Fabricating Graphene-Coated Cryo-EM Grids Using Grid-Sized MMA-Coated CVD Graphene Squares

메틸 메타크릴레이트 또는 MMA 코팅 CVD 그래핀을 그리드에 부착하려면 분자 등급의 물이 들어 있는 비커에 보관된 이전에 준비된 그리드 크기의 코팅된 그래핀 사각형을 사용합니다. 네거티브 액션 핀셋 사용. 탄소 면이 떠 있는 MMA 그래핀 사각형을 향하도록 그리드를 물에 수직으로 부드럽게 담그십시오.

사각형과 접촉하면 사각형이 그리드의 탄소 면에 완전히 부착되도록 하면서 물에서 그리드를 조심스럽게 제거합니다. MMA 그래핀 면이 위를 향하도록 깨끗한 커버 슬립에 그리드를 놓고 그리드를 1-2분 동안 자연 건조시킵니다. 납작한 핀셋을 사용하여 격자가 있는 커버 슬립을 섭씨 130도로 설정된 핫 플레이트로 옮깁니다.

유리 페트리 접시의 상단으로 20분 동안 그리드를 덮은 후 배양합니다. 다음으로, MMA를 아세톤으로 세척하기 위해 전체 커버 슬립을 15ml의 아세톤으로 채워진 페트리 접시에 옮기고 30분 동안 배양합니다. 그런 다음 깨끗한 유리 혈청학적 피펫을 사용하여 아세톤을 폐기물 용기로 옮깁니다.

또 다른 깨끗한 유리 혈청학적 피펫을 사용하여 페트리 접시에 15ml의 신선한 아세톤을 넣고 30분 동안 배양합니다. 아세톤을 세 번 씻은 후 아세톤을 제거하십시오. 그리고 깨끗한 유리 혈청학적 피펫을 사용하여 15ml의 이소프로판올로 교체합니다.

그런 다음 핀셋을 사용하여 이소프로판올용 그리드를 조심스럽게 제거하여 깨끗한 커버 슬립에 자연 건조시킵니다. 다음으로 섭씨 100도로 설정된 열판에 그래핀 코팅 격자가 있는 커버 슬립을 10분 동안 올려 잔류 유기물을 증발시킵니다. 역작용 핀셋을 사용하여 그래핀으로 코팅된 면이 위를 향하도록 하여 그리드를 UV 오존 클리너의 깨끗한 조명 영역에 부드럽게 놓습니다.

조명 영역을 닫고 기기를 켭니다. 시간 다이얼을 지정된 처리 시간으로 설정하여 그리드 UV 오존 처리를 시작합니다. 마지막으로, 처리된 그리드에 초저온 전자 현미경 샘플을 담그십시오.