시작하려면 AFM의 캔틸레버 홀더를 캔틸레버 교환대에 고정합니다. 워치메이커 집게를 사용하여 선택한 캔틸레버를 홀더에 장착합니다. 홀더의 나사를 조여 캔틸레버를 고정합니다.
캔틸레버 홀더를 스탠드에 놓인 AFM 헤드에 놓고 잠급니다. AFM 소프트웨어의 스텝 모터 기능을 사용하여 AFM 헤드를 가장 높은 지점으로 빼냅니다. 해당 위치를 0.0으로 설정합니다.
스탠드에서 AFM 헤드를 조심스럽게 들어 올린 다음 s에 장착합니다.tage는 다리를 각각의 슬롯에 놓습니다. 캔틸레버를 보정하려면 스텝 모터 기능을 사용하여 샘플 표면에 가깝게 가져옵니다. 그런 다음 Contact Mode for Spectroscopy(분광학을 위한 접촉 모드) 창에서 Approach(접근)를 클릭합니다.
캔틸레버를 15마이크로미터씩 조금씩 내려냅니다. Acquire를 눌러 힘 곡선을 캡처합니다. 그런 다음 힘 곡선을 선택하고 캘리브레이션 매니저 창에서 연 다음 Method 섹션에서 Contact-Based Mode를 선택합니다.
이제 맞춤 범위 선택 기능을 사용하여 선형 곡선 맞춤을 위한 캔틸레버 수축 곡선을 선택합니다. 그런 다음 감도 확인란을 선택하여 힘 단위를 볼트에서 뉴턴으로 변환합니다. 액체에서 캔틸레버를 100-200 마이크로미터 들어 올리고 열 소음 기능을 선택합니다. 다시 Select Fit Range를 클릭하고 열 소음 종형 곡선을 Lawrence Curve로 맞춥니다.
곡선 피팅 후 스프링 상수 K 상자를 선택합니다. 스프링 상수가 제조업체의 값에 가까운지 확인하고 나중에 참조할 수 있도록 기록해 둡니다. 다음으로, 설치류 눈 망막 혈관 또는 내피하 기질의 슬라이드 장착 샘플을 AFM 스테이지에 놓고 망막 혈관을 시각화합니다.
소프트웨어의 Experiment(실험) 섹션에서 Contact Mode for Spectroscopy(분광학에 대한 접촉 모드)를 선택합니다. 그런 다음 설정점 힘을 0.5나노뉴턴으로 설정하고 접근을 클릭합니다. AFM 스테이지의 스테이지 나사를 사용하여 캔틸레버 프로브를 샘플의 원하는 위치에 조심스럽게 배치합니다.
Approach(접근)를 클릭하여 캔틸레버를 샘플에 더 가깝게 배치한 다음 Acquire(획득)를 클릭하여 힘 곡선을 캡처합니다. 마지막으로, 해석을 위해 모든 힘 곡선을 저장합니다. 당뇨병이 있는 마우스에서 분리한 망막 모세관에서 얻은 접근 곡선과 수축 곡선은 당뇨병이 없는 마우스에서 얻은 것보다 더 가파르게 나타났습니다.
