이미징 시스템을 설정하려면 먼저 532나노미터 레이저를 15분 동안 켜두어 워밍업합니다. 다음으로, 수동으로 조정 가능한 s에 부착된 맞춤형 r을 배치합니다.amp 이미징 멤브레인 옆에. 호흡 튜브가 연결된 마우스 치아 홀더를 r에 부착amp, 그리고 r에 가열 패드를 고정amp 표면.
레이저가 예열되면 근적외선 감지기 카드를 광섬유 번들 입력 앞에 놓고 레이저 광이 번들에 들어가는지 확인하여 레이저 정렬을 확인합니다. 전기 면도기로 마취 된 마우스 머리의 머리카락을 눈 근처에서 귀 뒤쪽으로 다듬어 동물 준비를 시작하십시오. 머리 꼭대기에 제모 크림을 바릅니다.
5분 동안 그대로 둔 후 젖은 면봉으로 크림을 닦아냅니다. 머리의 피부가 완전히 제모 될 때까지 도포를 반복하십시오. 동물을 시스템의 플랫폼으로 옮기기 직전에 27 게이지 바늘을 사용하여 스톡 농도에서 100 마이크로 리터의 마이크로 버블을 역 궤도 주입합니다.
이제 눈 보호 로션 한 방울을 눈에 바르십시오. 음향 결합을 위해 이미징 창 표면에 증류수를 채워 PAUSAT 이미징을 시작합니다. 그런 다음 마우스의 머리를 치아 홀더에 고정하고 적절한 마취와 공기 흐름을 확인합니다.
가열 램프와 온도 조절기에 연결된 직장 프로브를 사용하여 동물의 체온을 섭씨 37도로 유지하십시오. 이미징 응용 프로그램을 열고 B 모드 초음파로 이동합니다. 라이브 초음파 창을 사용하여 마우스 헤드를 원하는 위치로 수동으로 조정하고 스테이지 높이를 그에 따라 조정합니다.
B 모드에서 초음파 전송 주파수 값을 16MHz로 조정합니다. 그런 다음 이미징 응용 프로그램에 저장 디렉토리 정보를 입력합니다. 그런 다음 플로팅 박스를 사용하여 원하는 뇌 스캔 영역을 선택합니다.
정적 획득 버튼을 누르고 이미지 획득이 완료되면 스캔 결과를 확인하여 원하는 영역 이미징을 보장합니다. 음향 혈관 조영술 영상을 수행하려면 Image Acquisition으로 돌아간 다음 모드를 Acoustic Angiography로 변경합니다. 그런 다음 원하는 스캔 프로토콜 매개 변수를 입력하고 프레임 간격을 0.2mm 및 위치 당 10 프레임으로 설정합니다.
이미지 분석에서 스캔 결과를 확인하여 이미지 품질을 확인합니다. 광음향 단층 촬영으로 이미지를 촬영하려면 광학 파라메트릭 발진기 또는 OPO 애플리케이션을 열고 756나노미터로 설정합니다. 그런 다음 선형 어레이 트랜스듀서를 이전에 결정된 좌표로 수동으로 변환하여 워블러 볼륨과 선형 어레이 볼륨을 자동으로 공동 등록합니다.
레이저 응용 프로그램을 열고 532 나노 미터 레이저를 켭니다. 스캔 매개변수를 0.4mm 스텝 크기, 20mm 스캔 길이, 위치당 평균 10프레임으로 설정합니다. 이제 초음파 데이터 수집 시스템 MATLAB 프로그램을 열고 실행 버튼을 누릅니다.
그런 다음 스캔 응용 프로그램에서 시작을 누릅니다. 스캔이 완료되면 MATLAB 저장 프로그램을 엽니다. 저장 이름을 원하는 파일 이름으로 변경하고 실행을 누릅니다.
그런 다음 OPO 파장을 798나노미터로 변경하고 스캔을 반복합니다. 음향 혈관 조영술 또는 AA 영상은 손상되지 않은 뇌에서 두 반구가 유사한 혈관 분포를 나타낸다는 것을 보여주었습니다. 유사한 결과가 두 개의 서로 다른 파장에서 광음향 이미지에서 관찰됩니다.
오른쪽 측면 피질의 현저한 신호 감소는 전기 소작된 마우스의 AA 이미지에서 관찰되었습니다. 동일한 영역은 또한 허혈을 시사하는 감소된 조직 산소화를 보였다. PAUSAT 이미징은 혈류 공급이 감소하고 산소 포화도가 감소한 상부 피질 영역을 식별하여 광혈전성 뇌졸중 모델을 기반으로 뇌졸중 영역을 식별할 수 있습니다.
마우스 나이는 두개골이 두꺼워지고 음향 임피던스가 달라져 나이든 마우스의 이미징 깊이가 감소하기 때문에 이미징에 영향을 줄 수 있습니다.
