시작하려면 수술을 위해 60cm x 60cm의 벤치 면적이 있는 방에서 수술 플랫폼 설정을 준비합니다. 70% 알코올로 표면을 청소하고 일회용 의료용 수건으로 덮습니다. 그런 다음 30분 동안 자외선으로 해당 부위를 소독합니다.
수술 전 일주일 동안 생후 8주 된 암컷 C57 블랙/6 마우스를 수용 시설에 적응시킵니다. 깨끗한 면봉을 사용하여 마취된 쥐의 뒷면에 제모 로션을 바릅니다. 3-5분 후 거즈와 면봉을 사용하여 털을 제거합니다.
다음으로 70% 에탄올로 피부를 청소합니다. 고무줄이나 면봉을 사용하여 마우스의 등을 위로 향하게 하여 수술 플랫폼에 고정하고 요오드포어 용액을 발라 등을 청소합니다. 난소 절제술의 경우 일회용 메스를 사용하여 허벅지 기저부에서 위쪽으로 세로로 1cm 정도 등쪽을 절개하여 피부와 피하 근막만 절개하고 후복막이 절단되지 않도록 합니다.
그런 다음 절개 부위를 왼쪽으로 당겨 흰색 지방 패드를 시각화합니다. 마이크로 집게와 가위를 사용하여 흰색 지방 패드를 따라 0.5cm를 잘라 복강내 구멍을 노출시킵니다. 후복막을 절단한 후 미세집게를 사용하여 복강내 구멍에서 백색 지방 패드를 천천히 부드럽게 제거합니다.
제거 직후 백색 지방 조직을 0.9% 멸균 식염수에 적신 거즈로 적십니다. 백색 지방 패드의 아래쪽 부분에서 분홍색 과립 물질을 난소로 식별하고 자궁에 연결되어 있는지 확인합니다. 5O 흡수성 봉합사를 사용하여 자궁의 난소 끝을 결찰합니다.
그런 다음 수술 기구와 난소 사이의 직접적인 접촉을 피하고 왼쪽 난소를 제거하여 난소 조직의 복강 내 착상을 방지합니다. 수술 후 흰색 지방 패드를 복강내 구멍에 조심스럽게 다시 넣습니다. 그런 다음 5-0 흡수성 봉합사를 사용하여 후복막에 간헐적 봉합을 수행합니다.
0.9% 멸균 식염수에 적신 거즈로 출혈 부위를 청소합니다. 그런 다음 피부 절개 부위를 오른쪽으로 당겨 같은 방법으로 오른쪽 난소를 제거합니다. 4-0 비흡수성 봉합사로 간헐적 봉합을 수행하고 0.9% 멸균 식염수에 적신 거즈로 출혈을 청소합니다.
두 봉합사를 모두 마친 후 요오드화 용액으로 상처를 청소하십시오. 24시간 후 멜록시캠을 피하주사하여 통증을 완화합니다. 매일 마우스를 모니터링하여 합병증의 징후 없이 적절한 수술 상처 치유를 확인합니다.
3일 후 쥐에게 갓 준비한 에스트라디올 발레레이트를 먹입니다. FSH 주입의 경우 재조합 인간 FSH 분말을 0.9% 멸균 식염수에 100 국제 단위/밀리리터로 용해시켜 FSH 용액을 준비합니다. 재조합 FSH의 생물학적 활성에 따라 2주 동안 복강 내 주사를 통해 용매 또는 다른 용량의 재조합 FSH를 투여합니다.
Papanicolaou 염색 세포의 도말 이미지는 발정기의 발정기, 발정기, 발정기 및 발정 단계를 명확하게 식별했습니다. 대조적으로, 양측 난소 절제술을 받은 마우스는 발정 주기를 잃었습니다. ELIZA 방법은 가짜 그룹 마우스에 비해 양측 난소 절제술 마우스의 혈청 에스트라디올 수치가 유의하게 감소했음을 보여주었습니다.
여분의 생식선 조직에서 합성된 내인성 에스트로겐은 FSH 처리된 마우스 모델에서 에스트로겐 수치의 안정성에 영향을 미치지 않습니다.
