시작하려면 고압멸균된 수술 기구를 수술 테이블에 놓습니다. 마취된 쥐의 복부를 면도하고 수술 보드의 누운 자세에 쥐를 놓습니다. 포비돈 요오드와 70% 에탄올로 복부를 청소합니다.
건조함을 방지하기 위해 쥐의 눈 아래에 안과 연고를 바르십시오. 수술 보드에 쥐를 제자리에 고정합니다. 데이터 수집 소프트웨어를 시작하고 기록을 시작합니다.
킬로그램당 4밀리리터로 인공호흡기를 켜고 호기말양의 양압이 약 2센티미터의 물인지 확인합니다. 가위를 사용하여 xiphoid process에서 pubic symphysis까지 정중선 개복술을 수행합니다. 그런 다음 무딘 기구를 사용하여 내측 내장 회전을 수행하고 infrahepatic inferior vena cava를 시각화합니다.
20게이지 바늘로 하대정맥에 헤파린을 주입합니다. 가위를 사용하여 흉골 노치에서 하악 각도 바로 아래까지 피부를 자르고 기관 쪽으로 절개를 시작합니다. 그런 다음 기관을 노출시키기 위해 필요한 스트랩 근육을 뭉툭하게 절개합니다.
연골 고리 사이의 전방 기관을 가로 절개하여 기관의 뒤쪽 부분을 절단하지 않도록 합니다. 기관 주위에 5-0 실크 봉합사를 놓습니다. 기관내관을 연골 고리에 삽입하고 5-0 실크 봉합사로 고정합니다.
기관내관을 인공호흡기에 연결하고 흉부가 적절하게 상승하도록 합니다. 가위를 사용하여 정중 흉골 절개술을 수행하고 흉강으로 들어갑니다. 흉벽 견인기를 배치하여 심장과 폐를 노출시키고 부주의한 폐 조작을 방지합니다.
날카롭고 둔한 절제술을 조합하여 전방 종격동에서 흉선을 제거합니다. 폐동맥을 확인하고 그 주위에 5-0 실크 봉합사를 배치하여 캐뉼레이션을 준비합니다. 가위를 사용하여 우심실 유출로를 2-3mm 절개하여 동맥 캐뉼라를 폐동맥 내에 배치하고 5-0 봉합사로 고정합니다.
쥐를 안락사시킨 후 공기가 제거된 폐 보존액을 동맥 캐뉼라에 빠르게 연결하여 폐를 중력으로 씻어냅니다. 동맥 캐뉼라를 EVLP 회로에 연결합니다. 롤러 펌프를 켜고 소량의 관류액이 폐를 통해 좌심실에서 흉강으로 흐르도록 합니다.
관류액이 좌심방에서 흘러나오기 시작하면 롤러 펌프를 끕니다. 다음으로, 좌심실에 작은 집게를 놓고 승모판 고리를 부드럽게 늘립니다. 5-0 실크 넥타이를 심장에 두르고 느슨하게 묶습니다.
좌심방 캐뉼라를 좌심실에 삽입하고 아트리움 내에서 볼 수 있을 때까지 캐뉼라를 전진시킵니다. 미리 묶인 5-0 봉합사로 왼쪽 심방을 고정합니다. 식도를 확인하고 가능한 한 횡격막에 가까운 지혈제로 고정합니다.
그런 다음 지혈제 아래의 식도를 자릅니다. 척추를 가이드로 사용하여 심장-폐 블록과 주변 구조물을 연결하는 모든 인대 부착물을 가위로 자릅니다. 그런 다음 목에서 기관을 절개하고 기관내관 위의 기관을 절단하여 심장-폐 블록을 해제합니다.
심폐 블록을 EVLP 회로 내의 흉부 재킷으로 이동하고 좌심방 캐뉼라를 회로에 부착합니다. 롤러 펌프를 켜고 인공호흡기 모니터를 연결합니다. 버블 트랩을 점검하여 공기 색전이 시스템에 유입되지 않는지 확인하십시오.
처음 15분 동안 환기 및 관류 설정을 원하는 실험 수준으로 천천히 변경합니다. 또한 관류 유량을 원하는 속도와 압력으로 높입니다. 지정된 시간에 관류 가스 수치와 폐 기능 검사를 확인하십시오.
테스트된 모든 관류액은 산소의 좌심방 분압이 약간 감소했으며 적혈구 기반 관류액은 1시간에 유의하게 감소했습니다. 다음 몇 시간 동안, polyhHB와 대조군 관류물 모두 안정적인 좌심방 산소 분압을 유지했습니다. 산소의 델타 분압은 RBC 관류물 그룹에서 1시간에 유의하게 감소한 반면, polyhHB 및 대조군 관류물에서는 유의하지 않은 추세로 안정적으로 유지되었습니다.
이산화탄소의 좌심방 분압은 첫 시간 후 polyhHB에 비해 적혈구 및 대조군 관류물에서 현저히 낮았으며 이러한 추세는 다음 시간 동안 계속됩니다. 이산화탄소의 델타 분압은 1시간 후 RBC 관류액에서 유의하게 증가하였고, 그 후에는 polyhHB와 대조군 관류액 모두에서 안정적으로 유지되었다. 실시간 폐 생리학적 데이터는 적혈구 관류가 첫 1시간 이내에 폐혈관 저항을 크게 증가시켰다는 것을 보여줍니다.
polyhHB와 대조군 관류물 모두 해당 기간 동안 낮고 안정적인 폐혈관 저항을 유지했지만, 폐 무게의 변화는 초기에 RBC 관류물에서 유의했으며, 모든 관류물에서 지속적인 증가가 있었고 polyhHB에서 약간 더 증가했습니다. 순응도는 첫 1시간 이내에 RBC 관류액에서 유의하게 감소한 반면, 다른 관류액에서는 유의하지 않게 감소했습니다. PolyhHB는 4시간 후 가장 높은 준수율을 보였습니다.
