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAD00;; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD615;&#xAD11; &#xC131; &#xAC10; &#xC801; transgene &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xD1B5;&#xD569; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Tol2kit &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; Tol2 transposon &#xB4F1;&#xBF08;&#xC5D0; [&#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;]-[&#xCF54;&#xB529; &#xC21C;&#xC11C;]-[3&#39; &#xD0DC;&#xADF8;] &#xAD6C;&#xBB38;&#xC758; &#xBE60;&#xB978;, &#xBAA8;&#xB4C8; &#xC870;&#xB9BD; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569; &#xAE30;&#xBC18; &#xBCF5;&#xC81C; (multisite &#xAC8C;&#xC774;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC774; &#xAE30;&#xC220;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; cmlc2:EGFP (&#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;) transgenesis &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBC0F; h s p 70 &#xBC0F; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xAC78; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB110;&#xB9AC; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xD56D;&#xBAA9; &#xD074;&#xB860;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB300;&#xC0C1; &#xBCA1;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;, &#xD575;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9C9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9AC;&#xBCF4;&#xC19C; &#xD56D;&#xBAA9; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAE30;&#xBC18; EGFP &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; bicistronic &#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;. Tol2kit &#xD06C;&#xAC8C; zebrafish transgenesis&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C;, &#xD074;&#xB860;, &#xACF5;&#xC720; &#xAC04;&#xC18C;&#xD654; &#xBC0F; &#xADDC;&#xC81C; &#xB610;&#xB294; &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xADDC;&#xBAA8; &#xD504;&#xB85C;&#xC81D;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tol2kit: Tol2 transposon transgenesis &#xAD6C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; multisite &#xAC8C;&#xC774;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC774; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC74;&#xC124; &#xD0A4;&#xD2B8;.

Transg&eacute;nesis es una herramienta importante para evaluar la funci&oacute;n del gene. En el pez cebra, transg&eacute;nesis ha sufrido tres problemas: el trabajo de construcci&oacute;n de construcciones de expresi&oacute;n compleja utilizando subclonaje convencionales; Transg&eacute;nesis baja eficiencia, llevando a mosaicismo en transg&eacute;nicos transitoria y la incorporaci&oacute;n de germline infrecuente; y dificultad en la identificaci&oacute;n del germline integraciones a menos que usando un marcador fluorescente transgen. El sistema Tol2kit utiliza espec&iacute;fica basada en la recombinaci&oacute;n clonaci&oacute;n (multisitio Gateway tecnolog&iacute;a) para permitir el montaje r&aacute;pido, modular de [promotor]-[secuencia de codificaci&oacute;n]-[3&#39; etiqueta] construcciones en un esqueleto de Tol2 transposon. Incluye un vector de destino con un marcador de transg&eacute;nesis cmlc2:EGFP (prote&iacute;na verde fluorescente mejorada) y una variedad de clones de entrada ampliamente &uacute;til, incluyendo promotores hsp70 y beta-actina; citopl&aacute;smicas, nucleares y localizada en la membrana prote&iacute;nas fluorescentes; y casetes EGFP de basadas en secuencia interna del ribosoma entrada para bicistronic expresi&oacute;n. El Tol2kit grandemente facilita la transg&eacute;nesis de pez cebra, simplifica el intercambio de clones y permite la comprobaci&oacute;n del funcionamiento de las bibliotecas de secuencias reguladoras o codificaci&oacute;n de proyectos a gran escala.

Clemens Grabher

Institute for Toxicology and Genetics

Karlsruhe Institute of Technology, Karlsruhe, Germany

Facilitating Drug Discovery: An Automated High-content Inflammation Assay in Zebrafish

Clemens Grabher

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Institute for Toxicology and Genetics

Karlsruhe Institute of Technology, Karlsruhe, Germany

Facilitating Drug Discovery: An Automated High-content Inflammation Assay in Zebrafish

Institute for Toxicology and Genetics