시작하려면 gut-on-a-chip 장치를 섭씨 60도로 설정된 건조 오븐에 30분 동안 넣어 습기를 제거합니다. 그런 다음 UV 오존 발생기를 사용하여 장치를 UV 및 오존 처리에 60분 동안 노출시킵니다. 바인더 클립을 사용하여 상부 마이크로채널의 입구, 바이패스 및 출구 튜브를 고정합니다.
하부 마이크로채널용 입구 튜브를 설치한 다음 하부 마이크로채널용 출구 튜브를 분리합니다. 하부 마이크로채널의 바이패스 튜브가 열려 있는지 확인하십시오. P100 마이크로피펫을 사용하여 하부 마이크로채널의 출구 구멍을 통해 100마이크로리터의 1% 폴리에틸렌이민 용액을 추가합니다.
하단 마이크로채널용 배출 튜브를 다시 연결합니다. 하부 마이크로채널의 입구 바이패스와 출구 튜브를 고정한 다음 바인더 클립을 사용하여 상부 마이크로채널의 입구 튜브를 고정합니다. 이제 상부 마이크로 채널의 출구 튜브를 분리하여 바이패스 튜브가 열린 상태로 유지되도록 합니다.
다음으로, 상부 마이크로 채널의 출구 구멍을 통해 1 % 폴리에틸렌 민 용액 100 마이크로 리터를 추가합니다. 상부 마이크로 채널의 출구 튜브를 다시 부착하고 장치를 실온에서 10분 동안 배양합니다. 0.1% 글루타르알데히드로 절차를 반복한 다음 탈이온수로 반복하여 과도한 표면 활성화 용액을 제거합니다.
오븐에서 섭씨 60도에서 밤새 칩을 말립니다. 다음날 오븐에서 칩을 꺼내 생물 안전 캐비닛에서 10분 동안 식히십시오. 바인더 클립을 사용하여 하부 마이크로채널의 입구 튜브를 포함하여 위쪽 마이크로채널의 입구, 바이패스 및 출구 튜브를 고정합니다.
하부 마이크로채널의 배출 튜브를 분리합니다. 하부 마이크로채널의 출구 구멍을 통해 20마이크로리터의 세포외 기질 또는 ECM 혼합물을 추가합니다. 그런 다음 하단 마이크로 채널용 배출 튜브를 다시 부착합니다.
바인더 클립으로 상부 마이크로 채널의 입구 튜브를 포함하여 하단 마이크로 채널의 입구, 바이패스 및 출구 튜브를 고정합니다. 상부 마이크로 채널의 출구 튜브를 분리한 후 상부 마이크로 채널의 출구 구멍을 통해 20 마이크로 리터의 VCM 혼합물을 추가합니다. 상부 마이크로채널의 배출 튜브를 다시 부착한 다음 하부 채널의 배출 튜브에서 바인더 클립을 제거하고 두 배출 튜브가 모두 열려 있는지 확인합니다.
칩을 섭씨 37도, 5% 이산화탄소 인큐베이터에 1시간 동안 넣습니다.
