시작하려면 Chlorella sorokiniana 및 Haematococcus pluvialis의 성장 역학을 연구하기 위해 접종물을 준비하고 표준 실험실 절차에 따라 필요한 양의 멸균 배양 배지를 준비합니다. photobioreactor와 플라스크 모두에 대한 광원을 원하는 색상 스펙트럼으로 구성합니다. 외부 조명 간섭을 방지하기 위해 두 시스템을 모두 덮으십시오.
광주기 설정을 조정한 후 이산화탄소 지속 시간 시스템을 광생물 반응기에 연결하여 클로렐라에 12시간 동안 이산화탄소를 제공합니다. 다음으로, 550 나노미터에서 300, 밀리리터당 0.180의 광학 밀도 또는 300의 시작 세포 밀도를 달성하기 위해 배양 용기를 접종합니다. 클로렐라 소로키니아나(Chlorella sookiniana)의 경우 12시간, 헤마토코커스 플루비알리스(Haematococcus pluvialis)의 경우 8시간의 일정한 간격으로 배양액을 샘플링합니다.
40ml의 샘플을 플라스틱 원뿔형 원심분리 튜브에 넣습니다. 섭씨 3000도에서 20분 동안 튜브를 15G로 원심분리합니다. 상층액을 디캔팅하고 90% 순도 아세톤 용액 3밀리리터를 첨가하여 세포를 재현탁시킨 다음 산화를 방지하기 위해 알루미늄 호일로 덮인 유리관에 세포를 옮기고 소용돌이를 사용하여 혼합합니다.
현탁 된 샘플을 얼음 욕조에서 각각 5 분씩 2 회 사이클로 초음파 처리하고 샘플을 섭씨 4도에서 16 시간 동안 휴지 시키십시오. 휴식을 취한 후 동일한 조건에서 각각 5분씩 2주기 동안 샘플을 다시 초음파 처리하고 3000G에서 섭씨 15도에서 20분 동안 샘플을 원심분리합니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 색소 추출물을 분리하고 빛으로부터 보호되는 다른 깨끗한 튜브로 옮깁니다.
그런 다음 색소 추출물을 석영 셀에 넣고 600, 647 및 664 나노 미터의 분광 광도계에서 읽습니다. 방정식을 사용하여 엽록소 농도를 계산합니다. 클로렐라 소로키니아나(Chlorella sookiniana)의 엽록소 함량은 이산화탄소 첨가가 많고, 보라색 빛이 있으며, 광도가 높은 조건에서 처리 4에서 가장 높았습니다.
주효과 플롯은 빛의 강도가 이산화탄소와 보라색 빛 효과에 비해 효과가 낮다는 것을 보여주었습니다. 클로렐라 소로키니아나(Chlorella sorokiniana)에서는 실험 전반에 걸쳐 엽록소 A와 B의 일관된 증가가 관찰되었으며, 50시간에 엽록소 A가 엽록소 B를 능가했습니다. 50시간에 헤마토코커스 플루비알리스(Haematococcus pluvialis)에서 엽록소 농도의 감소가 관찰되었으며, 엽록소 B는 현저히 감소한 반면 엽록소 A는 더 높게 유지되었습니다.
