조직학적 분석을 위한 전체 토끼 눈 절제 및 안구 조직 준비

토끼 눈의 경결막 적출 후 즉시 4% 파라포름알데히드와 PBS 50밀리리터를 얼음 위에 놓습니다. 15분 후 눈을 100mm 절개 접시에 옮기고 접시에 PBS를 채워 눈이 건조해지는 것을 방지합니다. 해부 현미경으로 수술용 칼날을 사용하여 홍채면과 평행을 유지하면서 변연 1mm 전방을 절개하기 시작합니다.

초기 절개 부위에 구부러진 가위를 삽입하고 림버스에서 1mm 거리를 유지하면서 원주종으로 계속 절단합니다. 그런 다음 집게로 각막을 제거하고 실험실 물티슈로 PBS를 부드럽게 닦아냅니다. 동결 보호를 위해 실온의 30% 자당 용액에 각막을 넣습니다.

구부러진 가위로 홍채를 통해 초기 절단을하십시오. 그런 다음 각막 제거와 유사하게 눈 주위를 원주방향으로 절개하여 홍채를 나머지 조직과 분리합니다. 집게로 홍채를 제거하고 실험실 물티슈로 과도한 PBS를 부드럽게 닦아냅니다.

동결 보호를 위해 실온의 30% 자당 용액에 아이리스를 넣습니다. 각막과 홍채를 제거한 후 4% 파라포름알데히드 50mL에 눈을 넣고 셰이커에 올려 부드럽게 저어줍니다. 밤새 섭씨 4도의 4% 파라포름알데히드에 눈을 그대로 두십시오.

다음 날, 눈을 해부 접시에 넣고 접시에 PBS를 채웁니다. 박리 현미경 아래에서 집게를 사용하여 수정체 전방 캡슐을 조심스럽게 잡습니다. 그런 다음 가위를 후방 챔버에 조심스럽게 삽입하고 칼날을 렌즈를 따라 뒤쪽으로 향하게 합니다.

구부러진 가위로 렌즈 구역을 통해 초기 절단을 만듭니다. 렌즈 zonules를 통해 원주 패턴으로 작은 절단을 계속하십시오. 수정체 제거를 확인하려면 겸자로 수정체 캡슐을 부드럽게 잡고 들어 올리십시오.

분리 시 냉동 보호를 위해 실온의 30% 자당 용액에 렌즈를 넣으십시오. 동결 보호를 위해 24-48 시간 동안 섭씨 4도에서 30 % 자당과 PBS의 50 밀리리터에 눈을 놓으십시오. 동결 보호를 신속하게 처리하려면 초기 자당 용액을 8-12시간 후에 새 자당 용액으로 교체하십시오.