근치적 전립선 절제술, 전립선 염색 및 종양 식별을 위한 샘플 특성 분석

먼저, 수술 전에 다중 또는 이중 매개변수 MRI를 사용하여 종양과 전립선에서 종양의 위치를 찾습니다. 다음으로, 복부 접근, 주입 및 화학 포트 배치를 통해 환자를 준비합니다. 폐복막갱개를 12mm로 설정합니다.

복막을 절개하여 방광을 풀어주고 직장 주위 공간을 절개합니다. 이제 양쪽의 골반 근막을 열고 전립선과 방광의 전방 및 외측 측면을 완전히 절개합니다. 방광경부를 열고 근위 요도를 확인합니다.

전립선과 방광의 후방 측면에 접근할 수 있도록 근위 요도를 절개합니다. 다음으로, 정낭과 직장 공간을 절개한 다음 전립선의 측면 측면을 절개합니다. 정점을 절개합니다.

그런 다음 원위 요도를 절개합니다. 그런 다음 방광-요도 문합을 완료합니다. 전립선을 적출한 후 절개 부위를 봉합합니다.

갓 채취한 전립선을 건조한 용기에 넣습니다. 검체 채취를 위해 전립선을 처리하려면 먼저 MRI 정보를 기반으로 대상 구역을 선택합니다. 일회용 자동 바늘을 사용하여 선택한 영역에서 원통형 샘플을 검색합니다.

그런 다음 실린더의 외부 영역을 식별하고 한 쌍의 조직 집게로 고정합니다. 실린더를 슬라이드에 놓고 티슈 잉크로 외부 영역을 표시합니다. 수집된 실린더를 저온 유지 장치 매질 매체로 채워진 샘플 홀더 디스크에 수평으로 놓고 절단을 위해 마이크로톰 냉각판으로 옮깁니다.

다음으로, 시료 홀더 디스크를 시편 척에 부착합니다. 절편하기 전에 OCT 화합물을 사용하여 조직 샘플을 삽입합니다. cryostat 마이크로톰을 사용하여 섭씨 25도에서 샘플을 절단합니다.

얇은 원통 모양의 조직 절편을 처리된 현미경 슬라이드에 수집합니다. 슬라이드를 96% 에탄올로 고정한 다음 증류수에 수화시킵니다. Harris hematoxylin의 섹션을 1분 동안 염색합니다.

이제 슬라이드를 30% 수산화암모늄으로 처리하여 헤마톡실린을 파란색으로 바꿉니다. 그런 다음 세척된 슬라이드를 30초 동안 에오신으로 염색합니다. 그런 다음 알코올의 적정을 증가시켜 슬라이드를 탈수한 다음 100% 자일렌으로 청소합니다.

GPX로 슬라이드를 장착하고 염색 된 조직에 커버 슬립을 놓습니다. 광학 현미경을 사용하여 염색된 샘플을 분석하고 암종이 있는 영역을 구별하고 종양의 Gleason 점수를 결정합니다. 슬라이드에 정확한 종양 부위를 표시하십시오.

그런 다음 수술용 칼날을 사용하여 OCT 디스크 내의 슬라이드에 표시된 샘플 영역을 매크로 미세 절개합니다. 매립 조직이 해동되기 시작하면 한 쌍의 집게로 조직을 들어 올리고 올바르게 라벨이 부착된 극저온 튜브에 넣습니다. 이 기술은 연구 된 사례의 61 %에서 종양 물질을 얻는 데 사용되었습니다.

16개의 전립선 중 종양 획득에 실패했고, 10개는 종양 부하가 10% 미만이었으며, 20%를 초과한 것은 하나도 없었다ROC 곡선 분석은 0.843의 곡선 아래 면적을 보여주었으며, 이는 이 방법이 만족스러운 종양 획득 결과를 제공할 수 있음을 나타냅니다. 근치적 전립선 절제술 표본과 처리된 실린더 생검의 조직병리학적 상관관계는 헤마톡실린 및 에오신 염색을 사용하여 수행되었습니다. 원통을 따라 다양한 조직학적 패턴이 발견되었는데, 예를 들어 글리슨 패턴 3(Gleason pattern 3)은 암세포가 늘어선 잘 형성된 작은 분비샘을 보여주었다.

비정형 세포가 확대된 불규칙한 모양의 분비샘이 글리슨 패턴 4절도에서 관찰되었습니다. 전립선 상피내 종양이 있는 샘플은 유관 공간 내에 밀집된 세포를 보여주었습니다.