저혈당 또는 고혈당 클램프용 펌프 시스템을 설정하는 것으로 시작합니다. 이렇게 하려면 두 개의 해밀턴 주사기에 인슐린 주입액과 30% 포도당 용액을 채웁니다. 채워진 주사기를 포도당 및 인슐린 주입을 위한 확장 튜브 설정의 두 개의 긴 튜브에 연결합니다.
주사기 어셈블리를 각 주사기 펌프에 부착한 후 각 용액을 해당 확장 튜브에 채웁니다. 다음으로, 동맥에서 혈액을 채취하기 위해 1밀리리터 주사기와 연장 튜브에 식염수를 채웁니다. 다음으로, 주입용 확장 튜브를 적절하게 마취된 마우스의 사전 설치된 경정맥 카테터에 연결합니다.
동물의 경동맥 카테터로 혈액을 채취하기 위한 연장 튜브. 셀로판 테이프를 사용하여 튜브를 함께 고정합니다. 튜브가 있는 마우스를 침구가 있는 빈 500밀리리터 비커 안에 넣습니다.
Clamp 혈액 채취를 위한 연장 튜브의 상단 끝을 새 주사기에 연결합니다. 50마이크로리터의 혈액을 추출하여 1.5밀리리터 튜브에 옮기고 혈당 수치를 측정합니다. 그런 다음 50마이크로리터의 식염수를 주입합니다.
호르몬 측정을 위해 혈액을 채취하려면 추가로 50마이크로리터의 혈액을 추출하여 얼음 위의 1.5밀리리터 튜브에 옮깁니다. 0분 혈당 측정 후 인슐린 주사기 펌프를 시작하여 적절한 양의 인슐린을 주입합니다. 혈당 수치를 계속 측정하고 정상 상태에 도달할 때까지 5분 모니터링 시간 동안 10-120분마다 포도당 주입 속도를 변경합니다.
고혈당 클램프의 경우 인슐린 주입 및 조정된 정상 상태 혈당 수치를 제외하고 저혈당 클램프에 대해 설명된 단계를 따르십시오.
