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Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria coexist. It has ...

Texas A&M University

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&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x3001; &#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x53CA;&#x5432;&#x54DA;&#x5BF9;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; o157: h7 &#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x3001; &#x6B96;&#x6C11;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

During infection in the gastrointestinal tract, enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7 is exposed to a wide range of signaling molecules, including the eukaryotic hormones epinephrine and norepinephrine, and bacterial signal molecules such as indole. Since these signaling molecules have been shown to be involved in the regulation of phenotypes such as motility and virulence that are crucial for EHEC infections, we hypothesized that these molecules also govern the initial recognition of the large intestine environment and attachment to the host cell surface. Here, we report that, compared to indole, epinephrine and norepinephrine exert divergent effects on EHEC chemotaxis, motility, biofilm formation, gene expression, and colonization of HeLa cells. Using a novel two-fluorophore chemotaxis assay, it was found that EHEC is attracted to epinephrine and norepinephrine while it is repelled by indole. In addition, epinephrine and norepinephrine also increased EHEC motility and biofilm formation while indole attenuated these phenotypes. DNA microarray analysis of surface-associated EHEC indicated that epinephrine/norepinephrine up-regulated the expression of genes involved in surface colonization and virulence while exposure to indole decreased their expression. The gene expression data also suggested that autoinducer 2 uptake was repressed upon exposure to epinephrine/norepinephrine but not indole. In vitro adherence experiments confirmed that epinephrine and norepinephrine increased attachment to epithelial cells while indole decreased adherence. Taken together, these results suggest that epinephrine and norepinephrine increase EHEC infection while indole attenuates the process.

Differential effects of epinephrine, norepinephrine, and indole on Escherichia coli O157:H7 chemotaxis, colonization, and gene expression.

Au cours de l&#x26;#39;infection dans le tractus gastro-intestinal, Escherichia coli ent&#xE9;roh&#xE9;morragique (EHEC) O157: H7 est expos&#xE9; &#xE0; un large &#xE9;ventail de mol&#xE9;cules de signalisation, y compris l&#x26;#39;adr&#xE9;naline et la noradr&#xE9;naline eucaryote hormones, et des mol&#xE9;cules de signalisation bact&#xE9;riens tels que l&#x26;#39;indole. &#xC9;tant donn&#xE9; que ces mol&#xE9;cules de signalisation ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; pour &#xEA;tre impliqu&#xE9;e dans la r&#xE9;gulation des ph&#xE9;notypes tels que la motilit&#xE9; et de la virulence qui sont cruciales pour les infections &#xE0; EHEC, nous avons suppos&#xE9; que ces mol&#xE9;cules r&#xE9;gissent &#xE9;galement la comptabilisation initiale de l&#x26;#39;environnement du gros intestin et l&#x26;#39;attachement &#xE0; la surface des cellules h&#xF4;te. Ici, nous d&#xE9;clarons que, par rapport &#xE0; l&#x26;#39;indole, adr&#xE9;naline et la noradr&#xE9;naline exercent des effets divergents sur EHEC chimiotactisme, la motilit&#xE9;, la formation de biofilm, l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes, et la colonisation des cellules HeLa. Utilisation d&#x26;#39;un roman en deux fluorophore essai de chimiotaxie, il a &#xE9;t&#xE9; constat&#xE9; que les EHEC est attir&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;adr&#xE9;naline et la noradr&#xE9;naline alors qu&#x26;#39;il est repouss&#xE9; par l&#x26;#39;indole. En outre, l&#x26;#39;&#xE9;pin&#xE9;phrine et la nor&#xE9;pin&#xE9;phrine a &#xE9;galement augment&#xE9; la motilit&#xE9; EHEC et la formation de biofilm tandis que l&#x26;#39;indole att&#xE9;nu&#xE9;s ces ph&#xE9;notypes. L&#x26;#39;analyse des puces &#xE0; ADN de la surface associ&#xE9;e &#xE0; EHEC a indiqu&#xE9; que l&#x26;#39;&#xE9;pin&#xE9;phrine / nor&#xE9;pin&#xE9;phrine r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans la colonisation et la virulence de surface tandis que l&#x26;#39;exposition en indole diminu&#xE9; leur expression. Les donn&#xE9;es d&#x26;#39;expression g&#xE9;nique a &#xE9;galement sugg&#xE9;r&#xE9; que l&#x26;#39;absorption autoinducteur 2 a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;prim&#xE9;e lors de l&#x26;#39;exposition &#xE0; l&#x26;#39;adr&#xE9;naline / noradr&#xE9;naline, mais pas d&#x26;#39;indole. Exp&#xE9;riences in vitro ont confirm&#xE9; que l&#x26;#39;adh&#xE9;sion adr&#xE9;naline et la noradr&#xE9;naline a augment&#xE9; son attachement aux cellules &#xE9;pith&#xE9;liales tandis indole diminu&#xE9; adh&#xE9;sion. Pris ensemble, ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;adr&#xE9;naline et la noradr&#xE9;naline augmentation EHEC infection pendant l&#x26;#39;indole att&#xE9;nue le processus.

Effets diff&#xE9;rentiels de l&#x26;#39;&#xE9;pin&#xE9;phrine, la nor&#xE9;pin&#xE9;phrine et l&#x26;#39;indole sur Escherichia coli O157: H7 chimiotactisme, la colonisation, et l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique

Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157: H7 ist w&auml;hrend der Infektion im Magen-Darm-Trakt eine Vielzahl von Molek&uuml;len wie der eukaryotischen Hormone Adrenalin und Noradrenalin und bakterielle Signalmolek&uuml;le wie Indol Signalisierung ausgesetzt. Da diese signalisierende Molek&uuml;le erwiesen haben, die Regulierung der Ph&auml;notypen wie Motilit&auml;t und Virulenz beteiligt, die ausschlaggebend f&uuml;r EHEC-Infektionen sind, vermutet wir, dass diese Molek&uuml;le auch die Ersterfassung der Dickdarm Umwelt und Anlage an der Zelloberfl&auml;che Host regieren. Hier berichten wir, dass im Vergleich zu Indol, Epinephrin und Norepinephrin &uuml;ben unterschiedliche Auswirkungen auf EHEC Chemotaxis, Motilit&auml;t, Biofilm-Bildung, Genexpression und Kolonisierung von HeLa-Zellen. Mit einem neuartigen zwei-Fluorophor Chemotaxis Assay, ergab, dass EHEC Epinephrin und Norepinephrin angezogen wird, w&auml;hrend es von Indol abgesto&szlig;en wird. Dar&uuml;ber hinaus erh&ouml;ht Epinephrin und Norepinephrin auch EHEC Motilit&auml;t und Biofilm Formation w&auml;hrend Indol diese Ph&auml;notypen abgeschw&auml;cht. DNA Microarray Analyse der Oberfl&auml;che-assoziierten EHEC erkennen, dass das Adrenalin/Noradrenalin oben-geregelt die Expression von Genen beteiligt Oberfl&auml;che Kolonisation und Virulenz w&auml;hrend Exposition gegen&uuml;ber Indol ihren Ausdruck sank. Die Gen-Ausdruck-Daten auch vorgeschlagen, dass die Autoinducer 2-Aufnahme bei Gef&auml;hrdung durch Adrenalin/Noradrenalin aber nicht Indol unterdr&uuml;ckt wurde. Einhaltung der in-vitro-Experimente best&auml;tigt, dass Adrenalin und Noradrenalin um Verbundenheit mit Epithelzellen, w&auml;hrend das Indol Einhaltung sank. Zusammen genommen zufolge diesen Ergebnissen Epinephrin und Norepinephrin EHEC Infektion erh&ouml;hen, w&auml;hrend Indol den Prozess d&auml;mpft.

Wirkungen von Adrenalin, Noradrenalin und Indol auf Escherichia coli O157: H7, Chemotaxis, Kolonisation und Gen Ausdruck.

Durante l&#39;infezione nel tratto gastrointestinale, enteroemorragica Escherichia coli (EHEC) O157: H7 &egrave; esposta ad una vasta gamma di molecole, tra cui l&#39;eucariotica ormoni epinefrina e norepinefrina e molecole segnale batterica come indolo di segnalazione. Poich&eacute; queste molecole di segnalazione hanno dimostrate di essere coinvolti nella regolazione di fenotipi come motilit&agrave; e virulenza che sono cruciali per le infezioni di EHEC, abbiamo ipotizzato che queste molecole regolano anche il riconoscimento iniziale dell&#39;intestino crasso ambiente e attaccamento alla superficie della cellula ospite. Qui, segnaliamo che, rispetto a indolo, epinefrina e norepinefrina esercitare effetti divergenti sulla chemiotassi EHEC, motilit&agrave;, formazione di biofilm, espressione genica e colonizzazione delle cellule HeLa. Utilizzando un&#39;analisi di chemiotassi romanzo due-fluoroforo, &egrave; stato trovato che EHEC &egrave; attratto da epinefrina e norepinefrina, mentre esso &egrave; respinto da indolo. Inoltre, epinefrina e norepinefrina anche aumentata motilit&agrave; EHEC e formazione di biofilm mentre indolo attenuato questi fenotipi. Analisi microarray del DNA di superficie associato EHEC indicano che adrenalina/noradrenalina up-regolata l&#39;espressione di geni coinvolti nella colonizzazione superficiale e virulenza mentre l&#39;esposizione a indolo diminuito la loro espressione. I dati di espressione genica ha anche suggerirono che assorbimento autoinducer 2 &egrave; stato represso all&#39;esposizione di adrenalina/noradrenalina ma non indolo. Esperimenti in vitro aderenza ha confermato che epinefrina e norepinefrina aumentato attaccamento alle cellule epiteliali mentre indolo diminuita aderenza. Presi insieme, questi risultati suggeriscono che epinefrina e norepinefrina aumentare infezione da EHEC mentre indolo attenua il processo.

Effetti differenziali di epinefrina, norepinefrina e indolo su Escherichia coli O157: H7, chemiotassi, colonizzazione e gene expression.

&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8178;&#x7BA1;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#xFF08;EHEC&#xFF09;O157&#xFF1A;H7&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x516C;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;EHEC&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x306E;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;EHEC&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3001;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;HeLa&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x767A;&#x6563;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3092;2-&#x30D5;&#x30EB;&#x30AA;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A9;&#x30A2;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3058;&#x304B;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;EHEC&#x306F;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x9B45;&#x4E86;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x200B;&#x200B;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3082;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;EHEC&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x66DD;&#x200B;&#x200B;&#x9732;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;EHEC&#x306E;DNA&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;/&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;2&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x304C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;/&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x66DD;&#x9732;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x6291;&#x5236;&#x304C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x305F;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x6E1B;&#x8870;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;EHEC&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

H7&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x3001;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#xFF1A;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;O157&#x306B;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5DEE;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xC704;&#xC7A5; &#xC694;&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; enterohemorrhagic &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; (EHEC) O157:H7 &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;, &#xC9C4; &#xD575; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0; &#xBC0F; &#xB178;&#xB974;, indole &#xB4F1; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; &#xB4F1;&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790; EHEC &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xB3C5;&#xC131; &#xB4F1; &#xACE0;&#xAE30; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB420; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xC774;&#xD6C4; &#xCD08;&#xAE30; &#xC778;&#xC2DD; &#xB300; &#xC7A5; &#xD658;&#xACBD; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;, &#xBCF4;&#xACE0; indole&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0; &#xBC0F; &#xB178;&#xB974; EHEC chemotaxis, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, biofilm &#xD615;&#xC131;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xBC0F; &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xBD84;&#xAE30; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xD718; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124; 2 fluorophore chemotaxis &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, indole&#xB85C; &#xACA9;&#xD1F4; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0; &#xBC0F; &#xB178;&#xB974; EHEC &#xB9E4;&#xB825; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0; &#xBC0F; &#xB178;&#xB974; &#xB610;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; EHEC&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xBC0F; biofilm &#xD615;&#xC131; indole &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACE0;&#xAE30;&#xB97C; &#xAC10;&#xC1E0; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xD45C;&#xBA74; &#xAD00;&#xB828; EHEC&#xC758; DNA microarray &#xBD84;&#xC11D; &#xD53C;/&#xB178;&#xB974; &#xCD5C;&#xB300; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774;&#xD2B8; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xACFC; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xC815;&#xC744; indole&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; autoinducer 2 &#xAE00;&#xADC0;&#xC5D0; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0;/&#xB178;&#xB974; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; indole &#xB178;&#xCD9C; &#xC2DC; &#xC5B5;&#xC555; &#xD588;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC900;&#xC218; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD655;&#xC778; &#xADF8; &#xD53C; norepinephrine indole &#xAC10;&#xC18C; &#xC900;&#xC218; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xBD80;&#xCC29; &#xC99D;&#xAC00;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0; &#xBC0F; &#xB178;&#xB974; &#xC99D;&#xAC00; EHEC &#xAC10;&#xC5FC; indole &#xC57D;&#xD654; &#xACFC;&#xC815; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; O157:H7 chemotaxis, &#xC2DD;&#xBBFC;, &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xD53C; &#xB124; &#xD504; &#xB9B0;, &#xB178;&#xB974;, indole&#xC758; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD6A8;&#xACFC;.

Durante la infecci&#xF3;n en el tracto gastrointestinal, la Escherichia coli enterohemorr&#xE1;gica (ECEH) O157: H7 se expone a una amplia gama de mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, incluyendo las hormonas epinefrina y norepinefrina eucariotas, y las mol&#xE9;culas bacterianas de la se&#xF1;al, tales como indol. Dado que estas mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n se han demostrado estar involucrados en la regulaci&#xF3;n de fenotipos como la motilidad y la virulencia que son cruciales para las infecciones por ECEH, la hip&#xF3;tesis de que estas mol&#xE9;culas tambi&#xE9;n se rigen por el reconocimiento inicial del medio ambiente intestino grueso y el apego a la superficie de la c&#xE9;lula hu&#xE9;sped. En este caso, nos informan de que, en comparaci&#xF3;n con el indol, la epinefrina y la norepinefrina ejercer efectos divergentes sobre la quimiotaxis de ECEH, la movilidad, la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas, expresi&#xF3;n g&#xE9;nica, y la colonizaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas HeLa. Usando un novedoso dos fluor&#xF3;foro ensayo quimiotaxis, se encontr&#xF3; que EHEC es atra&#xED;do a la epinefrina y norepinefrina, mientras que es repelida por indol. Adem&#xE1;s, la epinefrina y la norepinefrina tambi&#xE9;n aumento de la motilidad ECEH y la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas, mientras indol atenuadas estos fenotipos. An&#xE1;lisis de microarrays de ADN asociada a la superficie de EHEC se indica que la adrenalina / noradrenalina regulado hasta la expresi&#xF3;n de genes implicados en la colonizaci&#xF3;n de la superficie y la virulencia, mientras que la exposici&#xF3;n a indol disminuyeron su expresi&#xF3;n. Los datos de expresi&#xF3;n g&#xE9;nica tambi&#xE9;n sugiri&#xF3; que la captaci&#xF3;n de 2 autoinductor fue reprimida con la exposici&#xF3;n a la adrenalina / noradrenalina, pero no indol. En experimentos in vitro la adhesi&#xF3;n confirm&#xF3; que la epinefrina y la norepinefrina mayor apego a las c&#xE9;lulas epiteliales, mientras que indol disminuci&#xF3;n de la adherencia. En conjunto, estos resultados sugieren que la epinefrina y norepinefrina infecci&#xF3;n aumento EHEC mientras indol aten&#xFA;a el proceso.

Efectos diferenciales de la epinefrina, norepinefrina, y Indol en Escherichia coli O157: H7, la quimiotaxis, la colonizaci&#xF3;n y la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica

&#x636E;&#x62A5;&#x5728;&#x5C3C;&#x6CCA;&#x5C14;&#x7259;&#x79D1;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x9AD8;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5728;&#x9A6C;&#x5C3C;&#x5E15;&#x5C14;&#x6559;&#x5B66;&#x533B;&#x9662;&#x3001; &#x535A;&#x514B;&#x62C9;&#x3001; &#x5C3C;&#x6CCA;&#x5C14;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x900F;&#x9732;&#x7684;&#x7259;&#x79D1;&#x836F;&#x54C1;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E2D;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#x3002;&#x5DF2;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x591A;&#x9879;&#x63AA;&#x65BD;&#x4EE5;&#x6539;&#x5584;&#x8BA2;&#x660E;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8FDB;&#x884C;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x8BC4;&#x4F30;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E3E;&#x63AA;&#x5BF9;&#x7259;&#x79D1;&#x95E8;&#x8BCA;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x516D;&#x4E2A;&#x6708;&#x671F;&#x95F4;&#x53C2;&#x52A0;&#x533B;&#x9662;&#x7684;&#x7259;&#x79D1;&#x95E8;&#x8BCA;&#x60A3;&#x8005;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x4FE1;&#x606F;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x5F55;&#x836F;&#x7269;&#x7C7B;&#xFF0C;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x5F00;&#x7684;&#x836F;&#x65B9;&#x3002;&#x836F;&#x54C1;&#x7684;&#x6210;&#x672C;&#x662F;&#x8BA1;&#x7B97;&#x4F7F;&#x7528;&#x95E8;&#x8BCA;&#x836F;&#x623F;&#x4EF7;&#x683C;&#x5217;&#x8868;&#x3002;&#x5904;&#x65B9;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x536B;&#x751F;&#x7EC4;&#x7EC7; / INRUD &#x89C4;&#x5B9A;&#x7684;&#x6307;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8BA2;&#x660E;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x53C2;&#x6570;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x5F97;&#x5230;&#x663E;&#x8457;&#x6539;&#x5584;&#x3002;&#x5E94;&#x52A0;&#x5F3A;&#x6559;&#x80B2;&#x4E3E;&#x63AA;&#x3002;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8003;&#x8651;&#x7BA1;&#x7406;&#x5E72;&#x9884;&#x3002;&#x9700;&#x8981;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#x5728;&#x5C3C;&#x6CCA;&#x5C14;&#x897F;&#x90E8;&#x9AD8;&#x7B49;&#x6559;&#x80B2;&#x62A4;&#x7406;&#x6559;&#x5B66;&#x533B;&#x9662;&#x7684;&#x7259;&#x79D1;&#x95E8;&#x8BCA;&#x836F;&#x7269;&#x5229;&#x7528;&#x683C;&#x5C40;&#x3002;

A high incidence of dental disease has been reported in Nepal. Previous studies, both in the Manipal Teaching Hospital, Pokhara, Nepal, and other centers revealed problems in the use of medicines in dentistry. A number of initiatives to improve prescribing have been carried out. The study presented here was undertaken to assess the impact of these initiatives on drug utilization among dental outpatients. The study was conducted among patients attending the dental outpatient department of the hospital over a six-month period. Demographic details were studied. The drug classes and individual drugs prescribed were recorded. The cost of drugs was calculateS using the outpatient pharmacy price list. The prescriptions were analyzed using the WHO/INRUD prescribing indicators. Anomalies were noted in prescribing. Improvement was noted in certain parameters compared to previous studies. The educational initiatives should be strengthened. Managerial interventions can be considered. Further studies are required.

Drug utilization pattern in dental outpatients in tertiary care teaching hospital in western Nepal.

Une forte incidence de maladies dentaires a &eacute;t&eacute; signal&eacute;e au N&eacute;pal. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures, tant dans l&#39;h&ocirc;pital universitaire de Manipal, Pokhara, N&eacute;pal et autres centres a r&eacute;v&eacute;l&eacute; des probl&egrave;mes dans l&#39;utilisation des m&eacute;dicaments en m&eacute;decine dentaire. Un certain nombre d&#39;initiatives visant &agrave; am&eacute;liorer la prescription ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;. L&#39;&eacute;tude pr&eacute;sent&eacute;e ici a &eacute;t&eacute; entreprise pour &eacute;valuer l&#39;impact de ces initiatives sur l&#39;utilisation des m&eacute;dicaments chez les patients ambulatoires dentaires. L&#39;&eacute;tude a &eacute;t&eacute; men&eacute;e aupr&egrave;s de patients fr&eacute;quentant le service dentaire ambulatoire de l&#39;h&ocirc;pital sur une p&eacute;riode de six mois. D&eacute;tails d&eacute;mographiques ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s. Les classes de m&eacute;dicaments et les m&eacute;dicaments prescrits ont &eacute;t&eacute; enregistr&eacute;s. Le co&ucirc;t des m&eacute;dicaments est calcule &agrave; l&#39;aide de la liste de prix pharmacie ambulatoire. Les prescriptions ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es &agrave; l&#39;aide de l&#39;OMS / INRUD prescrire des indicateurs. Des anomalies ont &eacute;t&eacute; relev&eacute;es dans la prescription. Am&eacute;lioration a &eacute;t&eacute; not&eacute;e dans certains param&egrave;tres par rapport aux &eacute;tudes ant&eacute;rieures. Les initiatives &eacute;ducatives doivent &ecirc;tre renforc&eacute;es. Des interventions de gestionnaires peuvent &ecirc;tre envisag&eacute;es. D&#39;autres &eacute;tudes sont n&eacute;cessaires.

Mod&egrave;le utilisation de drogue en soins dentaires ambulatoires en h&ocirc;pital de soins tertiaires dans l&#39;ouest du N&eacute;pal.

Eine hohe Inzidenz von Zahnerkrankungen wurde in Nepal berichtet. Fr&uuml;here Studien, sowohl in der Manipal Teaching Hospital, Pokhara, Nepal, und anderen Zentren offenbart Probleme bei der Verwendung von Medikamenten in der Zahnmedizin. Eine Reihe von Initiativen zur Verbesserung der Verschreibung wurden durchgef&uuml;hrt. Die hier vorgestellte Studie wurde zur Bewertung der Auswirkungen dieser Initiativen zur Droge Auslastung unter dental ambulant durchgef&uuml;hrt. Die Studie wurde bei Patienten, die Teilnahme an der zahn&auml;rztlichen Poliklinik des Krankenhauses &uuml;ber einen Zeitraum von sechs Monaten durchgef&uuml;hrt. Demografische Informationen wurden untersucht. Die Droge Klassen und individuelle Medikamente wurden aufgezeichnet. Die Kosten f&uuml;r Medikamente wurde berechnet unter Verwendung der ambulanten Apotheke-Preisliste. Die Rezepte wurden analysiert mit die WHO / INRUD Verschreibung von Indikatoren. Anomalien wurden bei Verschreibung festgestellt. Verbesserung wurde bei bestimmten Parametern, die im Vergleich zu fr&uuml;heren Studien festgestellt. Die Bildungsinitiativen sollte gest&auml;rkt werden. Leitende Interventionen k&ouml;nnen betrachtet werden. Weitere Studien sind erforderlich.

Droge Auslastung Muster in dental ambulant in Terti&auml;r-Lehrkrankenhaus in westliche Nepal.

Un&#39;alta incidenza di malattia dentale &egrave; stata segnalata in Nepal. Studi precedenti, entrambi nel Teaching Hospital Manipal, Pokhara, Nepal e altri centri ha rivelato problemi nell&#39;uso di farmaci in odontoiatria. Una serie di iniziative per migliorare la prescrizione &egrave; stata effettuata. Lo studio qui presentato &egrave; stato intrapreso per valutare l&#39;impatto di queste iniziative sull&#39;utilizzo della droga tra i pazienti ambulatoriali odontoiatriche. Lo studio &egrave; stato condotto tra pazienti che frequentano il reparto di odontoiatria ambulatoriale dell&#39;ospedale per un periodo di sei mesi. Dati demografici sono stati studiati. Le classi di droga e i singoli farmaci prescritti sono stati registrati. Il costo dei farmaci &egrave; stato calcolato utilizzando il listino prezzi farmacia ambulatoriale. Le prescrizioni sono state analizzate utilizzando il WHO / INRUD prescrivere gli indicatori. Anomalie sono state notate nella prescrizione. Miglioramento &egrave; stato osservato in determinati parametri rispetto a studi precedenti. Le iniziative educative devono essere rafforzate. Possono essere considerati interventi gestionali. Ulteriori studi sono necessari.

Modello di utilizzo della droga in pazienti ambulatoriali odontoiatriche in cura terziaria teaching hospital nel Nepal occidentale.

&#x6B6F;&#x79D1;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x7387;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x30CD;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x30DE;&#x30CB;&#x30D1;&#x30EB;&#x6559;&#x80B2;&#x75C5;&#x9662;&#x3001;&#x30DD;&#x30AB;&#x30E9;&#x3001;&#x30CD;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3084;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x30BB;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x6B6F;&#x79D1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x85AC;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x554F;&#x984C;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x51E6;&#x65B9;&#x5411;&#x4E0A;&#x3078;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x3092;&#x6B6F;&#x79D1;&#x5916;&#x6765;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x85AC;&#x7269;&#x4F7F;&#x7528;&#x7387;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x9662;&#x306E;&#x6B6F;&#x79D1;&#x5916;&#x6765;&#x90E8;&#x9580;&#x306F; 6 &#x30AB;&#x6708;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x901A;&#x3046;&#x60A3;&#x8005;&#x3055;&#x3093;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7D71;&#x8A08;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x85AC;&#x7269;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3068;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x306E;&#x51E6;&#x65B9;&#x8A18;&#x9332;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x85AC;&#x306E;&#x8CBB;&#x7528;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x5916;&#x6765;&#x85AC;&#x5C40;&#x306E;&#x4FA1;&#x683C;&#x30EA;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3092;&#x8A08;&#x7B97;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x51E6;&#x65B9;&#x7B8B;&#x306F;&#x3001;WHO &#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x884C;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;/&#x6307;&#x6A19;&#x3092;&#x51E6;&#x65B9; INRUD&#x3002;&#x51E6;&#x65B9;&#x3067;&#x7570;&#x5E38;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;.&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6559;&#x80B2;&#x306E;&#x53D6;&#x308A;&#x7D44;&#x307F;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D4C;&#x55B6;&#x4ECB;&#x5165;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x897F;&#x30CD;&#x30D1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x533B;&#x7642;&#x6559;&#x80B2;&#x75C5;&#x9662;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B6F;&#x79D1;&#x5916;&#x6765;&#x3067;&#x306E;&#x85AC;&#x7269;&#x4F7F;&#x7528;&#x7387;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3002;

&#xCE58;&#xACFC; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960;&#xC774; &#xB192;&#xC740; &#xB124;&#xD314;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBAA8;&#xB450; Manipal &#xAD50;&#xC721; &#xBCD1;&#xC6D0;, &#xD3EC;&#xCE74;&#xB77C;, &#xB124;&#xD314; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xC13C;&#xD130;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE58;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC758;&#xC57D;&#xD488;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xCC98;&#xBC29;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xB2C8;&#xC154;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xCE58;&#xACFC; &#xC678;&#xB798; &#xC911; &#xB9C8;&#xC57D; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xB960;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC774;&#xB2C8;&#xC154;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC5D0; &#xCC29;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. 6 &#xAC1C;&#xC6D4; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCE58;&#xACFC; &#xC678;&#xB798;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xD658;&#xC790; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC778;&#xAD6C; &#xD1B5;&#xACC4; &#xD559;&#xC801; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC57D; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4;&#xC640; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC57D;&#xBB3C; &#xCC98;&#xBC29; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC57D;&#xC758; &#xBE44;&#xC6A9;&#xC740; &#xC678;&#xB798; &#xC57D;&#xAD6D; &#xAC00;&#xACA9; &#xBAA9;&#xB85D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCC98;&#xBC29;&#xC804; WHO&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; / INRUD &#xC9C0;&#xD45C;&#xB97C; &#xCC98;&#xBC29; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xC678;&#xB294; &#xCC98;&#xBC29;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xC120; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD2B9;&#xC815; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAD50;&#xC721; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC744; &#xAC15;&#xD654; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xACBD;&#xC601; &#xAC1C;&#xC785;&#xC744; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC11C; &#xBD80; &#xB124;&#xD314;&#xC758; 3 &#xCC28; &#xC758;&#xB8CC; &#xAD50;&#xC721; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCE58;&#xACFC; &#xC678;&#xB798;&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC57D; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xB960; &#xD328;&#xD134;.

Una alta incidencia de enfermedades dentales se ha divulgado en Nepal. Estudios anteriores, tanto en el Hospital Manipal, Pokhara, Nepal y otros centros revelaron problemas en el uso de medicamentos en odontolog&iacute;a. Se ha realizado una serie de iniciativas para mejorar la prescripci&oacute;n. El estudio presentado aqu&iacute; se realiz&oacute; para evaluar el impacto de estas iniciativas en la utilizaci&oacute;n de drogas entre pacientes ambulatorios dentales. El estudio se realiz&oacute; entre pacientes que asistieron al Departamento dental para pacientes ambulatorios del hospital durante un per&iacute;odo de seis meses. Se estudiaron los detalles demogr&aacute;ficos. Se registraron las clases de drogas y los f&aacute;rmacos prescritos. El costo de los medicamentos fue calcula utilizando la lista de precios de farmacia ambulatoria. Las prescripciones se analizaron la OMS / INRUD indicadores de prescripci&oacute;n. Se observaron anomal&iacute;as en la prescripci&oacute;n. La mejora fue observada en ciertos par&aacute;metros en comparaci&oacute;n con estudios previos. Se deben fortalecer las iniciativas educativas. Pueden considerarse intervenciones administrativas. Se requieren estudios adicionales.

Patr&oacute;n de utilizaci&oacute;n de medicamentos en pacientes ambulatorios dentales en el hospital docente de atenci&oacute;n terciaria en Nepal occidental.

&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x4FE1;&#x53F7;&#x57FA;&#x5185;&#x916F;&#x3001; &#x514B;&#x9686;-2 (AI-2) &#x548C;&#x5432;&#x54DA;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x5C31;&#x662F;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD;&#x5432;&#x54DA;&#x548C; AI-2 &#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x5432;&#x54DA;&#x52A0;&#x6CD5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5728; 30 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6; (186 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09; &#x6BD4;&#x5728; 37 &#x5EA6; C &#xFF08;59 &#x57FA;&#x56E0;)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5432;&#x54DA;&#x51CF;&#x5C11;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86; &#xFF08;&#x800C;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x751F;&#x957F;&#xFF09; &#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x5728; 25 &#x81F3; 30 &#x5EA6; C &#x6BD4;&#x5728; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x548C;&#x6548;&#x679C;&#x662F;&#x4E0E;&#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; SdiA &#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x5432;&#x54DA;&#x5728; 30 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x7684;&#x52A0;&#x6CD5;&#x76F8;&#x6BD4;&#x6700;&#x663E;&#x8457;&#x7684;&#x538B;&#x6291;&#x7684; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x57FA;&#x56E0;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5C3F;&#x82F7;&#x78F7;&#x9178; (&#x57CE;&#x5E02;) &#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210; &#xFF08;carAB&#x3001; pyrLBI&#x3001; pyrC&#x3001; pyrD&#x3001; pyrF &#x548C; upp&#xFF09; &#x548C;&#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x8FD0;&#x8F93; &#xFF08;&#x79CD;&#x7C7B;&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C3F;&#x5627;&#x5576;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x5728; 30 &#x5EA6; C SdiA&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x786E;&#x8BA4; SdiA &#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x5432;&#x54DA;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5432;&#x54DA;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x97AD;&#x6BDB;&#x76F8;&#x5173; qseB&#x3001; flhD &#x548C; fliA &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001; &#x589E;&#x5F3A;&#x6297;&#x751F;&#x7D20;&#x8010;&#x836F;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x5728; 30 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;&#x5432;&#x54DA;&#x548C; SdiA&#xFF0C;&#x53E6;&#x5916;&#x7684; (S)-4&#xFF0C;5-&#x4E8C;&#x7F9F;&#x57FA;-2&#xFF0C;3-&#x620A;&#x4E8C;&#x916E; (AI 2 &#x524D;&#x4F53;&#xFF09; &#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6; &#xFF08;63 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09; &#x6BD4;&#x5728; 30 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6; &#xFF08;11 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF09;&#xFF0C;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C; AI 2 &#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x9547;&#x538B;&#x4EBA;&#x6C11;&#x8FD0;&#x52A8;&#x8054;&#x76DF;&#x5408;&#x6210;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6; &#xFF08;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5728; 30 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#xFF09;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0; AI 2 &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; o157: h7 &#x5728;&#x6444;&#x6C0F; 37 &#x5EA6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x80FD;&#x5728; 30 &#x5EA6; C.&#x56E0;&#x6B64;&#x6BD2;&#x529B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x5F55;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9020;&#x6210;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x548C;&#x5432;&#x54DA;&#x548C; AI-2 &#x57FA;&#x4E8E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4EA4;&#x7EC7;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#x3002;

&#x5432;&#x54DA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;

We have shown that the quorum-sensing signals acylhomoserine lactones, autoinducer-2 (AI-2) and indole influence the biofilm formation of Escherichia coli. Here, we investigate how the environment, that is, temperature, affects indole and AI-2 signaling in E. coli. We show in biofilms that indole addition leads to more extensive differential gene expression at 30 degrees C (186 genes) than at 37 degrees C (59 genes), that indole reduces biofilm formation (without affecting growth) more significantly at 25 and 30 degrees C than at 37 degrees C and that the effect is associated with the quorum-sensing protein SdiA. The addition of indole at 30 degrees C compared to 37 degrees C most significantly repressed genes involved in uridine monophosphate (UMP) biosynthesis (carAB, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF and upp) and uracil transport (uraA). These uracil-related genes are also repressed at 30 degrees C by SdiA, which confirms SdiA is involved in indole signaling. Also, compared to 37 degrees C, indole more significantly decreased flagella-related qseB, flhD and fliA promoter activity, enhanced antibiotic resistance and inhibited cell division at 30 degrees C. In contrast to indole and SdiA, the addition of (S)-4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione (the AI-2 precursor) leads to more extensive differential gene expression at 37 degrees C (63 genes) than at 30 degrees C (11 genes), and, rather than repressing UMP synthesis genes, AI-2 induces them at 37 degrees C (but not at 30 degrees C). Also, the addition of AI-2 induces the transcription of virulence genes in enterohemorrhagic E. coli O157:H7 at 37 degrees C but not at 30 degrees C. Hence, cell signals cause diverse responses at different temperatures, and indole- and AI-2-based signaling are intertwined.

Indole cell signaling occurs primarily at low temperatures in Escherichia coli.

Nous avons montr&#xE9; que les signaux quorum-sensing acylhomos&#xE9;rine lactones, autoinducteur-2 (AI-2) et l&#x26;#39;indole influencer la formation du biofilm d&#x26;#39;Escherichia coli. Ici, nous examinons comment l&#x26;#39;environnement, qui est, la temp&#xE9;rature, affecte de signalisation indole et AI-2 dans E. coli. Nous montrons dans les biofilms que l&#x26;#39;addition d&#x26;#39;indole conduit &#xE0; l&#x26;#39;expression diff&#xE9;rentielle de g&#xE8;nes plus large &#xE0; 30 degr&#xE9;s C (186 g&#xE8;nes) que &#xE0; 37 &#xB0; C (59 g&#xE8;nes), que l&#x26;#39;indole r&#xE9;duit la formation de biofilm (sans affecter la croissance) de fa&#xE7;on plus significative &#xE0; 25 et 30 degr&#xE9;s Celsius qu&#x26;#39;&#xE0; 37 degr&#xE9;s C et que l&#x26;#39;effet est associ&#xE9; &#xE0; la prot&#xE9;ine de SDIA quorum-sensing. L&#x26;#39;ajout de l&#x26;#39;indole &#xE0; 30 degr&#xE9;s C par rapport &#xE0; 37 degr&#xE9;s C la plupart des g&#xE8;nes r&#xE9;prim&#xE9;s de mani&#xE8;re significative impliqu&#xE9;s dans uridine monophosphate (UMP) biosynth&#xE8;se (CCRAC, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF et upp) et le transport uracile (AACU). Ces g&#xE8;nes uracile-connexes sont &#xE9;galement r&#xE9;prim&#xE9;s &#xE0; 30 degr&#xE9;s C par SDIA, qui confirme SDIA est impliqu&#xE9; dans la signalisation indoliques. &#xC9;galement, par rapport &#xE0; 37 degr&#xE9;s C, de l&#x26;#39;indole plus significativement diminu&#xE9; flagelles li&#xE9;e qseB, flhD et une activit&#xE9; de promoteur FLIA, une r&#xE9;sistance accrue aux antibiotiques et la division cellulaire inhib&#xE9;e &#xE0; 30 degr&#xE9;s C. Dans la diff&#xE9;rence de l&#x26;#39;indole et SDIA, l&#x26;#39;addition de (S) -4 ,5-dihydroxy-2 ,3-pentanedione (le pr&#xE9;curseur AI-2) conduit &#xE0; l&#x26;#39;expression diff&#xE9;rentielle de g&#xE8;nes plus large &#xE0; 37 degr&#xE9;s C (63 g&#xE8;nes) que moins 30 degr&#xE9;s C (11 g&#xE8;nes), et, plut&#xF4;t que la r&#xE9;pression des g&#xE8;nes de synth&#xE8;se UMP , AI-2 induit les moins 37 degr&#xE9;s C (mais pas &#xE0; 30 degr&#xE9;s C). En outre, l&#x26;#39;ajout de l&#x26;#39;IA-2 induit la transcription des g&#xE8;nes de virulence dans ent&#xE9;roh&#xE9;morragique E. coli O157: H7 &#xE0; 37 degr&#xE9;s C mais pas &#xE0; 30 degr&#xE9;s C. Par cons&#xE9;quent, les signaux cellulaires provoquer des r&#xE9;actions diverses &#xE0; des temp&#xE9;ratures diff&#xE9;rentes, et de l&#x26;#39;indole-et-AI 2-base de signalisation sont intimement li&#xE9;s.

Signalisation cellulaire indole se produit principalement &#xE0; basse temp&#xE9;rature dans Escherichia coli

Wir haben gezeigt, dass die Quorum-sensing-Signale Acylhomoserine Lactone, Autoinducer-2 (AI-2) und Indol beeinflussen die Biofilm-Bildung von Escherichia coli. Hier untersuchen wir, wie die Umwelt, d. h. Temperatur, Indol und AI-2 signalisieren in E. Coli auswirkt. Wir zeigen in Biofilmen, dass Indol-Zusatz zu umfangreicher differenzielle Genexpression bei 30 Grad C (186-Gen) f&uuml;hrt bei 37 Grad C (59-Gen), das Indol Biofilm-Bildung vermindert also (ohne Wachstum) deutlich st&auml;rker bei 25 und 30 Grad C als bei 37 Grad C und die Wirkung der Quorum-sensing Protein SdiA zugeordnet ist. Der Zusatz von Indol bei 30 Grad C im Vergleich zu 37 Grad C erheblich unterdr&uuml;ckt Gene Uridin Monophosphat (UMP) Biosynthese (CarAB, PyrLBI, PyrC, PyrD, PyrF und Upp) und Uracil-Transport (UraA) beteiligt. Diese Uracil-bezogenen Gene sind auch bei 30 Grad C von SdiA, unterdr&uuml;ckt, die best&auml;tigt, dass Indol Signalisierung SdiA beteiligt ist. Auch im Vergleich zu 37 Grad C, Indol deutlich st&auml;rker gesunken Flagellen-bezogene QseB, FlhD und FliA-Promotor-Aktivit&auml;t, verbessert Antibiotikaresistenz und gehemmt Zellteilung bei 30 Grad C. Im Gegensatz zu Indol und SdiA, der Zusatz von (S) - 4,5 - Dihydroxy-2,3-Pentanedione (AI-2-Vorl&auml;ufer) f&uuml;hrt zu umfangreicher differenzielle Genexpression bei 37 Grad C (63-Gen) als bei 30 Grad C (11-Gen) und, statt zu unterdr&uuml;cken die UMP-Synthese-Gene, AI-2 induziert sie bei 37 Grad C (aber nicht bei 30 Grad C). Auch der Zusatz von AI-2 induziert die Transkription von Virulenzgene in Enterohemorrhagic E. Coli O157: H7 bei 37 Grad C, aber nicht bei 30 Grad C. also Zelle Signale verursachen unterschiedliche Reaktionen bei unterschiedlichen Temperaturen und Indol und AI-2-basierte Signalisierung sind miteinander verflochten.

Indol Zelle Signalisierung tritt vor allem bei niedrigen Temperaturen in Escherichia coli.

Abbiamo dimostrato che il quorum sensing segnali lattoni acylhomoserine, autoinducer-2 (IA-2) e indolo influenza la formazione di biofilm di Escherichia coli. Qui, indaghiamo su come l&#39;ambiente, cio&egrave;, temperatura, colpisce indolo e IA-2 segnalazione in e. coli. Vi mostriamo in biofilm che aggiunta indolo conduce alla pi&ugrave; ampio espressione genica differenziale a 30 gradi C (186 geni) rispetto a 37 gradi C (59 geni), indolo che riduce la formazione di biofilm (senza intaccare la crescita) pi&ugrave; significativamente a 25 e 30 gradi C rispetto a 37 gradi C e che l&#39;effetto &egrave; associato con la proteina quorum sensing SdiA. L&#39;aggiunta di indolo a 30 gradi C rispetto a 37 gradi C pi&ugrave; significativamente represso geni coinvolti nella biosintesi di Uridina monofosfato (UMP) (carri, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF e upp) e trasporto uracile (uraA). Questi geni correlati a uracile sono repressi anche a 30 gradi C da SdiA, che conferma che SDIa &egrave; coinvolto nella segnalazione dell&#39;indolo. Inoltre, rispetto ai 37 gradi C, indolo pi&ugrave; significativamente diminuito flagelli-qseB, flhD e fliA promotore attivit&agrave; connesse, migliorata resistenza agli antibiotici e inibisce la divisione cellulare a 30 gradi C. A differenza dell&#39;indolo e SdiA, l&#39;aggiunta di (S) - 4,5 - diidrossi-2,3-pentanedione (il precursore di IA-2) conduce alla pi&ugrave; ampio espressione genica differenziale a 37 gradi C (63 geni) rispetto a 30 gradi C (11 geni), e, invece di reprimere i geni di sintesi UMP, IA-2 li induce a 37 gradi C (ma non a 30 gradi C). Inoltre, l&#39;aggiunta di IA-2 induce la trascrizione dei geni di virulenza in enteroemorragica e. coli O157: H7 a 37 gradi C, ma non a 30 gradi C. quindi, segnali cellulari causano diverse risposte a diverse temperature e indolo - e AI-2-base di segnalazione si intrecciano.

Indolo segnalazione cellulare si verifica principalmente alle basse temperature in Escherichia coli.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30F3;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;2&#xFF08;AI-2&#xFF09;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;acylhomoserine&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5185;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;AI-2&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x304B;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;25&#x3068;30&#xB0;C&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#xFF08;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305A;&#x306B;&#xFF09;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;37&#x5EA6;C&#xFF08;59&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x3088;&#x308A;&#x3082;30&#xB0;C&#xFF08;186&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x3067;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5DEE;&#x52D5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306B;&#x8868;&#x793A;37&#x5EA6;C&#x3068;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;SDIA&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3002; 30&#x2103;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x4E00;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;UMP&#xFF09;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#xFF08;carAB&#x3001;pyrLBI&#x3001;pyrC&#x3001;pyrD&#x3001;pyrF&#x3068;UPP&#xFF09;&#x3068;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB;&#x8F38;&#x9001;&#xFF08;uraA&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;37&#x5EA6;C&#x306B;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A6;&#x30E9;&#x30B7;&#x30EB;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;SDIA&#x304C;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;SDIA&#x3001;30&#x2103;&#x3067;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;37&#x2103;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x97AD;&#x6BDB;&#x95A2;&#x9023;qseB&#x3001;fl&#x200B;&#x200B;hD&#x3068;fliA&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x751F;&#x7269;&#x8CEA;&#x8010;&#x6027;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;SDIA&#x3001;&#xFF08;S&#xFF09;-4&#x306E;&#x4ED8;&#x52A0;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;30&#x2103;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;-3,5  - &#x30B8;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;-2,3  - &#x30B8;&#x30AA;&#x30F3;&#xFF08;AI-2&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#xFF09;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;UMP&#x5408;&#x6210;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3001;30&#xB0;C&#xFF08;11&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x306B;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;37&#x2103;&#xFF08;63&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x5DEE;&#x52D5;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x3001; &#x3001;AI-2&#x306F;37&#x2103;&#xFF08;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;30&#xB0;C&#x6642;&#xFF09;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;AI-2&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x8178;&#x7BA1;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;O157&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8A98;&#x5C0E;&#xFF1A;37&#x2103;&#x3067;&#x306E;H7&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;30&#x2103;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;AI- 2&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x7D61;&#x307F;&#x5408;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x4F4E;&#x6E29;&#x6642;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xC2E0;&#xD638; acylhomoserine lactones, autoinducer-2 (AI-2), indole &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC870;&#xC0AC; &#xD658;&#xACBD;, &#xC989; &#xC628;&#xB3C4;, indole &#xBC0F; AI-2 &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; indole &#xCD94;&#xAC00; &#xB9AC;&#xB4DC; 30&#xB3C4; C (186 &#xC720;&#xC804;&#xC790;)&#xC5D0; &#xB354; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; 37&#xB3C4; c (59 &#xC720;&#xC804;&#xC790;), &#xADF8; indole (&#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294;) &#xC5C6;&#xC774; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xAC10;&#xC18C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD06C;&#xAC8C; 25&#xACFC; 30&#xB3C4; C &#xBCF4;&#xB2E4; 37&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C;&#xC640; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD00;&#xB828; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; SdiA biofilms&#xC5D0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. 30&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; indole &#xCD94;&#xAC00; 37 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC5B5;&#xC555; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (carAB, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF &#xBC0F; upp) uridine monophosphate (UMP) &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xBC0F; uracil &#xC804;&#xC1A1; (uraA)&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBE44;&#xAD50;. Uracil &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; SdiA SdiA indole &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD655;&#xC778; &#xD558; &#xC5EC; 30&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B5;&#xC555; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, 37&#xB3C4; C&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; indole &#xB354; &#xD06C;&#xAC8C; flagella &#xAD00;&#xB828; qseB, flhD &#xBC0F; fliA &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xAC10;&#xC18C;, &#xD56D;&#xC0DD;&#xC81C; &#xB0B4;&#xC131; &#xAC15;&#xD654; &#xBC0F; 30&#xB3C4; c &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC800;&#xD574; &#xB2EC;&#xB9AC; indole&#xC640; SdiA, (S)-4, 5-dihydroxy &#xCD94;&#xAC00;-2, 3-pentanedione (AI 2 &#xC804;&#xC870;) &#xB9AC;&#xB4DC; 37 &#xC12D;&#xC528; (63 &#xC720;&#xC804;&#xC790;) &#xBCF4;&#xB2E4; 30&#xB3C4; c (11 &#xC720;&#xC804;&#xC790;)&#xC5D0; &#xB354; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC9C4; &#xC2DD; &#xACE0;, UMP &#xD569;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC555; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC2E0; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xC720;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB4E4; 37 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4; (&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; 30 &#xC12D;&#xC528; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C;). &#xB610;&#xD55C;, AI 2 &#xCD94;&#xAC00; enterohemorrhagic 37&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; 30&#xB3C4; c. &#xADF8;&#xB7EC;&#xBBC0;&#xB85C;&#xC5D0; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; o157:h7&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xB2E4;&#xB978; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xC88C;&#xC6B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2E0;&#xD638; indole &#xBC0F; AI-2 &#xAE30;&#xBC18;.

Indole &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E0;&#xD638; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos demostrado que las se&#xF1;ales de detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum acylhomoserine lactonas, autoinductor-2 (IA-2) e indol influir en la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas de E. coli. En este sentido, investigar c&#xF3;mo el medio ambiente, es decir, temperatura, afecta a la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de indol y AI 2-en E. coli. Se demuestra en las biopel&#xED;culas que la adici&#xF3;n de indol conduce a la expresi&#xF3;n diferencial de genes m&#xE1;s amplia a 30 grados C (186 genes), que a 37 grados C (59 genes), que reduce la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas indol (sin afectar el crecimiento) es m&#xE1;s significativo a los 25 y 30 grados C que a 37 grados C y que el efecto est&#xE1; asociado con la prote&#xED;na SDIA qu&#xF3;rum de detecci&#xF3;n. La adici&#xF3;n de indol a 30 &#xBA; C en comparaci&#xF3;n con 37 &#xB0; C grados mayor&#xED;a de los genes reprimidos significativamente involucrados en uridina monofosfato (UMP), la bios&#xED;ntesis (carAB, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF y UPP) y el transporte uracilo (URAA). Estos genes relacionados con uracilo-que tambi&#xE9;n est&#xE1;n reprimidas a 30 &#xBA; C por SDIA, lo que confirma SDIA est&#xE1; implicado en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de indol. Adem&#xE1;s, en comparaci&#xF3;n con 37 grados C, indol m&#xE1;s disminuy&#xF3; significativamente flagelos relacionada qseB, flhD y actividad flia promotor, resistencia a los antibi&#xF3;ticos mejorada e inhibi&#xF3; la divisi&#xF3;n celular a 30 grados C. En contraste con indol y SDIA, la adici&#xF3;n de (S) -4 ,5-dihidroxi-2 ,3-pentanodiona (el precursor de AI-2) conduce a la expresi&#xF3;n diferencial de genes m&#xE1;s amplia a 37 grados C (63 genes) que a 30 grados C (11 genes), y, en lugar de reprimir los genes de s&#xED;ntesis UMP , AI-2 que induce a 37 grados C (pero no a 30 &#xBA; C). Adem&#xE1;s, la adici&#xF3;n de AI-2 induce la transcripci&#xF3;n de genes de virulencia en E. coli enterohemorr&#xE1;gica O157: H7 a 37 grados C, pero no a 30 &#xBA; C. Por lo tanto, las se&#xF1;ales de celulares causan diferentes respuestas a diferentes temperaturas, y AI-indol-y 2-basado en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n est&#xE1;n entrelazados.

Se&#xF1;alizaci&#xF3;n Celular indol se produce principalmente a bajas temperaturas en Escherichia coli

&#x6709;&#x4EBA;&#x63D0;&#x8BAE;&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x7684;&#x542B;&#x91CF;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80A0;&#x6E90;&#x6027;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x94DC;&#x7EFF;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x589E;&#x52A0;&#x7EFF;&#x8113; PA14 &#x589E;&#x957F;&#x3001; &#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x3001; &#x5C0F;&#x8D29;&#x4E8B;&#x52A1;&#x961F; 8 &#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6E38;&#x6CF3;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#xFF0C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x3002;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; 500 microM&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709; 50 microM&#xFF0C;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x4E3A; 7 h &#x7EFF;&#x8113;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x56E0;&#x7D20; pyocyanin&#x3001; &#x5F39;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x548C;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x55B9;&#x8BFA;&#x916E;&#x7C7B;&#x4FE1;&#x53F7; (PQS&#xFF0C;2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) &#x8C03;&#x8282;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x83CC;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x7EFF;&#x8113;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x56E0;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20; microM 500 &#x60AC;&#x6D6E;&#x57F9;&#x517B;&#x4F46;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x534A;&#x56FA;&#x6001;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;500 MicroM &#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x66DD;&#x5149;&#x540E;&#x4E5F;&#x51CF;&#x5C11;&#x8FD0;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x83CC;&#xFF0C;&#x76F4;&#x63A5;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x6700;&#x540E;&#x4E00;&#x9875;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F; rhlR &#x7684;&#x589E;&#x52A0;&#x548C;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; PQS &#x589E;&#x52A0;&#x8868;&#x660E;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E3B;&#x8981;&#x901A;&#x8FC7;&#x963F;&#x76DF;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EF2;&#x88C1;&#x9065;&#x611F;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x5F3A;&#x70C8;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x7684;&#x7EFF;&#x8113; PA14 &#x80A0;&#x6E90;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x6FC0;&#x7D20;&#x53BB;&#x7532;&#x80BE;&#x4E0A;&#x817A;&#x7D20;&#x589E;&#x52A0;&#x5047;&#x5355;&#x80DE;&#x83CC;&#x94DC;&#x7EFF; PA14 &#x6BD2;&#x529B;&#x901A;&#x8FC7;&#x963F;&#x62C9;&#x4F2F;&#x56FD;&#x5BB6;&#x8054;&#x76DF;-&#x611F;&#x5E94;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#x3002;

It has been proposed that the gastrointestinal tract environment containing high levels of neuroendocrine hormones is important for gut-derived Pseudomonas aeruginosa infections. In this study, we report that the hormone norepinephrine increases P. aeruginosa PA14 growth, virulence factor production, invasion of HCT-8 epithelial cells, and swimming motility in a concentration-dependent manner. Transcriptome analysis of P. aeruginosa exposed to 500 microM, but not 50 microM, norepinephrine for 7 h showed that genes involved in the regulation of the virulence determinants pyocyanin, elastase, and the Pseudomonas quinolone signal (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) were upregulated. The production of rhamnolipids, which are also important in P. aeruginosa infections, was not significantly altered in suspension cultures upon exposure to 500 microM norepinephrine but decreased on semisolid surfaces. Swarming motility, a phenotype that is directly influenced by rhamnolipids, was also decreased upon 500 microM norepinephrine exposure. The increase in the transcriptional activation of lasR but not that of rhlR and the increase in the levels of PQS suggest that the effects of norepinephrine are mediated primarily through the las quorum-sensing pathway. Together, our data strongly suggest that norepinephrine can play an important role in gut-derived infections by increasing the pathogenicity of P. aeruginosa PA14.

The neuroendocrine hormone norepinephrine increases Pseudomonas aeruginosa PA14 virulence through the las quorum-sensing pathway.

Il a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; que l&#x26;#39;environnement tractus gastro-intestinal contenant des niveaux &#xE9;lev&#xE9;s d&#x26;#39;hormones neuroendocrines est important pour l&#x26;#39;intestin d&#xE9;riv&#xE9;s infections &#xE0; Pseudomonas aeruginosa. Dans cette &#xE9;tude, nous rapportons que la noradr&#xE9;naline hormone augmente P. aeruginosa PA14 la croissance, la production de facteurs de virulence, l&#x26;#39;invasion de l&#x26;#39;HCT-8 cellules &#xE9;pith&#xE9;liales, et la motilit&#xE9; de nager dans une mani&#xE8;re d&#xE9;pendante de la concentration. L&#x26;#39;analyse du transcriptome de P. aeruginosa expos&#xE9;s &#xE0; 500 microM, mais pas 50 microM, la noradr&#xE9;naline pour 7 h montr&#xE9; que les g&#xE8;nes impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de la virulence facteurs d&#xE9;terminants de la pyocyanine, l&#x26;#39;&#xE9;lastase, et le Pseudomonas quinolone signal (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy -4-quinolone) ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;gul&#xE9;s &#xE0; la hausse. La production de rhamnolipides, qui sont aussi important dans les infections &#xE0; P. aeruginosa, n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; sensiblement modifi&#xE9; dans les cultures de suspension lors de l&#x26;#39;exposition &#xE0; 500 microM noradr&#xE9;naline, mais a diminu&#xE9; sur les surfaces semi-solides. Motilit&#xE9; essaimage, un ph&#xE9;notype qui est directement influenc&#xE9;e par rhamnolipides, a &#xE9;galement diminu&#xE9; sur 500 l&#x26;#39;exposition noradr&#xE9;naline microM. L&#x26;#39;augmentation de l&#x26;#39;activation transcriptionnelle de LASR mais pas celle de RHLR et l&#x26;#39;augmentation des niveaux de PQS sugg&#xE8;rent que les effets de la noradr&#xE9;naline sont m&#xE9;di&#xE9;s principalement par le biais du las quorum-sensing voie. Ensemble, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent fortement que la noradr&#xE9;naline peut jouer un r&#xF4;le important dans l&#x26;#39;intestin d&#xE9;riv&#xE9;s infections en augmentant la pathog&#xE9;nicit&#xE9; de P. aeruginosa PA14.

Le hormone appel&#xE9;e noradr&#xE9;naline neuroendocrine Augmente Pseudomonas aeruginosa PA14 virulence Gr&#xE2;ce &#xE0; la Las Quorum-sensing Pathway

Es wurde vorgeschlagen, dass die Magen-Darm-Trakt-Umgebung mit hohen gehalten an neuroendokrine Hormone f&uuml;r Darm-abgeleitet von Pseudomonas Aeruginosa-Infektionen wichtig. In dieser Studie berichten wir, dass das Hormon Noradrenalin p. Aeruginosa PA14 Wachstum, Virulenz Faktor Produktion, Invasion der HCT-8 Epithelzellen und Schwimmen Motilit&auml;t Konzentration-abh&auml;ngigen Weise erh&ouml;ht. Transkriptom-Analyse von p. Aeruginosa ausgesetzt 500 MicroM, aber nicht 50 MicroM Noradrenalin f&uuml;r 7H zeigte, dass Genen, die in der Verordnung die Virulenz Determinanten Pyocyanin, Elastase und Pseudomonas Quinolone Signal (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) herraufreguliert. Die Produktion von Rhamnolipids, die auch bei p. Aeruginosa-Infektionen wichtig sind, war nicht signifikant ge&auml;ndert Suspensionskulturen nach Exposition gegen&uuml;ber 500 MicroM Noradrenalin doch sank auf halbfeste Oberfl&auml;chen. Ausschw&auml;rmen Motilit&auml;t, einem Ph&auml;notyp, die direkt von Rhamnolipids, beeinflusst ist wurde auch auf 500 MicroM Noradrenalin Belichtung verringert. Die Erh&ouml;hung in der transcriptional Aktivierung LasR aber nicht, dass der RhlR und in den Ebenen der PQS legen nahe, dass die Wirkung von Noradrenalin vermittelt werden, vor allem durch die Las Quorum-sensing Weg. Unsere Daten empfehle zusammen, dass Noradrenalin eine wichtige Rolle im Darm abgeleitete Infektionen spielen kann, durch die Erh&ouml;hung der Pathogenit&auml;t von p. Aeruginosa PA14.

Die neuroendokrine Hormon Noradrenalin erh&ouml;ht Pseudomonas Aeruginosa PA14 Virulenz durch die Las Quorum-sensing Weg.

&Egrave; stato proposto che l&#39;ambiente gastrointestinale contenenti alti livelli di ormoni neuroendocrini &egrave; importante gut-derivati infezioni di Pseudomonas aeruginosa. In questo studio, si segnala che la noradrenalina ormone aumenta la crescita di p. aeruginosa PA14, produzione di fattore di virulenza, invasione delle cellule epiteliali HCT-8 e la motilit&agrave; del nuoto in modo concentrazione-dipendente. Transcriptome analisi di p. aeruginosa esposto a noradrenalina microM, ma non 50 microM, 500 per 7 h ha dimostrato che i geni coinvolti nella regolazione della piocianina determinanti di virulenza, elastasi e il segnale di chinolonici Pseudomonas (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) erano sovraregolati. La produzione di rhamnolipids, che sono anche importanti nelle infezioni da p. aeruginosa, era non significativamente alterata nelle culture di sospensione dopo l&#39;esposizione a 500 microM noradrenalina ma diminuita su superfici semisolidi. Sciamare motilit&agrave;, un fenotipo che &egrave; direttamente influenzato dalla rhamnolipids, era diminuito anche all&#39;esposizione di noradrenalina microM 500. Aumentare l&#39;attivazione trascrizionale di ieri, ma non quella di rhlR e l&#39;aumento dei livelli di PQS suggeriscono che gli effetti della noradrenalina sono mediati principalmente attraverso il las pathway quorum sensing. Insieme, i nostri dati suggeriscono fortemente che noradrenalina pu&ograve; giocare un ruolo importante nelle infezioni gut-derivati aumentando la patogenicit&agrave; di p. aeruginosa PA14.

La noradrenalina ormone neuroendocrino aumenta la virulenza di Pseudomonas aeruginosa PA14 attraverso il las pathway quorum sensing.

&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x74B0;&#x5883;&#x306F;&#x8178;&#x7531;&#x6765;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;PA14&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x3001;HCT-8&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x3001;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x6C34;&#x6CF3;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306F;&#x3001;500&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x200B;&#x200B;&#x308C;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;50&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x3001;7&#x6642;&#x9593;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30D4;&#x30AA;&#x30B7;&#x30A2;&#x30CB;&#x30F3;&#x3001;&#x30A8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;Pseudomonas&#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF08;PQS&#x3001;2  - &#x30D8;&#x30D7;&#x30C1;&#x30EB;-3  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;-4  - &#x30AD;&#x30CE;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF09;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306B;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30E9;&#x30E0;&#x30CE;&#x30EA;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;500&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x66DD;&#x9732;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x61F8;&#x6FC1;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x534A;&#x56FA;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7FA4;&#x304C;&#x3063;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x30E9;&#x30E0;&#x30CE;&#x30EA;&#x30D4;&#x30C3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;500&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; rhlR&#x3068;PQS&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;lasR&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x30E9;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AC;&#x30B9;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E3B;&#x306B;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x5F37;&#x304F;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;PA14&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8178;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30EB;&#x30A8;&#x30D4;&#x30CD;&#x30D5;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30E9;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AC;&#x30B9;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x7DD1;&#x81BF;&#x83CC;PA14&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;

&#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; neuroendocrine &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC704;&#xC7A5; &#xAE30;&#xAD00; &#xD658;&#xACBD; &#xCC3D; &#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB179; &#xB18D; &#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; norepinephrine P. &#xB18D; PA14 &#xADE0; &#xC131;&#xC7A5;, &#xB3C5;&#xC131; &#xC694;&#xC778; &#xC0DD;&#xC0B0;, HCT 8 &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218;&#xC601;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xCE68;&#xACF5; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0;. P. &#xB18D; &#xADE0; 500 microM, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; 50 microM norepinephrine 7 h&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; Transcriptome &#xBD84;&#xC11D; &#xADF8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3C5;&#xC131; &#xACB0;&#xC815; &#xC694;&#xC778; pyocyanin, elastase, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB179; quinolone &#xC2E0;&#xD638; (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone)&#xC758; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; upregulated&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xB2E4;. P. &#xB18D; &#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740; rhamnolipids&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; 500 microM &#xB178;&#xB974;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xC2DC; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC9C0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; semisolid &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C;. &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, rhamnolipids&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xC744; &#xCE58;&#xACE0; 500 microM norepinephrine &#xB178;&#xCD9C; &#xC2DC; &#xB610;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. LasR transcriptional &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Rhlr&#xC758; &#xADF8;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; PQS &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; norepinephrine&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB77C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xD1B5;&#xB85C;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB178;&#xB974; P. &#xB18D; &#xADE0; PA14 pathogenicity &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xCC3D; &#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD560; &#xC218;&#xB294; &#xC81C;&#xC548;.

Neuroendocrine &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; norepinephrine &#xC99D;&#xAC00; &#xB77C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB179; &#xB18D; &#xADE0; PA14 &#xB3C5;&#xC131; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xD1B5;&#xB85C;.

Se ha propuesto que el medio ambiente del tracto gastrointestinal que contiene altos niveles de hormonas neuroendocrinas es importante para tripa derivados de infecciones por Pseudomonas aeruginosa. En este estudio, mostramos que la hormona norepinefrina aumenta P. aeruginosa PA14 el crecimiento, la producci&#xF3;n de factor de virulencia, la invasi&#xF3;n de HCT-8 c&#xE9;lulas epiteliales, y la motilidad de la nataci&#xF3;n de una manera dependiente de la concentraci&#xF3;n. El an&#xE1;lisis del transcriptoma de P. aeruginosa expuestos a 500 mM, pero no 50 microM, norepinefrina durante 7 h mostr&#xF3; que los genes implicados en la regulaci&#xF3;n de la virulencia de los factores determinantes de piocianina, elastasa, y la se&#xF1;al de Pseudomonas quinolona (PQS, 2-heptil-3-hidroxi -4-quinolona) se upregulated. La producci&#xF3;n de ramnol&#xED;pidos, que tambi&#xE9;n son importantes en las infecciones por P. aeruginosa, no se modific&#xF3; significativamente en cultivos en suspensi&#xF3;n tras la exposici&#xF3;n a la norepinefrina microM 500, pero disminuy&#xF3; en las superficies de semis&#xF3;lidos. La motilidad enjambre, un fenotipo que est&#xE1; directamente influenciada por ramnol&#xED;pidos, se redujo tambi&#xE9;n en la exposici&#xF3;n 500 microM norepinefrina. El aumento de la activaci&#xF3;n transcripcional de LASR pero no la de rhlR y el aumento de los niveles de PQS sugieren que los efectos de la norepinefrina est&#xE1;n mediadas principalmente a trav&#xE9;s de la Las qu&#xF3;rum de detecci&#xF3;n v&#xED;a. En conjunto, nuestros datos sugieren fuertemente que la norepinefrina puede jugar un papel importante en el intestino derivadas de infecciones mediante el aumento de la patogenicidad de P. aeruginosa PA14.

La hormona norepinefrina neuroendocrino Aumenta Pseudomonas aeruginosa PA14 virulencia A trav&#xE9;s de la detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum Las Camino

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x6D88;&#x5316;&#x9053; (GI) &#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x975E;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027; (&#x5171;&#x751F;) &#x7EC6;&#x83CC;&#x5171;&#x5B58;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5E73;&#x8861;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x8FDB;&#x5165;&#x5230;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x662F;&#x6444;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x6B65;&#x9AA4;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5C42;&#x8981;&#x9644;&#x52A0;&#x5230;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x5BFC;&#x822A;&#x3002;&#x6709;&#x4EBA;&#x63D0;&#x8BAE;&#x75C5;&#x539F;&#x9047;&#x5230;&#x6816;&#x56FE;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x8D77;&#x7740;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x786E;&#x5B9A;&#x9644;&#x4EF6;&#x548C;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x75C5;&#x539F;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E0D;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x8C03;&#x67E5;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0D;&#x505A;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4E0E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6A21;&#x4EFF;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x8054;&#x5408;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F7F;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CA;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x548C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x5BF9;&#x75C5;&#x539F;&#x6B96;&#x6C11;&#x5316;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6C14;&#x52A8;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x88AB;&#x53D1;&#x8FBE;&#x56FD;&#x5BB6;&#x5411;&#x7A97;&#x4F53;&#x53EF;&#x9006;&#x7FA4;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x5C42;&#x57F9;&#x517B;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5F00;&#x53D1;&#x6816;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E4B;&#x95F4; HeLa &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x6A21;&#x578B;&#x8DDF;&#x7740;&#x6240;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC; 0157&#xFF1A; &#x8FDB;&#x5BB6;&#x6816;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x611F;&#x67D3;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x548C; tnaA &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; (&#x7F3A;&#x4E4F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5432;&#x54DA;) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x5171;&#x751F;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#xFF0C;&#x8BC1;&#x660E;&#x6816;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x662F;&#x80A0;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x548C;&#x6BD2;&#x529B;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x88AB;&#x7528;&#x4E8E;&#x57FA;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x80A0;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x6BD2;&#x4EE5;&#x53CA;&#x7B5B;&#x9009;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x76CA;&#x751F;&#x83CC;&#x83CC;&#x682A;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x5728;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684;&#x75C5;&#x83CC;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x80C3;&#x80A0;&#x9053;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x8054;&#x5408;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BC4;&#x4E3B;--&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria co-exist. This equilibrium is perturbed by the entry of pathogens into the GI tract. A key step in the infection process is the navigation of the pathogen through the commensal bacterial layer to attach to epithelial cells. It has been proposed that the microenvironment that the pathogen encounters in the commensal layer plays a significant role in determining the extent of attachment and colonization. Current culture methods for investigating pathogen colonization are not well suited for investigating this hypothesis as they do not enable co-culture of bacteria and epithelial cells in a manner that mimics the GI tract microenvironment. Here we report the development of a microfluidic co-culture model that enables independent culture of eukaryotic cells and bacteria, and testing the effect of the commensal microenvironment on pathogen colonization. A pneumatically-actuated system was developed to form reversible islands that allow development of bacterial biofilm along with culture of an epithelial cell monolayer. The co-culture model used to develop a commensal Escherichia coli biofilm among HeLa cells, followed by introduction of enterohemorrhagic E. coli (EHEC) into the commensal island, in a sequence that mimics the sequence of events in GI tract infection. Using wild-type E. coli and a tnaA mutant (lacks the signal indole) as the commensal bacteria, we demonstrate that the commensal biofilm microenvironment is a key determinant of EHEC infectivity and virulence. Our model has the potential to be used in fundamental studies investigating the effect of GI tract signals on EHEC virulence as well as for screening of different probiotic strains for modulating pathogen infectivity in the GI tract.

Co-culture of epithelial cells and bacteria for investigating host-pathogen interactions.

La gastro-intestinal humain (GI) est un environnement unique dans lequel les cellules &#xE9;pith&#xE9;liales intestinales et non-pathog&#xE8;nes (commensaux) les bact&#xE9;ries co-existent. Cet &#xE9;quilibre est perturb&#xE9; par l&#x26;#39;entr&#xE9;e d&#x26;#39;agents pathog&#xE8;nes dans le tractus gastro-intestinal. Une &#xE9;tape cl&#xE9; dans le processus d&#x26;#39;infection est la navigation de l&#x26;#39;agent pathog&#xE8;ne &#xE0; travers la couche bact&#xE9;rienne commensale se fixer aux cellules &#xE9;pith&#xE9;liales. Il a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; que le microenvironnement que l&#x26;#39;agent pathog&#xE8;ne rencontre dans la couche commensale joue un r&#xF4;le important dans la d&#xE9;termination de la mesure de l&#x26;#39;attachement et de la colonisation. M&#xE9;thodes de culture actuelles pour enqu&#xEA;ter sur la colonisation pathog&#xE8;ne ne sont pas bien adapt&#xE9;s pour enqu&#xEA;ter sur cette hypoth&#xE8;se, car ils ne permettent pas de co-culture de bact&#xE9;ries et de cellules &#xE9;pith&#xE9;liales d&#x26;#39;une mani&#xE8;re qui imite le microenvironnement tractus gastro-intestinal. Nous rapportons ici le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;une co-culture microfluidique mod&#xE8;le qui permet la culture ind&#xE9;pendante des cellules eucaryotes et les bact&#xE9;ries, et de tester l&#x26;#39;effet du microenvironnement commensal sur la colonisation pathog&#xE8;ne. Un syst&#xE8;me pneumatique actionn&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;velopp&#xE9; pour former des &#xEE;les r&#xE9;versibles qui permettent le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un biofilm bact&#xE9;rien avec la culture d&#x26;#39;une monocouche de cellules &#xE9;pith&#xE9;liales. Le mod&#xE8;le de co-culture utilis&#xE9;e pour d&#xE9;velopper un biofilm coli commensales Escherichia entre les cellules HeLa, suivie par l&#x26;#39;introduction de E. coli ent&#xE9;ro-h&#xE9;morragique (EHEC) dans l&#x26;#39;&#xEE;le commensal, dans une s&#xE9;quence qui reproduit la s&#xE9;quence des &#xE9;v&#xE9;nements dans les infections des voies gastro-intestinal. Utilisation de type sauvage de E. coli et un mutant tnaA (manque de signal de l&#x26;#39;indole) que les bact&#xE9;ries commensales, nous d&#xE9;montrons que le microenvironnement biofilm commensal est un d&#xE9;terminant cl&#xE9; de l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; et la virulence EHEC. Notre mod&#xE8;le a le potentiel pour &#xEA;tre utilis&#xE9; dans des &#xE9;tudes fondamentales de l&#x26;#39;enqu&#xEA;te de l&#x26;#39;effet de signaux tractus gastro-intestinal sur la virulence EHEC ainsi que pour le d&#xE9;pistage des diff&#xE9;rentes souches de probiotiques pour moduler l&#x26;#39;infectivit&#xE9; des agents pathog&#xE8;nes dans le tractus gastro-intestinal.

Co-culture de cellules &#xE9;pith&#xE9;liales et des bact&#xE9;ries pour enqu&#xEA;ter sur les interactions h&#xF4;te-pathog&#xE8;ne

Die menschlichen Gastrointestinaltrakt (GI) ist eine einzigartige Umgebung, die in der intestinalen Epithelzellen und nicht-pathogenen (Kommensale) Bakterien nebeneinander existieren. Dieses Gleichgewicht wird durch den Eintrag von Krankheitserregern in der GI-Trakt umwerfen. Ein wichtiger Schritt im Prozess Infektion ist die Navigation des Erregers &uuml;ber die Kommensale bakterielle Schicht Epithelzellen beimessen. Es wurde vorgeschlagen, dass die Untersuchungsverfahren, die den Erreger in der Kommensale Ebene findet eine bedeutende Rolle bei der Festsetzung des Umfangs der Anlage und Kolonisierung spielt. Aktuelle Kultur-Methoden zur Untersuchung der Erreger Kolonisation eignen sich nicht gut f&uuml;r diese Hypothese zu untersuchen, da sie nicht aktivieren Kokulturen von Bakterien und Epithelzellen in einer Weise, die die GI-Trakt Mikromilieu imitiert. Hier berichten wir &uuml;ber die Entwicklung eines mikrofluidische Kokulturen-Modells, das unabh&auml;ngige Kultur aus eukaryotischen Zellen und Bakterien und testen die Wirkung der Kommensale Mikromilieu auf Erreger Kolonisation erm&ouml;glicht. Eine pneumatisch bet&auml;tigte System entwickelte Form reversibel Inseln, die Entwicklung der bakteriellen Biofilm zusammen mit der Kultur der eine Monolage Epithelialer Zellen zu erm&ouml;glichen. Kokulturen Modell zur Entwicklung eines Kommensale Escherichia-coli-Biofilms unter HeLa-Zellen, gefolgt von Einf&uuml;hrung der Enterohemorrhagic E. coli (EHEC) in der Kommensale Insel, in einer Sequenz, die die Abfolge der Ereignisse im GI-Trakt-Infektion nachahmt. Mit Wildtyp E. Coli und TnaA Mutanten (fehlt das Signal Indol) als Kommensale Bakterien, zeigen wir, dass die Kommensale Biofilm Mikromilieu ein entscheidender Faktor f&uuml;r EHEC-Infektiosit&auml;t und Virulenz. Unser Modell hat das Potenzial, in grundlegenden Studien untersuchen die Wirkung von GI-Trakt Signale auf EHEC Virulenz ebenso wie f&uuml;r Screening von verschiedenen probiotischen St&auml;mme f&uuml;r modulierenden Pathogen Infektiosit&auml;t in GI-Trakt verwendet werden.

Kokulturen von Epithelzellen und Bakterien f&uuml;r die Untersuchung von Host-Pathogen Interaktionen.

Umano tratto gastrointestinale (GI) &egrave; un ambiente unico in cui coesistono cellule epiteliali intestinali e batteri non patogeni (commensali). Questo equilibrio &egrave; perturbato dall&#39;ingresso di agenti patogeni nel tratto GI. Un passaggio chiave nel processo di infezione &egrave; la navigazione dell&#39;agente patogeno attraverso lo strato di batterico commensale per fissare alle cellule epiteliali. &Egrave; stato proposto che il microambiente che l&#39;agente patogeno incontra nello strato commensale svolge un ruolo significativo nel determinare l&#39;estensione della colonizzazione e attaccamento. Attuali metodi di coltura per indagare la colonizzazione di agenti patogeni non sono adatti per indagare questa ipotesi in quanto non consentono co-culture di batteri e cellule epiteliali in un modo che imita il microambiente del tratto GI. Riportiamo qui lo sviluppo di un modello di microfluidica co-culture che consente la coltura indipendente delle cellule eucariotiche e batteri e prova l&#39;effetto del microambiente commensale sulla colonizzazione di agenti patogeni. Isole reversibile forma che consentono lo sviluppo di biofilm batterici insieme con la cultura di un monostrato di cellule epiteliali &egrave; stato sviluppato un sistema azionato pneumaticamente. Il modello co-culture usato per sviluppare un commensale Escherichia coli biofilm tra cellule HeLa, seguita dall&#39;introduzione di enteroemorragica E. coli (EHEC) nell&#39;isola commensale, in una sequenza che imita la sequenza degli eventi di infezione del tratto GI. Utilizzando il selvaggio-tipo e. coli e un mutante tnaA (manca l&#39;indolo segnale) come i batteri commensali, dimostriamo che il microambiente commensale biofilm &egrave; un fattore determinante di EHEC infettivit&agrave; e virulenza. Il nostro modello ha il potenziale per essere utilizzato negli studi fondamentali di indagare l&#39;effetto dei segnali del tratto GI sulla virulenza EHEC pure per quanto riguarda lo screening di diversi ceppi probiotici per modulante infettivit&agrave; patogeno nel tratto GI.

Co-culture di cellule epiteliali e batteri per indagare le interazioni ospite-patogeno.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x80C3;&#x8178;&#xFF08;GI&#xFF09;&#x7BA1;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5171;&#x5B58;&#xFF08;&#x5171;&#x751F;&#xFF09;&#x306E;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x975E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5E73;&#x8861;&#x306F;&#x3001;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x3078;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6442;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x611F;&#x67D3;&#x904E;&#x7A0B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4ED8;&#x7740;&#x3059;&#x308B;&#x5171;&#x751F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5C64;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x30CA;&#x30D3;&#x30B2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x304C;&#x5171;&#x751F;&#x5C64;&#x306B;&#x906D;&#x9047;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306F;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x5316;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x5B9A;&#x7740;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3084;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3088;&#x304F;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x6587;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x5730;&#x3067;&#x5171;&#x751F;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x7A7A;&#x6C17;&#x5727;&#x3067;&#x4F5C;&#x52D5;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5358;&#x5C64;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x7D30;&#x83CC;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x53EF;&#x9006;&#x306E;&#x5CF6;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9806;&#x5E8F;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x5185;&#x306E;&#x5171;&#x751F;&#x306E;&#x5CF6;&#x306B;&#x8178;&#x7BA1;&#x51FA;&#x8840;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#xFF08;EHEC&#xFF09;&#x3001;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;HeLa&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x5171;&#x751F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;&#x5171;&#x751F;&#x7D30;&#x83CC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;tnaA&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#xFF08;&#x4FE1;&#x53F7;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5171;&#x751F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306F;EHEC&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;EHEC&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5909;&#x8ABF;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AF;&#x30B9;&#x83CC;&#x682A;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3092;&#x57FA;&#x790E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5BBF;&#x4E3B; - &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC704;&#xC7A5; (GI)&#xB85C; &#xC7A5; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBE44; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; (&#xACF5;&#xC0DD;) &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xD568;&#xAED8; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD658;&#xACBD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD3C9;&#xD615; &#xAE30; &#xAD00;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD50;&#xB780; &#xC774;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC5FC; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0;&#xD560; &#xACF5;&#xC0DD; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xACC4;&#xCE35;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xD0D0;&#xC0C9;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xACF5;&#xC0DD; &#xACC4;&#xCE35;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; microenvironment &#xCCA8;&#xBD80;&#xC640; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC758; &#xBC94;&#xC704; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xBB38;&#xD654; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC;&#xB294; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; GI&#xB85C; microenvironment&#xC744; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; co-culture&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xC11C;&#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC801;&#xD569; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC2DD;&#xBBFC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xACF5;&#xC0DD; microenvironment&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; co-culture &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5; &#xC555; &#xC791;&#xB3D9; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xCE35;&#xC758; &#xBB38;&#xD654;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC138;&#xADE0; biofilm&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xB418;&#xB3CC;&#xB9B4; &#xC218; &#xC81C;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xAC04;&#xC758; &#xACF5;&#xC0DD; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; biofilm&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; co-culture &#xBAA8;&#xB378; enterohemorrhagic&#xC758; &#xB3C4;&#xC785;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; GI&#xB85C; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC0AC;&#xAC74;&#xC758; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29; &#xD558;&#xB294; &#xC21C;&#xC11C;&#xB85C; &#xACF5;&#xC0DD; &#xC12C;&#xC5D0; E. &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; (EHEC) &#xB2E4;&#xC74C;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xACFC; (&#xBD80;&#xC871; &#xC2E0;&#xD638; indole) tnaA &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xACF5;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;, &#xACF5;&#xC0DD; biofilm microenvironment EHEC infectivity &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xC815;&#xC790; &#xC784;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378; &#xAE30; &#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; infectivity &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; probiotic &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xC2EC;&#xC0AC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; EHEC &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; GI&#xB85C; &#xC2E0;&#xD638; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

&#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; co-culture.

El ser humano gastrointestinal (GI) es un entorno &#xFA;nico en el que las c&#xE9;lulas epiteliales intestinales y no pat&#xF3;genas (comensales) bacterias co-existir. Este equilibrio es perturbado por la entrada de agentes pat&#xF3;genos en el tracto gastrointestinal. Un paso clave en el proceso de infecci&#xF3;n es la navegaci&#xF3;n del pat&#xF3;geno a trav&#xE9;s de la capa de bacterias comensales a unirse a las c&#xE9;lulas epiteliales. Se ha propuesto que el microambiente que el pat&#xF3;geno se encuentra en la capa comensal juega un papel importante en la determinaci&#xF3;n del grado de fijaci&#xF3;n y la colonizaci&#xF3;n. Los m&#xE9;todos actuales de cultivo para investigar la colonizaci&#xF3;n de pat&#xF3;genos no est&#xE1;n bien adaptados para investigar esta hip&#xF3;tesis, ya que no permiten el co-cultivo de bacterias y c&#xE9;lulas epiteliales de una manera que imita el microambiente del tracto gastrointestinal. Aqu&#xED; mostramos el desarrollo de un co-cultivo de microfluidos modelo que permite a la cultura independiente de las c&#xE9;lulas eucariotas y bacterias, y probar el efecto del microambiente comensales en la colonizaci&#xF3;n de pat&#xF3;genos. Un sistema de accionamiento neum&#xE1;tico ha sido desarrollado para formar islas reversibles que permitan el desarrollo del biofilm bacteriano junto con la cultura de una monocapa de c&#xE9;lulas epiteliales. El modelo de co-cultivo utilizado para desarrollar una biopel&#xED;cula comensal Escherichia coli entre las c&#xE9;lulas HeLa, seguido por la introducci&#xF3;n de E. coli enterohemorr&#xE1;gica (EHEC) en la isla comensal, en una secuencia que imita la secuencia de acontecimientos en la infecci&#xF3;n del tracto gastrointestinal. Uso de tipo salvaje E. coli y un mutante tnaA (carece de la se&#xF1;al de indol), como las bacterias comensales, nos demuestran que el microambiente del biofilm comensales es un determinante clave de la infectividad y la virulencia de ECEH. Nuestro modelo tiene el potencial para ser utilizado en los estudios fundamentales que investigan el efecto de las se&#xF1;ales del tracto GI en la virulencia de ECEH, as&#xED; como para la detecci&#xF3;n de diferentes cepas de probi&#xF3;ticos para modular la infectividad de pat&#xF3;genos en el tracto gastrointestinal.

Co-cultivo de c&#xE9;lulas epiteliales y bacterias para la Investigaci&#xF3;n de Interacciones hu&#xE9;sped-pat&#xF3;geno

AI-2 &#x662F;&#x7531;&#x5F88;&#x591A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3002;LsrB &#x5C06; AI 2 periplasm &#x4E2D;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C; Tsr &#x662F; l-&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; AI 2 &#x5F3A;&#x70C8;&#x5438;&#x5F15;&#x4E86;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x3002;LsrB &#x548C; Tsr &#x662F;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x9065;&#x611F; AI-2&#xFF0C;&#x4F46; AI 2 &#x5438;&#x6536;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x6697;&#x793A; LsrB &#x548C; Tsr &#x5728; periplasm &#x4E2D;&#x76F4;&#x63A5;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;

&#x8D8B;&#x5316;&#x6027; AI 2 &#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x4FE1;&#x53F7;&#x9700;&#x8981; Tsr &#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x548C;&#x5468;&#x8D28; LsrB AI-2 &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

AI-2 is an autoinducer made by many bacteria. LsrB binds AI-2 in the periplasm, and Tsr is the l-serine chemoreceptor. We show that AI-2 strongly attracts Escherichia coli. Both LsrB and Tsr are necessary for sensing AI-2, but AI-2 uptake is not, suggesting that LsrB and Tsr interact directly in the periplasm.

Chemotaxis to the quorum-sensing signal AI-2 requires the Tsr chemoreceptor and the periplasmic LsrB AI-2-binding protein.

AI-2 est un autoinducteur faite par de nombreuses bact&#xE9;ries. LsrB lie AI-2 dans le p&#xE9;riplasme, et de la TSR est la chimior&#xE9;cepteurs L-s&#xE9;rine. Nous montrons que l&#x26;#39;IA-2 attire fortement Escherichia coli. Les deux LsrB et Tsr sont n&#xE9;cessaires pour d&#xE9;tecter AI-2, mais AI-2 n&#x26;#39;est pas l&#x26;#39;absorption, ce qui sugg&#xE8;re que LsrB et Tsr interagir directement dans le p&#xE9;riplasme.

Chimiotactisme aux conditions de quorum-sensing Signal AI-2 N&#xE9;cessite l&#x26;#39;Chimior&#xE9;cepteur Tsr et la p&#xE9;riplasmique LsrB AI-2-La liaison aux prot&#xE9;ines

AI-2 ist ein Autoinducer von vielen Bakterien gemacht. LsrB bindet AI-2 in der Periplasm und Tsr ist die l-Serin-Chemorezeptor. Wir zeigen, dass AI-2 Escherichia coli stark anzieht. LsrB und Tsr sind notwendig zur Erfassung von AI-2, aber AI-2 Aufnahme ist nicht, was darauf hindeutet, dass LsrB und Tsr direkt in die Periplasm interagieren.

Chemotaxis auf das Quorum sensing Signal AI-2 erfordert die Tsr-Chemorezeptor und der periplasmatischen LsrB AI-2-verbindliches Protein.

IA-2 &egrave; un autoinducer fatto da molti batteri. LsrB si lega AI-2 nella periplasm, e Tsr &egrave; la chemoreceptor l-Serina. Mostriamo che IA-2 attira fortemente Escherichia coli. Tsr and LsrB sono necessari per il rilevamento di AI-2, ma AI-2 assorbimento &egrave; non, suggerendo che LsrB e Tsr interagire direttamente nel periplasm.

Chemiotassi al quorum sensing segnale AI-2 richiede la chemoreceptor Tsr e la periplasmica LsrB IA-2-proteina.

AI-2&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; LsrB&#x306F;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;AI-2&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3001;TSR&#x306F;L-&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;&#x5316;&#x5B66;&#x53D7;&#x5BB9;&#x5668;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;AI-2&#x304C;&#x5F37;&#x304F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; LsrB&#x304A;&#x3088;&#x3073;TSR&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;AI-2&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;AI-2&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306F;LsrB&#x3068;TSR&#x304C;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x4FE1;&#x53F7;AI-2&#x301C;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306F;&#x3001;TSR&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x53D7;&#x5BB9;&#x3068;&#x30DA;&#x30EA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30E0;LsrB AI-2&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5;-2&#xB294; autoinducer &#xB9CE;&#xC740; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9C4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lsrb&#xB294; periplasm&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; Tsr&#xC740; l &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; chemoreceptor. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xAC15;&#xB825; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC744; &#xC720;&#xCE58; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. LsrB &#xBC0F; Tsr AI 2 &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC778;&#xACF5; &#xC9C0;&#xB2A5; 2 &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00;&#xC740;, LsrB &#xBC0F; Tsr&#xB294; periplasm&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xC2E0;&#xD638; AI 2 chemotaxis Tsr chemoreceptor periplasmic LsrB AI 2 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

IA-2 es un autoinductora hecha por muchas bacterias. LsrB une AI-2 en el periplasma, y &#x200B;&#x200B;Tsr es el quimiorreceptor L-serina. Se demuestra que el AI-2 atrae fuertemente la Escherichia coli. Tanto LsrB y Tsr son necesarios para la detecci&#xF3;n de AI-2, pero el AI-2 no es absorci&#xF3;n, lo que sugiere que LsrB y Tsr interactuar directamente en el periplasma.

La quimiotaxis a la detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum se&#xF1;al AI-2 requiere el Quimioreceptor Tsr y el Periplasmic LsrB IA-2-La uni&#xF3;n a prote&#xED;nas

&#x5229;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x8F6C;&#x6362;&#x4E3A;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x9700;&#x8981;&#x63A7;&#x5236;&#x548C;&#x66F4;&#x6362;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7B56;&#x5212;&#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784; Hha &#x548C;&#x5FAA;&#x73AF; diguanylate &#x7ED1;&#x5B9A; BdcA &#x521B;&#x5EFA;&#x542F;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4E00;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7535;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5229;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5206;&#x6563;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4EBA;&#x53E3;&#x9A71;&#x52A8;&#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x5F00;&#x5173;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5408;&#x6210;&#x7535;&#x8DEF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F62;&#x6210;&#x521D;&#x59CB;&#x6B96;&#x6C11;&#x8005;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x3001; &#x6B64;&#x73B0;&#x6709;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4E2D;&#x5F15;&#x5165;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B; (&#x4F20;&#x64AD;)&#x3001; &#x5F62;&#x6210;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x53CC;&#x7269;&#x79CD;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x548C;&#x53D6;&#x4EE3;&#x6700;&#x521D;&#x6B96;&#x6C11;&#x8005;&#x4E2D;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x80DE;&#x5916;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4ECE;&#x5206;&#x6563;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5220;&#x9664;&#x5316;&#x5B66;&#x611F;&#x5E94;&#x5F00;&#x5173;&#xFF0C;&#x5206;&#x6563;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x548C; consortial &#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8C03;&#x6574;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9996;&#x6B21;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x80FD;&#x591F;&#x53D6;&#x4EE3;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x5220;&#x9664;&#x547D;&#x4EE4;&#x5141;&#x8BB8;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x4E3A;&#x5404;&#x79CD;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684; consortial &#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x3002;

&#x5408;&#x6210;&#x7FA4;&#x4F53;&#x611F;&#x5E94;&#x7535;&#x8DEF;&#x6765;&#x63A7;&#x5236; consortial &#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x6563;&#x5E03;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;

To utilize biofilms for chemical transformations in biorefineries they need to be controlled and replaced. Previously, we engineered the global regulator Hha and cyclic diguanylate-binding BdcA to create proteins that enable biofilm dispersal. Here we report a biofilm circuit that utilizes these two dispersal proteins along with a population-driven quorum-sensing switch. With this synthetic circuit, in a novel microfluidic device, we form an initial colonizer biofilm, introduce a second cell type (dispersers) into this existing biofilm, form a robust dual-species biofilm and displace the initial colonizer cells in the biofilm with an extracellular signal from the disperser cells. We also remove the disperser biofilm with a chemically induced switch, and the consortial population could tune. Therefore, for the first time, cells have been engineered that are able to displace an existing biofilm and then be removed on command allowing one to control consortial biofilm formation for various applications.

Synthetic quorum-sensing circuit to control consortial biofilm formation and dispersal in a microfluidic device.

Pour utiliser les biofilms pour les transformations chimiques dans les bioraffineries dont ils ont besoin d&#x26;#39;&#xEA;tre contr&#xF4;l&#xE9;s et remplac&#xE9;s. Auparavant, nous avons con&#xE7;u le r&#xE9;gulateur global Hha et cycliques diguanylate contraignant BDCA pour cr&#xE9;er des prot&#xE9;ines qui permettent la dispersion du biofilm. Nous rapportons ici un circuit de biofilm qui utilise ces deux prot&#xE9;ines de dispersion avec une population ax&#xE9;e quorum-sensing interrupteur. Avec ce circuit de synth&#xE8;se, dans un dispositif microfluidique nouvelle, on forme une premi&#xE8;re colonisateur biofilm, introduire un second type de cellules (disperseurs) en ce biofilm existant, sous forme solide une double esp&#xE8;ces biofilm et d&#xE9;placer les cellules initiales colonisateur dans le biofilm avec un extracellulaire signal provenant des cellules disperseur. Nous avons &#xE9;galement supprimer le biofilm disperseur avec un interrupteur chimiquement induite, et la population consortium pourrait accorder. Par cons&#xE9;quent, pour la premi&#xE8;re fois, les cellules ont &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;us qui sont capables de d&#xE9;placer un biofilm existant et ensuite &#xEA;tre retir&#xE9; sur commande permettant &#xE0; un pour contr&#xF4;ler la formation de biofilm consortium pour diverses applications.

Synth&#xE9;tique Quorum-sensing Circuit pour contr&#xF4;ler la formation de biofilm consortial et la dispersion dans un dispositif microfluidique

Sie m&uuml;ssen f&uuml;r die Nutzung von Biofilmen f&uuml;r chemischen Umwandlungen in Bioraffinerien gesteuert und ersetzt werden. Zuvor, engineered wir die globale Aufsichtsbeh&ouml;rden Hha und zyklische Diguanylate-Bindung BdcA Proteine zu erstellen, die Biofilm Zerstreuung zu aktivieren. Hier berichten wir eine Biofilm-Schaltung, die diese zwei Zerstreuung Proteine zusammen mit einer Bev&ouml;lkerung-gesteuerte Quorum-sensing-Switch verwendet. Mit dieser synthetischen Schaltung, in einem Roman mikrofluidische Ger&auml;t wir bilden eine erste Kolonisator Biofilm, eine zweite Zelltyp (Dispergatoren) in diese vorhandenen Biofilm einf&uuml;hren, eine robuste Dual-Arten-Biofilm zu bilden und verdr&auml;ngen die erste Kolonisator-Zellen in der Biofilm mit eine extrazellul&auml;re Signal aus den Zellen Disperser. Wir entfernen auch Disperser Biofilms einen chemisch induzierte Schalter und die konsortiale Bev&ouml;lkerung konnte zu optimieren. Daher haben zum ersten Mal Zellen entwickelt worden, die sind in der Lage, eine vorhandene Biofilm zu verdr&auml;ngen und dann entfernt werden, auf Befehl erlaubt konsortialen Biofilm Formation f&uuml;r verschiedene Anwendungen zu steuern.

Synthetische Quorum-sensing-Schaltung konsortialen Biofilm-Entstehung und Ausbreitung in einem Microfluidic-Ger&auml;t zu steuern.

Per utilizzare i biofilm per trasformazioni chimiche in bioraffinerie che hanno bisogno di essere controllato e sostituito. In precedenza, abbiamo progettato il regolatore globale Hha e ciclico BdcA diguanylate-associazione per creare le proteine che consentono la dispersione del biofilm. Qui riportiamo un circuito di biofilm che utilizza queste due proteine dispersione insieme con un interruttore di quorum sensing basati sulla popolazione. Con questo circuito sintetico, in un dispositivo microfluidico romanzo, formano un biofilm iniziale colonizzatore, introdurre un secondo tipo di cella (dispersori) in questo biofilm esistenti, formano un biofilm dual-specie robusto e spostare le celle colonizzatore iniziale il biofilm con un segnale extracellulare dalle cellule disperser. Abbiamo inoltre rimuovere il biofilm dispersore con un interruttore chimicamente indotto, e la popolazione consortial potrebbe sintonizzarsi. Pertanto, per la prima volta, le cellule hanno state ingegnerizzate che sono in grado di spostare un biofilm esistente e quindi rimosso il comando che permette di controllare la formazione di biofilm consortial per varie applicazioni.

Circuito di quorum sensing sintetico per controllare la formazione di biofilm consortial e dispersione in un dispositivo microfluidico.

&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x5909;&#x63DB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x98DB;&#x6563;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;HHA&#x3068;&#x74B0;&#x72B6;diguanylate&#x7D50;&#x5408;BDCA&#x3092;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x53E3;&#xB7;&#x30C9;&#x30EA;&#x30D6;&#x30F3;&#xB7;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x5206;&#x6563;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x305F;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x56DE;&#x8DEF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#xFF08;&#x5206;&#x6563;&#x6A5F;&#xFF09;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30C7;&#x30E5;&#x30A2;&#x30EB;&#x7A2E;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x3067;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x690D;&#x6C11;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6563;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5206;&#x6563;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306F;&#x8ABF;&#x6574;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;1&#x306F;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B3;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x5909;&#x4F4D;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30A2;&#x30E0;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x98DB;&#x6563;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5408;&#x6210;&#x30AF;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E9;&#x30E0;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x56DE;&#x8DEF;

Biofilms biorefineries &#xD654;&#xD559; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD65C;&#xC6A9;&#xC744; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC0F; &#xAD50;&#xCCB4; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130; Hha &#xBC0F; biofilm &#xBD84;&#xC0B0; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xC21C;&#xD658; diguanylate &#xBC14;&#xC778;&#xB529; BdcA &#xC124;&#xACC4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC774; &#xB450; &#xBD84;&#xC0B0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xC6A9; biofilm &#xD68C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC124; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC774; &#xD569;&#xC131; &#xD68C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xCC99;&#xC790; biofilm&#xC744; &#xD615;&#xC131;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC140; &#xC720;&#xD615; (&#xC6B4;&#xBC18;&#xC790;)&#xC774; &#xAE30;&#xC874; biofilm&#xC5D0; &#xC18C;&#xAC1C;, &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC885; biofilm&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xBBF9;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC2E0;&#xD638; biofilm&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xAC1C;&#xCC99;&#xC790; &#xC140; &#xCE58;&#xD658;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58;&#xC640; &#xBBF9;&#xC11C; biofilm&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558; &#xACE0; consortial &#xC778;&#xAD6C; &#xC218; &#xC870;&#xC815;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAE30;&#xC874; biofilm&#xC744; &#xCE58;&#xD658; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBA85;&#xB839; &#xD558;&#xB098;&#xB97C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; consortial biofilm &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xC5D0; &#xC81C;&#xAC70;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Consortial biofilm &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xACB0;&#xD569; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC0B0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xC131; &#xCFFC;&#xB7FC; &#xC13C; &#xC2F1; &#xD68C;&#xB85C;.

Para utilizar las biopel&#xED;culas de las transformaciones qu&#xED;micas en la bio-refiner&#xED;as que deben ser controlados y reemplazados. Anteriormente, hemos dise&#xF1;ado el regulador global de Hha y c&#xED;clico diguanilato vinculante BDCA para crear las prote&#xED;nas que permiten la dispersi&#xF3;n de la biopel&#xED;cula. Aqu&#xED; mostramos un circuito de biofilm que utiliza estas dos prote&#xED;nas de dispersi&#xF3;n, junto con una poblaci&#xF3;n basada en detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum interruptor. Con este circuito sint&#xE9;tico, en un dispositivo de microfluidos novedosa, que forman una biopel&#xED;cula inicial colonizador, introducir un segundo tipo celular (dispersores) en este biofilm existente, forma un s&#xF3;lido de doble especies biopel&#xED;cula y desplazan las c&#xE9;lulas iniciales colonizador en la biopel&#xED;cula con un extracelular se&#xF1;al de las c&#xE9;lulas dispersores. Tambi&#xE9;n eliminar el biofilm dispersor con un interruptor inducido qu&#xED;micamente, y la poblaci&#xF3;n podr&#xED;a sintonizar consorciada. Por lo tanto, por primera vez, las c&#xE9;lulas han sido dise&#xF1;ados que son capaces de desplazar una biopel&#xED;cula existente y luego se separ&#xF3; en un comando que permite controlar la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas consorciada para diversas aplicaciones.

Sint&#xE9;tico detecci&#xF3;n de qu&#xF3;rum Circuito para controlar la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas de Consorcio y la dispersi&#xF3;n en un dispositivo de microfluidos

&#x7EC6;&#x83CC;&#x51E0;&#x4E4E;&#x603B;&#x662F;&#x627E;&#x5230;&#x751F;&#x6001;&#x4F4D;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x77E9;&#x9635;&#x94A2;&#x9AA8;&#x3001; &#x8868;&#x9762;&#x76F8;&#x5173;&#x3001; &#x591A;&#x54C1;&#x79CD;&#x7684;&#x793E;&#x533A;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x3002;&#x5B83;&#x88AB;&#x516C;&#x8BA4;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6709;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x4E0D;&#x540C;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x534F;&#x8C03;&#x7528;&#x4E8E;&#x793E;&#x4F1A;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x5E38;&#x89C4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8C03;&#x67E5;&#x7B49;&#x5B8F;&#x89C2;&#x6D41;&#x52A8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x4F4E;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5927;&#x7684;&#x5377;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x4E0D;&#x5141;&#x8BB8;&#x65F6;&#x7A7A;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x793E;&#x4F1A;&#x5F62;&#x6210;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x8C03;&#x67E5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5F62;&#x6210;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E24;&#x5C42; PDMS &#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x6D41;&#x52A8;&#x5355;&#x5143;&#x683C; (&mu;FC) &#x88C5;&#x7F6E;&#x7684;&#x7814;&#x5236;&#x3002;&Mu;FC &#x8BBE;&#x5907;&#x5305;&#x542B;&#x516B;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC; microchambers &#x57F9;&#x517B;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5355;&#x6269;&#x6563;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6DF7;&#x5408;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x53D1;&#x7535;&#x673A;&#x901A;&#x8FC7;&#x516C;&#x5F00;&#x516B;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x6C14;&#x52A8;&#x9600;&#x95E8;&#x548C;&#x64AD;&#x79CD;&#x662F;&#x4ECE;&#x6E10;&#x53D8;&#x6DF7;&#x5408;&#x6E20;&#x9053;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x7AEF;&#x53E3;&#x7684;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x4ECE;&#x68AF;&#x5EA6;&#x6DF7;&#x5408;&#x5668;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5FAE;&#x53CD;&#x5E94;&#x8154;&#x5B8C;&#x5168;&#x9694;&#x79BB;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x4F1A;&#x6267;&#x884C;&#x4E95;&#x4E0B;&#x8FDE;&#x7EED;&#x3001; &#x6279;&#x5904;&#x7406;&#x6216; semi-batch &#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0D;&#x540C;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5432;&#x54DA;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x4FE1;&#x53F7; (7-hydroxyindole &#x548C;&#x975B;&#x7EA2;)&#xFF0C;&#x6548;&#x679C;&#x7684;&#x5355;&#x72EC;&#x6216;&#x7EC4;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x53D1;&#x5C55;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; &mu;FC &#x5B9E;&#x7528;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6B64;&#x6A21;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x5F62;&#x6210;&#x6216;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x54C1;&#x4E2D;&#x5F88;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x9644;&#x4EF6;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x4E86;&#x89E3;&#x3002;

&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x751F;&#x7269;&#x819C;&#x7814;&#x7A76;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x88C5;&#x7F6E;&#x3002;

Bacteria are almost always found in ecological niches as matrix-encased, surface-associated, multi-species communities known as biofilms. It is well established that soluble chemical signals produced by the bacteria influence the organization and structure of the biofilm; therefore, there is significant interest in understanding how different chemical signals are coordinately utilized for community development. Conventional methods for investigating biofilm formation such as macro-scale flow cells are low-throughput, require large volumes, and do not allow spatial and temporal control of biofilm community formation. Here, we describe the development of a PDMS-based two-layer microfluidic flow cell (Î¼FC) device for investigating bacterial biofilm formation and organization in response to different concentrations of soluble signals. The Î¼FC device contains eight separate microchambers for cultivating biofilms exposed to eight different concentrations of signals through a single diffusive mixing-based concentration gradient generator. The presence of pneumatic valves and a separate cell seeding port that is independent from gradient-mixing channels offers complete isolation of the biofilm microchamber from the gradient mixer, and also performs well under continuous, batch or semi-batch conditions. We demonstrate the utility of the Î¼FC by studying the effect of different concentrations of indole-like biofilm signals (7-hydroxyindole and isatin), either individually or in combination, on biofilm development of pathogenic E. coli. This model can be used for developing a fundamental understanding of events leading to bacterial attachment to surfaces that are important in infections and chemicals that influence the biofilm formation or inhibition.

A microfluidic device for high throughput bacterial biofilm studies.

Les bact&#xE9;ries sont presque toujours trouv&#xE9; dans des niches &#xE9;cologiques que la matrice-envelopp&#xE9;, surface associ&#xE9;s, multi-esp&#xE8;ces des communaut&#xE9;s connues sous le nom biofilms. Il est bien &#xE9;tabli que les signaux chimiques solubles produits par les bact&#xE9;ries influencer l&#x26;#39;organisation et la structure du biofilm et, par cons&#xE9;quent, il ya un int&#xE9;r&#xEA;t significatif pour comprendre comment les signaux chimiques diff&#xE9;rents sont utilis&#xE9;s de mani&#xE8;re coordonn&#xE9;e pour le d&#xE9;veloppement communautaire. Les m&#xE9;thodes classiques d&#x26;#39;enqu&#xEA;te sur la formation de biofilm, comme des cellules d&#x26;#39;&#xE9;coulement macro-&#xE9;chelle sont faibles d&#xE9;bit, exigent de grands volumes, et ne permettent pas de contr&#xF4;le spatial et temporel de la formation de la communaut&#xE9; de biofilm. Ici, nous d&#xE9;crivons le d&#xE9;veloppement d&#x26;#39;un PDMS &#xE0; base de bi-couche &#xE9;coulement microfluidique de cellules (&#x3BC;FC) dispositif d&#x26;#39;enqu&#xEA;ter sur la formation de biofilm bact&#xE9;rien et l&#x26;#39;organisation en r&#xE9;ponse &#xE0; diff&#xE9;rentes concentrations de signaux solubles. Le dispositif contient huit &#x3BC;FC microchambres distincts pour cultiver des biofilms expos&#xE9;s &#xE0; huit concentrations diff&#xE9;rentes de signaux par le biais d&#x26;#39;un seul m&#xE9;lange diffusif bas&#xE9; sur g&#xE9;n&#xE9;rateur de gradient de concentration. La pr&#xE9;sence de vannes pneumatiques et un port cellule s&#xE9;par&#xE9;e semis qui est ind&#xE9;pendante du gradient de m&#xE9;lange des canaux offre une isolation compl&#xE8;te de la microchambre biofilm du m&#xE9;langeur gradient, et effectue &#xE9;galement bien continus, discontinus ou semi-batch conditions. Nous d&#xE9;montrons l&#x26;#39;utilit&#xE9; de la &#x3BC;FC en &#xE9;tudiant l&#x26;#39;effet de diff&#xE9;rentes concentrations de signaux biofilm indole-comme (7-hydroxy et isatine), que ce soit individuellement ou en combinaison, sur le d&#xE9;veloppement du biofilm des E. coli pathog&#xE8;nes. Ce mod&#xE8;le peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour d&#xE9;velopper une compr&#xE9;hension fondamentale des &#xE9;v&#xE9;nements menant &#xE0; la fixation des bact&#xE9;ries sur des surfaces qui sont important dans les infections et les produits chimiques qui influent sur la formation du biofilm ou d&#x26;#39;inhibition.

Un dispositif microfluidique pour les &#xE9;tudes &#xE0; haut d&#xE9;bit biofilm bact&#xE9;rien

Bakterien sind fast immer als Matrix-ummantelt, Oberfl&auml;che-assoziierte, arten&uuml;bergreifenden Gemeinschaften bekannt als Biofilme in &ouml;kologische Nischen gefunden. Es steht fest, dass l&ouml;sliche chemische Signale, die von den Bakterien erzeugten die Organisation und Struktur des Biofilms zu beeinflussen; Daher gibt es erhebliche Interesse verstehen, wie verschiedene chemische Signale sind f&uuml;r Gemeindeentwicklung coordinately genutzt. Herk&ouml;mmliche Methoden zur Untersuchung von Biofilm-Bildung wie Makro-Ma&szlig;stab-Durchflusszellen sind niedrig-Durchsatz und erfordern gro&szlig;e Mengen erlauben keine r&auml;umliche und zeitliche Steuerung der Biofilm-Gemeinschaft-Formation. Hier beschreiben wir die Entwicklung von ein PDMS-basierte zweilagigen mikrofluidische flie&szlig;en Zelle (&mu;FC) Ger&auml;t zur Untersuchung der bakteriellen Biofilm-Bildung und Organisation an verschiedenen Konzentrationen an l&ouml;slichen Signale. Das &mu;FC-Ger&auml;t enth&auml;lt acht separate Microchambers f&uuml;r den Anbau von Biofilmen acht verschiedene Konzentrationen der Signale &uuml;ber einen einzigen diffusiven mischen-basierte Konzentrationsgradienten Generator ausgesetzt. Das Vorhandensein von Pneumatikventile und eine separate Zelle Aussaat Port ein, der unabh&auml;ngig vom Farbverlauf-mischen-Kan&auml;le bietet vollst&auml;ndigen Isolierung der Biofilm-Microchamber von den Farbverlauf Mixer und auch gut unter kontinuierlicher, Batch oder Semi-batch Bedingungen f&uuml;hrt. Wir demonstrieren die N&uuml;tzlichkeit der &mu;FC durch das Studium der Wirkung von verschiedenen Konzentrationen von Indol-wie Biofilm-Signalen (7-Hydroxyindole und Isatin), einzeln oder in Kombination, Biofilm-Entwicklung von pathogenen E. Coli. Dieses Modell kann verwendet werden, f&uuml;r die Entwicklung eines grundlegenden Verst&auml;ndnis der Vorg&auml;nge um bakterielle Bindung an Fl&auml;chen, die sind wichtig, Infektionen und Chemikalien, die die Biofilm-Bildung oder Hemmung beeinflussen.

Mikrofluidische Ger&auml;t f&uuml;r Hochdurchsatz-bakterielle Biofilm-Studien.

Batteri sono quasi sempre trovati in nicchie ecologiche come matrix-hanno incassato, superficie-associati, multispecie comunit&agrave; conosciuta come biofilm. Esso &egrave; ben consolidata che segnali chimici solubili prodotte dai batteri influenzano l&#39;organizzazione e la struttura del biofilm; quindi, c&#39;&egrave; un interesse significativo nella comprensione chimico come i diversi segnali di coordinately sono utilizzati per lo sviluppo della Comunit&agrave;. I metodi convenzionali per indagare la formazione di biofilm come le cellule di flusso su scala macro sono basso-throughput, richiedono grandi volumi e non consentono un controllo spaziale e temporale della formazione di biofilm comunit&agrave;. Qui, descriviamo lo sviluppo di un dispositivo di cella (&mu;FC) del flusso PDMS-based microfluidic due strati per indagare la formazione di biofilm batterici e organizzazione in risposta a diverse concentrazioni di segnali solubili. Il dispositivo &mu;FC contiene otto microchambers separati per coltivare biofilm esposti a otto differenti concentrazioni di segnali attraverso un generatore singolo gradiente di concentrazione dei base di miscelazione diffusiva. La presenza di valvole pneumatiche e una cella separata semina porta che &egrave; indipendente dalla pendenza di miscelazione canali offre il completo isolamento del microchamber biofilm dal gradiente mixer e svolge anche bene in continue, batch o semi-batch condizioni. Noi dimostrare l&#39;utilit&agrave; del &mu;FC di studiare l&#39;effetto di diverse concentrazioni di segnali indolo-come biofilm (7-hydroxyindole e isatin), singolarmente o in combinazione, per lo sviluppo di biofilm di e. coli patogeni. Questo modello pu&ograve; essere utilizzato per lo sviluppo di una comprensione fondamentale degli eventi che portano all&#39;attacco batterico sulle superfici che sono importanti per le infezioni e le sostanze chimiche che influenzano la formazione di biofilm o inibizione.

Un dispositivo microfluidico per gli studi di biofilm batterici ad alto rendimento.

&#x7D30;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x884C;&#x5217;&#x5305;&#x307E;&#x308C;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x7A2E;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x751F;&#x614B;&#x7684;&#x5730;&#x4F4D;&#x306B;&#x8A18;&#x8F09;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3088;&#x304F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x4FE1;&#x53F7;&#x304C;&#x5354;&#x8ABF;&#x3057;&#x3001;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x95A2;&#x5FC3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6D41;&#x308C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5927;&#x5BB9;&#x91CF;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6C34;&#x6EB6;&#x6027;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;PDMS&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;2&#x5C64;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30BB;&#x30EB;&#xFF08;&#x3BC;FC&#xFF09;&#x88C5;&#x7F6E;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x3BC;FC&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x6DF7;&#x5408;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;8&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x66B4;&#x9732;&#x3057;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x3092;&#x57F9;&#x990A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;8&#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7A7A;&#x6C17;&#x5F01;&#x3068;&#x52FE;&#x914D;&#x30DF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5225;&#x500B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x64AD;&#x7A2E;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30E9;&#x30C7;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30DF;&#x30AD;&#x30B5;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x5206;&#x96E2;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3088;&#x304F;&#x9023;&#x7D9A;&#x3001;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x534A;&#x30D0;&#x30C3;&#x30C1;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6FC3;&#x5EA6;&#xFF08;7  - &#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30FC;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30A4;&#x30B5;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF09;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3BC;FC&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3084;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x5F62;&#x6210;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8868;&#x9762;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D30;&#x83CC;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EB;&#x30E0;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;

&#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xD56D;&#xC0C1; biofilms&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xC30C; &#xB2E4;, &#xD45C;&#xBA74; &#xAD00;&#xB828;, &#xC0AC; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0;&#xB85C; &#xC0DD;&#xD0DC; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC744; &#xC798; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xD654;&#xD559; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC601;&#xD5A5; biofilm;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xC124;&#xB9BD; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD654;&#xD559;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC740; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; coordinately &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC0AC;&#xD68C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9E4;&#xD06C;&#xB85C; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C; &#xD750;&#xB984; &#xC140; &#xAC19;&#xC740; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xC870;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBC29;&#xBC95; &#xB0AE;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;&#xC740; &#xD070; &#xBCFC;&#xB968;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558; &#xACE0; biofilm &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xD2F0; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC138;&#xADE0;&#xC758; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xC131; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; 2 &#xCE35; &#xBBF8;&#xC138; PDMS&#xB97C; &#xAE30;&#xBC18; &#xD750;&#xB984; &#xC140; (&mu;FC) &#xC7A5;&#xCE58; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAE30;&#xC220;. &Mu;FC &#xC7A5;&#xCE58; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD37C;&#xC9C0;&#xB294; &#xD63C;&#xD569; &#xAE30;&#xBC18; &#xB18D;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC0DD;&#xC131;&#xAE30;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; biofilms &#xC591;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; 8 &#xAC1C;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; microchambers&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5; &#xC555; &#xBC38;&#xBE0C;&#xC640; &#xC2DC;&#xB4DC; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xD63C;&#xD569; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xD3EC;&#xD2B8; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC140;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xBBF9;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; biofilm microchamber&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC808;&#xC5F0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xB610;&#xD55C; &#xC5F0;&#xC18D;, &#xC77C;&#xAD04; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; semi-batch &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC798; &#xC218;&#xD589; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xD569;, &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC758; biofilm &#xAC1C;&#xBC1C; indole &#xAC19;&#xC740; biofilm &#xC2E0;&#xD638; (7-hydroxyindole &#xBC0F; isatin)&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB97C; &Mu;fc&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xAC10;&#xC5FC;&#xACFC; biofilm &#xD615;&#xC131; &#xC774;&#xB098; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xD654;&#xD559; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xBD80;&#xCC29;&#xC744; &#xC120;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC138;&#xADE0; biofilm &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBBF8;&#xC138; &#xC7A5;&#xCE58;.

Las bacterias se encuentran casi siempre en los nichos ecol&#xF3;gicos como matriz encapsulada, asociados de superficie, de especies m&#xFA;ltiples comunidades conocidas como biopel&#xED;culas. Es bien sabido que las se&#xF1;ales qu&#xED;micas solubles producidas por las bacterias influyen en la organizaci&#xF3;n y la estructura de la biopel&#xED;cula, por lo tanto, existe un inter&#xE9;s significativo en la comprensi&#xF3;n de c&#xF3;mo las se&#xF1;ales qu&#xED;micas diferentes se utilizan de forma coordinada para el desarrollo comunitario. Los m&#xE9;todos convencionales para investigar la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas, como las celdas de flujo macro-escala, son de bajo rendimiento, requieren de grandes vol&#xFA;menes, y no permitir el control espacial y temporal de la formaci&#xF3;n de biofilm de la comunidad. Aqu&#xED;, se describe el desarrollo de un PDMS basado en dos capas de flujo microflu&#xED;dico celular (&#x3BC;FC) dispositivo para investigar la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas bacterianas y la organizaci&#xF3;n en respuesta a diferentes concentraciones de se&#xF1;ales solubles. El dispositivo contiene ocho &#x3BC;FC microc&#xE1;maras separadas para cultivar las biopel&#xED;culas expuestas a ocho concentraciones diferentes de se&#xF1;ales a trav&#xE9;s de una &#xFA;nica mezcla difusiva basado generador gradiente de concentraci&#xF3;n. La presencia de v&#xE1;lvulas neum&#xE1;ticas y un puerto de c&#xE9;lulas siembra separada que es independiente de gradiente de mezcla canales ofrece un aislamiento completo de la biopel&#xED;cula microcamara desde el mezclador de gradiente, y tambi&#xE9;n funciona bien bajo continuo por lotes, por lotes o semi-condiciones. Se demuestra la utilidad de la &#x3BC;FC mediante el estudio del efecto de diferentes concentraciones de las se&#xF1;ales de biofilm como indol-(7-hidroxi-y isatina), ya sea individualmente o en combinaci&#xF3;n, en el desarrollo del biofilm del pat&#xF3;geno Escherichia coli. Este modelo puede ser utilizado para desarrollar una comprensi&#xF3;n fundamental de acontecimientos que conducen a la fijaci&#xF3;n bacteriana a las superficies que son importantes en las infecciones y los productos qu&#xED;micos que influyen en la formaci&#xF3;n de biopel&#xED;culas o inhibici&#xF3;n.

Manjunath Hegde

McFerrin Department of Chemical Engineering

Texas A&M University

Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions