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Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Mammalian Toll-like receptors (TLRs) are a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns. Not only are TLRs crucial sensors of ...

Queen's University - Kingston, Ontario

&#x53D7;&#x4F53;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x4E2A;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x54EA;&#x4E9B;&#x76EE;&#x6807;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x548C;&#x53D7;&#x4F53; desialylates &#x548C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E8C;&#x805A;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5; 2&#xFF0C;3 &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269; TrkA &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6C34;&#x89E3;&#x5E76;&#x8FC5;&#x901F;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x3002;Trk &#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x521D;&#x7EA7;&#x4E0E;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x523A;&#x6FC0;&#x540E;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8868;&#x8FBE;&#x6709;&#x529B;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x83F2;&#x3001; BCX1812 &#x548C; BCX1827&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (NGF) TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8111;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50; (BDNF) &#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x3001; 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#x9178;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C; Neu3 &#x548C; Neu2 sialidases &#x5177;&#x4F53;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; pTrkA &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;GM1 &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x5177;&#x4F53;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E9A;&#x57FA; B &#x9002;&#x7528;&#x4E8E; TrkA PC12 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x8F74;&#x7A81;&#x751F;&#x6280;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597; TrkA PC12 &#x548C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3;&#x4E0E; TrkB &#x53D7;&#x4F53; (TrkB nnr5) &#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7597; PC12(nnr5)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x5929;&#x7136;&#x914D;&#x4F53;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x65B0;&#x578B;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x548C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE; sialidases &#x7684;&#x65B0;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x5BF9;&#x8702;&#x7A9D;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8425;&#x517B;&#x56E0;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B; Trk &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;

A direct link between receptor glycosylation and activation following natural ligand interaction has not been observed. Here, we discover a membrane sialidase-controlling mechanism that depends on ligand binding to its receptor to induce enzyme activity which targets and desialylates the receptor and, consequently, causes the induction of receptor dimerization and activation. We also identify a specific sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl sugar residue of TrkA tyrosine kinase receptor, which is rapidly targeted and hydrolyzed by the sialidase. Trk-expressing cells and primary cortical neurons following stimulation with specific neurotrophic growth factors express a vigorous membrane sialidase activity. Neuraminidase inhibitors, Tamiflu, BCX1812, and BCX1827, block sialidase activity induced by nerve growth factor (NGF) in TrkA-PC12 cells and by brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in primary cortical neurons. In contrast, the neuraminidase inhibitor, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid, specific for plasma membrane ganglioside Neu3 and Neu2 sialidases has no inhibitory effect on NGF-induced pTrkA. The GM1 ganglioside specific cholera toxin subunit B applied to TrkA-PC12 cells has no inhibitory effect on NGF-induced sialidase activity. Neurite outgrowths induced by NGF-treated TrkA-PC12 and BDNF-treated PC12(nnr5) stably transfected with TrkB receptors (TrkB-nnr5) cells are significantly inhibited by Tamiflu. Our results establish a novel mode of regulation of receptor activation by its natural ligand and define a new function for cellular sialidases.

Dependence of neurotrophic factor activation of Trk tyrosine kinase receptors on cellular sialidase.

Un lien direct entre la glycosylation du r&#xE9;cepteur et l&#x26;#39;activation apr&#xE8;s une interaction ligand naturel n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e. Ici, on d&#xE9;couvre une membrane de commande du m&#xE9;canisme de la sialidase qui d&#xE9;pend de la liaison du ligand &#xE0; son r&#xE9;cepteur pour induire une activit&#xE9; enzymatique qui cible et le r&#xE9;cepteur desialylates et, par cons&#xE9;quent, provoque l&#x26;#39;induction de la dim&#xE9;risation du r&#xE9;cepteur et l&#x26;#39;activation. Nous avons &#xE9;galement identifier un particulier sialyl alpha-2 ,3-linked r&#xE9;sidu de sucre b&#xEA;ta-galactosyl du r&#xE9;cepteur tyrosine kinase TrkA, qui est rapidement cibl&#xE9; et hydrolys&#xE9; par la sialidase. Trk cellules exprimant et primaires neurones corticaux apr&#xE8;s stimulation avec certains facteurs de croissance neurotrophiques exprimer une activit&#xE9; vigoureuse membrane sialidase. Inhibiteurs de la neuraminidase, Tamiflu, BCX1812, et BCX1827, l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase bloc induite par le facteur de croissance nerveuse (NGF) dans les cellules PC12-TrkA et par le facteur neurotrophique d&#xE9;riv&#xE9; du cerveau (BDNF) dans les neurones corticaux primaires. En revanche, l&#x26;#39;inhibiteur de la neuraminidase, 2-d&#xE9;soxy-2 ,3-d&#xE9;hydro-N-ac&#xE9;tylneuraminique, sp&#xE9;cifique pour la membrane plasmique ganglioside Neu3 et Neu2 sialidases n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur le NGF induit pTrkA. Le ganglioside GM1 sp&#xE9;cifique toxine chol&#xE9;rique sous-unit&#xE9; B appliqu&#xE9; &#xE0; TrkA-cellules PC12 n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase NGF induite. Excroissances neurites induite par le NGF-TrkA-trait&#xE9; PC12 et PC12 BDNF-trait&#xE9;e (nnr5) transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec des r&#xE9;cepteurs TrkB (TrkB-nnr5) les cellules sont significativement inhib&#xE9;e par Tamiflu. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablissent un nouveau mode de r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;activation du r&#xE9;cepteur par son ligand naturel et de d&#xE9;finir une nouvelle fonction pour sialidases cellulaires.

D&#xE9;pendance &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de l&#x26;#39;activation du facteur neurotrophique des r&#xE9;cepteurs Trk tyrosine kinase sur sialidase cellulaire

Eine direkte Verbindung zwischen Rezeptor Glycosylation und Aktivierung, die folgende nat&uuml;rliche Ligand Interaktion nicht beobachtet hat. Hier entdecken wir einen Membran Sialidase-Steuerung Mechanismus, der von Liganden binden an seinen Rezeptor an Enzymaktivit&auml;t induzieren welche Ziele abh&auml;ngt und Desialylates des Rezeptors und folglich verursacht die Induktion der Dimerisierung des Rezeptors und Aktivierung. Wir erkennen au&szlig;erdem spezifische Sialyl Alpha-2,3-chromosomale Beta-Galaktosyltransferase Zucker Reste 1q21-Tyrosin-Kinase-Rezeptor, die schnell ausgerichtet ist und durch die Sialidase hydrolysiert. TRK-Ausdruck Zellen und prim&auml;re kortikale Neuronen nach Stimulation mit bestimmten neurotrophe Wachstumsfaktoren Ausdr&uuml;cken eine kr&auml;ftige Membran Sialidase Aktivit&auml;t. Neuraminidase-Hemmer, Tamiflu, BCX1812 und BCX1827, blockieren Sialidase Aktivit&auml;t induziert durch Nerv Wachstumfaktor (NGF) in 1q21-PC12 Zellen und von Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF) in prim&auml;ren kortikalen Neuronen. Im Gegensatz dazu hat die Neuraminidasehemmer, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic Acid, speziell f&uuml;r die Plasmamembran Ganglioside Neu3 und Neu2 Sialidases keine hemmende Wirkung auf NGF-induzierte pTrkA. Die GM1 Ganglioside spezifischen Cholera Toxin-Untereinheit B auf 1q21-PC12 Zellen angewendet hat keine hemmende Wirkung auf Sialidase NGF-induzierte Aktivit&auml;t. Neurit Ausw&uuml;chse hervorgerufen durch NGF-behandelten 1q21-PC12 und BDNF-behandelte PC12(nnr5) stabil transfected mit TrkB Rezeptoren (TrkB-nnr5) Zellen sind durch Tamiflu erheblich gehemmt. Unsere Ergebnisse stellen eine neuartige Mode Verordnung der Rezeptor-Aktivierung durch seine nat&uuml;rlichen Liganden und definieren eine neue Funktion zur zellul&auml;ren Sialidases.

Abh&auml;ngigkeit von zellul&auml;ren Sialidase Neurotrophic Faktor Aktivierung von Trk-Tyrosin-Kinase-Rezeptoren.

Un collegamento diretto tra recettore glicosilazione e attivazione seguente interazione ligando naturale non &egrave; stata osservata. Qui, scopriamo un meccanismo di controllo sialidasi membrana che dipende dal ligando quali obiettivi vincolanti al suo recettore per indurre l&#39;attivit&agrave; dell&#39;enzima e desialylates il recettore e, di conseguenza, causa l&#39;induzione di dimerizzazione del recettore e attivazione. Abbiamo anche identificare un residuo di zucchero beta legata all&#39;alfa-2,3-galattosil sialil specifico del recettore di TrkA tirosina chinasi, che &egrave; rapidamente mirato ed idrolizzato dalla sialidasi. Cellule che esprimono TRK e primari dei neuroni corticali dopo stimolazione con fattori di crescita neurotrofici specifici esprimono un&#39;attivit&agrave; sialidasi membrana vigorosa. Inibitori della neuraminidasi, Tamiflu, BCX1812 e BCX1827, bloccare attivit&agrave; sialidasi indotta dal nerve growth factor (NGF) in cellule PC12 TrkA e di brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in neuroni corticali primari. Al contrario, l&#39;inibitore della neuraminidasi, acido 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic, specifico per la membrana del plasma dei gangliosidi Neu3 e sialidases Neu2 non ha alcun effetto inibitorio su pTrkA NGF-indotta. La subunit&agrave; tossina per colera specifico di ganglioside GM1 B applicata a cellule PC12 TrkA non ha alcun effetto inibitorio sull&#39;attivit&agrave; sialidasi NGF-indotta. Escrescenze dei neuriti indotte da PC12-TrkA NGF-trattati e BDNF-trattato PC12(nnr5) stabile transfected con TrkB cellule recettori (TrkB-nnr5) sono significativamente inibito da Tamiflu. I nostri risultati per stabilire una modalit&agrave; di regolazione dell&#39;attivazione del recettore romanzo suo ligando naturale e definiscono una nuova funzione per cellulare sialidases.

Dipendenza di attivazione fattore neurotrophic di recettori della chinasi della tirosina di Trk sul cellulare sialidasi.

&#x5929;&#x7136;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F8C;&#x306B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306F;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3057;desialylates&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x819C;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x5236;&#x5FA1;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CF;&#x4F53;&#x5316;&#x3068;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;TrkA&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x3B1;-2,3  - &#x7D50;&#x5408;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x523A;&#x6FC0;&#x5F8C;&#x306B;TRK-&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x4E00;&#x6B21;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x85AC;&#x3001;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3001;BCX1812&#x3001;&#x3068;BCX1827&#x3001;TrkA&#x306E;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;NGF&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8133;&#x7531;&#x6765;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;BDNF&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x30AC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;NEU3&#x3068;Neu2&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3001;2  - &#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;-2,3  - &#x30C7;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;-N-&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x3001;NGF-&#x8A98;&#x767A;pTrkA&#x306B;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; TrkA&#x306E;&#x3001;PC12&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;GM1&#x30AC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AA;&#x30B7;&#x30C9;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30B3;&#x30EC;&#x30E9;&#x6BD2;&#x7D20;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;B&#x306F;&#x3001;NGF-&#x8A98;&#x767A;&#x6027;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002; NGF-TrkA&#x306E;&#x51E6;&#x7406;-PC12&#x3068;&#x5B89;&#x5B9A;TrkB&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TrkB&#x306E;-nnr5&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;BDNF&#x51E6;&#x7406;PC12&#xFF08;nnr5&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;outgrowths&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5929;&#x7136;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x643A;&#x5E2F;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3067;Trk&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x6804;&#x990A;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;

&#xB2E4;&#xC74C; &#xC790;&#xC5F0; ligand &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; glycosylation &#xC0AC;&#xC774; &#xC9C1;&#xC811; &#xC5F0;&#xACB0;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xB300;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; sialidase &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC1C;&#xACAC; &#xBC0F; desialylates &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; dimerization &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xBA74;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; sialidase&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84;&#xD574; TrkA &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; sialyl &#xBCA0;&#xD0C0; galactosyl &#xC54C;&#xD30C; 2, 3 &#xC5F0;&#xACB0; &#xC124;&#xD0D5; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Trk &#xD45C;&#xD604; &#xC140; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0; &#xC790;&#xADF9; &#xD2B9;&#xC815; &#x79D1; &#xC131;&#xC7A5; &#xC694;&#xC778;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; sialidase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4;. TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB450;&#xB1CC; &#xD30C;&#xC0DD; &#xD55C; neurotrophic &#xC694;&#xC778; (BDNF) &#xAE30;&#xBCF8; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;, BCX1812, &#xBC0F; BCX1827, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (NGF)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#xC0B0;, &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; ganglioside Neu3 &#xBC0F; Neu2 sialidases&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815;&#xC740; NGF &#xC720;&#xB3C4; Ptrka&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xB294; GM1 ganglioside &#xD2B9;&#xC815; &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; TrkA PC12 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; B NGF &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neurite outgrowths TrkA PC12 NGF &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C;&#xC640; BDNF &#xB300;&#xC6B0; PC12(nnr5) &#xC548;&#xC815;&#xC801; TrkB &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TrkB nnr5) &#xC140;&#xACFC; &#xD398;&#xB294; &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC800;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC790;&#xC5F0;&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; sialidases&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD568;&#xC218; &#xC815;&#xC758;.

&#xD734;&#xB300; &#xC804;&#xD654; sialidase&#xC5D0; neurotrophic &#xC694;&#xC778; Trk &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC758;&#xC874; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Una relaci&#xF3;n directa entre la glicosilaci&#xF3;n del receptor y la activaci&#xF3;n despu&#xE9;s de la interacci&#xF3;n ligando natural no se ha observado. Aqu&#xED;, se descubre una membrana de control de sialidasa mecanismo que depende de la uni&#xF3;n del ligando a su receptor para inducir la actividad enzim&#xE1;tica que se dirige y desialylates el receptor y, en consecuencia, provoca la inducci&#xF3;n de la dimerizaci&#xF3;n del receptor y la activaci&#xF3;n. Tambi&#xE9;n identificar un espec&#xED;fico sialil alfa-2 ,3-beta-galactosilo vinculado residuo de az&#xFA;car de receptor TrkA tirosina quinasa, que es r&#xE1;pidamente dirigido y se hidroliza por la sialidasa. Trk-que expresan las c&#xE9;lulas y neuronas corticales primarias tras la estimulaci&#xF3;n con factores neurotr&#xF3;ficos de crecimiento expresar una actividad de la membrana sialidasa vigoroso. Inhibidores de la neuraminidasa, Tamiflu, BCX1812 y BCX1827, bloquear la actividad sialidasa inducida por el factor de crecimiento nervioso (NGF) en las c&#xE9;lulas PC12-TrkA y por el factor neurotr&#xF3;fico derivado del cerebro (BDNF) en la ense&#xF1;anza primaria neuronas corticales. En contraste, el inhibidor de la neuraminidasa, 2-desoxi-2 ,3-deshidro-&#xE1;cido N-acetilneuram&#xED;nico, espec&#xED;fico para la membrana plasm&#xE1;tica gangli&#xF3;sido Neu3 y sialidasas Neu2 no tiene ning&#xFA;n efecto inhibitorio sobre el NGF inducida pTrkA. El gangli&#xF3;sido GM1 espec&#xED;fica toxina del c&#xF3;lera subunidad B se aplica a TrkA-c&#xE9;lulas PC12 no tiene ning&#xFA;n efecto inhibidor sobre la actividad sialidasa inducida por NGF. Excrecencias neuritas inducida por NGF TrkA tratada-PC12 y PC12 tratadas con BDNF (nnr5) transfectadas establemente con los receptores TrkB (TrkB-nnr5) las c&#xE9;lulas se inhibi&#xF3; de Tamiflu. Nuestros resultados establecen un nuevo modo de regulaci&#xF3;n de la activaci&#xF3;n del receptor por su ligando natural y definir una nueva funci&#xF3;n para sialidasas celulares.

Schammim R. Amith

Department of Microbiology and Immunology

Queen's University - Kingston, Ontario

Detection of Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Schammim R. Amith

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Microbiology and Immunology

Queen's University - Kingston, Ontario

Detection of Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Department of Microbiology and Immunology