이 프로토콜은 기관 애니멀 케어 승인 및 플로리다 대학에서위원회 (IACUC)를 사용하고 &quot;연구소 동물 관리의 원리&quot;(NIH 간행물 번호 86-23, 1985 개정) 준수가되었습니다. 1. 자료 <ol><li> 동물 : 수술 시에 20-26그램 무게 남성 C57BL / 6 마​​우스 (할렌 연구소, 인디애나 폴리스, IN, 미국). </li><li> 마취 : <ol><li> 마취 기계 : VetEquip의 흡입 마취 시스템 (VetEquip 주식 회사, 플레즌턴, CA, 미국). </li><li> 마취 흡입 : Isoflurane (백스터 조제학, 디어 필드, IL). </li></ol></li><li> 수술 도구 : SuperCut 이리스 가위, 스트레이트 (세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), Vannas 마이크로 가위, 직진 (세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 더몬트 포셉 (좋은 팁, 45 ° 벤트 팁, 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 바이폴라 응고 장치 (고주파 건조기 900 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국), 마이크로 선박 클립 (세계 정밀 계측기, 주식, 사라소타, 플로리다, 미국) </li><li> 외과 용품 : 무균 커튼 팁, 잎사귀, 압박 붕대 스펀지, 봉합사 (7-0 실크 봉합사, Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국), 조직 접착제 (Vetbond, 3M 회사, 세인트 폴, 미네소타, 미국); 외과 스크럽 : Bethadine, 70 % 에탄올 및 멸균 식염수 0.9 %, 아이 연고 (Puralube 베트 연고, Pharmaderm, 멜빌, NY, 미국). </li><li> MCAO을위한 폐색 봉합 준비 : <ol><li> MCA 폐색을위한 필라멘트 : 7-0 외과 나일론 monofilament의 봉합 (Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국). </li><li> 봉합사 팁 (열 소작 단위, 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다)을 둔화에 대한 열원. </li><li> 액체 실리콘 고무 (실리콘 RTV 접착제, 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국). </li></ol></li><li> 현미경을 분석 해 봅시다 / 외과 (Leica 스테레오 현미경 MZ6). <ol><li> 광섬유 조명기 (광섬유 조명기 FO1 - 150, TechniQuip 공사, 리버 모어, CA, 미국). </li></ol></li><li> 레이저 도플러 flowmetry (PeriFlux 시스템 5000, Perimed, 스톡홀름, 스웨덴). <ol><li> 유연한 microtip (MT B500 - 0 스트레이트 Microtip, Perimed, 스톡홀름, 스웨덴) </li></ol></li><li> 온도 매개 변수 : <ol><li> 직장 온도 모니터 (BAT - 12, 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, FL). </li><li> 열전달 담요 (T / 펌프 TP600, Gaymar, NY, 미국). </li></ol></li><li> 얼룩 및 볼륨 경색의 양적 측정 : <ol><li> 2 % 솔루션 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화물 (2 % TTC, 시그마 - 알드리치 (주), 세인트 루이스, MO, 미국). </li><li> 쥐 두뇌 행렬 슬라 이서 (Zivic - 밀러 연구실., 주식 회사, 앨리슨 공원, PA, 미국). </li><li> 디지털 카메라 (V1253, 코닥 (주), 로체스터, NY, 미국). </li><li> 이미지 J 소프트웨어 (ImageJ 1.42q 소프트웨어, 건강의 미국 국립 연구소, 베데스다, MA, 미국). </li></ol></li></ol> 2. 사전 외과 단계 <ol><li> 이전 수술로, 생쥐는 설치류 물과 식량을 무료로 이용할 수있는 12시 12분 어둠 / 빛이주기 밑에 위치해 있습니다. </li><li> MCAO에 대한 봉합은 그것이 (7-0 건조 수 있도록, 열 및 액체 실리콘 고무와의 팁에서 코팅 봉합 샤프트의 3-4mm로 봉합 팁의 1-2mm을 둔화에 의해 준비되며 팁 직경 0.20 - 0.25mm; 코팅 길이, 3~4밀리미터, 봉합 길이 11~13mm). 불임은 위에서 언급한 모든 단계에서 보존해야합니다. </li><li> 마우스를 무게 후 마취가 유도 챔버에서 isoflurane 4퍼센트와 유도는 30 % O 2 70% N 안면을 통해 2 O 가스 혼합물에서 isoflurane 1.5-2 %로 절차를 수행하는 동안 유지. </li><li> 마우스는 온도 제어 운영 표면 (열 담요)에 누워 거즈 패드에 발생하기 쉬운 위치에 배치되며 머리 모피는 면도 있습니다. </li><li> 윤활유 안과 연고는 양쪽 눈 모두에 적용되며, 눈꺼풀은 수술 과정 중에 안구 건조를 막기 위해 폐쇄됩니다. </li><li> 정중선 절개 (1cm)은 nasion과 피부가 부착 유연한 microtip을 (; 0.5mm 직경 MT B500 - 0 스트레이트 Microtip)에 옆으로 뽑아입니다 뛰어난 nuchal 라인에서 두개관을 overlying 피부에 이루어집니다. microtip는 레이저 도플러 flowmetry하여 MCA 영역에 혈액 흐름을 모니터 오른쪽 정수리 두개골의 표면 (후부 1mm 및 bregma에 측면 5mm)에 직각 배치됩니다. </li><li> 동물 부정사 위치로 설정되어 전에 유연한 microtip 단단히 두개골에 첨부되어 있는지 확인합니다. 동물의 목을은 부드러운 패드에 위치하고 코가 마취 장치의 코 콘에서 개최됩니다. 이것은 유연한 microtip을위한 충분한 공간이 필요하게됩니다. </li><li> 직장 온도 프로브는 ± 0.5 ° C.는 37 상수 동물 코어 온도를 유지하기 위해 삽입 </li><li> 모두 forepaws과 hindpaws는 운영 플랫폼 표면 녹화하고 있으며, 꼬리는 직장 관이 테이프로 붙여져 있습니다. </li> &lt;/ 올&gt; 3. MCA 폐색 수술 : <ol><li> 운영 현미경, 정중선 목 절개는 부드럽게 풀어 피부를 리프팅하여 manubrium와 턱 사이에 가위로 이루어집니다. </li><li> 이점 기본 턱밑 분비가 퉁명스럽게 현장에두고 왼쪽 선 (腺)으로 나누어집니다. 오른쪽 턱밑 글랜드는 cranially 철회하고 sternocleidomastoid 근육과 함께 안전합니다. </li><li> 경동맥 칼집을 포함 omohyoid 근육의 노출된 부문은 신중하게 픽업과 함께 나눌 수 있습니다. </li><li> 바로 일반적인 경동맥 (CCA)는 조심스럽게 미주 신경 및 칼집 (CCA로 측면에 위치)에서 분리하여 격리됩니다. </li><li> 향후, MCA 폐색을 수행하기 위해 자주 사용되었습니다 2 수술 방법은 분기 : </li></ol> 고이즈미의 4 방법 <ol class="lroman" type="i"><li> 세 느슨한 칼라의 봉합 (7-0 비단)은 오른쪽 CCA 주변 준비가되어 있습니다. </li><li> 외부 경동맥의 동맥 (ECA)는 식별 고립, 그리고 불로 지졌죠 (분기점에 말초 2-3mm)입니다. 이것은 이후에 마이크로 가위로 나눌 수 있습니다. 소작된 사이트에서 실수로 주변 피해를 방지하기 위해 전원은 전원 손잡이를 사용하여 1로 설정해야합니다. 이것은 모든 cauterizations에 대해 일치합니다. </li><li> 충분한 긴장은 혈액의 흐름 (영구 결합)을 막다에 CCA에서 가장 근위 칼라 봉합에 적용됩니다. 흐름 폐색은 기본 대뇌 피질의 관류 값 ~ 50 % 드롭에 의해 확인됩니다. </li><li> 그런 다음 선박 클립 arteriotomy의 시간에 역행 흐름을 피하기 위해 단지 CCA의 분기점 앞에 배치됩니다. </li><li> arteriotomy는 마이크로 가위 (가까이 내고까지)와 근위 출혈도 잡았 봉합 및 CCA의 선박 클립 사이에 수행됩니다. </li><li> 열 무딘 실리콘 코팅 7-0 나일론 봉합사는 arteriotomy를 통해 소개하고 선박 클립에 도달까지 고급입니다. 2 나머지 느슨한 칼라 봉합은 부드럽게 동맥 벽에 ...에 상처​​를 입히다하지 않는주의, CCA를 통해 흐름 누출을 다시 피하기 위해 arteriotomy 및 선박 클립 사이 CCA 주위 강화되며 다음 선박 클립이 철회됩니다. </li></ol> 롱가의 3 방식 <ol class="lalpha" type="a"><li> ECA는 식별 불로 지졌죠 (1로 설정 전력), (언어 및 상악 동맥으로의 분기점 근처) 가능한 한 해부하고, 마이크로 가위로 나뉘어져 있습니다. </li><li> 두 느슨한 칼라의 봉합 (7-0 실크)는 단지 CCA의 분기점 위의 근위 ICA 주변 준비가되어 있습니다. </li><li> CCA는 일시적으로 혈관 클립과 함께 닫힙니다. 흐름 폐색은 기본 대뇌 피질의 관류 값 ~ 50 % 드롭에 의해 확인됩니다. </li><li> 다음 ICA가 일시적으로 arteriotomy의 시간에 역행 흐름을 피하기 위해 두 느슨한 옷깃 봉합 위에 선박 클립과 함께 닫힙니다. </li><li> arteriotomy는 유세에 반영 ECA 가까이에있는 마이크로 가위를 사용하여 수행됩니다. </li><li> 열 무딘 실리콘 코팅 7-0 나일론 봉합사는 ECA에서 arteriotomy를 통해 소개하고 ICA에 적용 선박 클립에 도달까지 고급입니다. 근위 ICA에이 느슨한 칼라 봉합은 부드럽게 동맥 벽에 ...에 상처​​를 입히다 못할 정도로 관심과 ICA를 통해 환류 혈액 흐름을 피하기 위해 근위 ICA 주위 강화되며 다음 선박 클립이 철회됩니다. </li></ol> 절차의 나머지 부분은 대부분 수렴입니다 <ol><li> 가벼운 저항이 생각 때까지 occluding의 봉합은 천천히 두개골 기본 방향으로 내부 경동맥 (ICA)를 통해 고급입니다. 기준에 대한 상대적인 비율 (= 80 %)으로 대뇌 혈류의 가치에 동시 드롭은 레이저 도플러 flowmetry에 의해 확인됩니다. 2 칼라 봉합은 삽입 필라멘트 주위에 강화하고 있습니다. </li><li> 일시적 대뇌 국소 빈혈 실험은 occluding의 봉합사는 45 분 후에 부드럽게 철회합니다. 이 시점은 다양한 실험적인 목표에 대해 변경할 수 있습니다. </li><li> 봉합사 필라멘트를 철수 후, arteriotomy 사이트는 수술 후 출혈을 피하기 위해 닫힙니다. 고이즈미의 방법에서는, 이것은 안전 CCA 주위에 목걸이를 봉합을 강화 포함됩니다. 롱가의 기술에 ECA의 기지에서 arteriotomy 사이트가 불로 지졌죠는 다음 근위 ICA에서 칼라 봉합은 느슨하게하고 경동맥 흐름을 복원 제거됩니다. </li><li> 절개를 닫으려면, 턱밑 글랜드과 SCM은 수술 분야를 통해 마련하고 있습니다. 상처의 가장자리는 다음 자궁 경부에서 조직 접착제와 두피 영역 approximated 있습니다. 또는, 흡수성 봉합 또는 금속 주식은 동물의 장기적인 생존을위한 것입니다 특히 상처를 가까이하는 데 사용할 수 있습니다. </li><li> 절개 폐쇄 후, 동물 볼륨 보충으로 subcutaneously 1 ML 따뜻한 호수를받습니다. 적절한 진통제의 투여 (0.05-0.1 MG / kg에서 즉, Buprenorphine)는 복구 기간 동안 동물의 고통과 불편을 최소화하기 위해 사용해야합니다. 애니마나는 수술 스위트룸에서 제거하고 부드러운 음식과 물을 무료로 쉽게 접근할 수있는, 저체온증을 방지하기 위해 따뜻한 복구 지역 / 케이지에 있습니다. </li></ol> 4. 수술 신경학 평가 동물이 전체 의식을 차릴 후 3 다음과 같이 신경 결손은 간단한 스케일 (5 점 척도)에 의해 평가할 수있다 : <ol start="0"><li> 눈에 띄는 적자 없음 </li><li> contralateral 앞발 (온화한 초점 neurologic 적자)를 확장 실패 </li><li> 경색에 contralateral 방향으로 공전하는 (중간 초점 neurologic 적자) </li><li> 경색에 contralateral 방향으로 떨어지는 (심각한 초점 neurologic 적자) </li><li> 자발적인 움직임없이 의식의 우울 수준 </li></ol> 5. 얼룩 및 뇌 경색 볼륨의 양적 측정 <ol><li> MCA의 reperfusion 24 시간 후, 남은 마우스는 4 % isoflorane와 깊이 anesthetized 무게이며, 승인된 프로토콜에 따라 희생. </li><li> 두뇌는 신중하게 제거하고 마우스 뇌 매트릭스 기계에 배치하고, 전체의 꿈은 2mm 간격으로 coronally sectioned입니다. </li><li> 섹션은 TTC는 인산염의 37 호수 (PBS)를 버퍼 2% ° 20 분 C로 포장되어 있습니다. TTC의 얼룩 후, infracted 지역은 붉은 벽돌 (가능한) 조직 (그림 1)에 인접한 흰색 (흠없는) 조직으로 표시됩니다. </li><li> 시리얼 섹션은 이미지 J 프로그램 측정 디지털 카메라 경색의 면적을 사용하여 촬영하고 있습니다. </li><li> 경색의 영역 (흰색, 흠없는), ipsilateral 반구 (스테인드, 벽돌 흰색과 빨간색) 분야, 그리고 contralateral 반구 (붉은 벽돌, 스테인드)의 영역은 각 섹션에 대한 측정입니다. 볼륨은 모든 섹션에서 대표적인 영역을 합산하여 슬라이스의 두께로 곱하여 계산합니다. 부종에 대한 보정 후, 경색의 볼륨은 다음과 9과 같이 계산됩니다 : 수정된 경색 볼륨 (문학), % = [contralateral 반구 볼륨 - (ipsilateral 반구 볼륨 - 볼륨 경색)] / contralateral 반구 볼륨 X 100 </li></ol> 6. 대표 결과 대뇌 국소 빈혈 과도를 확립하기 위해 왼쪽 CCA를 통해 폐색 및 MCA의 reperfusion 후, 동물 희생하고 자신의 coronally sectioned 두뇌는 경색의 볼륨 (그림 1)을 평가하는 TTC 물들일 수 있습니다. <img src="files/ftp_upload/2879/2879fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 생쥐에서 TTC - 묻은 시리얼 코로나 두뇌 섹션 (2mm)는 MCA 폐색를 받게.

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+on+stroke+prevention,+diagnosis,+and+therapy.+Report+of+the+WHO+Task+Force+on+Stroke+and+other+Cerebrovascular+Disorders.">Recommendations on stroke prevention, diagnosis, and therapy. Report of the WHO Task Force on Stroke and other Cerebrovascular Disorders.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 1407-1431 (1989).</li><li>Lloyd-Jones, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics--2009+update:+a+report+from+the+American+Heart+Association+Statistics+Committee+and+Stroke+Statistics+Subcommittee.">Heart disease and stroke statistics--2009 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee.</a> Circulation. 119, e21-e181 (2009).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 20, 84-91 (1989).</li><li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema.+I.+A+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area.">Experimental studies of ischemic brain edema. I. A new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. 8, 1-8 (1986).</li><li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse.">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurol Res. 19, 641-648 (1997).</li><li>Fujii, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-related+differences+in+susceptibility+to+transient+forebrain+ischemia+in+SV-129+and+C57black/6+mice.+.">Strain-related differences in susceptibility to transient forebrain ischemia in SV-129 and C57black/6 mice. .</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 28, 1805-1810 (1997).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+2,3,5-triphenyltetrazolium+chloride+as+a+stain+for+detection+and+quantification+of+experimental+cerebral+infarction+in+rats.">Evaluation of 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride as a stain for detection and quantification of experimental cerebral infarction in rats.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 17, 1304-1308 (1986).</li><li>Qi, X., Hosoi, T., Okuma, Y., Kaneko, M., Nomura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sodium+4-phenylbutyrate+protects+against+cerebral+ischemic+injury.">Sodium 4-phenylbutyrate protects against cerebral ischemic injury.</a> Mol Pharmacol. 66, 899-908 (2004).</li><li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy.">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13, 683-692 (1993).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ideal+suture+diameter+is+critical+for+consistent+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice.">Ideal suture diameter is critical for consistent middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Neurosurgery. 56, 196-200 (2005).</li><li>Barber, P. A., Hoyte, L., Colbourne, F., Buchan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temperature-regulated+model+of+focal+ischemia+in+the+mouse:+a+study+with+histopathological+and+behavioral+outcomes.">Temperature-regulated model of focal ischemia in the mouse: a study with histopathological and behavioral outcomes.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 35, 1720-1725 (2004).</li><li>Kapinya, K. J., Prass, K., Dirnagl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+induced+prolonged+protection+against+cerebral+ischemia+in+mice:+a+redox+sensitive+mechanism?.">Isoflurane induced prolonged protection against cerebral ischemia in mice: a redox sensitive mechanism?.</a> Neuroreport. 13, 1431-1435 (2002).</li></ol>

저자들은 이익에 대한 갈등이 없다는 것을 선언합니다.

MCAO 모델은 murine 종의 대뇌 국소 빈혈을 복제 설립 모델입니다. 이 모델은 처음 쥐에 사용하고 이후 마우스에 적응했다. 혈액 뇌 장벽의 투자율과 intracranial 압력에 대한 수술 조작의 영향을 제거하는 craniectomy을 방지하는 것이이 기술의 장점입니다. 그러나, 이러한 스트레인과 관련된 차이가 10, 폐색 6, 체온 12, 마취 13 봉합 팁 11 기간의 크기 및 기타 요인?...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 유형 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> 남성 C57BL / 6 마​​우스 </td><td> 동물 </td><td> 할런 연구소, 인디애나 폴리스, IN, 미국 </td><td></td><td> 20-26 GRS </td></tr><tr><td> 해부 현미경 </td><td> 현미경 </td><td> Leica 스테레오 현미경 MZ6 </td><td></td><td> 6.3:1 줌 </td></tr><tr><td> 광섬유 조명기 </td><td> 조명기 </td><td> TechniQuip 주식, 리버 모어, CA, 미국 </td><td></td><td> FO1 - 150 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> 마취 </td><td> 백스터 조제학, 디어 필드, IL </td><td> 1001936060 </td><td></td></tr><tr><td> 직선 SuperCut 이리스 가위, </td><td> 수술 도구 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 14,218 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas 마이크로 가위, 직선 </td><td> 수술 도구 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 14,003 </td><td></td></tr><tr><td> 더몬트 좋은 팁 포셉 </td><td> 수술 도구 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 503290 </td><td></td></tr><tr><td> 선박 클립 </td><td> 수술 도구 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 14,120 </td><td></td></tr><tr><td> 고주파 건조기 900 </td><td> 수술 도구 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 500397 </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 외과 나일론 monofilament의 봉합 </td><td> 봉합하다 </td><td> Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국 </td><td> 1647G </td><td> 폐색에 대한 봉합 </td></tr><tr><td> 7-0 외과 실크 봉합 </td><td> 봉합하다 </td><td> Ethicon, 주식 회사, 서머빌, 뉴저지, 미국 </td><td> 7733G </td><td> 결합에 대한 봉합 </td></tr><tr><td> 실리콘 RTV 접착제 </td><td> 실리콘 고무 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 1571 </td><td></td></tr><tr><td> Vetbond </td><td> 조직 접착제 </td><td> 3M 회사, 세인트 폴, 미네소타, 미국 </td><td> 70200746587 </td><td></td></tr><tr><td> Puralube 베트 연고 </td><td> 아이 연고 </td><td> Pharmaderm, 멜빌, NY, 미국 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorphine hydrochlorode </td><td> 진통제 </td><td> Hospira 주식 회사, 레이크 포레스트, IL, 미국 </td><td> NDC 0409-2012-32 </td><td></td></tr><tr><td> 열 소작 단위 </td><td></td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> 501292 </td><td></td></tr><tr><td> PeriFlux 시스템 5000 </td><td> TCD flowmetry </td><td> Perimed, 스톡홀름, 스위든 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> BAT - 12 </td><td> 직장 온도계 </td><td> 세계 정밀 계측기, 주식 회사, 사라소타, 플로리다, 미국 </td><td> BAT - 12R </td><td></td></tr><tr><td> T / 펌프, TP600 </td><td> 열 담요 </td><td> Gaymar, NY, 미국 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화 </td><td> 시약 </td><td> 시그마 - 알드리치 (주), 세인트 루이스, MO, 미국 </td><td> T8877 </td><td></td></tr><tr><td> 마우스 뇌 매트릭스 슬라 이서 </td><td> 브레인 슬라 이서 </td><td> Zivic - 밀러 연구실., 주식 회사, 앨리슨 공원, PA, 미국 </td><td> BSMAS001 - 1 </td><td></td></tr></tbody></table>

intraluminal middle cerebral artery occlusion (mcao) model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in mice

스트로크 2009 1,2 년 미국에서 근처 70,000,000,000달러의 예상 비용, 죽음의 세 번째 주요 원인과 세계에서 장애의 주요 원인이다. intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) 모델 쥐에 impactful 인간의 병리 현상을 시뮬레이션하기 위해 1986 년 고이즈미 사에 의해 개발되었습니다. MCAO 방식의 수정은 나중에 롱가 3 수여되었다. 두 기술은 널리 허혈성 뇌졸중 및 잠재적인 치료 modalities 5로 인한 뇌 손상의 분자 메커니즘을 식별하는 데 사용되었습니다. 쥐이 비교적 비침 투 방법은 유전자 변형과 녹아웃의 변종 6,7을 활용하는 마우스에 사용하도록 확장되었습니다. 모델 초점 대뇌 국소 빈혈하려면, intraluminal 봉합은 MCA의 기반을 막다하기 위해 내부 경동맥을 통해 고급입니다. 지정된 기간 후에 Retracting 봉합사는 자연 reperfusion을 모방한 것이었지만, 봉합도 영구적으로 유지하실 수 있습니다. 이 동영상은 stepwise 방식의 생쥐에 intraluminal MCAO 절차를 수행하기위한 두 가지 주요 접근 방식을 보여주는,뿐만 아니라 잠재적인 단점과 함정에 대한 통찰력을 제공합니다. 허혈성 뇌 조직은 이후 대뇌 경색 8 정도를 평가하는 2,3,5 - triphenyltetrazolium 염화물 (TTC)로 물들일 것이다.

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Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) 모델은 실험 허혈성 뇌졸중 모델 중 가장 자주 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 전체 레이저 도플러 flowmetry의 가이드와 함께 상세하게 모델 및 대표 결과를 보여줄 것입니다.

마우스의 레이저 도플러 Flowmetry 안내와 허혈성 뇌졸중에 대한 중간 대뇌 동맥 Intraluminal 폐색 (MCAO) 모델

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

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Medicine

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

49.6K 조회수.  University of Florida. intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) 모델은 실험 허혈성 뇌졸중 모델 중 가장 자주 사용되는 모델입니다. 여기서 우리는 전체 레이저 도플러 flowmetry의 가이드와 함께 상세하게 모델 및 대표 결과를 보여줄 것입니다.

비디오: Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are very limited. To meet the need for novel therapeutic approaches, experimental stroke research frequently employs rodent models of focal cerebral ischaemia. Most researchers use permanent or transient occlusion of the middle cerebral artery (MCA) in mice or rats.
Proximal occlusion of the middle cerebral artery (MCA) via the intraluminal suture technique (so called filament or suture model) is probably the most frequently used model in experimental stroke research. The intraluminal MCAO model offers the advantage of inducing reproducible transient or permanent ischaemia of the MCA territory in a relatively non-invasive manner. Intraluminal approaches interrupt the blood flow of the entire territory of this artery. Filament occlusion thus arrests flow proximal to the lenticulo-striate arteries, which supply the basal ganglia. Filament occlusion of the MCA results in reproducible lesions in the cortex and striatum and can be either permanent or transient. In contrast, models inducing distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA occlusion typically spare the striatum and primarily involve the neocortex. In addition these models do require craniectomy. In the model demonstrated in this article, a silicon coated filament is introduced into the common carotid artery and advanced along the internal carotid artery into the Circle of Willis, where it blocks the origin of the middle cerebral artery. In patients, occlusions of the middle cerebral artery are among the most common causes of ischaemic stroke. Since varying ischemic intervals can be chosen freely in this model depending on the time point of reperfusion, ischaemic lesions with varying degrees of severity can be produced. Reperfusion by removal of the occluding filament at least partially models the restoration of blood flow after spontaneous or therapeutic (tPA) lysis of a thromboembolic clot in humans.
In this video we will present the basic technique as well as the major pitfalls and confounders which may limit the predictive value of this model.

Filamentous occlusion of the Middle cerebral artery is a common model for studying ischemic stroke in mice.

마우스의 모델링 스트로크 - 필라멘트 모델 중간 대뇌 동맥 폐색

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

연구

의학

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

중간 대뇌 동맥 폐색의 마우스 모델

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We have established bilateral common carotid artery occlusion as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance to transient focal cerebral ischemia in C57Bl6/J mice. In this video, we will demonstrate the methodology used for this study.

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning (PC) &#x2013; a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a subsequent damaging ischemic insult. We established bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO) as a preconditioning stimulus to induce early ischemic tolerance (IT) to transient focal cerebral ischemia (induced by middle cerebral artery occlusion, MCAO) in C57Bl6/J mice.

초점 대뇌 국소 빈혈에 조기 허혈성 공차를 유도하기 위해 적절한 전처리 자극으로 양측 경동맥 동맥 폐색

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in 20091, 2. Several models of cerebral ischemia have been developed to mimic the human condition of stroke. It has been suggested that up to 80% of all strokes result from ischemic damage in the middle cerebral artery (MCA) area3. In the early 1990s, endothelin-1 (ET-1) 4 was used to induce ischemia by applying it directly adjacent to the surface of the MCA after craniotomy. Later, this model was modified 5 by using a stereotaxic injection of ET-1 adjacent to the MCA to produce focal cerebral ischemia. The main advantages of this model include the ability to perform the procedure quickly, the ability to control artery constriction by altering the dose of ET-1 delivered, no need to manipulate the extracranial vessels supplying blood to the brain as well as gradual reperfusion rates that more closely mimics the reperfusion in humans5-7. On the other hand, the ET-1 model has disadvantages that include the need for a craniotomy, as well as higher variability in stroke volume8. This variability can be reduced with the use of laser Doppler flowmetry (LDF) to verify cerebral ischemia during ET-1 infusion. Factors that affect stroke variability include precision of infusion and the batch of the ET-1 used6. Another important consideration is that although reperfusion is a common occurrence in human stroke, the duration of occlusion for ET-1 induced MCAO may not closely mimic that of human stroke where many patients have partial reperfusion over a period of hours to days following occlusion9, 10. This protocol will describe in detail the ET-1 induced MCAO model for ischemic stroke in rats. It will also draw attention to special considerations and potential drawbacks throughout the procedure.

Several animal models of cerebral ischemia have been developed to simulate the human condition of stroke. This protocol describes the endothelin-1 (ET-1) induced middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke in rats. In addition, important considerations, advantages, and shortcomings of this model are discussed.

쥐의 레이저 도플러 Flowmetry 안내와 허혈성 뇌졸중에 대한 엔도 테린-1 유도 중간 뇌 동맥 폐색 모델

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be performed in many locations overlying the rat cerebrum, but is most easily carried out by creating a craniectomy over the readily accessible frontal or parietal bones. Most frequently, we have used this technique in combination with the endothelin-1 middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke to quantify the changes in middle cerebral artery vessel diameter that occur with injection of endothelin-1 into the brain parenchyma adjacent to the proximal MCA4, 5. In order to visualize the proximal portion of the MCA during endothelin -1 induced MCAO, we use a technique to create a cranial window through the temporal bone on the lateral aspect of the rat skull (Figure 1). Cerebral arteries can be visualized either with the dura intact or with the dura incised and retracted. Most commonly, we leave the dura intact during visualization since endothelin-1 induced MCAO involves delivery of the vasoconstricting peptide into the brain parenchyma. This bypasses the need to incise the dura directly over the visualized vessels for drug delivery. This protocol will describe how to create a cranial window to visualize cerebral arteries in a step-wise fashion, as well as how to avoid many of the potential pitfalls pertaining to this method.

This article describes a method for visualizing rat cerebral arteries through a cranial window using temporal craniectomy in order to view proximal portions of the middle cerebral artery (Figure 1). This versatile method can be combined with various techniques of drug delivery to measure cerebral artery reactivity in vivo.

엔도 테린-1 유도 중간 뇌 동맥 폐색 동안 중동 뇌동맥을 시각화하기 위해 두개골 창 활용

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal models of acute ischemic stroke allows to confirm successful arterial occlusion and exclude subarachnoid hemorrhage. Cerebral perfusion monitoring can also be used to study intracranial collateral circulation, which is emerging as a powerful determinant of stroke outcome and a possible therapeutic target. Despite a recognized role of Laser Doppler perfusion monitoring as part of the current guidelines for experimental cerebral ischemia, a number of technical difficulties exist that limit its widespread use. One of the major issues is obtaining a secure and prolonged attachment of a deep-penetration Laser Doppler probe to the animal skull. In this video, we show our optimized system for cerebral perfusion monitoring during transient middle cerebral artery occlusion by intraluminal filament in the rat. We developed in-house a simple method to obtain a custom made holder for twin-fibre (deep-penetration) Laser Doppler probes, which allow multi-site monitoring if needed. A continuous and prolonged monitoring of cerebral perfusion could easily be obtained over the intact skull.

Cerebral perfusion monitoring has been demonstrated to improve accuracy in ischemic stroke models. Technical difficulties often limit the use of this essential tool for cerebrovascular research. In this video, an optimized system is shown to obtain a single or multi-site hemodynamic monitoring during intraluminal middle cerebral artery occlusion in rats.

Intraluminal 중간 대뇌 동맥 폐색의 쥐 뇌졸중 모델에서 뇌 관류 모니터링에 최적화 된 시스템

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

마우스의 모델링 스트로크 : 말초 중간 대뇌 동맥의 영구 응고

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic stroke. However, the use of tPA is limited by its narrow therapeutic window and by increased risk of hemorrhagic transformation. There is an urgent need to develop suitable stroke models to study new thrombolytic agents and strategies for treatment of ischemic stroke. At present, two major types of ischemic stroke models have been developed in rats and mice: intraluminal suture MCAO and embolic MCAO. Although MCAO models via the intraluminal suture technique have been widely used in mechanism-driven stroke research, these suture models do not mimic the clinical situation and are not suitable for thrombolytic studies. Among these models, the embolic MCAO model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical investigation of thrombolytic therapy. This embolic model was first developed in rats by Overgaard et al.1 in 1992 and further characterized by Zhang et al. in 19972. Although embolic MCAO has gained increasing attention, there are technical problems faced by many laboratories. To meet increasing needs for thrombolytic research, we present a highly reproducible model of embolic MCAO in the rat, which can develop a predictable infarct volume within the MCA territory. In brief, a modified PE-50 tube is gently advanced from the external carotid artery (ECA) into the lumen of the internal carotid artery (ICA) until the tip of the catheter reaches the origin of the MCA. Through the catheter, a single homologous blood clot is placed at the origin of the MCA. To identify the success of MCA occlusion, regional cerebral blood flow was monitored, neurological deficits and infarct volumes were measured. The techniques presented in this paper should help investigators to overcome technical problems for establishing this model for stroke research.

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

흰쥐의 동종 혈액 혈전과 허혈성 뇌졸중에 대한 전성 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

마우스의 중간 대뇌 동맥 폐색 및 재관류 유도 스트로크에 대한 수술 적 접근

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...