시작하려면 TIMER2.0 데이터베이스 웹 사이트 인터페이스로 이동합니다. Cancer Exploration(암 탐색) 탭을 선택합니다. 검색창에 유전자 ID를 입력하고 Submit(제출)을 클릭하면 다양한 종양 유형에서 TMEM200A의 감별 발현 이미지를 생성할 수 있습니다.
transfection의 경우 3개의 마이크로 원심분리기 튜브를 siRNA-1, 2 및 3으로 라벨링합니다. 그런 다음 각 튜브에 transfection 시약을 첨가한 후 기초 배지를 첨가합니다. 각 튜브에 4마이크로그램의 siRNA를 추가하고 잘 섞습니다.
이제 혼합물을 선암 세포가 들어있는 6웰 플레이트의 3개 웰에 분배합니다. 혼합물이 고르게 분포되도록 접시를 부드럽게 흔듭니다. 혼합물이 첨가된 3개의 웰을 siRNA 1, siRNA 2 및 siRNA 3으로 라벨링합니다.
세포를 4-6시간 동안 배양한 후, 라벨이 부착된 웰에 있는 배지의 절반을 신선한 완전한 배지로 교체합니다. 정량적 RTPCR 및 웨스턴 블로팅에 사용하기 전에 24-48시간 동안 세포를 배양합니다.
