Cell Transfection and 5-Bromo-2'-Deoxyuridine (BrdU) Incorporation in HeLa Cells

세포 형질감염을 시작하기 위해, 희석된 siRNA를 함유하는 384-웰 플레이트 웰에 20 마이크로리터의 헬라 세포 현탁액을 첨가하여 웰 당 700개의 헬라 세포를 시딩한다. 실온에서 1시간 배양한 후 웰 플레이트를 섭씨 37도, 이산화탄소 5%에서 72시간 동안 배양기에 넣습니다. 형질주입된 세포에 BrdU를 혼입시키기 위해, siRNA 형질감염 56시간 후에 각 웰에 90마이크로몰 BrdU 용액 10마이크로리터를 첨가한다.

섭씨 37도와 5% 이산화탄소에서 16시간 동안 세포를 배양합니다. HeLa 세포의 미토콘드리아 DNA로의 BrdU 통합의 특이성은 미토콘드리아 DNA가 결여된 rho0 세포를 사용하여 연구되었습니다.