쥐 기관 상피 세포가 조약돌 모양의 온전한 단층을 형성하면 미리 데워진 PBS 3ml로 세포를 부드럽게 헹굽니다. 접시에 동물성 성분이 없는 효소 해리 용액 3ml를 넣고 섭씨 37도에서 5분 동안 배양합니다. 부드럽게 피펫팅하여 세포를 제거하고 현탁액을 3ml의 동물 성분이 없는 효소 억제 용액으로 옮깁니다.
셀 현탁액을 섭씨 4도에서 5분 동안 400G로 원심분리하고 펠릿을 1밀리리터의 팽창 매체에 재현탁시킵니다. trypan blue와 혈구계를 사용하여 생존 가능한 세포를 계산합니다. 쥐 꼬리 콜라겐으로 사전 코팅된 100mm 접시에 P1 세포 현탁액을 플레이트합니다.
섭씨 37도에서 5%의 이산화탄소로 세포를 배양합니다.