Title Cell Encapsulation by Droplets

Harvard Medical School

Brigham and Women's Hospital

&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x5408;&#x5E76;&#x5230;&#x76EE;&#x6807; CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x4E3A;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x70B9;-&#x7684;&#x62A4;&#x5728;&#x8D44;&#x6E90;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x96C6;&#x6210;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x82AF;&#x7247;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x53CA;&#x65E0;&#x9700;&#x4F7F;&#x7528;&#x6602;&#x8D35;&#x7684;&#x6D01;&#x51C0;&#x5BA4;&#x8BBE;&#x5907;&#x53EA;&#x9700;&#x7528;&#x4E00;&#x53F0;&#x6FC0;&#x5149;&#x5207;&#x5272;&#x673A;&#x634F;&#x9020;&#x3002;&#x8981;&#x6355;&#x83B7; CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x3001; &#x6297; CD4 &#x6297;&#x4F53;&#x5C06;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4FA7;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x7535;&#x8377;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x5668;&#x4EF6; &#xFF08;CCD&#xFF09; &#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x900F;&#x955C;&#x9634;&#x5F71;&#x900F;&#x660E;&#x82AF;&#x7247;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x88AB;&#x4FD8;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x7070;&#x5EA6;&#x56FE;&#x50CF;&#x7684; 24 &#x6BEB;&#x7C73; x 4 &#x6BEB;&#x7C73; x 50 microm &#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x4E2D;&#x6355;&#x6349;&#x5230;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x88AB;&#x901A;&#x8FC7;&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x81EA;&#x52A8;&#x8BA1;&#x6570;&#x8F6F;&#x4EF6;&#x5217;&#x4E3E; 3s &#x4E2D;&#x6355;&#x6349;&#x5230;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x90FD;&#x8FD8;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x548C;&#x624B;&#x52A8;&#x8BA1;&#x7B97;&#x5728;&#x5185;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x7BA1;&#x7406;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x7EFC;&#x5408;&#x7BA1;&#x7406;&#x5E73;&#x53F0;&#x5B9E;&#x73B0; 70.2+/-6.5%&#x6355;&#x83B7;&#x6548;&#x7387;&#x3001; 88.8+/-5.4%&#x6355;&#x83B7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; 96 1.6 %ccd &#x6548;&#x7387;&#x3001; &#x548C; 83.5+/-2.4%+ CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E3A;&#x6574;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x6027;&#x80FD; &#xFF08;n = 9 &#x8BBE;&#x5907;&#xFF09; &#x76F8;&#x6BD4;&#x9EC4;&#x91D1;&#x6807;&#x51C6;&#xFF0C;&#x5373;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x3002;&#x7EFC;&#x5408;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x5728; 10 &#x5206;&#x949F;&#x5185;&#x4F7F; CD4 &#x8BA1;&#x6570;&#x3002;&#x7EFC;&#x5408;&#x7BA1;&#x7406;&#x5E73;&#x53F0;&#x70B9;&#x770B;&#x597D;&#x65B9;&#x5411;&#x70B9;&#x7684;&#x62A4;&#x7406;&#x68C0;&#x9A8C; (POCT) &#x5230;&#x8FC5;&#x901F;&#x6355;&#x83B7;&#x3001; &#x56FE;&#x50CF;&#x548C;&#x8BA1;&#x6570;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x4ECE;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x81EA;&#x52A8;&#x7684;&#x4E8B;&#x3002;

&#x96C6;&#x6210;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x548C;&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x70B9;&#x7684;&#x7167;&#x987E;&#x3002;

We demonstrate an integrated platform that merges a microfluidic chip with lensless imaging to target CD4(+) T-lymphocyte counts for HIV point-of-care testing at resource-limited settings. The chips were designed and fabricated simply with a laser cutter without using expensive cleanroom equipment. To capture CD4(+) T-lymphocytes from blood, anti-CD4 antibody was immobilized on only one side of the microfluidic chip. These captured cells were detected through an optically clear chip using a charge coupled device (CCD) sensor by lensless shadow imaging techniques. Gray scale image of the captured cells in a 24 mm x 4 mm x 50 microm microfluidic chip was obtained by the lensless imaging platform. The automatic cell counting software enumerated the captured cells in 3s. Captured cells were also imaged with a fluorescence microscope and manually counted to characterize functionality of the integrated platform. The integrated platform achieved 70.2+/-6.5% capture efficiency, 88.8+/-5.4% capture specificity for CD4(+) T-lymphocytes, 96+/-1.6% CCD efficiency, and 83.5+/-2.4% overall platform performance (n=9 devices) compared to the gold standard, i.e. flow cytometry count. The integrated system gives a CD4 count from blood within 10 min. The integrated platform points a promising direction for point-of-care testing (POCT) to rapidly capture, image and count subpopulations of cells from blood samples in an automated matter.

Integrating microfluidics and lensless imaging for point-of-care testing.

Nous d&#xE9;montrons une plate-forme int&#xE9;gr&#xE9;e qui fusionne une puce microfluidique avec l&#x26;#39;imagerie sans lentille de CD4 cibles (+) des lymphocytes T comtes pour le VIH au point de soins essais &#xE0; ressources limit&#xE9;es. Les puces ont &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;ues et fabriqu&#xE9;es tout simplement avec un cutter laser sans utiliser de mat&#xE9;riel de salle blanche ch&#xE8;re. &#xC0; capturer CD4 +) les lymphocytes T &#xE0; partir du sang, anticorps anti-CD4 a &#xE9;t&#xE9; immobilis&#xE9; sur un seul c&#xF4;t&#xE9; de la puce microfluidique. Ces cellules captur&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s par une puce optiquement clair en utilisant un dispositif &#xE0; couplage de charge (CCD) par les techniques d&#x26;#39;imagerie sans lentille ombre. Image en niveaux de gris des cellules captur&#xE9;es dans un 24 mm x 4 mm x 50 microm des puces microfluidiques a &#xE9;t&#xE9; obtenue par la plate-forme d&#x26;#39;imagerie sans lentille. Le logiciel de comptage automatique de la cellule a &#xE9;num&#xE9;r&#xE9; les cellules captur&#xE9;es dans 3s. Les cellules captur&#xE9;es ont &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; imag&#xE9; avec un microscope &#xE0; fluorescence et compt&#xE9;es manuellement pour caract&#xE9;riser la fonctionnalit&#xE9; de la plate-forme int&#xE9;gr&#xE9;e. La plate-forme int&#xE9;gr&#xE9;e atteint 70,2 + efficacit&#xE9; de captage / -6,5%, 88,8 + sp&#xE9;cificit&#xE9; de capture / -5,4% pour CD4 (+) les lymphocytes T, 96 + / -1,6% de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de la CCD, et de 83,5 + / -2,4% de performance plate-forme globale ( n = 9 appareils) par rapport &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;talon-or, le comte c.-&#xE0;-cytom&#xE9;trie en flux. Le syst&#xE8;me int&#xE9;gr&#xE9; donne un nombre de CD4 du sang &#xE0; moins de 10 min. La plate-forme int&#xE9;gr&#xE9;e souligne une direction prometteuse pour le point-of-care testing (POCT) &#xE0; saisir rapidement, l&#x26;#39;image et des sous-populations de cellules de comptage &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons de sang dans une affaire automatis&#xE9;.

Microfluidique Int&#xE9;gration et imagerie sans lentille pour Point-of-care test

Wir zeigen eine integrierte Plattform, die einen mikrofluidische-Chip mit lensless Darstellung zum Ziel, die CD4(+) T-Lymphozyten f&uuml;r Point f&uuml;hrt-of-Care-Tests bei beschr&auml;nkten Ressourcen Einstellungen von HIV z&auml;hlt. Die Chips wurden entworfen und fabriziert einfach mit einem Laser-Cutter ohne teure Reinraum-Ausr&uuml;stungen. Um CD4(+) T-Lymphozyten aus dem Blut zu erfassen, wurde Anti-CD4 Antik&ouml;rper auf nur eine Seite der Microfluidic Chip immobilisiert. Diese aufgezeichneten Zellen wurden durch eine optisch klare Chip mit einem kostenlos-coupled Device (CCD)-Sensor von lensless Shadow bildgebenden Verfahren erkannt. Graustufen-Bild der aufgezeichneten Zellen in einem 24 mm x 4 mm x 50 Microm Microfluidic Chip wurde von der lensless-Bildbearbeitung-Plattform erhalten. Die automatische Zelle z&auml;hlen Software aufgelistet die aufgezeichneten Zellen in 3s. Erfasste Zellen waren auch mit einem Fluoreszenzmikroskop abgebildet und manuell gez&auml;hlt, um die Funktionalit&auml;t der integrierten Plattform zu charakterisieren. Die integrierte Plattform erreicht 70.2+/-6.5% Erfassung Effizienz, 88.8+/-5.4% Erfassung Spezifit&auml;t f&uuml;r CD4(+) T-Lymphozyten, 96 +/-1,6 % CCD Effizienz und 83.5+/-2.4% Plattform Gesamtleistung (n = 9 Ger&auml;te) im Vergleich zu den Gold-Standard, d.h. flie&szlig;en Cytometry Graf. Das integrierte System gibt eine CD4-Z&auml;hlung von Blut innerhalb von 10 min. Die integrierte Plattform weist eine vielversprechende Richtung f&uuml;r Point-of-Care Test (POCT) zu schnell erfassen, Bild und Graf Subpopulationen von Zellen aus Blutproben in ein automatisiertes Angelegenheit.

Mikrofluidik und lensless Imaging f&uuml;r Point-of-Care testing zu integrieren.

Dimostriamo una piattaforma integrata che unisce un chip microfluidico con ottica imaging a destinazione che CD4(+) T-linfociti conta per HIV point-of-care testing a impostazioni di risorse limitate. I chip sono stati progettati e fabbricati semplicemente con un cutter laser senza l&#39;utilizzo di attrezzature costose per camere bianche. Per catturare CD4(+) T-linfociti da sangue, anticorpi anti-CD4 &egrave; stato immobilizzato su un solo lato del chip microfluidico. Queste cellule catturate sono state rilevate attraverso un chip otticamente chiaro utilizzando un sensore di charge coupled device (CCD) da ombra ottica, tecniche di imaging. Immagine a scala di grigi delle cellule catturate in un 24 mm x 4 mm x 50 microm microfluidic chip &egrave; stato ottenuto con la piattaforma di imaging ottica. La cella automatica conteggio software enumerato le cellule catturate in 3s. Cellule catturate furono anche fotografate con un microscopio a fluorescenza e contate manualmente per caratterizzare le funzionalit&agrave; della piattaforma integrata. La piattaforma integrata raggiunto 70.2+/-6.5% cattura l&#39;efficienza, specificit&agrave; cattura 88.8+/-5.4% per CD4(+) T-linfociti, 96 + 1,6% efficienza CCD e 83.5+/-2.4% le prestazioni complessive della piattaforma (n = 9 dispositivi) rispetto al gold standard, cio&egrave; fluiscono cytometry conte. Il sistema integrato d&agrave; una conta di CD4 da sangue entro 10 min. La piattaforma integrata punti una promettente direzione per point-of-care testing (POCT) per rapidamente cattura, immagine e conteggio delle sottopopolazioni di cellule da campioni di sangue in una materia automatizzato.

Integrazione di microfluidica e ottica imaging per point-of-care testing.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;CD4&#xFF08;+&#xFF09;&#x8CC7;&#x6E90;&#x304C;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;HIV&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x7528;&#x306E;T-&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6570;&#x306B;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30B8;&#x3059;&#x308B;&#x7D71;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x9AD8;&#x4FA1;&#x306A;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x30EB;&#x30FC;&#x30E0;&#x6A5F;&#x5668;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3057;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;&#x306E;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6297;CD4&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x7247;&#x5074;&#x306E;&#x307F;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C9;&#x30A6;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x96FB;&#x8377;&#x7D50;&#x5408;&#x7D20;&#x5B50;&#xFF08;CCD&#xFF09;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5149;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x900F;&#x660E;&#x306A;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; 24&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#x3067;&#x6355;&#x6349;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x753B;&#x50CF;&#x306F;&#x3001;X 4&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xD7;50&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002; 3S&#x306B;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5217;&#x6319;&#x81EA;&#x52D5;&#x7D30;&#x80DE;&#x8A08;&#x6570;&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A2;&#x3002;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x64AE;&#x50CF;&#x3057;&#x3001;&#x624B;&#x52D5;&#x3067;&#x7D71;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D71;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;70.2&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;+ / -6.5&#xFF05;&#x306E;&#x6355;&#x7372;&#x52B9;&#x7387;&#x3001;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3001;96 + / -1.6&#xFF05;CCD&#x52B9;&#x7387;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;83.5 + / -2.4&#xFF05;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#xFF08;&#x305F;&#x3068;&#x3048;&#x3070;&#x3001;88.8 + / -5.4&#xFF05;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;N = 9&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#xFF09;&#x306E;&#x30B4;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x30C9;&#x3001;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D71;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;10&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x8840;&#x6DB2;&#x304B;&#x3089;CD4&#x6570;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D71;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x691C;&#x67FB;&#xFF08;POCT&#xFF09;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x554F;&#x984C;&#x3067;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x6307;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D71;&#x5408;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x7528;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;

&#xBCD1;&#xD569; &#xB300;&#xC0C1; CD4(+) T-&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xC5D0;&#xC774;&#xC988; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8;-&#xC911;-&#xCF00;&#xC5B4; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4; &#xC81C;&#xD55C; &#xC124;&#xC815;&#xC744; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC74;&#xC758;&#xB97C; lensless &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69; &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE69; &#xC124;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xBE44;&#xC2FC; &#xD06C;&#xB9B0; &#xB8F8; &#xC7A5;&#xBE44;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xCEE4;&#xD130;&#xC640; &#xAC04;&#xB2E8; &#xC870;&#xC791;. CD4(+) T-&#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD608;&#xC561;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xC548;&#xD2F0; CD4 &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC758; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAE30;&#xBC95; lensless &#xADF8;&#xB9BC;&#xC790; &#xC5EC; &#xCDA9;&#xC804; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xC7A5;&#xCE58; (CCD) &#xC13C;&#xC11C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xD559; &#xD22C;&#xBA85; &#xCE69;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD68C;&#xC0C9;&#xC870; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB294; 24 m m x m 4 m x 50 microm &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; lensless &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5BB;&#xC740;. &#xC790;&#xB3D9; &#xC140; &#xCE74;&#xC6B4;&#xD305; &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC5B4; 3s&#xC5D0; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; &#xC5F4;&#xAC70; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C;&#xB3C4; &#xBA87; &#xAD70;&#xB370; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; 70.2+/-6.5% &#xCEA1;&#xCC98; &#xD6A8;&#xC728;, CD4(+) T-&#xC138;&#xD3EC;, 1.6 %ccd &#xD6A8;&#xC728;&#xACFC; 83.5+/-2.4% + 96 88.8+/-5.4% &#xCEA1;&#xCC98; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; &#xB2EC;&#xC131; &#xC804;&#xCCB4; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC131;&#xB2A5; (n = 9 &#xC7A5;&#xCE58;) cytometry &#xD69F;&#xC218;&#xB97C; &#xD750;&#xB984; &#xC989;, &#xD669;&#xAE08; &#xD45C;&#xC900;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; 10 &#xBD84; &#xC774;&#xB0B4; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; CD4 &#xCE74;&#xC6B4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC810; &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;&#xC758; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xCEA1;&#xCC98;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC218; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC5D0; (POCT) &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1B5;&#xD569; microfluidics &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xAD00;&#xB9AC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; lensless &#xC601;&#xC0C1;.

Se demuestra una plataforma integrada que combina un chip de microfluidos con las im&#xE1;genes sin lentes de CD4 objetivo (+) de linfocitos T cuenta para el VIH en el punto de atenci&#xF3;n de las pruebas en entornos con recursos limitados. Los chips han sido dise&#xF1;ados y fabricados s&#xF3;lo con una cortadora l&#xE1;ser sin necesidad de utilizar equipos de sala limpia caro. Para capturar CD4 (+) T-linfocitos de la sangre, anticuerpo anti-CD4 fue inmovilizado en un solo lado del chip de microfluidos. Estas c&#xE9;lulas capturados fueron detectados a trav&#xE9;s de un chip &#xF3;pticamente transparente con un dispositivo de carga acoplada (CCD) por la sombra sin lentes t&#xE9;cnicas de imagen. Imagen en escala de grises de las c&#xE9;lulas capturadas en un 24 mm x 4 mm x 50 micras chip de microfluidos se obtuvo mediante la plataforma de im&#xE1;genes sin lentes. El software de conteo autom&#xE1;tico de c&#xE9;lulas enumer&#xF3; las c&#xE9;lulas capturadas en 3s. Las c&#xE9;lulas capturadas fueron estudiados tambi&#xE9;n con un microscopio de fluorescencia y de forma manual cuenta para caracterizar la funcionalidad de la plataforma integrada. La plataforma integrada alcanzado 70,2 + / -6,5% de eficiencia de captura, 88.8 + especificidad / -5,4% para la captura de CD4 (+) linfocitos T, 96 + / -1,6% de eficiencia, y CCD de 83,5 + / -2,4% el rendimiento global de la plataforma ( n = 9 equipos) en comparaci&#xF3;n con el patr&#xF3;n oro, es decir, el flujo de la citometr&#xED;a de recuento. El sistema integrado proporciona un recuento de CD4 de la sangre en 10 minutos. La plataforma integrada se&#xF1;ala una direcci&#xF3;n prometedora para la prueba de punto de atenci&#xF3;n (POCT) para capturar r&#xE1;pidamente, la imagen y subpoblaciones recuento de c&#xE9;lulas procedentes de muestras de sangre en un asunto automatizado.

La integraci&#xF3;n de microflu&#xED;dica y de im&#xE1;genes sin lentes para las pruebas de punto de atenci&#xF3;n

&#x751F;&#x7269;&#x4E09;&#x7EF4; (3D) &#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x6CBB;&#x7597;&#x5404;&#x79CD;&#x75BE;&#x75C5;&#x5982;&#x764C;&#x75C7;&#x3001; &#x7EC4;&#x7EC7;&#x529F;&#x80FD;&#x6216;&#x5668;&#x5B98;&#x529F;&#x80FD;&#x8870;&#x7AED;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x9762;&#x4E34;&#x6311;&#x6218;&#x5236;&#x4F5C; 3D &#x7EC4;&#x7EC7;&#x6784;&#x9020;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x672C;&#x673A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x5FAE;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86; bioprinter&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x6253;&#x5370;&#x5C01;&#x88C5;&#x5728;&#x80F6;&#x539F;&#x5185;&#x7684;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE; (5 &#x6BEB;&#x7C73;&#x4E58; 5 &#x6BEB;&#x7C73; x 81 microm&#xFF09; 3D &#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x5F53;&#x524D;&#x55B7;&#x58A8;&#x5370;&#x5237;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x906D;&#x53D7;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x529B;&#x548C;&#x5835;&#x585E;&#x3002;&#x8981;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9650;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F7F;&#x7528;&#x673A;&#x68B0;&#x9600;&#x95E8;&#x8981;&#x6253;&#x5370;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x9AD8;&#x7C98;&#x5EA6;&#x51DD;&#x80F6;&#x524D;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684; bioprinting &#x5E73;&#x53F0;&#x542F;&#x7528; (i) &#x591A;&#x5C42; 3D &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x62C9;&#x4E39;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x7ED3;&#x6784; &#xFF08;&#x6BCF;&#x5C42;&#x539A; 16.2 microm) &#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x6253;&#x5370; &#xFF08;&#x8FD1;&#x7AEF;&#x8F74;&#xFF1A; 18.0 + 7.0 microm &#x548C;&#x8FDC;&#x7AEF;&#x8F74;&#xFF1A; 0.5 + /-4.9 microm)&#xFF0C;(&#x4E8C;) &#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x751F;&#x6210; (1 s &#x6BCF;&#x5C42;&#x3001; 160 &#x98DE;&#x6CAB;/s)&#xFF0C;(&#x4E09;) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6392;&#x79CD;&#x5747;&#x5300;&#x6027; (+ /-2 cells/mm(2) &#x5728; 100 &#x4E07;&#x7EC6;&#x80DE;/mL&#xFF0C;+ /-20 cells/mm(2) &#x5728; 500 &#x4E07;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;/mL 122 26&#x548C; 216 + /-38 cells/mm(2) &#x5728; 1000 &#x4E07;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;/mL&#xFF09;&#xFF0C;&#x53CA; (iv) &#x957F;&#x671F;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684;&#x6587;&#x5316; (&gt; 90%&#xFF0C;14 &#x5929;&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6253;&#x5370; 3D &#x7EC4;&#x7EC7;&#x6784;&#x9020;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x901A;&#x8FC7;&#x542F;&#x7528;&#x6253;&#x5370;&#x7684;&#x66F4;&#x6362;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5236;&#x9020;&#x3002;

&#x901A;&#x8FC7;&#x5355;&#x5143;&#x683C;-&#x62C9;&#x767B;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x98DE;&#x6CAB;&#x5C42;&#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5916;&#x5EF6;&#x5C42;&#x3002;

The ability to bioengineer three-dimensional (3D) tissues is a potentially powerful approach to treat diverse diseases such as cancer, loss of tissue function, or organ failure. Traditional tissue engineering methods, however, face challenges in fabricating 3D tissue constructs that resemble the native tissue microvasculature and microarchitectures. We have developed a bioprinter that can be used to print 3D patches of smooth muscle cells (5 mm x 5 mm x 81 microm) encapsulated within collagen. Current inkjet printing systems suffer from loss of cell viability and clogging. To overcome these limitations, we developed a system that uses mechanical valves to print high viscosity hydrogel precursors containing cells. The bioprinting platform that we developed enables (i) printing of multilayered 3D cell-laden hydrogel structures (16.2 microm thick per layer) with controlled spatial resolution (proximal axis: 18.0 +/- 7.0 microm and distal axis: 0.5 +/- 4.9 microm), (ii) high-throughput droplet generation (1 s per layer, 160 droplets/s), (iii) cell seeding uniformity (26 +/- 2 cells/mm(2) at 1 million cells/mL, 122 +/- 20 cells/mm(2) at 5 million cells/mL, and 216 +/- 38 cells/mm(2) at 10 million cells/mL), and (iv) long-term viability in culture (>90%, 14 days). This platform to print 3D tissue constructs may be beneficial for regenerative medicine applications by enabling the fabrication of printed replacement tissues.

Layer by layer three-dimensional tissue epitaxy by cell-laden hydrogel droplets.

La capacit&#xE9; de bioing&#xE9;nieur en trois dimensions (3D) des tissus est une approche potentiellement puissant pour traiter diverses maladies comme le cancer, la perte de fonction du tissu, ou d&#xE9;faillance d&#x26;#39;un organe. Les m&#xE9;thodes traditionnelles de l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie tissulaire, cependant, face &#xE0; des d&#xE9;fis dans la fabrication de constructions de tissu 3D qui ressemblent &#xE0; la microvascularisation tissu natif et microarchitectures. Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une bioprinter qui peut &#xEA;tre utilis&#xE9;e pour imprimer des correctifs en 3D de cellules musculaires lisses (5 mm x 5 mm x 81 microM) encapsul&#xE9;es dans du collag&#xE8;ne. Actuelles des syst&#xE8;mes d&#x26;#39;impression jet d&#x26;#39;encre souffrent de la perte de la viabilit&#xE9; cellulaire et le colmatage. Pour surmonter ces limitations, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un syst&#xE8;me qui utilise des valves m&#xE9;caniques &#xE0; imprimer de haute viscosit&#xE9; pr&#xE9;curseurs hydrogel contenant des cellules. La plate-forme bioprinting que nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; permet (i) l&#x26;#39;impression de multicouches 3D des structures d&#x26;#39;hydrogel cellules charg&#xE9;es (16,2 &#xE9;paisseur par couche microm) avec une r&#xE9;solution spatiale contr&#xF4;l&#xE9;e (axe proximal: 18,0 + / - 7,0 microm&#xE8;tre et l&#x26;#39;axe distale: 0,5 + / - 4,9 microm&#xE8;tre ), (ii) la g&#xE9;n&#xE9;ration des gouttelettes &#xE0; haut d&#xE9;bit (1 s par couche, 160 gouttelettes / s), (iii) l&#x26;#39;uniformit&#xE9; ensemencement des cellules (26 + / - 2 cellules / mm (2) &#xE0; 1 millions de cellules / mL, 122 + / - 20 cellules / mm (2) &#xE0; 5 millions de cellules / ml, et 216 + / - 38 cellules par mm (2) &#xE0; 10 millions de cellules / ml), et (iv) viabilit&#xE9; &#xE0; long terme dans la culture (&#x26;gt; 90%, 14 jours). Cette plate-forme pour imprimer constructions de tissu 3D peut &#xEA;tre b&#xE9;n&#xE9;fique pour les applications en m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative, en permettant la fabrication de tissus de remplacement imprim&#xE9;s.

Couche par couche d&#x26;#39;&#xE9;pitaxie tissu tridimensionnel par des gouttelettes d&#x26;#39;hydrogel Cell-charg&#xE9;s

Die F&auml;higkeit, Bioingenieurwissenschaften dreidimensionale (3D) Gewebe ist ein potentiell m&auml;chtige Ansatz zur Behandlung von verschiedener Krankheiten wie Krebs, Verlust von Gewebe-Funktion oder Organversagen. Traditionelle Gewebe-engineering-Methoden, Herausforderungen jedoch Epoxidharzen 3D Gewebe-Konstrukte, die die systemeigene Gewebe Microvasculature und Mikroarchitekturen &auml;hneln. Wir haben eine Bioprinter entwickelt, das zum Drucken 3D Flecken der glatten Muskelzellen (5 x 5 mm x 81 Microm) in Kollagen gekapselt werden k&ouml;nnen. Aktuelle Inkjetdrucksystemen leiden Verlust der Zellviabilit&auml;t und Verstopfungen. Diese Einschr&auml;nkungen zu &uuml;berwinden, entwickelten wir ein System, das mechanische Ventile verwendet, um hochviskoses Hydrogel Vorstufen mit Zellen zu drucken. Die Bioprinting-Plattform, die wir entwickelt erm&ouml;glicht i Drucken mehrschichtig 3D Zelle beladene Hydrogel Strukturen (16,2 Microm Dicke pro Schicht) mit kontrollierten r&auml;umlicher Aufl&ouml;sung (proximale Achse: 18.0 +/-7,0 Microm und distale Achse: 0,5 +/-4.9 Microm), II Hochdurchsatz-Tr&ouml;pfchen-Generierung (1 s pro Schicht, 160 Tr&ouml;pfchen/s), (Iii) Zelle Aussaat Homogenit&auml;t (26 +/-2 cells/mm(2) bei 1 Million Zellen/mL, 122 +/-20 cells/mm(2) bei 5 Millionen Zellen/mLund 216 +/-38 cells/mm(2) bei 10 Millionen Zellen/mL), und (iv) langfristige Lebensf&auml;higkeit in Kultur (&gt; 90 %, 14 Tage). Diese Plattform 3D Gewebe Konstrukte Drucken m&ouml;glicherweise vorteilhaft f&uuml;r regenerative Medizin-Anwendungen erm&ouml;glicht die Herstellung von gedruckten Ersatzgewebe.

Schicht f&uuml;r Schicht dreidimensionale Gewebe Epitaxie von Hydrogel Zelle beladene Tr&ouml;pfchen.

La capacit&agrave; di bioingegnere tridimensionale tessuti (3D) &egrave; un approccio potenzialmente potente per il trattamento di diverse malattie come il cancro, la perdita di funzione del tessuto o organo fallimento. Metodi di ingegneria dei tessuti tradizionali, tuttavia, affrontano le sfide nel fabbricare costrutti tessuto 3D che ricordano il microvasculature tessuto nativo e microarchitetture. Abbiamo sviluppato un bioprinter che pu&ograve; essere utilizzato per la stampa 3D patch di cellule muscolari lisce (5 x 5 mm x 81 microm) incapsulate all&#39;interno di collagene. Attuali sistemi di stampa inkjet soffrono di perdita di vitalit&agrave; delle cellule e intasamento. Per superare queste limitazioni, abbiamo sviluppato un sistema che utilizza valvole meccaniche per stampare dei precursori di idrogel ad alta viscosit&agrave; contenenti cellule. La piattaforma bioprinting che abbiamo sviluppato permette di stampa (i) di strutture multistrato 3D cell-laden hydrogel (16,2 microm spessore per ogni strato) con risoluzione spaziale controllata (asse prossimale: 18,0 + 7,0 microm e asse distale: 0,5 + /-4,9 microm), generazione di goccia (ii) ad alta velocit&agrave; (1 s per ogni strato, 160 gocce/s), (iii) cella semina uniformit&agrave; (26 + 2 cells/mm(2) a 1 milione cellule/mL, 122 + /-20 cells/mm(2) a 5 milioni di cellule/mLe 216 + 38 cells/mm(2) a 10 milioni di cellule/mL) e la redditivit&agrave; a lungo termine (iv) in cultura (&amp;gt; 90%, 14 giorni). Questa piattaforma di stampa tessuto 3D costrutti pu&ograve; essere utile per le applicazioni della medicina rigenerativa consentendo la realizzazione di tessuti stampati di sostituzione.

Strato di epitassia tessuto tridimensionale strato di goccioline di idrogel a carico delle cellule.

3&#x6B21;&#x5143;&#xFF08;3D&#xFF09;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;bioengineer&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x764C;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x81D3;&#x5668;&#x4E0D;&#x5168;&#x306A;&#x3069;&#x3001;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5DE5;&#x5B66;&#x7684;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x30FC;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x8AB2;&#x984C;&#x306B;&#x76F4;&#x9762;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30AB;&#x30D7;&#x30BB;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;5mm&#xD7;5mm&#x306E;&#xD7;81&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;3D&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x5370;&#x5237;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;bioprinter&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B8;&#x30A7;&#x30C3;&#x30C8;&#x5370;&#x5237;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3068;&#x76EE;&#x8A70;&#x307E;&#x308A;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306B;&#x82E6;&#x3057;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x9AD8;&#x7C98;&#x5EA6;&#x30CF;&#x30A4;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x3092;&#x5370;&#x5237;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x6A5F;&#x68B0;&#x5F01;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 0.5 + /  -  4.9&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF1A; -  7.0&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9060;&#x4F4D;&#x8EF8;18.0 + /&#xFF1A;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;bioprinting&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;i&#xFF09;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7A7A;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#xFF08;&#x8FD1;&#x4F4D;&#x8EF8;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x591A;&#x5C64;3&#x6B21;&#x5143;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3060;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020;&#xFF08;&#x5C64;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x539A;&#x3055;16.2&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF09;&#x306E;&#x5370;&#x5237;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#xFF09;&#x3001;&#xFF08;II&#xFF09;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x751F;&#x6210;&#xFF08;&#x5C64;&#x3042;&#x305F;&#x308A;1&#x79D2;&#x3001;160&#x6EF4;/&#x79D2;&#xFF09;&#x3001;&#xFF08;iii&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x64AD;&#x7A2E;&#x306E;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#xFF08;26 + /  -  2&#x7D30;&#x80DE;/ mm&#xFF08;2&#xFF09;1&#x4E07;&#x500B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;/ mL&#x3067;&#x3001;122 + / -  20&#x7D30;&#x80DE;/ mm&#xFF08;2&#xFF09;5&#x4E07;&#x500B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;/ mL&#x3068;216 + /&#x6642; -  10&#x4E07;&#x7D30;&#x80DE;/ mL&#x3067;38&#x7D30;&#x80DE;/ mm&#xFF08;2&#xFF09;&#xFF09;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#xFF08;iv&#xFF09;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x5B58;&#x7D9A;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#xFF08;&#x26;gt; 90&#xFF05;&#x3001; 14&#x65E5;&#x9593;&#xFF09;&#x3002;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5370;&#x5237;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5370;&#x5237;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4EA4;&#x63DB;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x88FD;&#x9020;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x7642;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x76CA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3060;&#x30B2;&#x30EB;&#x6EF4;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EC;&#x30A4;&#x30E4;3&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x30A8;&#x30D4;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30FC;&#x6CD5;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5C64;

Bioengineer 3 &#xCC28;&#xC6D0; (3D) &#xC870;&#xC9C1; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC740; &#xC554;, &#xC870;&#xC9C1; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xAD00; &#xC2E4;&#xD328;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB4F1; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C8;&#xD658; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC870;&#xC791; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC870;&#xC9C1; microvasculature &#xBC0F; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;&#xC544;&#xD0A4;&#xD14D;&#xCC98;&#xAC00; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xBA74;. &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90;&#xC5D0; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xB41C; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC; (5mm x 5mm x 81 microm)&#xC758; 3D &#xD328;&#xCE58; &#xC778;&#xC1C4; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; bioprinter&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xC789;&#xD06C;&#xC82F; &#xC778;&#xC1C4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xBC0F; &#xB9C9;&#xD798;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xACE0;&#xD1B5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD55C;&#xACC4;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xBC38;&#xBE0C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xACE0; &#xC810;&#xB3C4; hydrogel &#xB2E8;&#xACC4;&#xC778; &#xC778;&#xC1C4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. Bioprinting &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xB2E4;&#xCE35;&#xB41C; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC140; &#xB77C;&#xB374; hydrogel &#xAD6C;&#xC870; (&#xCE35; &#xB2F9; &#xB450;&#xAEBC;&#xC6B4; 16.2 microm) &#xC81C;&#xC5B4; &#xACF5;&#xAC04; &#xBD84;&#xD574;&#xB2A5;&#xC758; &#xC778;&#xC1C4; (i) (&#xADFC; &#xC704; &#xCD95;: 18.0 &plusmn; 7.0 microm&#xACFC; &#xC6D0;&#xC2EC; &#xCD95;: 4.9 microm &plusmn; 0.5), (ii) &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xB4DC;&#xB86D;&#xB9BF; &#xC138;&#xB300; (1 &#xCE35; &#xB2F9; s, 160 &#xBC29;&#xC6B8;/s), (iii) &#xC140; &#xADE0;&#xC77C;&#xC131; (26 &#xBC31;&#xB9CC; &#xC140;/mL, 5 &#xBC31;&#xB9CC; &#xC140;/Ml&#xC5D0;&#xC11C; 20 cells/mm(2) + 122&#xC5D0;&#xC11C; 2 cells/mm(2) + &#xC2DC;&#xB4DC;&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xCC9C;&#xB9CC; &#xC140;/Ml&#xC5D0;&#xC11C; 38 cells/mm(2) + 216), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; (4) &#xBB38;&#xD654; (&amp;gt; 90%, 14 &#xC77C;). &#xC774; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; 3D &#xC870;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xC778;&#xC1C4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC778;&#xC1C4; &#xB300;&#xCCB4; &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xC870; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB808;&#xC774;&#xC5B4; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xD53C; &#xC140; &#xB77C;&#xB374; hydrogel &#xBC29;&#xC6B8; &#xC5EC; &#xC5EC;.

La capacidad de bioingenier&#xED;a en tres dimensiones (3D) los tejidos es un enfoque potencialmente poderosa para el tratamiento de diversas enfermedades como el c&#xE1;ncer, la p&#xE9;rdida de la funci&#xF3;n del tejido, o la insuficiencia de &#xF3;rganos. Los m&#xE9;todos tradicionales de ingenier&#xED;a de tejidos, sin embargo, se enfrentan a retos en la fabricaci&#xF3;n de estructuras en 3D de tejidos que se asemejan a la microvasculatura del tejido nativo y microarquitecturas. Hemos desarrollado un bioprinter que se puede utilizar para imprimir los parches 3D de c&#xE9;lulas de m&#xFA;sculo liso (5 mm x 5 mm x 81 microM) encapsuladas dentro de col&#xE1;geno. Los sistemas actuales de impresi&#xF3;n de inyecci&#xF3;n de tinta sufren de p&#xE9;rdida de la viabilidad celular y la obstrucci&#xF3;n. Para superar estas limitaciones, hemos desarrollado un sistema que utiliza para imprimir las v&#xE1;lvulas mec&#xE1;nicas de alta viscosidad que contienen precursores de hidrogel de las c&#xE9;lulas. La plataforma bioprinting que hemos desarrollado permite (i) la impresi&#xF3;n de varias capas de estructuras 3D de hidrogel cargados de c&#xE9;lulas (16,2 micras de espesor por capa) con una resoluci&#xF3;n espacial controlada (proximal del eje: 18.0 + / - 7,0 micras y el eje distal: 0,5 + / - 4,9 micras ), (ii) de alto rendimiento de la generaci&#xF3;n de las gotas (1 s por capa, de 160 gotas / s), (iii) la uniformidad de la siembra de c&#xE9;lulas (26 + / - 2 c&#xE9;lulas / mm (2) en 1 mill&#xF3;n de c&#xE9;lulas / ml, 122 + / - 20 c&#xE9;lulas / mm (2) a los 5 millones de c&#xE9;lulas / ml, y 216 + / - 38 c&#xE9;lulas / mm (2) en 10 millones de c&#xE9;lulas / ml), y (iv) viabilidad a largo plazo en la cultura (&#x26;gt; 90%, 14 d&#xED;as). Esta plataforma para imprimir construcciones 3D tejido puede ser beneficiosa para las aplicaciones de medicina regenerativa al permitir la fabricaci&#xF3;n de tejidos de reemplazo impresas.

Capa por capa tridimensional del tejido epitaxia por las gotas de hidrogel cargado de c&#xE9;lulas

&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5408;&#x5E76; CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x5728;&#x8D44;&#x6E90;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x8981;&#x6355;&#x83B7; CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6297; CD4 &#x6297;&#x4F53;&#x88AB;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#x4E0A;&#x3002;&#x7535;&#x8377;&#x8026;&#x5408;&#x7684;&#x5668;&#x4EF6; &#xFF08;CCD&#xFF09; &#x4F20;&#x611F;&#x5668;&#x4F7F;&#x7528;&#x900F;&#x955C;&#x9634;&#x5F71;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x7070;&#x5EA6;&#x9634;&#x5F71;&#x56FE;&#x50CF;&#x6355;&#x83B7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x82AF;&#x7247; (24 &#x6BEB;&#x7C73; x 4 &#x6BEB;&#x7C73; x 50 &#x5988;&#x5988;) &#x88AB;&#x5217;&#x4E3E;&#x5728;&#x4E09;&#x79D2;&#x949F;&#x5185;&#x4F7F;&#x7528;&#x8BA1;&#x6570;&#x8F6F;&#x4EF6;&#x81EA;&#x52A8;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8BE5;&#x8BBE;&#x5907;&#x5B9E;&#x73B0; 70.2 + /-6.5%&#x6355;&#x83B7;&#x6548;&#x7387;&#x3001; 88.8 + /-5.4%&#x6355;&#x83B7;&#x7684; CD4(+) T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x3001; 96 + CCD &#x6548;&#x7387; 1.6%&#xFF0C;+ /-2.4 %83.5 &#x6574;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x6027;&#x80FD; &#xFF08;n = 9 &#x8BBE;&#x5907;&#xFF09;&#x3002;&#x6B64;&#x96C6;&#x6210;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x5177;&#x6709;&#x6F5C;&#x529B;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x70B9;&#x7684;&#x62A4;&#x7406; (POCT) &#x4ECE;&#x672A;&#x7ECF;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x5168;&#x8840;&#x8FC5;&#x901F;&#x6355;&#x83B7;&#x3001; &#x56FE;&#x50CF;&#x548C;&#x8BA1;&#x6570;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;

&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x70B9;&#x7684;&#x7167;&#x987E;&#x3002;

We show a platform that merges a microfluidic chip with lensless imaging for CD4(+) T-lymphocyte counting at resource-limited settings. To capture CD4(+) T lymphocytes, anti-CD4 antibody was immobilized on a microfluidic chip. The captured cells were detected by a charge coupled device (CCD) sensor using lensless shadow imaging techniques. Gray scale shadow images of captured cells on the chip (24 mm x 4 mm x 50 mum) were enumerated in three seconds using an automatic cell counting software. The device achieved 70.2 +/- 6.5% capture efficiency, 88.8 +/- 5.4% capture specificity for CD4(+) T-lymphocytes, 96 +/- 1.6% CCD efficiency, and 83.5 +/- 2.4% overall platform performance (n = 9 devices). This integrated platform has potential for point-of-care testing (POCT) to rapidly capture, image and count specific cell types from unprocessed whole blood.

Lensless imaging for point-of-care testing.

Nous montrons une plate-forme qui fusionne une puce microfluidique avec l&#x26;#39;imagerie sans lentille pour CD4 (+) des lymphocytes T comptage &#xE0; ressources limit&#xE9;es. Pour capturer CD4 (+) des lymphocytes T, anticorps anti-CD4 a &#xE9;t&#xE9; immobilis&#xE9; sur une puce microfluidique. Les cellules captur&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s par un dispositif &#xE0; couplage de charge (CCD) en utilisant des techniques d&#x26;#39;imagerie sans lentille ombre. Gris des images d&#x26;#39;ombre &#xE9;chelle de cellules captur&#xE9;es sur la puce (24 mm x 4 mm x 50 mum) sont &#xE9;num&#xE9;r&#xE9;es dans trois secondes &#xE0; l&#x26;#39;aide d&#x26;#39;une cellule de comptage automatique des logiciels. Le dispositif r&#xE9;alis&#xE9; 70,2 + / - 6,5% l&#x26;#39;efficacit&#xE9; de capture, 88,8 + / - la sp&#xE9;cificit&#xE9; de capture de 5,4% pour CD4 (+) des lymphocytes T, 96 + / - 1,6% l&#x26;#39;efficacit&#xE9; CCD, et de 83,5 + / - 2,4% de rendement plate-forme globale (n = 9 appareils). Cette plate-forme int&#xE9;gr&#xE9;e a le potentiel pour le point-of-care testing (POCT) &#xE0; saisir rapidement, l&#x26;#39;image et &#xE0; compter des types cellulaires sp&#xE9;cifiques &#xE0; partir de sang entier non transform&#xE9;.

Imagerie sans lentille pour Point-of-care test

Wir zeigen eine Plattform, die einen mikrofluidische-Chip mit lensless Imaging f&uuml;r CD4(+) T-Lymphozyten Z&auml;hlung mit beschr&auml;nkten Ressourcen Einstellungen zusammenf&uuml;hrt. Um CD4(+) T-Lymphozyten zu erfassen, wurde auf einem Chip mikrofluidische Anti-CD4 Antik&ouml;rper immobilisiert. Die aufgezeichneten Zellen wurden durch einen kostenlos-coupled Device (CCD)-Sensor mit lensless Schatten bildgebenden Verfahren erkannt. Graustufen-Schattenbilder erfassten Zellen auf dem Chip (24 x 4 mm x 50 Mum) wurden in drei Sekunden mithilfe einer automatischen Zelle z&auml;hlen Software aufgelistet. Das Ger&auml;t erreicht 70,2 +/-6,5 % Abscheidung Effizienz, 88,8 +/-5,4 % Abscheidung Spezifit&auml;t f&uuml;r CD4(+) T-Lymphozyten, 96 +/-1,6 % CCD Effizienz und 83,5 +/-2,4 % Gesamtleistung Plattform (n = 9 Ger&auml;te). Diese integrierte Plattform hat Potenzial f&uuml;r Point-of-Care Test (POCT) zu schnell erfassen, Bild und Count bestimmter Zelltypen aus unverarbeiteten Vollblut.

Lensless imaging f&uuml;r Point-of-Care-Tests.

Vi mostriamo una piattaforma che unisce un chip microfluidico con ottica imaging per il conteggio dei linfociti-T CD4(+) a impostazioni di risorse limitate. Per catturare i linfociti T CD4(+), anticorpo anti-CD4 &egrave; stato immobilizzato su un chip microfluidico. Le cellule catturate sono state rilevate da un sensore coupled device (CCD) carica utilizzando ombra ottica, tecniche di imaging. Scala di grigio ombra immagini di cellule catturate sul chip (24 mm x 4 mm x 50 mamma) sono stati enumerati in tre secondi utilizzando una cella automatica software di conteggio. Il dispositivo realizzato 70.2 + 6,5% cattura efficienza, 88,8 + 5,4% cattura specificit&agrave; per CD4(+) T-linfociti, 96 + 1,6% efficienza CCD e 83,5 + 2,4% le prestazioni complessive della piattaforma (n = 9 dispositivi). Questa piattaforma integrata ha un potenziale per il point-of-care testing (POCT) per rapida cattura, immagine e numero di tipi cellulari specifici da sangue intero non trasformati.

Ottica di imaging per il point-of-care testing.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;CD4&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#xFF08;+&#xFF09;&#x8CC7;&#x6E90;&#x304C;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3067;T-&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x30DE;&#x30FC;&#x30B8;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6297;CD4&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x6D41;&#x4F53;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x4E0A;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x5F71;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x96FB;&#x8377;&#x7D50;&#x5408;&#x7D20;&#x5B50;&#xFF08;CCD&#xFF09;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B5;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x4E0A;&#x306B;&#x6355;&#x6349;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;24&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xD7;4&#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xD7;50 MUM&#xFF09;&#x306E;&#x30B0;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x5F71;&#x306E;&#x753B;&#x50CF;&#x306F;&#x3001;&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A2;&#x3092;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x52D5;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;3&#x79D2;&#x3067;&#x5217;&#x6319;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;70.2&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;+ /  -  6.5&#xFF05;&#x306E;&#x6355;&#x7372;&#x52B9;&#x7387;&#x3001;88.8 + /  -  1.6&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;CCD&#x52B9;&#x7387;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;83.5 + /  -   -  CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x3001;96 + / 5.4&#xFF05;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x7279;&#x7570;&#x6027;2.4&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#xFF08;N = 9&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#xFF09;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x3001;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x30FC;&#x753B;&#x50CF;&#x3068;&#x672A;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x5168;&#x8840;&#x304B;&#x3089;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3092;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x691C;&#x67FB;&#xFF08;POCT&#xFF09;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x79D8;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AA;&#x30D6;&#x30B1;&#x30A2;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x7528;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC5D0; lensless &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; CD4(+) T-&#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xACC4;&#xC0B0; &#xB9AC;&#xC18C;&#xC2A4; &#xC81C;&#xD55C; &#xC124;&#xC815;&#xC744; &#xBCD1;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. CD4(+) T &#xB9BC;&#xD504; &#xD1A8;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xC548;&#xD2F0; CD4 &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC5D0; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; lensless &#xADF8;&#xB9BC;&#xC790; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCDA9;&#xC804; &#xACB0;&#xD569; &#xB41C; &#xC7A5;&#xCE58; (CCD) &#xC13C;&#xC11C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB808;&#xC774; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C; &#xADF8;&#xB9BC;&#xC790; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC758; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xC140; &#xCE69; (24 4mm x 4mm x 50 &#xC5C4;&#xB9C8;) 3 &#xCD08; &#xC138; &#xACE0; &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC5B4; &#xC790;&#xB3D9; &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F4;&#xAC70; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC7A5;&#xCE58; &#xB2EC;&#xC131; 6.5% &#xCEA1;&#xCC98; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131; + 70.2, + 5.4% &#xCEA1;&#xCC98; CD4(+) T-&#xC138;&#xD3EC; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131; 88.8, 1.6 %ccd &#xD6A8;&#xC728; + 96 &plusmn; 2.4 %83.5 &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xC131;&#xB2A5; (n = 9 &#xC7A5;&#xCE58;). &#xC774; &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC810; &#xCC98;&#xB9AC; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xCEA1;&#xCC98;, &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xC218; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD; (POCT) &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;.

Lensless &#xCF00;&#xC5B4; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC601;&#xC0C1;.

Se presenta una plataforma que combina un chip de microfluidos con las im&#xE1;genes sin lentes de CD4 (+) el recuento de linfocitos T en entornos con recursos limitados. Para capturar CD4 (+) linfocitos T, anticuerpos anti-CD4 fue inmovilizado sobre un chip de microfluidos. Las c&#xE9;lulas capturadas fueron detectados por un dispositivo de carga acoplada (CCD) utilizando t&#xE9;cnicas de imagen sin lentes sombra. Gray im&#xE1;genes de la sombra a escala de c&#xE9;lulas capturadas en el chip (24 mm x 4 mm x 50 m&#xED;nimo) se enumeran en tres segundos, utilizando una celda de conteo autom&#xE1;tico de software. El dispositivo logra 70,2 + / - 6,5% la eficiencia de captura, 88.8 + / - 5,4% de especificidad para la captura de CD4 (+) los linfocitos T, 96 + / - 1,6% la eficiencia de la CLD, y 83.5 + / - 2,4% de rendimiento global de la plataforma (n = 9 equipos). Esta plataforma integrada tiene un gran potencial para las pruebas de punto de atenci&#xF3;n (POCT) para capturar con rapidez, la imagen y contar con tipos espec&#xED;ficos de c&#xE9;lulas de la sangre entera sin procesar.

Imagen sin cristalino para las pruebas de punto de atenci&#xF3;n

&#x8840;&#x6DB2;&#x94F6;&#x884C;&#x5177;&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x516C;&#x5171;&#x536B;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x6BCF;&#x5929;&#x5F71;&#x54CD;&#x6570;&#x767E;&#x4E07;&#x4EBA;&#x7684;&#x751F;&#x547D;&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D7;&#x76CA;&#x4E8E;&#x65B0;&#x5174; biopreservation &#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x663E;&#x793A;&#x5DF2;&#x8D85;&#x8FC7;&#x4F20;&#x7EDF;&#x7684;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5DF2;&#x5C1A;&#x672A;&#x7EB3;&#x5165;&#x8F93;&#x8840;&#x533B;&#x5B66;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728; microdroplets &#x4E2D;&#x7684;&#x8840;&#x7EA2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x73BB;&#x7483;&#x56FA;&#x5316;&#x4E3A;&#x5F3A;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x5728;&#x77ED;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F;&#x5176;&#x8840;&#x6DB2;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53EF;&#x884C;&#x7684;&#x548C;&#x53EF;&#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6280;&#x672F;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x5728;&#x751F;&#x6D3B;&#x6EF4;&#x8840;&#x94F6;&#x884C;&#x3002;

Blood banking has a broad public health impact influencing millions of lives daily. It could potentially benefit from emerging biopreservation technologies. However, although vitrification has shown advantages over traditional cryopreservation techniques, it has not been incorporated into transfusion medicine mainly due to throughput challenges. Here, we present a scalable method that can vitrify red blood cells in microdroplets. This approach enables the vitrification of large volumes of blood in a short amount of time, and makes it a viable and scalable biotechnology tool for blood cryopreservation.

Blood banking in living droplets.

Banques de sang a un impact sur la sant&#xE9; public au sens large influencer des millions de vies chaque jour. Il pourrait b&#xE9;n&#xE9;ficier des technologies Biopr&#xE9;servation &#xE9;mergents. Cependant, bien que la vitrification a montr&#xE9; des avantages sur les techniques de cryoconservation traditionnelles, il n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; incorpor&#xE9; dans la m&#xE9;decine transfusionnelle principalement en raison de probl&#xE8;mes de d&#xE9;bit. Ici, nous pr&#xE9;sentons une m&#xE9;thode &#xE9;volutive qui peut vitrifier globules rouges dans des microgouttelettes. Cette approche permet la vitrification de grandes quantit&#xE9;s de sang dans un court laps de temps, et en fait un outil biotechnologique viable et &#xE9;volutive pour la cryoconservation de sang.

Banques de sang dans les gouttelettes de vie

Blut-Banking hat eine breite &ouml;ffentliche Gesundheit Auswirkungen t&auml;glich Millionen von Menschenleben zu beeinflussen. Es k&ouml;nnten potenziell von neuen Biopreservation Technologien profitieren. Aber obwohl der Verglasung Vorteile gegen&uuml;ber traditionellen Kryokonservierung Techniken gezeigt hat, hat es nicht in Transfusionsmedizin haupts&auml;chlich auf Durchsatz Herausforderungen eingearbeitet. Hier pr&auml;sentieren wir eine skalierbare Methode, die roten Blutk&ouml;rperchen im Microdroplets Verglasen kann. Dieser Ansatz erm&ouml;glicht die Verglasung von gro&szlig;en Mengen Blut in kurzer Zeit und macht es eine tragf&auml;hige und skalierbare Biotechnologie-Werkzeug f&uuml;r die Kryokonservierung von Blut.

Blut-Banking in lebenden Tr&ouml;pfchen.

Operazioni bancarie di anima hanno un impatto di sanit&agrave; pubblica ampio influenzare milioni di vite ogni giorno. Potenzialmente potrebbe beneficiare biopreservation tecnologie emergenti. Tuttavia, sebbene vetrificazione ha mostrato vantaggi rispetto alle tecniche tradizionali di crioconservazione, esso &egrave; non stato incorporato in medicina trasfusionale, principalmente a causa di problemi di velocit&agrave; effettiva. Qui di seguito, presentiamo un metodo scalabile che pu&ograve; Vitrificare globuli rossi in microgocce. Questo approccio consente la vetrificazione di grandi volumi di sangue in un breve lasso di tempo e lo rende uno strumento di biotecnologia vitali e scalabile per la crioconservazione del sangue.

Operazioni bancarie di anima in goccioline vivente.

&#x8840;&#x6DB2;&#x9280;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x6BCE;&#x65E5;&#x4F55;&#x767E;&#x4E07;&#x3082;&#x306E;&#x547D;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x516C;&#x8846;&#x885B;&#x751F;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x65B0;&#x8208;biopreservation&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x6069;&#x6075;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x8F38;&#x8840;&#x533B;&#x7642;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x306E;&#x8D64;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x77ED;&#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x8840;&#x6DB2;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x30AC;&#x30E9;&#x30B9;&#x5316;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x8840;&#x306E;&#x51CD;&#x7D50;&#x4FDD;&#x5B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30E9;&#x30D6;&#x30EB;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30C6;&#x30AF;&#x30CE;&#x30ED;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x200B;&#x200B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x6EF4;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x9280;&#x884C;

&#xD608;&#xC561; &#xC740;&#xD589;&#xC5D0;&#xB294; &#xC77C;&#xC0C1; &#xC0DD;&#xD65C;&#xC758; &#xC218;&#xBC31;&#xB9CC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBCF4;&#xAC74; &#xC601;&#xD5A5;&#xC774;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; biopreservation &#xC2E0;&#xAE30;&#xC220;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD61C;&#xD0DD;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, vitrification &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC778; cryopreservation &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xBCF4;&#xC774;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;, &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xD558;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xBB38;&#xC81C; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC218;&#xD608; &#xC758;&#xD559;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC801;&#xD608;&#xAD6C; microdroplets vitrify &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xBC29;&#xBC95; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC774; &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB300;&#xB7C9;&#xC758; &#xD608;&#xC561;&#xC758; vitrification&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xACE0; &#xD608;&#xC561; cryopreservation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD655;&#xC7A5; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC0DD;&#xBA85; &#xACF5;&#xD559; &#xB3C4;&#xAD6C;.

&#xC0DD;&#xD65C; &#xBC29;&#xC6B8;&#xC758; &#xD608;&#xC561; &#xC740;&#xD589;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Almacenamiento de la sangre tiene un gran impacto de la salud p&#xFA;blica influir en millones de vidas todos los d&#xED;as. Se podr&#xED;a beneficiarse de las tecnolog&#xED;as emergentes bioconservaci&#xF3;n. Sin embargo, aunque la vitrificaci&#xF3;n ha demostrado ventajas sobre las t&#xE9;cnicas de crioconservaci&#xF3;n tradicionales, no se ha incorporado en medicina de transfusiones principalmente debido a los problemas de rendimiento. A continuaci&#xF3;n, presentamos un m&#xE9;todo escalable que puede vitrificar los gl&#xF3;bulos rojos en microgotas. Este enfoque permite la vitrificaci&#xF3;n de grandes vol&#xFA;menes de sangre en un corto per&#xED;odo de tiempo, y hace que sea una herramienta de la biotecnolog&#xED;a viable y escalable para la criopreservaci&#xF3;n de sangre.

Bancos de Sangre en las gotitas de vida

530 &#x4E07;&#x7F8E;&#x56FD;&#x592B;&#x5987;&#x7684;&#x751F;&#x80B2;&#x5E74;&#x9F84; (9%) &#x53D7;&#x4E0D;&#x5B55;&#x4E0D;&#x80B2;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x7537;&#x6027;&#x56E0;&#x7D20;&#x5360; 50%&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x8D28;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8BA1;&#x6570;&#x548C;&#x52A8;&#x529B;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x786E;&#x5B9A;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x7CBE; (IVF) &#x6709;&#x65E0;&#x80DE;&#x6D46;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04; (ICSI) &#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x6700;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8F85;&#x52A9;&#x751F;&#x6B96;&#x6280;&#x672F; (ART) &#x73B0;&#x4EE3;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5B9E;&#x8DF5;&#xFF0C;&#x514B;&#x670D;&#x7537;&#x6027;&#x4E0D;&#x80B2;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;IVF &#x548C; ICSI &#x7684;&#x969C;&#x788D;&#x4E4B;&#x4E00;&#x5728;&#x4E8E;&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x9694;&#x79BB;&#x6709;&#x4F4E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8BA1;&#x6570; &#xFF08;&#x5C11;&#xFF09; &#x548C;/&#x6216;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6D3B;&#x52A8;&#x529B;&#x4F4E; (oligospermaesthenia) &#x7684;&#x7CBE;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x5F97;&#x5230;&#x6700;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x548C;&#x5927;&#x6982;&#x662F;&#x6700;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x663E;&#x793A;&#x6392;&#x5E8F;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x6D41;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5C0F;&#x89C6;&#x573A; (FOV) &#x7684;&#x5E38;&#x89C4;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5E38;&#x7528;&#x4E8E;&#x56FE;&#x50CF;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8FD0;&#x52A8;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x540C;&#x65F6;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x4E0E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x89C6;&#x573A;&#x96C6;&#x6210;&#x900F;&#x955C;&#x7535;&#x8377;&#x8026;&#x5408;&#x5668;&#x4EF6; &#xFF08;CCD&#xFF09; &#x548C;&#x81EA;&#x52A8;&#x8BB0;&#x5F55;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x5185;&#x79FB;&#x52A8;&#x3002;&#x7EFC;&#x5408;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4F7F;&#x6392;&#x5E8F;&#x548C;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5DF2;&#x653E;&#x7F6E;&#x5728;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x6B64;&#x901A;&#x9053;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x5782;&#x76F4;&#x914D;&#x7F6E;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x6E38;&#x6CF3;&#x5217;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E34;&#x5E8A;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E2D;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3002;&#x7CBE;&#x5B50;&#x52A8;&#x529B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x5355;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x7684;&#x9634;&#x5F71;&#x8DEF;&#x5F84;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5982;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6E38;&#x6CF3;&#x4ECE;&#x5B9E;&#x73B0;&#x7684;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x51FA;&#x53E3;&#x5165;&#x53E3;&#x6309;&#x6392;&#x5E8F;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x5230;&#x7535;&#x6E90;&#x63D2;&#x5EA7;&#x7684;&#x79CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63D0;&#x53D6;&#x5728;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7ED3;&#x675F;&#x65F6;&#x7684;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x5BBD;&#x89C6;&#x573A;&#xFF0C;oligozoospermic &#x6216; oligospermaesthenic &#x7684;&#x6837;&#x672C;&#xFF0C;&#x6700;&#x79CD;&#x7CBE;&#x5B50;&#x9700;&#x8981;&#x4ECE;&#x6C60;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C11;&#x6570;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x5B50;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8BC1;&#x660E;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x52A8;&#x529B;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;

&#x900F;&#x955C;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CBE;&#x5B50;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x6392;&#x5E8F;&#x3002;

5.3 million American couples of reproductive age (9%) are affected by infertility, among which male factors account for up to 50% of cases, which necessitates the identification of parameters defining sperm quality, including sperm count and motility. In vitro fertilization (IVF) with or without intra cytoplasmic sperm injection (ICSI) has become the most widely used assisted reproductive technology (ART) in modern clinical practice to overcome male infertility challenges. One of the obstacles of IVF and ICSI lies in identifying and isolating the most motile and presumably healthiest sperm from semen samples that have low sperm counts (oligozoospermia) and/or low sperm motility (oligospermaesthenia). Microfluidic systems have shown potential to sort sperm with flow systems. However, the small field of view (FOV) of conventional microscopes commonly used to image sperm motion presents challenges in tracking a large number of sperm cells simultaneously. To address this challenge, we have integrated a lensless charge-coupled device (CCD) with a microfluidic chip to enable wide FOV and automatic recording as the sperm move inside a microfluidic channel. The integrated system enables the sorting and tracking of a population of sperm that have been placed in a microfluidic channel. This channel can be monitored in both horizontal and vertical configuration similar to a swim-up column method used clinically. Sperm motilities can be quantified by tracing the shadow paths for individual sperm. Moreover, as the sperm are sorted by swimming from the inlet towards the outlet of a microfluidic channel, motile sperm that reach the outlet can be extracted from the channel at the end of the process. This technology can lead to methods to evaluate each sperm individually in terms of motility response in a wide field of view, which could prove especially useful, when working with oligozoospermic or oligospermaesthenic samples, in which the most motile sperm need to be isolated from a pool of small number of sperm.

Lensless imaging for simultaneous microfluidic sperm monitoring and sorting.

5,3 millions de couples am&#xE9;ricains en &#xE2;ge de procr&#xE9;er (9%) sont touch&#xE9;s par l&#x26;#39;infertilit&#xE9;, parmi lesquels des facteurs masculins repr&#xE9;sentent jusqu&#x26;#39;&#xE0; 50% des cas, ce qui n&#xE9;cessite l&#x26;#39;identification de param&#xE8;tres d&#xE9;finissant la qualit&#xE9; du sperme, y compris la num&#xE9;ration des spermatozo&#xEF;des et la motilit&#xE9;. La f&#xE9;condation in vitro (FIV) avec ou sans injection de sperme intra cytoplasmique (ICSI) est devenu le plus largement utilis&#xE9; la technologie de reproduction assist&#xE9;e (ART), dans la pratique clinique moderne pour surmonter les difficult&#xE9;s d&#x26;#39;infertilit&#xE9; masculine. Un des obstacles de la FIV et ICSI r&#xE9;side dans l&#x26;#39;identification et l&#x26;#39;isolement du sperme plus mobiles et plus saine sans doute &#xE0; partir d&#x26;#39;&#xE9;chantillons de sperme qui ont faible num&#xE9;ration des spermatozo&#xEF;des (oligospermie) ou des motilit&#xE9; des spermatozo&#xEF;des faible (oligospermaesthenia). Les syst&#xE8;mes microfluidiques ont montr&#xE9; un potentiel pour trier le sperme avec les syst&#xE8;mes d&#x26;#39;&#xE9;coulement. Cependant, le petit champ de vision (FOV) de microscopes classiques couramment utilis&#xE9;s pour le mouvement des spermatozo&#xEF;des l&#x26;#39;image pr&#xE9;sente des d&#xE9;fis dans le suivi d&#x26;#39;un grand nombre de spermatozo&#xEF;des simultan&#xE9;ment. Pour relever ce d&#xE9;fi, nous avons int&#xE9;gr&#xE9; un lensless charge-coupled device (CCD) avec une puce microfluidique pour permettre FOV large et l&#x26;#39;enregistrement automatique comme le passage du sperme &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur d&#x26;#39;un canal microfluidique. Le syst&#xE8;me int&#xE9;gr&#xE9; permet le tri et le suivi d&#x26;#39;une population de spermatozo&#xEF;des qui ont &#xE9;t&#xE9; plac&#xE9;s dans un canal microfluidique. Ce canal peut &#xEA;tre contr&#xF4;l&#xE9; dans la configuration &#xE0; la fois horizontale et verticale semblable &#xE0; une m&#xE9;thode de la colonne swim-up utilis&#xE9; en clinique. Motilit&#xE9; des spermatozo&#xEF;des peut &#xEA;tre quantifi&#xE9;e par le trac&#xE9; des chemins d&#x26;#39;ombre pour spermatozo&#xEF;de. En outre, que les spermatozo&#xEF;des sont tri&#xE9;s &#xE0; la nage de l&#x26;#39;entr&#xE9;e vers la sortie d&#x26;#39;un canal microfluidique, spermatozo&#xEF;des mobiles qui atteignent la sortie peut &#xEA;tre extraite de la cha&#xEE;ne &#xE0; la fin du processus. Cette technologie peut conduire &#xE0; des m&#xE9;thodes pour &#xE9;valuer individuellement chaque spermatozo&#xEF;de en termes de r&#xE9;ponse motilit&#xE9; dans un large champ de vision, ce qui pourrait s&#x26;#39;av&#xE9;rer particuli&#xE8;rement utile, lorsque l&#x26;#39;on travaille avec des &#xE9;chantillons oligozoospermic ou oligospermaesthenic, dans lequel le sperme plus mobiles ont besoin d&#x26;#39;&#xEA;tre isol&#xE9; &#xE0; partir d&#x26;#39;un pool de de petit nombre de spermatozo&#xEF;des.

Imagerie sans lentille pour la surveillance simultan&#xE9;e de sperme microfluidique et tri

5,3 Millionen amerikanische Paare im geb&auml;rf&auml;higen Alter (9 %) von Unfruchtbarkeit, darunter entfallen die m&auml;nnliche Faktoren um bis zu 50 % der F&auml;lle, die die Identifizierung der Kenndaten f&uuml;r die Festlegung der Samenqualit&auml;t, einschlie&szlig;lich der Spermienzahl und Beweglichkeit erfordert betroffen sind. In vitro-Fertilisation (IVF) mit oder ohne Intra cytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) ist die am weitesten verbreitete unterst&uuml;tzte reproduktive Technologie (Kunst) in der modernen klinischen Praxis, M&auml;nnliche Infertilit&auml;t Herausforderungen zu meistern geworden. Eines der Hindernisse der IVF und ICSI liegt in der Identifizierung und Isolierung der meisten st&auml;bchenf&ouml;rmiges und vermutlich ges&uuml;ndeste Sperma von Sperma-Proben, die niedrige Spermienzahl (Oligozoospermia) und/oder geringer Spermien-Motilit&auml;t (Oligospermaesthenia) haben. Mikrofluidische Systeme haben potenzielle Samenzellen mit Fluss-Systeme sortieren gezeigt. Allerdings stellt das kleine Sichtfeld (FOV) des konventionellen Mikroskope, die h&auml;ufig zum Bild Sperma Bewegung Herausforderungen eine gro&szlig;e Anzahl von Spermien gleichzeitig verfolgen. Um dieser Herausforderung zu begegnen, haben wir eine lensless Charge - Coupled Device (CCD) integriert, mit einem Microfluidic Chip breites FOV aktivieren und automatische Aufzeichnung als die Spermien bewegen innerhalb eines mikrofluidische-Kanals. Das integrierte System erm&ouml;glicht die Sortierung und die Verfolgung von einer Bev&ouml;lkerung von Spermien, die in einem mikrofluidische Kanal platziert wurden. Dieser Kanal kann in horizontaler und vertikaler Konfiguration &auml;hnlich wie eine Swim Up-Spalte Methode klinisch &uuml;berwacht werden. Sperma Motilities k&ouml;nnen quantifiziert werden, durch die Schatten-Pfade f&uuml;r einzelne Spermien nachzeichnen. Dar&uuml;ber, wie die Spermien Schwimmen aus der Bucht in Richtung Ausgang eines Kanals mikrofluidische sortiert sind, k&ouml;nnen bewegliche Spermien, die den Ausgang zu erreichen den Kanal am Ende des Prozesses entnommen werden. Diese Technologie kann zu Methoden f&uuml;hren, jedes Sperma individuell in Bezug auf die Motilit&auml;t Antwort in ein weites Blickfeld, zu bewerten, die besonders n&uuml;tzlich erweisen k&ouml;nnte, bei der Arbeit mit Oligozoospermic oder Oligospermaesthenic Proben, in denen die meisten st&auml;bchenf&ouml;rmiges Spermien aus einem Pool von kleinen Anzahl von Spermien isoliert werden m&uuml;ssen.

Lensless imaging f&uuml;r gleichzeitige mikrofluidische Spermien &Uuml;berwachung und sortieren.

5,3 milioni le coppie americane dell&#39;et&agrave; riproduttiva (9%) sono affetti da infertilit&agrave;, tra i quali fattori maschi conto fino al 50% dei casi, che rende necessaria l&#39;identificazione dei parametri che definiscono la qualit&agrave; dello sperma, compreso il numero di spermatozoi e la motilit&agrave;. Fecondazione in vitro (IVF) con o senza intra cytoplasmic spermatica (ICSI) &egrave; diventato il pi&ugrave; ampiamente usato procreazione assistita (ART) nella moderna pratica clinica per superare le sfide di infertilit&agrave; maschile. Uno degli ostacoli di FIVET e ICSI si trova a identificare e isolare gli spermatozoi pi&ugrave; mobili e presumibilmente pi&ugrave; sani da campioni di sperma che hanno conti basso di spermatozoi (oligozoospermia) e/o motilit&agrave; spermatica bassa (oligospermaesthenia). Sistemi microfluidici hanno mostrato potenziali per ordinare lo sperma con sistemi a flusso. Tuttavia, il piccolo campo visivo (FOV) di microscopi convenzionali comunemente usati per il movimento degli spermatozoi immagine presenta sfide nell&#39;inseguimento simultaneamente un gran numero di spermatozoi. Per affrontare questa sfida, abbiamo integrato un ottica charge coupled device (CCD) con un chip microfluidico per consentire ampia FOV e registrazione automatica come lo sperma si sposta all&#39;interno di un canale di microfluidica. Il sistema integrato consente l&#39;ordinamento e il rilevamento di una popolazione di spermatozoi che sono stati inseriti in un canale microfluidico. Questo canale pu&ograve; essere monitorato in configurazione orizzontale e verticale simile a un metodo swim-up colonna utilizzato clinicamente. Motilities di sperma pu&ograve; essere quantificata tracciando i percorsi di ombra per singolo spermatozoo. Inoltre, come lo sperma &egrave; ordinato in piscina dall&#39;ingresso verso l&#39;uscita di un canale di microfluidica, spermatozoi motili che raggiungono l&#39;outlet possono essere estratta dal canale alla fine del processo. Questa tecnologia pu&ograve; portare a metodi per valutare ogni sperma individualmente in termini di risposta di motilit&agrave; in un ampio campo di vista, che potrebbe rivelarsi particolarmente utile, quando si lavora con campioni oligozoospermic o oligospermaesthenic, in cui gli spermatozoi motili pi&ugrave; bisogno di essere isolato da un pool di piccolo numero di spermatozoi.

Imaging per sperma microfluidica simultaneo monitoraggio e cernita ottica.

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&#x540C;&#x6642;&#x6D41;&#x4F53;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BD;&#x30FC;&#x30C8;&#x7528;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30BA;&#x30EC;&#x30B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;

&#xBD88; &#xC784;, &#xB0A8;&#xC131; &#xC694;&#xC778; (&#xCD5C;&#xB300; 50%&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;, &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD488;&#xC9C8;, &#xC815;&#xC790; &#xC218;, &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB4F1;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xB2F4;&#xB2F9; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC2DC;&#xB300; (9%)&#xC758; 530&#xB9CC; &#xBBF8;&#xAD6D; &#xCEE4;&#xD50C;. &#xCCB4; &#xC678; &#xC218;&#xC815; (IVF) &#xB0B4;&#xBD80; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC815;&#xC790; &#xC8FC;&#xC785; (ICSI)&#xC758; &#xC720;&#xBB34;&#xB294; &#xB0A8;&#xC131; &#xBD88; &#xC784; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD604;&#xB300; &#xC784;&#xC0C1; &#xC5F0;&#xC2B5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB110;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xBCF4;&#xC870; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xC220; (&#xC608;&#xC220;) &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. IVF&#xC640; ICSI&#xC758; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xB0AE;&#xC740; &#xC815;&#xC790; &#xAC1C;&#xC218; (oligozoospermia) &#xB610;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xC815;&#xC790; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; (oligospermaesthenia) &#xC815;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC7A5; &#xAC74;&#xAC15; &#xD55C; &#xC815;&#xC790;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBBF8;&#xC138; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xD750;&#xB984; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xACFC; &#xC815;&#xC790; &#xC815;&#xB82C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC791;&#xC740; &#xC2DC;&#xC57C; (FOV) &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0; &#xC815;&#xC790; &#xBAA8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xB97C; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xCD94;&#xC801;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC804;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB113;&#xC740; FOV &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xBBF8;&#xC138; &#xCE69;&#xC73C;&#xB85C;&#xB294; lensless &#xC804; &#xD558; &#xACB0;&#xD569; &#xC18C;&#xC790; (CCD)&#xB294; &#xD1B5;&#xD569;&#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558; &#xACE0; &#xBBF8;&#xC138; &#xCC44;&#xB110; &#xB0B4; &#xC815;&#xC790;&#xB85C; &#xC790;&#xB3D9; &#xAE30;&#xB85D; &#xC774;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xD569;&#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC815;&#xB82C; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC138; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58; &#xB41C; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xCD94;&#xC801;. &#xC774; &#xCC44;&#xB110;&#xC740; &#xC218;&#xD3C9; &#xBC0F; &#xC218;&#xC9C1; &#xAD6C;&#xC131; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC784;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xC218;&#xC601;-&#xCD5C;&#xB300; &#xC5F4; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC790; motilities &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xADF8;&#xB9BC;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C; &#xCD94;&#xC801; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE21;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC815;&#xC790; &#xBBF8;&#xC138; &#xCC44;&#xB110;&#xC758; &#xCD9C;&#xAD6C; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC601;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB82C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xBA54;&#xAD6C;&#xBBF8; &#xC815;&#xC790;&#xB97C; &#xCF58;&#xC13C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xB2EC; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815; &#xB05D;&#xC5D0; &#xCC44;&#xB110;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xAC01; &#xC815;&#xC790; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xB113;&#xC740; &#xC2DC;&#xC57C;, oligozoospermic &#xB610;&#xB294; oligospermaesthenic &#xC0D8;&#xD50C;, &#xAC00;&#xC7A5; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC815;&#xC790; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC791;&#xC740; &#xC218; &#xD480;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB420; &#xD544;&#xC694;&#xB97C; &#xC791;&#xC5C5;&#xD560; &#xB54C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xC6A9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBCC4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Lensless &#xB3D9;&#xC2DC; &#xBBF8;&#xC138; &#xC815;&#xC790; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBC0F; &#xC815;&#xB82C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;.

5,3 millones de parejas estadounidenses en edad de procrear (9%) se ven afectados por la infertilidad, entre los cuales los factores masculinos representan hasta el 50% de los casos, lo que requiere la identificaci&#xF3;n de los par&#xE1;metros que definen la calidad del esperma, incluyendo el conteo de espermatozoides y la motilidad. La fertilizaci&#xF3;n in vitro (FIV) con o sin inyecci&#xF3;n de esperma intracitoplasm&#xE1;tica (ICSI) se ha convertido en el m&#xE1;s ampliamente utilizado tecnolog&#xED;a de reproducci&#xF3;n asistida (ART), en la pr&#xE1;ctica cl&#xED;nica moderna para superar los retos de infertilidad masculina. Uno de los obst&#xE1;culos de la FIV y la ICSI consiste en identificar y aislar los espermatozoides m&#xE1;s m&#xF3;viles y m&#xE1;s sano, presumiblemente a partir de muestras de semen que tienen bajo conteo de esperma (oligospermia) y / o motilidad baja de espermatozoides (oligospermaesthenia). Los sistemas de microfluidos han mostrado potencial para ordenar el esperma con los sistemas de flujo. Sin embargo, el peque&#xF1;o campo de visi&#xF3;n (FOV) de los microscopios convencionales com&#xFA;nmente utilizados para el movimiento de la imagen de esperma presenta desaf&#xED;os en el seguimiento de un gran n&#xFA;mero de espermatozoides al mismo tiempo. Para hacer frente a este desaf&#xED;o, hemos integrado una sin lentes dispositivo de carga acoplada (CCD) con un chip de microfluidos para permitir campo de visi&#xF3;n amplio y la grabaci&#xF3;n autom&#xE1;tica como el paso de espermatozoides dentro de un canal de microfluidos. El sistema integrado permite la clasificaci&#xF3;n y el seguimiento de una poblaci&#xF3;n de espermatozoides que han sido colocados en un canal de microfluidos. Este canal se puede controlar en configuraci&#xF3;n horizontal y vertical similar a un m&#xE9;todo de columna en la piscina utilizado cl&#xED;nicamente. Motilidad de los espermatozoides puede ser cuantificada mediante el trazado de los caminos de sombra para los espermatozoides. Adem&#xE1;s, como el esperma se ordenan por nadar desde la entrada hacia la salida de un canal de microfluidos, espermatozoides m&#xF3;viles que llegar a la salida puede ser extra&#xED;do de la canal al final del proceso. Esta tecnolog&#xED;a puede conducir a m&#xE9;todos de evaluaci&#xF3;n de cada uno de los espermatozoides de forma individual en t&#xE9;rminos de respuesta movilidad en un amplio campo de visi&#xF3;n, lo que podr&#xED;a resultar especialmente &#xFA;til cuando se trabaja con muestras oligozoosp&#xE9;rmicos o oligospermaesthenic, en los que los espermatozoides m&#xE1;s m&#xF3;viles necesitan ser aislados de un grupo del peque&#xF1;o n&#xFA;mero de espermatozoides.

Imagen sin cristalino para el monitoreo simult&#xE1;neo de esperma de microfluidos y clasificaci&#xF3;n

&#x4E09;&#x7EF4;&#x78C1;&#x5FAE;&#x578B;&#x6C34;&#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x96C6;&#x3002;

Three-dimensional magnetic assembly of microscale hydrogels.

Trois dimensions de l&#x26;#39;Assembl&#xE9;e magn&#xE9;tique des hydrogels Microscale

Dreidimensionale Magnetplatte von Microscale Hydrogele.

Montaggio magnetico tridimensionale di Microscala idrogel.

&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x78C1;&#x6C17;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;

Microscale hydrogels&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC790;&#xAE30; &#xC870;&#xB9BD;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Tridimensional de la Asamblea magn&#xE9;tica de hidrogeles microescala

&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x5185;&#x4F53;&#x6DB2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6355;&#x83B7;&#x5927;&#x81F4;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x6539;&#x53D8;&#x533B;&#x5B66;&#x542F;&#x7528;&#x5FAA;&#x73AF;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#xFF0C;&#x5FEB;&#x901F; CD4(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x8BA1;&#x6570;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x76D1;&#x6D4B;&#x3001; &#x548C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x8BCA;&#x65AD;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6355;&#x83B7;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x5728;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6355;&#x83B7;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x6355;&#x83B7;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x68C0;&#x7D22;&#x5C06;&#x901A;&#x8FC7;&#x5141;&#x8BB8;&#x79CD;&#x690D;&#x548C;&#x540E;&#x5904;&#x7406;&#x4F7F;&#x751F;&#x7269;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x65B0;&#x65F6;&#x4EE3;&#x3002;&#x5728;&#x53D1;&#x884C;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x6311;&#x6218;&#x6765;&#x81EA;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E8B;&#x5B9E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x575A;&#x51B3;&#x9075;&#x5B88;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x8868;&#x9762;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x57FA;&#x4E8E;&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5373;&#x4F7F;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D41;&#x4F53;&#x526A;&#x5207;&#x548C;&#x9176;&#x5206;&#x79BB;&#x6355;&#x83B7;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5FAE;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x79F0;&#x4E3A;&#x635F;&#x5BB3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7279;&#x5F81;&#x3002;&#x672C;&#x767D;&#x76AE;&#x4E66;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x91CA;&#x653E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x4F53;&#x526A;&#x5207;&#x6216;&#x9176;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x4E2D;&#x7684;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6355;&#x83B7;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x53D1;&#x5E03;&#x4E86;&#x6355;&#x83B7;&#x7684; CD4(+) &#x5355;&#x5143;&#x683C; &#xFF08;&#x5355;&#x4E2A;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 3.6%&#xFF09; &#x4ECE;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x4E2D;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x7279;&#x5F02;&#x6027; &#xFF08;89%&plusmn; 8%&#xFF09;&#x3001; &#x53EF;&#x884C;&#x6027; &#xFF08;94%&plusmn; 4%&#xFF09; &#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x6548;&#x7387; &#xFF08;59%&plusmn; 4%&#xFF09;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E13;&#x95E8;&#x6355;&#x83B7;&#x548C; controllably &#x91CA;&#x653E; CD34(+) &#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x5168;&#x8840;&#x7684;&#x91CF;&#x5316;&#x7684;&#x8BDD;&#x8981; 19 &#x4E07;&#x8840;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x8840;&#x6DB2;&#x6837;&#x672C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E5F;&#x8868;&#x793A;&#x4ECE;&#x5FAE;&#x91CA;&#x653E;&#x7684; CD4(+) &#x548C; CD34(+) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5065;&#x5EB7;&#x3001; &#x9002;&#x5408;&#x8FDB;&#x884C;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x3002;&#x624B;&#x52A8;&#x6D41;&#x91CF;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5FAE;&#x6D41;&#x63A7;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5229;&#x7528;&#x4FBF;&#x5B9C;&#xFF0C;&#x5BB9;&#x6613;&#x5236;&#x9020;&#x5141;&#x8BB8;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5FAE;&#x6355;&#x83B7;&#x5E76;&#x91CA;&#x653E;&#x5728;&#x4E0D;&#x5230; 10 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x5728;&#x7167;&#x987E;&#x70B9;&#x3002;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x51C0;&#x5316;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x6DF7;&#x5408;&#x7FA4;&#x4F53;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x5728;&#x5E94;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x79D1;&#x5B66;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5982;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x3001; &#x518D;&#x751F;&#x533B;&#x5B66;&#x3001; &#x7A00;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x79BB;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;/&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7814;&#x7A76;&#x3001; &#x548C;&#x65E0;&#x6027;&#x7CFB;&#x4E0E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

&#x53EF;&#x884C;&#x63A7;&#x91CA;&#x5FAE;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x6355;&#x83B7;&#x65E0;&#x6807;&#x7B7E;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

Selective capture of cells from bodily fluids in microchannels has broadly transformed medicine enabling circulating tumor cell isolation, rapid CD4(+) cell counting for HIV monitoring, and diagnosis of infectious diseases. Although cell capture methods have been demonstrated in microfluidic systems, the release of captured cells remains a significant challenge. Viable retrieval of captured label-free cells in microchannels will enable a new era in biological sciences by allowing cultivation and post-processing. The significant challenge in release comes from the fact that the cells adhere strongly to the microchannel surface, especially when immuno-based immobilization methods are used. Even though fluid shear and enzymes have been used to detach captured cells in microchannels, these methods are known to harm cells and affect cellular characteristics. This paper describes a new technology to release the selectively captured label-free cells in microchannels without the use of fluid shear or enzymes. We have successfully released the captured CD4(+) cells (3.6% of the mononuclear blood cells) from blood in microfluidic channels with high specificity (89% Â± 8%), viability (94% Â± 4%), and release efficiency (59% Â± 4%). We have further validated our system by specifically capturing and controllably releasing the CD34(+) stem cells from whole blood, which were quantified to be 19 cells per million blood cells in the blood samples used in this study. Our results also indicated that both CD4(+) and CD34(+) cells released from the microchannels were healthy and amenable for in vitro culture. Manual flow based microfluidic method utilizes inexpensive, easy to fabricate microchannels allowing selective label-free cell capture and release in less than 10 minutes, which can also be used at the point-of-care. The presented technology can be used to isolate and purify a broad spectrum of cells from mixed populations offering widespread applications in applied biological sciences, such as tissue engineering, regenerative medicine, rare cell and stem cell isolation, proteomic/genomic research, and clonal/population analyses.

Controlled viable release of selectively captured label-free cells in microchannels.

Capture s&#xE9;lective de cellules &#xE0; partir de fluides corporels dans des microcanaux a largement transform&#xE9; la m&#xE9;decine permettant l&#x26;#39;isolement de cellules tumorales circulant, CD4 rapide (+) de comptage de cellules pour la surveillance du VIH, et le diagnostic des maladies infectieuses. Bien que les m&#xE9;thodes de capture de cellules ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;es dans des syst&#xE8;mes microfluidiques, la lib&#xE9;ration de cellules captur&#xE9;es demeure un d&#xE9;fi important. De r&#xE9;cup&#xE9;ration viable captur&#xE9;s sans &#xE9;tiquette cellules dans des microcanaux permettra une nouvelle &#xE8;re dans les sciences biologiques en permettant la culture et de post-traitement. Le d&#xE9;fi significative de la lib&#xE9;ration vient du fait que les cellules adh&#xE8;rent fortement &#xE0; la surface microcanal, en particulier lorsque proc&#xE9;d&#xE9;s d&#x26;#39;immobilisation d&#x26;#39;immuno-base sont utilis&#xE9;s. M&#xEA;me si de cisaillement du fluide et les enzymes ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;es pour d&#xE9;tacher les cellules captur&#xE9;es dans des microcanaux, ces m&#xE9;thodes sont connues pour endommager les cellules et affecter les caract&#xE9;ristiques cellulaires. Cet article d&#xE9;crit une nouvelle technologie pour lib&#xE9;rer les prisonniers de fa&#xE7;on s&#xE9;lective sans &#xE9;tiquette cellules dans des microcanaux, sans l&#x26;#39;utilisation de cisaillement du fluide ou des enzymes. Nous avons lanc&#xE9; avec succ&#xE8;s les CD4 captur&#xE9;s (+) des cellules (3,6% des cellules mononucl&#xE9;&#xE9;es du sang) &#xE0; partir du sang dans les canaux microfluidiques avec une sp&#xE9;cificit&#xE9; &#xE9;lev&#xE9;e (89% &#xB1; 8%), la viabilit&#xE9; (94% &#xB1; 4%) et de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; communiqu&#xE9; (59 % &#xB1; 4%). Nous avons ensuite valid&#xE9; par notre syst&#xE8;me de capture et sp&#xE9;cifiquement la lib&#xE9;ration contr&#xF4;l&#xE9;e du CD34 (+) des cellules souches du sang total, qui ont &#xE9;t&#xE9; quantifi&#xE9;es au moins 19 cellules par million de cellules sanguines dans les &#xE9;chantillons de sang utilis&#xE9;s dans cette &#xE9;tude. Nos r&#xE9;sultats indiquent &#xE9;galement que les deux CD4 (+) et CD34 (+) des cellules lib&#xE9;r&#xE9;es par les microcanaux &#xE9;taient en bonne sant&#xE9; et pr&#xEA;te pour la culture in vitro. Manuel d&#x26;#39;&#xE9;coulement microfluidique utilise la m&#xE9;thode fond&#xE9;e sur peu co&#xFB;teux, facile &#xE0; fabriquer des microcanaux permettant s&#xE9;lective de capture de cellules sans &#xE9;tiquette et la lib&#xE9;ration en moins de 10 minutes, ce qui peut &#xE9;galement &#xEA;tre utilis&#xE9; au point-of-care. La technologie pr&#xE9;sent&#xE9;e peut &#xEA;tre utilis&#xE9;e pour isoler et purifier un large spectre de cellules provenant de populations mixtes offrant des applications r&#xE9;pandues dans sciences biologiques appliqu&#xE9;es, telles que l&#x26;#39;ing&#xE9;nierie tissulaire, m&#xE9;decine r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative, la cellule rare et l&#x26;#39;isolement de cellules souches, la prot&#xE9;omique / g&#xE9;nomique de recherche, et clonale / population analyses.

Controlled Release viable de mani&#xE8;re s&#xE9;lective captur&#xE9;s sans &#xE9;tiquette cellules dans des microcanaux

Selektive Abscheidung von Zellen aus K&ouml;rperfl&uuml;ssigkeiten in Mikrokan&auml;len hat im gro&szlig;en und ganzen Medizin aktivieren zirkulierende Tumor Zelle isoliert, schnelle CD4(+)-Zelle f&uuml;r HIV-&Uuml;berwachung und Diagnose von Infektionskrankheiten z&auml;hlen verwandelt. Obwohl Zelle erfassen Methoden in mikrofluidische Systeme gezeigt haben, bleibt die Freilassung von Gefangenen Zellen eine bedeutende Herausforderung. Tragf&auml;hige abrufen erfassten Etikett-freien Zellen in Mikrokan&auml;len wird eine neue &Auml;ra in den Biowissenschaften zu erm&ouml;glichen, indem Anbau Nachbearbeitung der. Die gro&szlig;e Herausforderung im Release kommt von der Tatsache, dass die Zellen stark an die Microchannel-Oberfl&auml;che zu halten, insbesondere wenn Immobilisation Immuno-basierte Methoden verwendet werden. Obwohl fl&uuml;ssig scher- und Enzyme verwendet wurden erfasste Zellen in Mikrokan&auml;len zu l&ouml;sen, sind diese Methoden bekannt sch&auml;digen Zellen und zellul&auml;re Beschaffenheit beeinflussen. Dieses Whitepaper beschreibt eine neue Technologie um selektiv erfassten Etikett-freien Zellen in Mikrokan&auml;len ohne den Einsatz von fl&uuml;ssigen Scherung oder Enzyme freizugeben. Wir haben erfolgreich die aufgezeichneten CD4(+) Zellen (3,6 % der mononukle&auml;ren Blutzellen) aus dem Blut in mikrofluidische Kan&auml;le mit hoher Spezifit&auml;t (89 % &plusmn; 8 %), Lebensf&auml;higkeit (94 % &plusmn; 4 %) und Freigabe-Effizienz (59 % &plusmn; 4 %) ver&ouml;ffentlicht. Wir haben unser System weiter validiert, durch speziell aufzeichnen und Seilbremsen Freigabe der CD34(+) Stammzellen aus Vollblut, die quantifiziert wurden 19 Zellen pro million Blutzellen in den Blutproben, die in dieser Studie verwendet werden. Unsere Ergebnisse zeigten auch, dass sowohl die CD4(+) als auch die CD34(+) Zellen, die aus den Mikrokan&auml;len entlassen gesund und f&uuml;r in-vitro-Kultur einsehbar waren. Manuelle Str&ouml;mung basiert mikrofluidische Methode verwendet kosteng&uuml;nstig, einfach zu fabrizieren Mikrokan&auml;len erlauben selektive Etikett-freie Zelle erfassen und freizugeben, die in weniger als 10 Minuten, die auch bei der Point-of-Care verwendet werden kann. Die vorgestellte Technologie kann verwendet werden, zu isolieren und ein breites Spektrum von Zellen aus Mestizen mit weit verbreiteten Anwendungen in Angewandte Biowissenschaften, wie Gewebe-engineering, regenerative Medizin, seltene Zelle und Stammzellen isoliert, Proteomic/Genomforschung und klonalen/Bev&ouml;lkerung Analysen zu reinigen.

Tragf&auml;hige Aufl&ouml;sungder selektiv erfasste Etikett-freien Zellen in Mikrokan&auml;len gesteuert.

Cattura selettiva delle cellule da fluidi corporei in microcanali ha largamente trasformato medicina consentendo circolanti isolamento delle cellule di tumore, rapid CD4(+) cella contando per HIV monitoraggio e diagnosi delle malattie infettive. Sebbene i metodi di cattura delle cellule sono state dimostrate in sistemi microfluidici, il rilascio di cellule catturate rimane una sfida significativa. Recupero vitale delle cellule senza etichetta catturate a microcanali consentir&agrave; una nuova era nelle scienze biologiche permettendo di coltivazione e di post-elaborazione. La sfida significativa in versione deriva dal fatto che le cellule aderiscono fortemente alla superficie microchannel, soprattutto quando vengono utilizzati metodi di immobilizzazione di immuno-based. Anche se gli enzimi e taglio fluido sono stati usati per staccare cellule catturate a microcanali, questi metodi sono noti per danneggiare le cellule e possono influenzare le caratteristiche cellulari. Questo documento descrive una nuova tecnologia per rilasciare le cellule senza etichetta selettivamente catturate a microcanali senza l&#39;uso di taglio fluido o enzimi. Abbiamo pubblicato con successo le cellule CD4(+) catturate (3,6% delle cellule mononucleate del sangue) dal sangue nei canali microfluidici con alta specificit&agrave; (89% &plusmn; 8%), vitalit&agrave; (94% &plusmn; 4%) e rilascio efficienza (59% &plusmn; 4%). Noi abbiamo convalidato ulteriormente il nostro sistema specificamente catturando e controllably rilasciando le cellule staminali CD34(+) da sangue intero, che sono state quantificate da 19 cellule per milione globuli nei campioni di sangue utilizzati in questo studio. I nostri risultati ha anche indicano che sia CD4(+) che CD34(+) le cellule rilasciate dai microcanali erano sani e suscettibili di coltura in vitro. Flusso manuale basata microfluidica metodo utilizza poco costoso, facile da fabbricare microcanali permettendo selettiva delle cellule senza etichetta catturano e rilascio in meno di 10 minuti, che pu&ograve; essere utilizzati anche presso il point-of-care. La tecnologia presentata pu&ograve; essere utilizzata per isolare e purificare un ampio spettro di cellule da popolazioni miste, che offrono applicazioni diffuse in scienze biologiche applicate, come la medicina rigenerativa, ingegneria dei tessuti, cellule rare e isolamento delle cellule staminali, ricerca genomica/proteomica e analisi clonale/popolazione.

Rilascio controllato di vitale delle cellule senza etichetta selettivamente catturate a microcanali.

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&#xB354; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCEA1;&#xCC98; &#xBC0F; controllably&#xB294;&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB41C; &#xD608;&#xC561; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xD608;&#xC561; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2F9; 19 &#xC140; &#xC218; &#xACC4;&#xB7C9; &#xB41C; &#xC804;&#xCCB4; &#xD608;&#xC561;&#xC5D0;&#xC11C; CD34(+) &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD574;&#xC81C; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xB610;&#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; microchannels&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xD45C; &#xD558;&#xB294; CD4(+) &#xBC0F; CD34(+) &#xC140; &#xAC74;&#xAC15; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC758;&#xBB34;&#xAC00; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xC744; &#xAC00;&#xB9AC;&#xD0A8;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB3D9; &#xD750;&#xB984; &#xAE30;&#xBC18; &#xACB0;&#xD569; &#xBC29;&#xBC95; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC800;&#xB834;, &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xAE30; &#xC26C;&#xC6B4; microchannels &#xC120;&#xD0DD; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xB294; &#xC140; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xCEA1;&#xCC98; &#xBC0F; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xBBF8;&#xB9CC; 10 &#xBD84;, &#xB610;&#xD55C; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC751;&#xC6A9;&#xB41C; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xACFC;&#xD559;, &#xC870;&#xC9C1; &#xACF5;&#xD559;, &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC758;&#xD559; &#xB4F1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xD63C;&#xD569; &#xB41C; &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140;, &#xD76C;&#xADC0; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xACA9;&#xB9AC;, proteomic/&#xAC8C;&#xB188; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xD074;&#xB860;/&#xC778;&#xAD6C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC815;&#xD654; &#xC81C;&#xC2DC; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Microchannels&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCEA1;&#xCC98;&#xB41C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14; &#xC5C6;&#xB294; &#xC140;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;.

La captura selectiva de las c&#xE9;lulas de los fluidos corporales en microcanales ha transformado la medicina general que permita el aislamiento de c&#xE9;lulas tumorales circulantes, c&#xE9;lulas CD4 r&#xE1;pidos (+) el recuento de c&#xE9;lulas para el control del VIH y el diagn&#xF3;stico de enfermedades infecciosas. Aunque los m&#xE9;todos de captura de c&#xE9;lulas ha sido demostrada en sistemas de microfluidos, la liberaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas capturadas sigue siendo un reto importante. La recuperaci&#xF3;n viable de capturados sin etiqueta c&#xE9;lulas en microcanales permitir&#xE1; una nueva era en las ciencias biol&#xF3;gicas, al permitir el cultivo y post-procesamiento. El desaf&#xED;o significativo en la liberaci&#xF3;n proviene del hecho de que las c&#xE9;lulas se adhieren fuertemente a la superficie microcanal, especialmente cuando inmuno-basados &#x200B;&#x200B;en m&#xE9;todos de inmovilizaci&#xF3;n se utilizan. Aunque cortante del fluido y las enzimas se han utilizado para separar las c&#xE9;lulas capturadas en microcanales, estos m&#xE9;todos son conocidos por da&#xF1;ar las c&#xE9;lulas y afectan a las caracter&#xED;sticas celulares. Este documento describe una nueva tecnolog&#xED;a para liberar selectivamente los capturados libres etiqueta-c&#xE9;lulas en microcanales sin el uso de cizallamiento l&#xED;quido o enzimas. Hemos lanzado con &#xE9;xito las c&#xE9;lulas CD4 capturados (+) las c&#xE9;lulas (3,6% de las c&#xE9;lulas mononucleares de la sangre) de la sangre en los canales de microfluidos con una alta especificidad (89% &#xB1; 8%), viabilidad (94% &#xB1; 4%), y la eficiencia de liberaci&#xF3;n (59 % &#xB1; 4%). Adem&#xE1;s, hemos validado por nuestro sistema espec&#xED;ficamente capturar y controlable de soltar el CD34 (+) las c&#xE9;lulas madre de la sangre entera, que se cuantificaron las c&#xE9;lulas es de 19 por mill&#xF3;n de c&#xE9;lulas de la sangre en las muestras de sangre utilizadas en este estudio. Nuestros resultados tambi&#xE9;n indican que tanto CD4 (+) y CD34 (+) las c&#xE9;lulas liberadas por los microcanales estaban sanos y susceptibles de cultivo in vitro. Flujo manual basado en el m&#xE9;todo de microfluidos utiliza barato, f&#xE1;cil de fabricar microcanales permitiendo selectiva etiqueta libre de captura de c&#xE9;lulas y la liberaci&#xF3;n en menos de 10 minutos, lo que tambi&#xE9;n se puede utilizar en el punto de atenci&#xF3;n. La tecnolog&#xED;a presentada se puede utilizar para aislar y purificar una amplia gama de c&#xE9;lulas de poblaciones mixtas que ofrecen amplias aplicaciones en Ciencias Biol&#xF3;gicas Aplicadas, tales como la ingenier&#xED;a tisular, medicina regenerativa, c&#xE9;lulas raras y el aislamiento de c&#xE9;lulas madre, la investigaci&#xF3;n prote&#xF3;mica / gen&#xF3;mica, y clonal / poblaci&#xF3;n an&#xE1;lisis.

Controlled Release viable de forma selectiva capturados sin etiqueta-Cells en microcanales

&#x76EE;&#x7684;&#xFF1A; &#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#xFF0C;&#x6D3B;&#x4EA7;&#x7387;&#x7684;&#x89E3;&#x51BB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EA;&#x6709; 2-4%&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x6280;&#x672F;&#x3002;&#x6750;&#x6599; &amp; &#x65B9;&#x6CD5;&#xFF1A; &#x57FA;&#x4E8E;&#x5F15;&#x5C04;&#x5668;&#x7684;&#x6DB2;&#x6EF4;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E3A;&#x4E86;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5730;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7387;&#x3001; &#x5F62;&#x8C8C;&#x548C;&#x5B64;&#x96CC;&#x751F;&#x6B96;&#x540E;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E00;&#x6B65;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6BD4;&#x8F83;&#x65B0;&#x9C9C;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8D27;&#x7269;&#x88C5;&#x5378;&#x3001; &#x6297;&#x51BB;&#x5242;&#x540E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x68C0;&#x7D22;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF1A; &#x548C;&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x5C01;&#x88C5;&#x4E2D;&#x57F9;&#x517B; 24 h &#x540E;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7387;&#x4E3A;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6062;&#x590D;&#x540E;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;/&#x89E3;&#x51BB;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5F62;&#x6001;&#x5411;&#x90A3;&#x4E9B;&#x65B0;&#x9C9C;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x5C01;&#x88C5;&#x540E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B64;&#x96CC;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7387;&#x4E0E;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5AB2;&#x7F8E;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x6280;&#x672F;&#x4F7F;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x51B7;&#x5374;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x6297;&#x51BB;&#x5242;&#x7EA7;&#x522B; &#xFF08;&#x5373; 1.4 M &#x4E59;&#x4E8C;&#x9187;&#x3001; 1.1 &#x7C73;&#x4E8C;&#x7532;&#x57FA;&#x4E9A;&#x781C;&#x548C; 1 M &#x8517;&#x7CD6;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x4F7F;&#x4E4B;&#x6210;&#x4E3A;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x6539;&#x5584;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x53D8;&#x6696;&#x901F;&#x7387;&#x3002;

&#x65B0;&#x578B;&#x7EB3;&#x5347;&#x7EA7;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x6EF4;&#x73BB;&#x7483;&#x5316;&#x51B7;&#x51BB;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51B7;&#x51BB;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3002;

Aim: Oocyte cryopreservation remains largely experimental, with live birth rates of only 2-4% per thawed oocyte. In this study, we present a nanoliter droplet technology for oocyte vitrification. Materials & methods: An ejector-based droplet vitrification system was designed to continuously cryopreserve oocytes in nanoliter droplets. Oocyte survival rates, morphologies and parthenogenetic development after each vitrification step were assessed in comparison with fresh oocytes. Results: Oocytes were retrieved after cryoprotectant agent loading/unloading, and nanoliter droplet encapsulation showed comparable survival rates to fresh oocytes after 24 h in culture. Also, oocytes recovered after vitrification/thawing showed similar morphologies to those of fresh oocytes. Additionally, the rate of oocyte parthenogenetic activation after nanoliter droplet encapsulation was comparable with that observed for fresh oocytes. This nanoliter droplet technology enables the vitrification of oocytes at higher cooling and warming rates using lower cryoprotectant agent levels (i.e., 1.4 M ethylene glycol, 1.1 M dimethyl sulfoxide and 1 M sucrose), thus making it a potential technology to improve oocyte cryopreservation outcomes.

Nanoliter droplet vitrification for oocyte cryopreservation.

Objectif: cryopr&#xE9;servation des ovocytes reste largement exp&#xE9;rimentale, avec des taux de naissances vivantes de seulement 2-4% par ovocyte d&#xE9;congel&#xE9;. Dans cette &#xE9;tude, nous pr&#xE9;sentons une technologie de gouttelettes nanolitre pour la vitrification des ovocytes. Mat&#xE9;riaux et m&#xE9;thodes: Un syst&#xE8;me d&#x26;#39;&#xE9;jection des gouttelettes &#xE0; base de vitrification a &#xE9;t&#xE9; con&#xE7;u pour congeler les ovocytes en continu sous forme de gouttelettes nanolitre. Taux de survie des ovocytes, des morphologies et de d&#xE9;veloppement parth&#xE9;nog&#xE9;n&#xE9;tique apr&#xE8;s chaque &#xE9;tape de vitrification ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;valu&#xE9;es en comparaison avec des ovocytes frais. R&#xE9;sultats: Les ovocytes ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;s apr&#xE8;s l&#x26;#39;agent cryoprotecteur de chargement / d&#xE9;chargement, et l&#x26;#39;encapsulation des gouttelettes nanolitre ont montr&#xE9; des taux de survie comparables &#xE0; des ovocytes frais apr&#xE8;s 24 h dans la culture. En outre, les ovocytes r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;s apr&#xE8;s vitrification / d&#xE9;gel a montr&#xE9; des morphologies semblables &#xE0; celles des ovocytes frais. En outre, le taux d&#x26;#39;activation parth&#xE9;nog&#xE9;n&#xE9;tique ovocyte apr&#xE8;s nanolitre gouttelettes d&#x26;#39;encapsulation a &#xE9;t&#xE9; comparable &#xE0; celle observ&#xE9;e pour les ovocytes frais. Cette technologie permet des gouttelettes nanolitre la vitrification des ovocytes au plus de refroidissement et le taux de r&#xE9;chauffement utilisant de plus faibles niveaux d&#x26;#39;agents cryoprotecteurs (soit 1,4 M d&#x26;#39;&#xE9;thyl&#xE8;ne glycol, 1,1 M dim&#xE9;thylsulfoxyde et 1 M de saccharose), en faisant ainsi un potentiel technologique pour am&#xE9;liorer les r&#xE9;sultats de cryoconservation des ovocytes.

Vitrification des gouttelettes nanolitre pour cryopr&#xE9;servation d&#x26;#39;ovocytes

Ziel: Die Eizelle Kryokonservierung bleibt weitgehend experimentell, mit Live-Geburtenraten von nur 2-4 % pro aufgetauten Eizelle. In dieser Studie stellen wir eine Nanoliter-Droplet-Technologie f&uuml;r die Eizelle Verglasung. Materialien &amp; Methoden: eine Ejektor-basierte Tr&ouml;pfchen-Verglasung-System wurde entwickelt, um kontinuierlich Eizellen in Nanoliter Tr&ouml;pfchen cryopreserve. Eizelle-&Uuml;berlebensraten, Morphologien und parthenogenetic Entwicklung nach jedem Schritt der Verglasung wurden im Vergleich zu frischen Eizellen beurteilt. Ergebnisse: Eizellen wurden abgerufen, nachdem cryoprotektive Agent be-und entladen, und Nanoliter Tr&ouml;pfchen Kapselung zeigten vergleichbare &Uuml;berlebensraten um frische Eizellen nach 24 h in Kultur. Auch, Eizellen wiederhergestellt, nachdem Verglasung/Auftauen &auml;hnliche Morphologien zu denen frische Eizellen zeigte. Dar&uuml;ber hinaus war die Rate der Eizelle parthenogenetic Aktivierung nach Nanoliter Tr&ouml;pfchen Kapselung vergleichbar mit frischen Eizellen zu beobachten. Diese Nanoliter-Droplet-Technologie erm&ouml;glicht die Verglasung der Eizellen zu h&ouml;heren K&uuml;hlung und Erw&auml;rmung Zinss&auml;tzen mit geringerem cryoprotektive Agent (1,4 M Ethylenglykol, 1.1M Dimethyl Sulfoxid und 1 M Saccharose), so dass es eine m&ouml;gliche Technologie zur Verbesserung der Eizelle Kryokonservierung Ergebnisse.

Nanoliter Tr&ouml;pfchen Verglasung f&uuml;r die Eizelle Kryokonservierung.

Obiettivo: Crioconservazione ovocita rimane in gran parte sperimentale, con tassi di natalit&agrave; live di ovociti scongelati solo 2-4%. In questo studio, presentiamo una tecnologia nanolitro gocciolina vitrificazione degli ovociti. Materiali &amp; metodi: un sistema di vetrificazione gocciolina espulsore-base &egrave; stato progettato per continuit&agrave; crioconservare gli ovociti in goccioline nanolitro. I tassi di sopravvivenza degli ovociti, morfologie e sviluppo nei dopo ogni passaggio di vetrificazione sono stati valutati rispetto agli ovociti freschi. Risultati: Gli ovociti sono stati recuperati dopo cryoprotectant agente di carico e scarico, e incapsulamento gocciolina nanolitro hanno mostrato tassi di sopravvivenza paragonabili a ovociti freschi dopo 24 h nella cultura. Inoltre, gli ovociti recupero dopo vetrificazione/scongelamento ha mostrato morfologie simili a quelle degli ovociti freschi. Inoltre, il tasso di attivazione nei ovocita dopo nanolitro incapsulamento gocciolina era comparabile con quello osservato per gli ovociti freschi. Questa tecnologia di gocciolina nanolitro consente la vetrificazione degli ovociti al superiore di raffreddamento e riscaldamento Tariffe utilizzando livelli di agente cryoprotectant inferiori (cio&egrave;, glicole etilenico 1,4 M, M 1,1 dimetil sulfossido e 1 M saccarosio), rendendo cos&igrave; un potenziale tecnologia per migliorare i risultati crioconservazione degli ovociti.

Nanolitro vetrificazione droplet per la crioconservazione degli ovociti.

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&#xBAA9;&#xD45C;: Oocyte cryopreservation &#xB0A8;&#xC544; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD5D8;, &#xD574; &#xB3D9;&#xB41C; oocyte &#xB2F9;&#xB9CC; 2-4%&#xC758; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xC728;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; oocyte vitrification nanoliter &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; &#xAE30;&#xC220; &#xC18C;&#xAC1C;. &#xC7AC;&#xB8CC; &amp; &#xBC29;&#xBC95;: &#xC774;&#xC81D;&#xD130; &#xAE30;&#xBC18; &#xB4DC;&#xB86D;&#xB9BF; vitrification &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; nanoliter &#xBC29;&#xC6B8;&#xC5D0; oocytes&#xB97C; cryopreserve &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Oocyte &#xC0DD;&#xC874; &#xC728;, &#xBB38;&#xBC95;&#xACFC; &#xBC0F; &#xAC01; vitrification &#xB2E8;&#xACC4; &#xD6C4; parthenogenetic &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; oocytes &#xBE44;&#xAD50; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. Oocytes cryoprotectant &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xB85C;&#xB4DC;/&#xC5B8;&#xB85C;&#xB4DC;, &#xD6C4; &#xAC80;&#xC0C9; &#xACB0;&#xACFC;: &#xACE0; nanoliter &#xBC29;&#xC6B8; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xBB38;&#xD654; 24 h &#xD6C4; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; oocytes&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC0DD;&#xC874; &#xC728;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, oocytes vitrification/&#xB179;&#xACE0; &#xADF8; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; oocytes &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBB38;&#xBC95;&#xACFC; &#xD6C4; &#xBCF5;&#xAD6C;. &#xB610;&#xD55C;, nanoliter &#xBC29;&#xC6B8; &#xCEA1;&#xC290;&#xD654; &#xD6C4; oocyte parthenogenetic &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xC120;&#xD55C; oocytes&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; nanoliter &#xBC29;&#xC6B8; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xB0C9;&#xAC01; &#xBC0F; &#xB0AE;&#xC740; cryoprotectant &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xC218;&#xC900; (&#xC989;, 1.4 M &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C; &#xAE00;&#xB9AC;&#xCF5C;, 1.1 M &#xB514; &#xBA54; &#xD2F8; sulfoxide 1m &#xC790;&#xB2F9;)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xC220; oocyte cryopreservation &#xACB0;&#xACFC; &#xAC1C;&#xC120; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368; &#xC9C0;&#xAD6C; &#xC628;&#xB09C;&#xD654; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; oocytes vitrification &#xAC00;&#xB2A5;.

Nanoliter &#xBB3C;&#xBC29;&#xC6B8; vitrification oocyte cryopreservation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Objetivo: la criopreservaci&#xF3;n de ovocitos permanece en gran medida experimental, con tasas de nacidos vivos de tan s&#xF3;lo 2.4% por ovocitos descongelados. En este estudio, se presenta una tecnolog&#xED;a de gotas de nanolitros de vitrificaci&#xF3;n de ovocitos. Materiales y m&#xE9;todos: Un sistema de gotas de expulsi&#xF3;n basado en la vitrificaci&#xF3;n fue dise&#xF1;ado para criopreservar &#xF3;vulos de forma continua en las gotitas nanolitros. Las tasas de supervivencia de los ovocitos, morfolog&#xED;as y el desarrollo partenogen&#xE9;tica despu&#xE9;s de cada paso de vitrificaci&#xF3;n fueron evaluados en comparaci&#xF3;n con ovocitos frescos. Resultados: Los ovocitos fueron recuperados despu&#xE9;s de la agente crioprotector de carga / descarga, y la encapsulaci&#xF3;n nanolitros gota mostraron tasas de supervivencia comparables a los ovocitos frescos despu&#xE9;s de 24 h en la cultura. Adem&#xE1;s, los oocitos se recuper&#xF3; despu&#xE9;s de vitrificaci&#xF3;n / descongelaci&#xF3;n mostr&#xF3; morfolog&#xED;as similares a las de los oocitos frescos. Adem&#xE1;s, la tasa de activaci&#xF3;n de oocitos partenogen&#xE9;tica despu&#xE9;s nanolitro encapsulaci&#xF3;n gotita era comparable con la observada para los oocitos frescos. Esta tecnolog&#xED;a permite que la gota nanolitros la vitrificaci&#xF3;n de ovocitos en mayor enfriamiento y las tasas de calentamiento utilizando los niveles m&#xE1;s bajos de agentes crioprotectores (es decir, 1,4 M de etilenglicol, 1,1 M sulf&#xF3;xido de dimetilo y 1 M de sacarosa), por lo que es una tecnolog&#xED;a potencial para mejorar los resultados de los ovocitos criopreservaci&#xF3;n.

Hasan Onur Keles

Bio-Acoustic-MEMS Laboratory in Medicine (BAMM),
HST-Center for Bioengineering,
Brigham and Women's,
Bio-Acoustic-MEMS Laboratory in Medicine (BAMM), HST-Center for Bioengineering, Brigham and Women's

Harvard Medical School

Title Cell Encapsulation by Droplets

Hasan Onur Keles

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Harvard Medical School

Title Cell Encapsulation by Droplets

Bio-Acoustic-MEMS Laboratory in Medicine (BAMM),
HST-Center for Bioengineering,
Brigham and Women's,
Bio-Acoustic-MEMS Laboratory in Medicine (BAMM), HST-Center for Bioengineering, Brigham and Women's