preparation-of-quality-inositol-pyrophosphates

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

Myo-inositol is present in nature either unmodified or in more complex phosphorylated derivates. Of the latest, the two most abundant in eukaryotic cells ...

University College London

&#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x81F4;&#x547D;&#x6A21;&#x5177;&#x66F2;&#x9709;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E00;&#x4E2A;&#x96BE;&#x5F97;&#x7684;&#x673A;&#x4F1A;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x79CD;&#x75C5;&#x83CC;&#x4EA7;&#x751F;&#x8010;&#x836F;&#x6027;&#x5236;&#x8BA2;&#x6218;&#x7565;&#x6839;&#x672C;&#x4E0D;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x83CC;&#x6392;&#x6CC4; fusarinine C &#x548C; triacetylfusarinine C &#x6355;&#x83B7;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x94C1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BF9;&#x83CC;&#x4E1D;&#x94C1;&#x5B58;&#x50A8;&#x4F7F;&#x7528; ferricrocin&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5212;&#x5B9A;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x548C;&#x80DE;&#x5916;&#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x9014;&#x5F84;&#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x7EFC;&#x5408;&#x53D1;&#x80B2;&#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7684;&#x7B2C;&#x56DB;&#x6B21;&#x94C1;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; hydroxyferricrocin&#xFF0C;&#x53D7;&#x96C7;&#x7684;&#x5206;&#x751F;&#x5B62;&#x5B50;&#x94C1;&#x5B58;&#x50A8;&#x8F7D;&#x4F53;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x975E;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x80BD;&#x5408;&#x6210;&#x9176;&#x56FD;&#x6295;&#x706D;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x94C1;&#x8F7D;&#x4F53;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x80DA;&#x82BD;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3001; &#x65E0;&#x6027;&#x4EA7;&#x5B62;&#x3001; &#x6297;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3001; &#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x6C22;&#x9176; A &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;&#x5206;&#x751F;&#x5B62;&#x5B50; hydroxyferricrocin &#x5185;&#x5BB9;&#x6062;&#x590D;&#x90E8;&#x5206;&#x62EF;&#x6551;&#x6BD2;&#x529B; apathogenic &#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x7A7A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x745E;&#x5178;&#xFF0C;&#x611F;&#x67D3;&#x5F00;&#x59CB;&#x65F6;&#x8868;&#x660E;&#x5206;&#x751F;&#x5B62;&#x5B50;&#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x80DE;&#x5916;&#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x540E;&#x7684;&#x9170;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; SidF &#x6216;&#x975E;&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x80BD;&#x5408;&#x6210;&#x9176; SidD &#x706D;&#x6D3B;&#x5E9F;&#x9664;&#x5BFC;&#x81F4;&#x589E;&#x957F;&#x94C1;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x5BF9;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x548C;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x6BD2;&#x529B;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x6B63;&#x5E38;&#x80DA;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x7684;&#x8FD8;&#x539F;&#x94C1;&#x540C;&#x5316;&#x7684;&#x5B8C;&#x5168;&#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x66F2;&#x9709;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x5185;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x94C1;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x75BE;&#x75C5;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

&#x5185;&#x548C;&#x671F;&#x95F4;&#x9709;&#x83CC;&#x75C5;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x94C1;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;

Siderophore biosynthesis by the highly lethal mould Aspergillus fumigatus is essential for virulence, but non-existent in humans, presenting a rare opportunity to strategize therapeutically against this pathogen. We have previously demonstrated that A. fumigatus excretes fusarinine C and triacetylfusarinine C to capture extracellular iron, and uses ferricrocin for hyphal iron storage. Here, we delineate pathways of intra- and extracellular siderophore biosynthesis and show that A. fumigatus synthesizes a developmentally regulated fourth siderophore, termed hydroxyferricrocin, employed for conidial iron storage. By inactivation of the nonribosomal peptide synthetase SidC, we demonstrate that the intracellular siderophores are required for germ tube formation, asexual sporulation, resistance to oxidative stress, catalase A activity, and virulence. Restoration of the conidial hydroxyferricrocin content partially rescues the virulence of the apathogenic siderophore null mutant Delta sidA, demonstrating an important role for the conidial siderophore during initiation of infection. Abrogation of extracellular siderophore biosynthesis following inactivation of the acyl transferase SidF or the nonribosomal peptide synthetase SidD leads to complete dependence upon reductive iron assimilation for growth under iron-limiting conditions, partial sensitivity to oxidative stress, and significantly reduced virulence, despite normal germ tube formation. Our findings reveal distinct cellular and disease-related roles for intra- and extracellular siderophores during mammalian Aspergillus infection.

Distinct roles for intra- and extracellular siderophores during Aspergillus fumigatus infection.

Biosynth&egrave;se de sid&eacute;rophores par la moisissure hautement l&eacute;tale Aspergillus fumigatus est essentiel pour la virulence, mais inexistante chez l&#39;homme, pr&eacute;sentant une rare occasion pour &eacute;laborer des strat&eacute;gies th&eacute;rapeutiques contre ce pathog&egrave;ne. Nous avons pr&eacute;c&eacute;demment d&eacute;montr&eacute; qu&#39;a. fumigatus excr&egrave;te fusarinine C et triacetylfusarinine C pour capturer fer extracellulaire et utilise ferricrocin pour le stockage du fer des hyphes. Ici, nous tracer des voies intra - et extracellulaires sid&eacute;rophore biosynth&egrave;se et montrer qu&#39;a. fumigatus synth&eacute;tise un sid&eacute;rophore quatri&egrave;me d&eacute;veloppemental r&eacute;gl&eacute;, appel&eacute; hydroxyferricrocin, employ&eacute;e pour le stockage du fer de conidies. Par l&#39;inactivation de la synth&eacute;tase de peptides ribosomiques SidC, nous d&eacute;montrons que les sid&eacute;rophores intracellulaires sont requis pour la formation de tubes germinatifs, la sporulation asexu&eacute;e, r&eacute;sistance au stress oxydatif et d&#39;activit&eacute; catalase A virulence. Restauration du contenu conidies hydroxyferricrocin sauve partiellement la virulence de l&#39;apathogenic sid&eacute;rophore null mutant Delta ASDI, d&eacute;montrant un r&ocirc;le important pour les sid&eacute;rophores conidies au cours de l&#39;initiation de l&#39;infection. Abrogation de biosynth&egrave;se extracellulaire sid&eacute;rophore suite &agrave; l&#39;inactivation de la transf&eacute;rase acyl SidF ou la synth&eacute;tase de peptides ribosomiques SidD m&egrave;ne &agrave; une d&eacute;pendance compl&egrave;te apr&egrave;s l&#39;assimilation de fer r&eacute;ductrice pour la croissance dans des conditions de limitation de fer, partielle sensibilit&eacute; au stress oxydatif et virulence significativement r&eacute;duite, malgr&eacute; la formation de tubes germinatifs normaux. Nos r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent des r&ocirc;les distincts de cellulaires et li&eacute;e &agrave; la maladie pour intra - et extracellulaires sid&eacute;rophores lors d&#39;aspergillose chez les mammif&egrave;res.

R&ocirc;les distincts pour intra - et extracellulaires sid&eacute;rophores au cours de l&#39;infection &agrave; Aspergillus fumigatus.

Bios&iacute;ntesis de sider&oacute;foro por el molde altamente letal Aspergillus fumigatus es esencial para la virulencia, pero inexistente en los seres humanos, que presenta una oportunidad &uacute;nica para crear una estrategia terap&eacute;utica contra este pat&oacute;geno. Hemos demostrado anteriormente a. fumigatus excreta fusarinine C y triacetylfusarinine C captar hierro extracelular y utiliza ferricrocin para el almacenamiento de hierro hifal. Aqu&iacute;, nos delinear v&iacute;as de intra y extracelular sider&oacute;foro bios&iacute;ntesis y mostrar que a. fumigatus sintetiza un sider&oacute;foro cuarto desarrollo regulado, denominado hydroxyferricrocin, empleada para el almacenamiento de hierro conidiales. Por la inactivaci&oacute;n de la sintetasa de p&eacute;ptido nonribosomal SidC, demostramos que los sider&oacute;foros intracelulares son necesarios para la formaci&oacute;n de conductos de germen, esporulaci&oacute;n asexual, resistencia al estr&eacute;s oxidativo, actividad catalasa y virulencia. Restauraci&oacute;n del contenido hydroxyferricrocin conidiales rescata parcialmente la virulencia de la apathogenic sider&oacute;foro nula mutante Delta sidA, demostrando un papel importante para el sider&oacute;foro conidial durante la iniciaci&oacute;n de la infecci&oacute;n. Derogaci&oacute;n de bios&iacute;ntesis de sider&oacute;foro extracelular despu&eacute;s de la inactivaci&oacute;n de la acil transferasa SidF o la sintetasa de p&eacute;ptido nonribosomal SidD conduce a la completa dependencia de asimilaci&oacute;n reductiva del hierro para el crecimiento bajo condiciones de limitaci&oacute;n de hierro, sensibilidad parcial al estr&eacute;s oxidativo y virulencia reducida significativamente, a pesar de la formaci&oacute;n de conductos de germen normal. Nuestros resultados revelan distintas funciones celulares y relacionada con la enfermedad intra y extracelular sider&oacute;foros durante la infecci&oacute;n por Aspergillus mam&iacute;fera.

Diferentes roles para intra y extracelular sider&oacute;foros durante la infecci&oacute;n por Aspergillus fumigatus.

Siderophore Biosynthese durch die &auml;u&szlig;erst t&ouml;dlichen Schimmelpilz Aspergillus Fumigatus ist wesentlich f&uuml;r die Virulenz, aber nicht Existent beim Menschen, eine seltene Gelegenheit, therapeutisch gegen diese Erreger strategisch pr&auml;sentieren. Wir haben bereits bewiesen, dass A. Fumigatus scheidet Fusarinine C und Triacetylfusarinine C, extrazellul&auml;re Eisen zu erfassen und Ferricrocin f&uuml;r geflochtenen Eisen-Speicher verwendet. Hier beschreiben wir Wege von Intra- und extrazellul&auml;ren Siderophore Biosynthese und zeigen, dass A. Fumigatus synthetisiert eine entwicklungspolitisch geregelten vierte Siderophore, genannt Hydroxyferricrocin, f&uuml;r conidial Eisen-Speicher eingesetzt. Durch Inaktivierung von die nichtribosomale Peptid-Synthetase SidC zeigen wir, dass die intrazellul&auml;re SIDEROPHORE f&uuml;r Keim-Gef&auml;&szlig;-Anordnung, asexuelle Sporenbildung, Resistenz gegen oxidativen Stress, Katalase A Activity und Virulenz erforderlich sind. Restaurierung des conidial Hydroxyferricrocin Inhalts rettet teilweise die Virulenz der apathogene Siderophore null mutant Delta SidA, demonstriert eine wichtige Rolle f&uuml;r die conidial Siderophore zu Beginn der Infektion des. Aufhebung der extrazellul&auml;ren Siderophore Biosynthese nach Inaktivierung der Acyl-Transferase SidF oder die nichtribosomale Peptid-Synthetase SidD f&uuml;hrt zum vollst&auml;ndigen Abh&auml;ngigkeit von reduktiven Eisen Assimilation f&uuml;r Wachstum unter Eisen einschr&auml;nkenden Bedingungen, teilweise Empfindlichkeit gegen&uuml;ber oxidativem Stress und deutlich reduzierten Virulenz, trotz normalen Keim-Gef&auml;&szlig;-Anordnung. Unsere Ergebnisse zeigen zellul&auml;re und krankheitsbezogenen Rollen f&uuml;r Intra- und extrazellul&auml;ren SIDEROPHORE w&auml;hrend S&auml;ugetier-Aspergillus-Infektion.

Unterschiedliche Rollen f&uuml;r Intra- und extrazellul&auml;ren SIDEROPHORE w&auml;hrend Aspergillus Fumigatus Infektion.

Sideroforo biosintesi di stampo altamente letale Aspergillus fumigatus &egrave; essenziale per la virulenza, ma inesistenti in esseri umani, che presenta una rara opportunit&agrave; per strategie terapeuticamente contro questo agente patogeno. In precedenza abbiamo dimostrato che a. fumigatus espelle fusarinine C e triacetylfusarinine C per catturare il ferro extracellulare e utilizza ferricrocin per l&#39;archiviazione di ferro ifale. Qui, noi delineare percorsi di intra - ed extracellulare sideroforo biosintesi e mostrare che a. fumigatus sintetizza un sideroforo quarto evolutivamente regolamentato, definito hydroxyferricrocin, impiegato per la conservazione di ferro conidial. Da inattivazione della sintetasi del peptide di nonribosomal l&#39;associazione, dimostriamo che la siderofori intracellulare sono necessari per la formazione del tubo germe, sporulazione asessuata, resistenza allo stress ossidativo, l&#39;attivit&agrave; A catalasi e virulenza. Restauro del contenuto hydroxyferricrocin conidial Salva parzialmente la virulenza della apathogenic sideroforo null mutante Delta sidA, dimostrando un ruolo importante per il sideroforo conidial durante l&#39;inizio dell&#39;infezione. Abrogazione della biosintesi extracellulare sideroforo seguendo l&#39;inattivazione del transferasi dell&#39;acilico SidF o la sintetasi del peptide di nonribosomal SidD conduce alla dipendenza completa assimilazione di ferro riduttivo per la crescita in condizioni limite di ferro, parziale sensibilit&agrave; a stress ossidativo e virulenza notevolmente ridotto, nonostante la formazione del tubo normale germe. I nostri risultati rivelano distinti ruoli cellulari e malattie legate per intra - ed extracellulare siderofori durante l&#39;infezione da Aspergillus dei mammiferi.

Ruoli distinti per intra - ed extracellulare siderofori durante l&#39;infezione da Aspergillus fumigatus.

&#x9AD8;&#x81F4;&#x6B7B;&#x91D1;&#x578B;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3053;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x3066;&#x307E;&#x308C;&#x306A;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x975E;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x305D;&#x306E; A. fumigatus fusarinine C &#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x9244;&#x3092;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30C1;&#x30E3;&#x3059;&#x308B; triacetylfusarinine C &#x3092;&#x6392;&#x6CC4;&#x3057;&#x3066; ferricrocin &#x83CC;&#x7CF8;&#x9244;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x63CF;&#x304F;&#x3068;&#x305D;&#x306E; A. fumigatus &#x62C5;&#x9244;&#x5206;&#x751F;&#x5B50;&#x9244;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3001;hydroxyferricrocin &#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x898F;&#x5236;&#x7B2C;&#x56DB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x975E;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x578B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20; SidC &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E; siderophores &#x304C;&#x767A;&#x82BD;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x7121;&#x6027;&#x80DE;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3001;&#x30AB;&#x30BF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x3002;&#x80DE;&#x5B50; hydroxyferricrocin &#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x306E;&#x5FA9;&#x5143;&#x3092;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x6642;&#x306B;&#x5206;&#x751F;&#x5B50;&#x306E;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3001;&#x5F31;&#x6BD2;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE; null &#x5909;&#x7570;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF; sidA &#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6B21;&#x306E;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; SidF &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x975E;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x578B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x4E0B;&#x3059;&#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x5EC3;&#x6B62;&#x306E;&#x9084;&#x5143;&#x9244;&#x540C;&#x5316;&#x6210;&#x9577;&#x4E0B;&#x9244;&#x304C;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x3001;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3068;&#x901A;&#x5E38;&#x767A;&#x82BD;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306B;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x500B;&#x5225;&#x7D30;&#x80DE;&#x30FB;&#x75BE;&#x60A3;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; siderophores &#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x4E2D;&#x306B;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916; siderophores &#x30B3;&#x30A6;&#x30B8;&#x30AB;&#x30D3; fumigatus &#x611F;&#x67D3;&#x6642;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3002;

&#xB9E4;&#xC6B0; &#xCE58;&#xBA85;&#xC801;&#xC778; &#xAE08;&#xD615; &#xB204; fumigatus&#xC5D0;&#xC11C; Siderophore &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC740; &#xB3C5;&#xC131;, &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB4DC;&#xBB38; &#xAE30;&#xD68C;&#xAC00; &#xBCD1;&#xC6D0;&#xC774; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC778;&#xAC04; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xADF8; A. fumigatus fusarinine C&#xC640; triacetylfusarinine C &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xCCA0;&#xC744; &#xC7A1;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xBC30;&#xC124; &#xBC0F; ferricrocin&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; hyphal &#xCCA0; &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xAE30;, &#xB0B4;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; siderophore &#xC0DD; &#xD569;&#xC131; &#xACBD;&#xB85C; &#xC724;&#xACFD;&#xC744; &#xADF8;&#xB9AC; &#xB2E4; &#xADF8; A. fumigatus &#xD569;&#xC131; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xADDC;&#xC81C; 4 siderophore, hydroxyferricrocin, conidial &#xCCA0; &#xC2A4;&#xD1A0;&#xB9AC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xB418; &#xB098; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nonribosomal &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD569;&#xC131; Sidc&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; siderophores&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xADE0; &#xAD00; &#xD615;&#xC131;, &#xC131;&#xACFC; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC5C6;&#xB294; &#xD3EC;&#xC790; &#xD615;&#xC131;, &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;, catalase A &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCF5;&#xC6D0; conidial hydroxyferricrocin &#xCF58;&#xD150;&#xCE20;&#xB294; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; apathogenic siderophore null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB378;&#xD0C0; sidA, &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; conidial siderophore&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294;. Acyl &#xC804;&#xC774; SidF &#xB610;&#xB294; nonribosomal &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xD569;&#xC131; Sidd&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; siderophore &#xC0DD; &#xD569;&#xC131;&#xC758; &#xD3D0;&#xC9C0; reductive &#xCCA0; &#xB3D9;&#xD654; &#xCCA0; &#xC81C;&#xD55C; &#xC870;&#xAC74;, &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC77C;&#xBC18; &#xC138;&#xADE0; &#xAD00; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB3C5;&#xC131; &#xBD80;&#xBD84; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xB530;&#xB77C; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC758;&#xC874;&#xC5D0; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB204; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; siderophores &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBD80;-&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xAD00;&#xB828; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xB204; fumigatus &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; siderophores &#xBC0F; &#xB0B4;&#xBD80;-&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

&#x86CB;&#x767D;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x78F7;&#x9178;&#x662F;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9499;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x5230;&#x591A;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8C03;&#x89E3;&#x4EBA;&#x3002;&#x5728;&#x771F;&#x83CC;&#x4E2D;&#x9499;&#x8C03;&#x795E;&#x7ECF;&#x78F7;&#x9178;&#x884C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x7C7B;&#x4F3C; Crz1p &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x66F2;&#x9709; CRZ1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;CrzA&#xFF0C;&#x5E76;&#x8868;&#x660E;&#x5176;&#x8C03;&#x89E3;&#x7684;&#x9499;&#x548C;&#x9530;&#x6D53;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8010;&#x53D7;&#x6027;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x79BB;&#x5B50;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11;&#x5206;&#x751F;&#x5B62;&#x5B50;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#xFF0C;crzA &#x7A7A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x53D7;&#x5230;&#x9AD8;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x9499;&#x548C;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x83CC;&#x682A;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E0B;&#x9499;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x591A;&#x4E2A;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x5206;&#x6790;&#x63A2;&#x8BA8; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x9499;&#x5BB9;&#x5FCD;&#x4E86;&#x62C9;&#x4E01;&#x7F8E;&#x6D32;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; crzA &#x4F9D;&#x8D56; mRNA &#x79EF;&#x7D2F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E;&#x4EE5;&#x5F80;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x66F2;&#x9709;&#x6784;&#x5DE2;&#x66F2;&#x9709;&#x9499;&#x8C03;&#x795E;&#x7ECF;&#x78F7;&#x9178;&#x4E9A;&#x57FA;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x5BA1;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x548C;&#x8BC4;&#x5BA1;&#x7F3A;&#x5931;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5171;&#x4EAB;&#x5728;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;DeltacalA &#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x5229;&#x7528; A.&#x6784;&#x5DE2;&#x66F2;&#x9709;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x94FE;&#x63A5;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x4E0E;&#x65E0;&#x6027;&#x53D1;&#x5C55;&#x611F;&#x5E94;&#xFF0C;&#x627E;&#x5230; CrzA &#x9499;&#x8C03;&#x795E;&#x7ECF;&#x78F7;&#x9178;&#x548C; brlA &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x5728;&#x652F;&#x6301;&#x9002;&#x5F53;&#x53D1;&#x5C55;&#x611F;&#x5E94;&#x3002;

&#x66F2;&#x9709; CRZ1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;CrzA &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

The protein phosphatase calcineurin is an important mediator connecting calcium-dependent signalling to various cellular responses in multiple organisms. In fungi calcineurin acts largely through regulating Crz1p-like transcription factors. Here we characterize an Aspergillus fumigatus CRZ1 homologue, CrzA and demonstrate its mediation of cellular tolerance to increased concentrations of calcium and manganese. In addition to acute sensitivity to these ions, and decreased conidiation, the crzA null mutant suffers altered expression of calcium transporter mRNAs under high concentrations of calcium, and loss of virulence when compared with the corresponding complemented and wild-type strains. We use multiple expression analyses to probe the transcriptional basis of A. fumigatus calcium tolerance identifying several genes having calA and/or crzA dependent mRNA accumulation patterns. We also demonstrate that contrary to previous findings, the gene encoding the Aspergillus nidulans calcineurin subunit homologue, cnaA, is not essential and that the cnaA deletion mutant shares the morphological phenotypes observed in the corresponding A. fumigatus mutant, DeltacalA. Exploiting the A. nidulans model system, we have linked calcineurin activity with asexual developmental induction, finding that CrzA supports appropriate developmental induction in a calcineurin and brlA-dependent manner in both species.

Functional characterization of the Aspergillus fumigatus CRZ1 homologue, CrzA.

La calcineurine phosphatase de prot&eacute;ine est un m&eacute;diateur important reliant calcium-d&eacute;pendante de signalisation &agrave; diverses r&eacute;actions cellulaires dans plusieurs organismes. Chez les champignons calcineurine agit en grande partie par la r&eacute;gulation des facteurs de transcription de type Crz1p. Ici, nous caract&eacute;risons un Aspergillus fumigatus homologue CRZ1, CrzA et d&eacute;montrer sa m&eacute;diation cellulaire tol&eacute;rance &agrave; une augmentation des concentrations de calcium et de mangan&egrave;se. En plus de la sensibilit&eacute; aigu&euml; de ces ions et une diminution de la conidiation, le mutant nul crzA souffre une expression alt&eacute;r&eacute;e des ARNm de transporteur de calcium sous des concentrations &eacute;lev&eacute;es de calcium et la perte de virulence en comparaison avec les souches compl&eacute;t&eacute;es et sauvage correspondants. Nous utilisons plusieurs analyses d&#39;expression pour sonder la base transcriptionnelle de la tol&eacute;rance de calcium d&#39;a. fumigatus identifier plusieurs g&egrave;nes ayant calA et/ou crzA mod&egrave;les d&eacute;pendants accumulation des ARNm. Nous d&eacute;montrons &eacute;galement que contrairement aux pr&eacute;c&eacute;dentes conclusions, le g&egrave;ne codant l&#39;Aspergillus nidulans calcineurine sous-unit&eacute; homologue, cnaA, n&#39;est pas indispensable et que le mutant de d&eacute;l&eacute;tion cnaA partage les ph&eacute;notypes morphologiques observ&eacute;s chez le mutant d&#39;a. fumigatus correspondant, DeltacalA. Exploitant le syst&egrave;me de mod&egrave;le d&#39;a. nidulans, nous avons li&eacute; la calcineurine activit&eacute; avec l&#39;induction du d&eacute;veloppement asexuelle, concluant que CrzA prend en charge l&#39;induction du d&eacute;veloppement appropri&eacute;e d&#39;une mani&egrave;re la calcineurine et brlA-d&eacute;pendant chez les deux esp&egrave;ces.

Caract&eacute;risation fonctionnelle de l&#39;Aspergillus fumigatus homologue CRZ1, CrzA.

Das Protein Phosphatase Calcineurin ist ein wichtiger Vermittler Verbindung Kalzium-abh&auml;ngige Signalisierung zu verschiedenen zellul&auml;ren Antworten in mehrere Organismen. In Pilzen fungiert Calcineurin weitgehend durch Crz1p-wie Transkriptionsfaktoren regulieren. Hier wir ein Aspergillus Fumigatus CRZ1 Homolog, CrzA charakterisieren und ihrer Vermittlung der zellul&auml;re Toleranz zu erh&ouml;hten Konzentrationen von Kalzium und Mangan zu demonstrieren. Neben akuten Sensibilit&auml;t f&uuml;r diese Ionen und verminderte Conidiation leidet die CrzA null Mutant ver&auml;nderten Ausdruck Kalzium Transporter mRNAs unter hohen Konzentrationen von Calcium und Verlust der Virulenz im Vergleich mit den entsprechenden erg&auml;nzten und Wildtyp-St&auml;mmen. Wir verwenden mehrere Ausdruck-Analysen, um die transkriptionelle Basis A. Fumigatus Kalzium Toleranz identifizieren mehrere Gene mit CalA und/oder CrzA abh&auml;ngige mRNA-Ansammlung-Muster. Wir zeigen auch, dass im Gegensatz zu fr&uuml;heren Feststellungen, gen, das den Aspergillus Nidulans Calcineurin Untereinheit Homolog, CnaA, ist nicht unbedingt erforderlich und das CnaA L&ouml;schung Mutant die morphologischen Ph&auml;notypen, die in den entsprechenden A. Fumigatus Mutant, DeltacalA beobachtet teilt. A. Nidulans-Modell-System nutzen, haben wir verkn&uuml;pft Calcineurin-Aktivit&auml;t mit ungeschlechtliche Entwicklungs-Induktion, CrzA unterst&uuml;tzt entsprechende Entwicklungsst&ouml;rungen Induktion in eine Calcineurin und BrlA-abh&auml;ngigen Weise bei beiden Spezies zu finden.

Funktionelle Charakterisierung der Aspergillus Fumigatus CRZ1 Homolog, CrzA.

La proteina fosfatasi calcineurina &egrave; un mediatore importante collegamento calcio-dipendente di segnalazione a varie risposte cellulari in molteplici organismi. Nei funghi calcineurina agisce in gran parte attraverso la regolazione di fattori di trascrizione come Crz1p. Qui ci caratterizzano un Aspergillus fumigatus CRZ1 omologo, CrzA e dimostrare la sua mediazione di tolleranza cellulare all&#39;aumento delle concentrazioni di calcio e manganese. Oltre a acuta sensibilit&agrave; di questi ioni e conidiation &egrave; diminuito, il mutante null crzA soffre alterata espressione dei mRNAs transporter calcio sotto alte concentrazioni di calcio e la perdita di virulenza quando confrontati con i corrispondenti ceppi integrati e selvaggio-tipo. Usiamo pi&ugrave; analisi di espressione per sondare la base transcriptional di tolleranza di calcio di a. fumigatus identificazione di diversi geni avendo calA o crzA modelli di accumulo di mRNA dipendente. Dimostreremo anche che contrariamente alle precedenti scoperte, il gene che codifica per l&#39;omologo di subunit&agrave; Aspergillus nidulans calcineurina, cnaA, non &egrave; essenziale e che il mutante di delezione cnaA condivide i fenotipi morfologici osservati nel corrispondente a. fumigatus mutante, DeltacalA. Sfruttando il sistema di modello a. nidulans, noi abbiamo collegato attivit&agrave; della calcineurina con induzione dello sviluppo asessuale, trovando che CrzA supporta induzione dello sviluppo appropriato in modo calcineurina e brlA-dipendente in entrambe le specie.

Caratterizzazione funzionale di Aspergillus fumigatus CRZ1 omologo, CrzA.

&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x8131;&#x71D0;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A8;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x83CC;&#x985E;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x4E3B; Crz1p &#x69D8;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9; CRZ1 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0; CrzA &#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BDB;&#x5BB9;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30F3;&#x30AC;&#x30F3;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x5897;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3068;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306E; 3&#x91CF;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x611F;&#x5EA6;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;crzA null &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x9AD8;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8F38;&#x9001;&#x4F53; Mrna &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x82E6;&#x3057;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5F0F;&#x89E3;&#x6790;&#x30AB;&#x30E9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F; crzA &#x4F9D;&#x5B58; mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B; A. fumigatus &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066; Aspergillus nidulans &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; cnaA&#x3001;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A; cnaA &#x6B20;&#x5931;&#x5909;&#x7570; DeltacalA &#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; A. fumigatus &#x5909;&#x7570;&#x3067;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;A. nidulans &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x60AA;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3001;CrzA&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3; brlA &#x4F9D;&#x5B58;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x7A2E;&#x3067;&#x3001;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x6D3B;&#x6027;&#x7121;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9; CRZ1 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0; CrzA &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; calcineurin &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xCE7C;&#xC298; &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC790; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBC84;&#xC12F; calcineurin &#xD06C;&#xAC8C; Crz1p &#xAC19;&#xC740; &#xB179;&#xC74C; &#xBC29;&#xC1A1; &#xC694;&#xC778; &#xD1B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB204; fumigatus CRZ1 homologue, CrzA &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xACF5;&#xCC28;&#xC758; &#xCE7C;&#xC298;&#xACFC; &#xB9DD;&#xAC04;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC911;&#xC7AC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC774;&#xC628;, &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E0;&#xB41C; conidiation&#xC5D0; &#xAE09;&#xC131; &#xAC10;&#xB3C4; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; crzA null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCE7C;&#xC298;, &#xCE7C;&#xC298;&#xC758; &#xACE0; &#xB18D;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xD574;&#xB2F9; &#xBCF4;&#xCDA9; &#xBC0F; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC885;&#xC790;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xB3C5;&#xC131;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC1A1; Mrnas&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC2DD;&#xC744; &#xACAA;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xCE7C;&#xB77C; &#xBC0F; crzA &#xC885;&#xC18D; mRNA &#xCD95;&#xC801; &#xD328;&#xD134; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; A. fumigatus &#xCE7C;&#xC298; &#xACF5;&#xCC28;&#xC758; transcriptional &#xAE30;&#xCD08; &#xC870;&#xC0AC;. &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xB204; nidulans calcineurin &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; homologue &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC720;&#xC804;&#xC790; cnaA, &#xD544;&#xC218; &#xC774;&#xBA70; cnaA &#xC0AD;&#xC81C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xACF5;&#xC720; &#xD574;&#xB2F9; A. fumigatus &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, Deltacala&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xACE0;&#xAE30; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. A. nidulans &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5F0;&#xACB0; calcineurin &#xD65C;&#xB3D9; &#xC131;&#xACFC; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC5C6;&#xB294; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC720;&#xB3C4; CrzA &#xB450; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; calcineurin &#xBC0F; brlA &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC720;&#xB3C4; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xCC3E;&#xB294;.

&#xB204; fumigatus CRZ1 homologue, Crza&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

La prote&iacute;na fosfatasa calcineurina es un mediador importante conexi&oacute;n se&ntilde;alizaci&oacute;n dependiente de calcio a varias respuestas celulares en varios organismos. En hongos calcineurina act&uacute;a en gran parte a trav&eacute;s de la regulaci&oacute;n de factores de transcripci&oacute;n Crz1p-como. Aqu&iacute; se caracterizan un Aspergillus fumigatus CRZ1 hom&oacute;logo, CrzA y demostrar su mediaci&oacute;n de tolerancia celular al aumento de las concentraciones de calcio y magnesio. Adem&aacute;s de aguda sensibilidad a estos iones y disminuci&oacute;n de la conidiation, el mutante nulo crzA sufre la expresi&oacute;n alterada de los mRNAs de transportador de calcio bajo altas concentraciones de calcio y p&eacute;rdida de virulencia en comparaci&oacute;n con las cepas complementadas y salvaje-tipo correspondientes. Utilizamos m&uacute;ltiples an&aacute;lisis de expresi&oacute;n para sondear la base transcripcional de a. fumigatus tolerancia de calcio identificaci&oacute;n de varios genes que calA y/o crzA patrones de acumulaci&oacute;n dependientes de mRNA. Tambi&eacute;n demostramos que contrariamente a los resultados anteriores, el gene que codifica el hom&oacute;logo de subunidad Aspergillus nidulans calcineurina, cnaA, no es esencial y que los mutantes de deleci&oacute;n de cnaA comparten los fenotipos morfol&oacute;gicos observados en los correspondientes mutantes de a. fumigatus, DeltacalA. Aprovechando el sistema de modelo de a. nidulans, hemos vinculado actividad de calcineurina con inducci&oacute;n del desarrollo asexual, encontrando que CrzA apoya la inducci&oacute;n del desarrollo apropiada de manera calcineurina y brlA-dependiente en ambas especies.

Caracterizaci&oacute;n funcional de los Aspergillus fumigatus CRZ1 hom&oacute;logo, CrzA.

&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x662F;&#x79BB;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x771F;&#x83CC;&#x751F;&#x957F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x65E0;&#x673A;&#x78F7; &#xFF08;P(i)) &#x5728;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; (PHO) &#x6536;&#x8D2D;&#x88AB;&#x5B9A;&#x6027;&#x4E3A;&#x4F4E;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B; &#xFF08;&#x786E;&#x4FDD;&#x4F9B;&#x5E94;&#x7684; P(i) &#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x6216;&#x9AD8;&#x5916;&#x90E8; P(i) &#x6D53;&#x5EA6;&#xFF09; &#x548C;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B; &#xFF08;P(i) &#x9965;&#x997F;&#x56DE;&#x5E94;&#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF09;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E86;&#x89E3;&#x66F2;&#x9709; PHO &#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B65;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9; PHO80 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;PhoB(PHO80)&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; DeltaphoB(PHO80) &#x7A81;&#x53D8;&#x6709;&#x6781;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x7F3A;&#x9677; (&#x5373;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x80DA;&#x7BA1;&#x51FA;&#x73B0;&#xFF09; &#x548C;&#x7531;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x78F7;&#x7684;&#x5438;&#x6536;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x7ACB; PhoB(PHO80)&#x3001; &#x9499;&#x8C03;&#x795E;&#x7ECF;&#x78F7;&#x9178;&#x548C;&#x9499;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x3002;&#x4ECE;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x57FA;&#x56E0;&#x82AF;&#x7247;&#x6742;&#x4EA4;&#x8FDB;&#x884C; RNA &#x83B7;&#x5F97;&#x548C; DeltaphoB(PHO80) &#x7A81;&#x53D8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BC6;&#x522B; Afu4g03610 &#xFF08;phoD(PHO84))&#xFF0C;Afu7g06350 &#xFF08;phoE(PHO89))&#xFF0C;Afu4g06020 &#xFF08;phoC(PHO81)) &#x548C; Afu2g09040 (&#x6DB2;&#x6CE1;&#x8F6C;&#x8FD0; Vtc4&#xFF09; &#x66F4;&#x8868;&#x793A;&#x5728; DeltaphoB(PHO80) &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x80CC;&#x666F;&#x548C;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x9650;&#x5236;&#x4E0B; 0.1 m m P(i) &#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; DeltaphoB(PHO80) &#x6DB2;&#x6CE1;&#x4E2D;, &#x805A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x900F;&#x9732;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x78F7;&#x9178;&#x6D53;&#x5EA6;&#x3002;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;phoD(PHO84) &#x7F3A;&#x5931;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x662F;&#x533A;&#x5206;&#x8868;&#x4ECE;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x83CC;&#x682A;&#x3002;mRNA &#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5728; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; A &#x7F3A;&#x4E4F;&#x652F;&#x6301; PHO &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;DeltaphoB(PHO80) &#x548C; DeltaphoD(PHO84) &#x7A81;&#x53D8;&#x662F;&#x5B8C;&#x5168;&#x6076;&#x6BD2;&#x7684;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x66F2;&#x9709;&#x75C5;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;

&#x9ED1;&#x66F2;&#x9709; fumigatusPHO80 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;

Phosphate is an ion that is essential for fungal growth. The systems for inorganic phosphate (P(i)) acquisition in eukaryotic cells (PHO) have been characterized as a low-affinity (that assures a supply of P(i) at normal or high external P(i) concentrations) and a high-affinity (activated in response to P(i) starvation). Here, as an initial step to understand the PHO pathway in Aspergillus fumigatus, we characterized the PHO80 homologue, PhoB(PHO80). We show that the DeltaphoB(PHO80) mutant has a polar growth defect (i.e., a delayed germ tube emergence) and, by phenotypic and phosphate uptake analyses, establish a link between PhoB(PHO80), calcineurin and calcium metabolism. Microarray hybridizations carried out with RNA obtained from wild-type and DeltaphoB(PHO80) mutant cells identify Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)), and Afu2g09040 (vacuolar transporter Vtc4) as more expressed both in the DeltaphoB(PHO80) mutant background and under phosphate-limiting conditions of 0.1mM P(i). Epifluorescence microscopy revealed accumulation of poly-phosphate in DeltaphoB(PHO80) vacuoles, which was independent of extracellular phosphate concentration. Surprisingly, a phoD(PHO84) deletion mutant is indistinguishable phenotypically from the corresponding wild-type strain. mRNA analyses suggest that protein kinase A absence supports the expression of PHO genes in A. fumigatus. Furthermore, DeltaphoB(PHO80) and DeltaphoD(PHO84) mutant are fully virulent in a murine low dose model for invasive aspergillosis.

Functional characterization of the Aspergillus fumigatusPHO80 homologue.

Le phosphate est un ion qui est essentiel pour la croissance fongique. Les syst&egrave;mes de phosphate inorganique (P(i)) acquisition dans les cellules eucaryotes (PHO) ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;s comme une faible affinit&eacute; (qui assure un approvisionnement en p (i) &agrave; des concentrations de p (i) externes normales ou &eacute;lev&eacute;es) et une haute affinit&eacute; (activ&eacute; en r&eacute;ponse &agrave; la famine de p (i)). Ici, dans un premier temps &agrave; comprendre la voie PHO chez Aspergillus fumigatus, nous avons caract&eacute;ris&eacute; l&#39;homologue de PHO80, PhoB(PHO80). Nous montrons que le mutant DeltaphoB(PHO80) a un d&eacute;faut de croissance polaire (c&#39;est-&agrave;-dire, une &eacute;mergence du tube germinal retard&eacute;e) et, par ph&eacute;notypique et analyses de l&#39;absorption de phosphate, &eacute;tablir un lien entre le m&eacute;tabolisme de la calcineurine, PhoB(PHO80) et le calcium. Microarray hybridations r&eacute;alis&eacute;es avec RNA obtenu de sauvage et d&#39;identifient les cellules mutantes DeltaphoB(PHO80) Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)) et Afu2g09040 (transporteur vacuolaire Vtc4) exprim&eacute;e plus tant sous limitation de phosphate dans le fond de mutant DeltaphoB(PHO80) conditions de 0,1 mM p (i). Microscopie &agrave; &eacute;pifluorescence r&eacute;v&egrave;le accumulation de poly-phosphate dans les vacuoles de DeltaphoB(PHO80), qui &eacute;tait ind&eacute;pendante de la concentration extracellulaire de phosphate. &Eacute;tonnamment, un mutant de d&eacute;l&eacute;tion phoD(PHO84) est indiscernable ph&eacute;notypiquement de la souche sauvage correspondante. les ARNm analyses sugg&egrave;rent que A absence de prot&eacute;ine kinase favorise l&#39;expression des g&egrave;nes PHO dans a. fumigatus. En outre, le mutant DeltaphoB(PHO80) et DeltaphoD(PHO84) sont enti&egrave;rement virulente dans un mod&egrave;le murin de faible dose d&#39;aspergillose invasive.

Caract&eacute;risation fonctionnelle de l&#39;homologue de fumigatusPHO80 Aspergillus.

Phosphat ist ein Ion, das notwendig f&uuml;r Pilzbefall. Die Systeme zur anorganischen Phosphat (P(i)) Erwerb in eukaryotischen Zellen (PHO) haben eine niedrige Affinit&auml;t (die eine Versorgung von P(i) bei normalen oder hohen externen P(i) Konzentrationen versichert) sowie ein hoher Affinit&auml;t (aktiviert als Reaktion auf P(i) Hunger) gepr&auml;gt. Hier, als ersten Schritt die PHO-Pathway in Aspergillus Fumigatus verstehen, wir die PHO80 Homolog, PhoB(PHO80) gekennzeichnet. Wir zeigen, dass der DeltaphoB(PHO80)-Mutant einen polar Wachstum defekt (d. h. eine verz&ouml;gerte Keim Rohr entstehen hat) und durch die ph&auml;notypische und Phosphat-Aufnahme-Analysen, stellen eine Verbindung zwischen PhoB(PHO80), Calcineurin und Kalzium-Stoffwechsel. Microarray-Hybridisierung durchgef&uuml;hrt mit RNA aus Wildtyp und DeltaphoB(PHO80) mutierte Zellen identifizieren Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)) und Afu2g09040 (welches Transporter Vtc4) ausgedr&uuml;ckt mehr im DeltaphoB(PHO80) mutant Hintergrund und unter Phosphat einschr&auml;nkenden Bedingungen von 0,1 mM P(i). Epifluoreszenz Mikroskopie herausstellte Anh&auml;ufung von Poly-Phosphat in DeltaphoB(PHO80) Vakuolen, die unabh&auml;ngig von extrazellul&auml;ren Phosphat-Konzentration. &Uuml;berraschend ist eine phoD(PHO84)-L&ouml;schung-Mutante ph&auml;notypisch von der entsprechenden Wildtyp-Stamm zu unterscheiden. mRNA-Analysen legen nahe, dass Protein Kinase A fehlen die Expression von Genen PHO im A. Fumigatus unterst&uuml;tzt. Dar&uuml;ber hinaus sind die DeltaphoB(PHO80) und DeltaphoD(PHO84) Mutant voll virulenter in einem murinen niedrig dosiertem Modell f&uuml;r invasive Aspergillose.

Funktionelle Charakterisierung der Aspergillus fumigatusPHO80 Homolog.

Il fosfato &egrave; un ione che &egrave; essenziale per la crescita fungina. I sistemi di fosfato inorganico (P(i)) acquisizione nelle cellule eucariotiche (PHO) sono state caratterizzate come una bassa affinit&agrave; (che assicura un rifornimento di P(i) a concentrazioni P(i) esterni normale o alte) e un&#39;ad alta affinit&agrave; (attivato in risposta alla fame di P(i)). Qui, come un passo iniziale per capire il percorso PHO in Aspergillus fumigatus, abbiamo caratterizzato l&#39;omologo di PHO80, PhoB(PHO80). Dimostriamo che il mutante DeltaphoB(PHO80) ha un difetto di crescita polare (cio&egrave;, un&#39;emersione del tubo germe ritardato) e, da fenotipica e analisi di assorbimento del fosfato, stabilire un collegamento fra metabolismo PhoB(PHO80), calcineurina e calcio. Microarray ibridazioni effettuate con RNA ottenuto da wild-type e cellule mutanti DeltaphoB(PHO80) identificano Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)) e Afu2g09040 (vacuolar transporter Vtc4) come espresso pi&ugrave; in background mutante DeltaphoB(PHO80) e sotto fosfato-limitare condizioni di 0.1 mM P(i). Epifluorescenza rivelato accumulo di poly-fosfato nei vacuoli DeltaphoB(PHO80), che &egrave; indipendente dalla concentrazione extracellulare di fosfato. Sorprendentemente, un mutante di delezione phoD(PHO84) &egrave; indistinguibile fenotipicamente dal ceppo selvaggio-tipo corrispondente. analisi mRNA suggeriscono che assenza di proteina chinasi A supporta l&#39;espressione dei geni PHO in a. fumigatus. Inoltre, mutante DeltaphoB(PHO80) e DeltaphoD(PHO84) sono completamente virulenti in un modello murino di basso dosaggio per aspergillosi invasiva.

Caratterizzazione funzionale di omologo di fumigatusPHO80 l&#39;Aspergillus.

&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5869;&#x306F;&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x7121;&#x6A5F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178; &#xFF08;&#x771F;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE; &#xFF08;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#xFF09; &#x306E;&#x8CB7;&#x53CE;&#x306F;&#x4F4E;&#x89AA;&#x548C; &#xFF08;&#x3064;&#x307E;&#x308A;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9AD8;&#x306E;&#x5916;&#x90E8; P(i) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067; P(i) &#x306E;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3092;&#x4FDD;&#x8A3C;&#xFF09; &#x3068;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044; &#xFF08;P(i) &#x98E2;&#x9913;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#xFF09; &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; P(i))&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x624B;&#x9806;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x3001;PHO80 &#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;PhoB(PHO80) &#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F; DeltaphoB(PHO80) &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x6975;&#x6210;&#x9577;&#x6B20;&#x9665; (&#x9045;&#x5EF6;&#x767A;&#x82BD;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#xFF09; &#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5438;&#x53CE;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;PhoB(PHO80)&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x306E;&#x4EA4;&#x914D;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD; RNA &#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x304A;&#x3088;&#x3073; DeltaphoB(PHO80) &#x5909;&#x7570;&#x7D30;&#x80DE;&#x8B58;&#x5225; Afu4g03610 (phoD(PHO84))&#x3001;Afu7g06350 (phoE(PHO89))&#x3001;Afu4g06020 &#xFF08;phoC(PHO81))&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; Afu2g09040 &#xFF08;&#x7A7A;&#x80DE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC; Vtc4&#xFF09; DeltaphoB(PHO80) &#x5909;&#x7570;&#x80CC;&#x666F;&#x3068;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5869;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x8868;&#x73FE;&#x3068;&#x3057;&#x3066; 0.1 mM P(i) &#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x843D;&#x5C04;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; DeltaphoB(PHO80) &#x7A7A;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;-&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;phoD(PHO84) &#x524A;&#x9664;&#x5909;&#x7570;&#x5F62;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x682A;&#x3068;&#x533A;&#x5225;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;mRNA &#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; A &#x4E0D;&#x5728;&#x304C; A. fumigatus &#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;DeltaphoB(PHO80) &#x3068; DeltaphoD(PHO84) &#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x75C7;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x9EB9;&#x83CC;&#x306E; fumigatusPHO80 &#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3002;

&#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC740; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xC628;. &#xBB34;&#xAE30; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; (P(i)) &#xC9C4; &#xD575; &#xC138;&#xD3EC; (&#xD3EC;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC9D1;&#xC774; (&#xC989; &#xC815;&#xC0C1; &#xB610;&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; P(i) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; p(i)&#xC758; &#xACF5;&#xAE09;&#xC744; &#xBCF4;&#xC7A5;) &#xB0AE;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; (P(i) &#xAE30;&#xC544;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;)&#xC73C;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;. &#xC5EC;&#xAE30;, Aspergillus fumigatus&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xCCAB; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PhoB(PHO80) PHO80 homologue &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC6B0;&#xB9AC; DeltaphoB(PHO80) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xADF9; &#xC9C0; &#xC131;&#xC7A5; &#xACB0;&#xD568; (&#xC989;, &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC138;&#xADE0; &#xD29C;&#xBE0C; &#xCD9C;&#xD604;) &#xD45C;&#xC2DC; &#xBC0F; phenotypic &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xD1B5;&#xD48D; &#xAD00; &#xBD84;&#xC11D;, PhoB(PHO80), calcineurin &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xB300;&#xC0AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;. &#xD568;&#xAED8; &#xC2E4;&#xC2DC; Microarray &#xB0B4; RNA &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xACE0; DeltaphoB(PHO80) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC140; &#xC2DD;&#xBCC4; Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)), &#xBC0F; Afu2g09040 (vacuolar &#xC804;&#xC1A1; Vtc4) DeltaphoB(PHO80) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xACBD; &#xBC0F; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xC81C;&#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354; &#xD45C;&#xD604; 0.1 m P(i) M&#xC758; &#xC870;&#xAC74;. Epifluorescence &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xACF5;&#xAC1C; DeltaphoB(PHO80) vacuoles&#xC5D0; &#xD3F4; &#xB9AC; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, phoD(PHO84) &#xC0AD;&#xC81C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; phenotypically &#xD574;&#xB2F9; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. mRNA &#xBD84;&#xC11D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; A &#xBD80;&#xC7AC; A. fumigatus&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, DeltaphoB(PHO80) &#xBC0F; DeltaphoD(PHO84) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xCE68;&#xB7B5; aspergillosis murine &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xC545;&#xC131;.

&#xB204; fumigatusPHO80 homologue&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El fosfato es un ion que es esencial para el crecimiento de hongo. Los sistemas de fosfato inorg&aacute;nico (P(i)) adquisici&oacute;n en las c&eacute;lulas eucariotas (PHO) se han caracterizado como una baja afinidad (que asegura un suministro de p.II a concentraciones de p.II externos normales o altas) y una alta afinidad (que se activa en respuesta al hambre p.II). Aqu&iacute;, como un primer paso para entender el camino PHO en Aspergillus fumigatus, caracterizamos el hom&oacute;logo de PHO80, PhoB(PHO80). Mostramos que el mutante de DeltaphoB(PHO80) tiene un defecto de crecimiento polar (es decir, una aparici&oacute;n del tubo del germen tard&iacute;a) y, por fenot&iacute;pica y an&aacute;lisis de la absorci&oacute;n de fosfato, establecer un v&iacute;nculo entre el metabolismo del calcio, calcineurina y PhoB(PHO80). Microarray hibridaciones realizadas con RNA Obtenido de tipo salvaje y las c&eacute;lulas mutantes DeltaphoB(PHO80) identifican Afu4g03610 (phoD(PHO84)), Afu7g06350 (phoE(PHO89)), Afu4g06020 (phoC(PHO81)) y Afu2g09040 (vacuolar transportador Vtc4) tal como se expresa m&aacute;s bajo limitaci&oacute;n de fosfato tanto en el fondo del mutante de DeltaphoB(PHO80) condiciones de 0,1 mM p.II. Microscop&iacute;a de epifluorescencia revel&oacute; la acumulaci&oacute;n de poli-fosfato en vacuolas DeltaphoB(PHO80), que era independiente de la concentraci&oacute;n de fosfato extracelular. Sorprendentemente, un mutante de eliminaci&oacute;n de phoD(PHO84) es indistinguible fenot&iacute;picamente la correspondiente cepa de tipo salvaje. mRNA an&aacute;lisis sugieren que la ausencia de prote&iacute;na quinasa A apoya la expresi&oacute;n de genes PHO en a. fumigatus. Adem&aacute;s, el mutante de DeltaphoB(PHO80) y DeltaphoD(PHO84) son totalmente virulento en un modelo murino de dosis baja para la aspergilosis invasiva.

Caracterizaci&oacute;n funcional del hom&oacute;logo de fumigatusPHO80 de Aspergillus.

&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x662F;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x6A21;&#x5177;&#xFF0C;&#x5176;&#x5B62;&#x5B50;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x673A;&#x8F7D;&#x690D;&#x7269;&#x533A;&#x7CFB;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x529F;&#x80FD;&#x5931;&#x8C03;&#x5BFC;&#x81F4;&#x66F2;&#x9709;&#x75C5;&#xFF0C;&#x4E25;&#x91CD;&#x5A01;&#x80C1;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5065;&#x5EB7;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#xFF0C;&#x548C;&#x5371;&#x53CA;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x5F62;&#x5F0F;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80BA;&#x5141;&#x8BB8;&#x5438;&#x5165;&#x5B62;&#x5B50;&#x53D1;&#x80B2;&#x751F;&#x957F;&#x3002;A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x83CC;&#x7684;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x7684;&#x6210;&#x529F;&#x662F;&#x552F;&#x4E00;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FD1;&#x4EB2;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x5728;&#x5206;&#x5B50;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x5F88;&#x5DEE;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x9ED1;&#x66F2;&#x9709;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x7279;&#x6B8A;&#x673A;&#x4F1A;&#x5206;&#x6790;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x7684;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x671F;&#x95F4;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x751F;&#x6001;&#x4F4D;&#x9002;&#x5E94;&#x5DEE;&#x5F02;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x591A;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709; germlings &#x5206;&#x949F;&#x91C7;&#x6837;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x5C0F;&#x9F20;&#x611F;&#x67D3;&#x5F00;&#x59CB;&#x65F6;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x7406;&#x4E8B;&#x4EE3;&#x8C22;&#x548C;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5728;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x9F9B;&#x5185;&#x5141;&#x8BB8;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x84EC;&#x52C3;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7EDF;&#x7B79; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x83CC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x53D1;&#x80B2;&#x517B;&#x62A4;&#x548C;&#x9057;&#x4F20;&#x8F68;&#x8FF9;&#xFF0C;28%&#x548C; 30%&#xFF0C;&#x5206;&#x522B; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x83CC;&#x7684;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x66F2;&#x76EE;&#x6CBF;&#x88AD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x6587;&#x5316;&#x548C;&#x7269;&#x7406;&#x7FA4;&#x96C6;&#x5305;&#x62EC;&#x6307;&#x6325; pseurotin &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x70B9;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;gliotoxin &#x548C;&#x55DC;&#x94C1;&#x7D20;&#x751F;&#x7269;&#x5408;&#x6210;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x51FA;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;Locationally &#x6709;&#x504F;&#x89C1; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x63D0;&#x793A;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F53;&#x5916;&#x94C1;&#x9650;&#x5236;&#xFF0C;&#x9178;&#x3001; &#x78B1;&#x3001; &#x538C;&#x6C27;&#x6216;&#x6C27;&#x5316;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x6742;&#x4EA4;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x88AB;&#x8D5E;&#x6210; ex &#x4F53;&#x5185;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66B4;&#x9732;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x4E30;&#x5BCC;&#x548C;&#x5DEE;&#x8425;&#x517B;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x57F9;&#x517B; germlings &#x4E4B;&#x540E;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x975E;&#x51E1;&#x7D22;&#x5F15;&#x4E4B;&#x95F4; A.&#x70DF;&#x66F2;&#x9709;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x9002;&#x5E94;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x548C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x56E0;&#x4F53;&#x5916;&#x94C1;&#x8017;&#x7AED;&#x3001; &#x78B1;&#x6027;&#x8F6C;&#x53D8;&#x3001; &#x6C2E;&#x9965;&#x997F;&#x548C;&#x62C9;&#x57C3;&#x963F;&#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x8FD9;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x671F;&#x95F4;&#x542F;&#x52A8;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8F6C;&#x5F55;&#x5FEB;&#x7167;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F4;&#x63A5;&#x6025;&#x9700;&#x8BCA;&#x65AD;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x6742;&#x4EA4;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x4E2D;&#x7684;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#x66F2;&#x9709;&#x83CC;&#x5C5E;&#x6F14;&#x53D8;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x529B;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5168;&#x7403;&#x89C6;&#x89D2;&#x3002;

Sub-telomere &#x9488;&#x5BF9;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5F00;&#x59CB;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x66F2;&#x9709;&#x75C5;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Aspergillus fumigatus is a common mould whose spores are a component of the normal airborne flora. Immune dysfunction permits developmental growth of inhaled spores in the human lung causing aspergillosis, a significant threat to human health in the form of allergic, and life-threatening invasive infections. The success of A. fumigatus as a pathogen is unique among close phylogenetic relatives and is poorly characterised at the molecular level. Recent genome sequencing of several Aspergillus species provides an exceptional opportunity to analyse fungal virulence attributes within a genomic and evolutionary context. To identify genes preferentially expressed during adaptation to the mammalian host niche, we generated multiple gene expression profiles from minute samplings of A. fumigatus germlings during initiation of murine infection. They reveal a highly co-ordinated A. fumigatus gene expression programme, governing metabolic and physiological adaptation, which allows the organism to prosper within the mammalian niche. As functions of phylogenetic conservation and genetic locus, 28% and 30%, respectively, of the A. fumigatus subtelomeric and lineage-specific gene repertoires are induced relative to laboratory culture, and physically clustered genes including loci directing pseurotin, gliotoxin and siderophore biosyntheses are a prominent feature. Locationally biased A. fumigatus gene expression is not prompted by in vitro iron limitation, acid, alkaline, anaerobic or oxidative stress. However, subtelomeric gene expression is favoured following ex vivo neutrophil exposure and in comparative analyses of richly and poorly nourished laboratory cultured germlings. We found remarkable concordance between the A. fumigatus host-adaptation transcriptome and those resulting from in vitro iron depletion, alkaline shift, nitrogen starvation and loss of the methyltransferase LaeA. This first transcriptional snapshot of a fungal genome during initiation of mammalian infection provides the global perspective required to direct much-needed diagnostic and therapeutic strategies and reveals genome organisation and subtelomeric diversity as potential driving forces in the evolution of pathogenicity in the genus Aspergillus.

Sub-telomere directed gene expression during initiation of invasive aspergillosis.

Aspergillus fumigatus est un moule commun dont les spores sont une composante de la flore normale a&eacute;roport&eacute;e. Dysfonctionnement immunitaire permet la croissance du d&eacute;veloppement des spores inhal&eacute;s dans le poumon humain causant l&#39;aspergillose, une menace importante pour la sant&eacute; humaine sous la forme d&#39;infections invasives allergiques et potentiellement mortelle. Le succ&egrave;s d&#39;a. fumigatus comme pathog&egrave;ne est unique parmi les proches parents phylog&eacute;n&eacute;tiques et est mal caract&eacute;ris&eacute; au niveau mol&eacute;culaire. R&eacute;cent s&eacute;quen&ccedil;age du g&eacute;nome de plusieurs esp&egrave;ces d&#39;Aspergillus fournit une occasion exceptionnelle d&#39;analyser les attributs de virulence fongique dans un contexte g&eacute;nomique et &eacute;volutif. Pour identifier les g&egrave;nes exprim&eacute;s pr&eacute;f&eacute;rentiellement au cours de l&#39;adaptation &agrave; la niche de l&#39;h&ocirc;te mammif&egrave;re, nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; plusieurs profils d&#39;expression g&eacute;nique de minutes Echantillonnages des germinations d&#39;a. fumigatus au cours de l&#39;initiation de l&#39;infection murine. Elles r&eacute;v&egrave;lent un programme d&#39;expression de g&egrave;ne de hautement coordonn&eacute;e a. fumigatus, r&eacute;gissant l&#39;adaptation m&eacute;tabolique et physiologique, ce qui permet &agrave; l&#39;organisme de prosp&eacute;rer au sein de la niche de mammif&egrave;res. En fonction de la conservation phylog&eacute;n&eacute;tique et locus g&eacute;n&eacute;tique, 28 % et 30 %, respectivement, de l&#39;a. fumigatus subt&eacute;lom&eacute;riques et les r&eacute;pertoires de g&egrave;nes sp&eacute;cifiques lign&eacute;e sont induites par rapport &agrave; la culture en laboratoire, et physiquement en cluster g&egrave;nes dont le locus, mise en sc&egrave;ne pseurotin, biosynth&egrave;se gliotoxine et sid&eacute;rophores est une place pr&eacute;pond&eacute;rante. L&#39;expression des g&egrave;nes geographiquement biais&eacute;e d&#39;a. fumigatus n&#39;est pas invit&eacute; par la limitation en fer in vitro, acide, alcalin, ana&eacute;robie ou oxydant stress. Toutefois, l&#39;expression des g&egrave;nes subt&eacute;lom&eacute;riques est favoris&eacute;e suite ex vivo exposition neutrophiles et les analyses comparatives des tubes germinatifs laboratoire richement et mal nourrie de culture. Nous avons trouv&eacute; une concordance remarquable entre le transcriptome de h&ocirc;te-adaptation d&#39;a. fumigatus et celles r&eacute;sultant de l&#39;appauvrissement de fer in vitro, d&eacute;calage alcalin, azot&eacute;e et perte de la m&eacute;thyltransf&eacute;rase Loi. Cet instantan&eacute; premi&egrave;re transcription du g&eacute;nome fongique au cours de l&#39;initiation de l&#39;infection chez les mammif&egrave;res fournit la perspective globale requise pour diriger les indispensables diagnostique et th&eacute;rapeutique des strat&eacute;gies r&eacute;v&egrave;le g&eacute;nome organisation et subt&eacute;lom&eacute;riques diversit&eacute; et comme potentiel de forces motrices dans l&#39;&eacute;volution de la pathog&eacute;nicit&eacute; du genre Aspergillus.

Sub-Telomere a ordonn&eacute; &agrave; l&#39;expression g&eacute;nique au cours de l&#39;initiation de l&#39;aspergillose invasive.

Kolbenschimmel Fumigatus ist eine gemeinsame Form, deren Sporen eine Komponente der normalen Luft Flora sind. Immun Dysfunktion erlaubt Entwicklungsst&ouml;rungen Wachstum der eingeatmete Sporen in der menschlichen Lunge Aspergillose, eine erhebliche Bedrohung f&uuml;r die menschliche Gesundheit in Form von allergischen und lebensbedrohliche invasive Infektionen verursachen. Der Erfolg von A. Fumigatus als ein Erreger ist einzigartig unter den Angeh&ouml;rigen der phylogenetischen und zeichnet sich schlecht auf molekularer Ebene. Den letzten Genomsequenzierung mehrerer Aspergillus-Arten bietet eine au&szlig;ergew&ouml;hnliche Gelegenheit, pilzartige Virulenz Attribute in einem genomische und evolution&auml;ren Kontext zu analysieren. Um die Identifizierung von Genen, die bevorzugt in Anpassung an die S&auml;ugetier-Host-Nische ge&auml;u&szlig;erten, haben wir mehrere Gen-Ausdruck-Profile von Minute Stichproben von A. Fumigatus Germlings w&auml;hrend der Einleitung des murinen Infektion generiert. Sie offenbaren eine sehr koordinierte A. Fumigatus Gen Ausdruck Programm, EZB metabolischen und physiologischen Anpassung, die den Organismus zu gedeihen in den S&auml;ugetier-Nische erm&ouml;glicht. Als Funktionen der phylogenetischen Erhaltung und genetischen Locus, 28 % und 30 %, von der A. Fumigatus dei und Herkunfts-spezifische gen-Repertoire sind relativ Labor Kultur induzierte beziehungsweise physikalisch gruppierten Gene einschlie&szlig;lich Loci Pseurotin Regie, Gliotoxin und Siderophore Biosynthesewege sind eine Besonderheit. Locationally einseitig A. Fumigatus Genexpression ist nicht aufgefordert durch in-vitro-Eisen Einschr&auml;nkung, S&auml;ure, Alkali, anaerobe oder oxidativen Stress. Allerdings ist di Genexpression beg&uuml;nstigt nach ex-Vivo neutrophil Exposition und in vergleichende Analysen der Germlings Reich und schlecht gen&auml;hrt Labor kultiviert. Wir fanden die bemerkenswerte &Uuml;bereinstimmung zwischen der A. Fumigatus Host-Anpassung Transkriptom und diejenigen, die aus in-vitro-Eisen-Ersch&ouml;pfung, alkalische Shift, Stickstoff Hunger und Verlust an die Methyltransferase f&uuml;hrenden. Diese erste transkriptionelle Momentaufnahme eine pilzartige Genom w&auml;hrend der Einleitung des S&auml;ugetier-Infektion stellt die globale Perspektive, die ben&ouml;tigt werden, um notwendige diagnostische und therapeutische Strategien und zeigt Genom Organisation und dei Vielfalt als Potenzial, die treibenden Kr&auml;fte in der Evolution der Pathogenit&auml;t der Gattung Aspergillus zu leiten.

Sub-Telomere Regie Genexpression w&auml;hrend der Einleitung invasiver Aspergillose.

Aspergillus fumigatus &egrave; uno stampo comune cui le spore sono una componente della normale flora airborne. Disfunzione immunitaria consente la crescita dello sviluppo delle spore inalate nel polmone umano causando aspergillosi, una minaccia significativa per la salute umana in forma di allergie e life-threatening infezioni invasive. Il successo di a. fumigatus come un agente patogeno &egrave; unico tra i parenti stretti filogenetiche e scarsamente &egrave; caratterizzato a livello molecolare. Recente sequenziamento del genoma di diverse specie di Aspergillus offre un&#39;eccezionale opportunit&agrave; di analizzare gli attributi di virulenza fungina all&#39;interno di un contesto genomico ed evolutivo. Per identificare i geni espressi preferenzialmente durante l&#39;adattamento alla nicchia ospitante dei mammiferi, abbiamo generato pi&ugrave; profili di espressione genica da campionamenti minuti di a. fumigatus germlings durante l&#39;inizio dell&#39;infezione murina. Essi rivelano un programma di espressione genica altamente coordinata a. fumigatus, direttivo adattamento metabolico e fisiologico, che consente l&#39;organismo a prosperare entro la nicchia dei mammiferi. Come funzioni di conservazione filogenetica e locus genico, 28% e 30%, rispettivamente, di a. fumigatus subtelomerica e repertori gene specifico lignaggio sono indotti rispetto alla cultura di laboratorio, e fisicamente in cluster geni compresi loci regia pseurotin, biosyntheses gliotoxin e sideroforo sono una caratteristica prominente. Locationally parziale a. fumigatus espressione genica non &egrave; richiesto da limitazione in vitro di ferro, acido, lo stress ossidativo, alcalino o anaerobico. Tuttavia, l&#39;espressione di gene subtelomerica &egrave; favorita seguito ex vivo l&#39;esposizione dei neutrofili e nelle analisi comparative di laboratorio riccamente e mal nutrita coltivata germlings. Abbiamo trovato notevole concordanza tra il transcriptome host-adattamento di a. fumigatus e quelli derivanti dalla deplezione di ferro in vitro, shift alcalina, fame di azoto e perdita di metiltransferasi LaeA. Questo primo snapshot trascrizionale di un genoma fungino durante l&#39;inizio dell&#39;infezione dei mammiferi fornisce la prospettiva globale necessaria per dirigere la tanto necessaria diagnostiche e terapeutiche strategie e rivela genoma organizzazione subtelomerica diversit&agrave; e come potenziale alla guida delle forze nell&#39;evoluzione della patogenicit&agrave; del genere Aspergillus.

Sub-telomere diretta espressione genica durante l&#39;iniziazione di aspergillosi invasiva.

&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x305D;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x306F;&#x7A7A;&#x4E2D;&#x53E2;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x91D1;&#x578B;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x80FD;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x80BA;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x75C7;&#x3001;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3068;&#x751F;&#x547D;&#x3092;&#x8105;&#x304B;&#x3059;&#x306E;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x5F62;&#x3067;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5065;&#x5EB7;&#x3078;&#x306E;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x8105;&#x5A01;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3066;&#x3067;&#x5438;&#x5165;&#x306E;&#x80DE;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;A. fumigatus &#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306F;&#x3001;&#x7CFB;&#x7D71;&#x8FD1;&#x89AA;&#x9593;&#x3067;&#x4E00;&#x610F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x5C5E;&#x306E;&#x6570;&#x7A2E;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3068;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x771F;&#x83CC;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x5C5E;&#x6027;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3092;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x3078;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB; A. fumigatus &#x80DE;&#x5B50;&#x306E;&#x5206;&#x306E;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x304B;&#x3089;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x6642;&#x306B;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3084;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x9069;&#x5FDC;&#x3092;&#x7E41;&#x6804;&#x3059;&#x308B;&#x751F;&#x7269;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x5185;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30CD;&#x30FC;&#x30C8; A. fumigatus &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x4FDD;&#x5168;&#x3068; 28 &#xFF05; &#x3068; 30 &#xFF05; &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E; A. fumigatus subtelomeric &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CFB;&#x7D71;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30EC;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EA;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x6587;&#x5316;&#x76F8;&#x5BFE;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;pseurotin &#x76E3;&#x7763;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7269;&#x7406;&#x7684;&#x306B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x62C5;&#x9244;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x751F;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Locationally &#x504F;&#x3063;&#x305F; A. fumigatus &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x4F53;&#x5916;&#x9244;&#x5236;&#x9650;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x9178;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x3001;&#x5ACC;&#x6C17;&#x6027;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9178;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3092;&#x6C42;&#x3081;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;subtelomeric &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE; ex vivo &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x9732;&#x51FA;&#x3068;&#x8C4A;&#x304B;&#x306A;&#x3001;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x6804;&#x990A;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x57F9;&#x990A;&#x80DE;&#x5B50;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x6B21;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8; &#x30E6;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x306B;&#x4EBA;&#x6C17;&#x3067;&#x3059;&#x3002;A. fumigatus &#x5BBF;&#x4E3B;&#x9069;&#x5FDC;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x9244;&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA; &#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;, &#x7A92;&#x7D20;&#x98E2;&#x9913;&#x3084;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; LaeA &#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x304B;&#x3089;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC; &#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x771F;&#x83CC;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x6642;&#x306B;&#x5927;&#x3044;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x8A3A;&#x65AD;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068; subtelomeric &#x591A;&#x69D8;&#x30B3;&#x30A6;&#x30B8;&#x30AB;&#x30D3;&#x5C5E;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x539F;&#x52D5;&#x529B;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x76F4;&#x63A5;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306A;&#x8996;&#x70B9;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Sub-telomere &#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x30A2;&#x30B9;&#x30DA;&#x30EB;&#x30AE;&#x30EB;&#x30B9;&#x75C7;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x6642;&#x306B;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#xB204; fumigatus &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAE08;&#xD615;&#xC758; &#xD3EC;&#xC790;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xACF5; &#xC218; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA74;&#xC5ED; &#xBD80;&#xC804; aspergillosis, &#xC54C;&#xB808;&#xB974;&#xAE30;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC0DD;&#xBA85;&#xC744; &#xC704;&#xD611; &#xD558; &#xACE0; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC74;&#xAC15;&#xC5D0; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xC704;&#xD611;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xD3D0;&#xC5D0; &#xD761;&#xC785;&#xB41C; &#xD3EC;&#xC790;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. A. fumigatus &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xB85C; &#xC11C;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC640; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC6B4; phylogenetic &#xCE5C;&#xCC99; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB204; &#xC885;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC9C4;&#xD654; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xB3C5;&#xC131; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xBCC4; &#xD55C; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; A. fumigatus germlings&#xC758; &#xBD84; samplings&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xD544; murine &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xC131; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xBC88;&#xC601;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xD2C8;&#xC0C8; &#xC2DC;&#xC7A5; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC801;&#xC751; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xB3D9;&#xC801; A. fumigatus &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Phylogenetic &#xBCF4;&#xC874; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;, 28%, 30%&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC01;&#xAC01; A. fumigatus&#xC758; subtelomeric &#xBC0F; &#xACC4;&#xBCF4; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC94;&#xC720;&#xB7FD; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xBB38;&#xD654; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xBB3C;&#xB9AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; loci pseurotin &#xC9C0;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;, gliotoxin &#xBC0F; siderophore biosyntheses&#xB294; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;. Locationally &#xD55C;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xC6B0;&#xCE5C;&#xB41C; A. fumigatus &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC740; &#xCCB4; &#xC678; &#xCCA0; &#xC81C;&#xD55C;, &#xC0B0; &#xC131;, &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131;, &#xD610; &#xAE30;&#xC131; &#xB610;&#xB294; &#xC0B0;&#xD654; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, subtelomeric &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; ex vivo &#xD638; &#xB178;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xAD50;&#xC591; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC790;&#xB77C; &#xB09C;&#xB41C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; germlings&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC120;&#xD638; &#xD558;&#xB294;. A. fumigatus &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC801;&#xC751; transcriptome&#xC640; &#xCCB4; &#xC678; &#xCCA0; &#xACE0;&#xAC08;, &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC131; &#xAD50;&#xB300;, &#xC9C8;&#xC18C; &#xAE30;&#xC544;&#xC640; methyltransferase Laea&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xB798;&#xD55C; &#xADF8; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; transcriptional &#xC2A4;&#xB0C5;&#xC20F;&#xC774; &#xB9CE;&#xC774; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC9C4;&#xB2E8; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xACC4;&#xC2DC; &#xD55C;&#xB2E4; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; subtelomeric &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; Aspergillus &#xC18D;&#xC5D0; pathogenicity&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;&#xC5D0; &#xBD80; &#xB300; &#xC6B4;&#xC804;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xAD00;&#xC810;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Sub-telomere&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xCE68;&#xB7B5; aspergillosis&#xC758; &#xCD08;&#xAE30;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC10;&#xB3C5;.

Aspergillus fumigatus es un molde com&uacute;n cuyas esporas son un componente de la flora normal del aire. Disfunci&oacute;n inmune permite crecimiento desarrollo de esporas inhaladas en el pulm&oacute;n humano causando aspergilosis, una amenaza significativa para la salud humana en forma de infecciones invasivas al&eacute;rgicas y potencialmente mortales. El &eacute;xito de a. fumigatus como pat&oacute;geno es &uacute;nico entre los parientes filogen&eacute;ticas y mal se caracteriza a nivel molecular. Reciente secuenciaci&oacute;n del genoma de varias especies de Aspergillus proporciona una oportunidad excepcional para analizar los atributos de virulencia hongos dentro de un contexto evolutivo y gen&oacute;mico. Para identificar genes expresados preferentemente durante la adaptaci&oacute;n para el nicho de hu&eacute;sped mam&iacute;fero, hemos generado m&uacute;ltiples perfiles de expresi&oacute;n g&eacute;nica de muestreos minutos de germlings de a. fumigatus durante la iniciaci&oacute;n de la infecci&oacute;n murina. Revelan un programa altamente coordinado a. fumigatus gene expresi&oacute;n, Consejo adaptaci&oacute;n metab&oacute;lica y fisiol&oacute;gica, que permite al organismo a prosperar dentro del nicho mam&iacute;fero. Como funciones de conservaci&oacute;n filogen&eacute;tica y locus gen&eacute;ticos, 28% y 30%, respectivamente, de la a. fumigatus subtelom&eacute;ricas y repertorios de linaje espec&iacute;fico gen son inducidos en relaci&oacute;n con la cultura de laboratorio, y f&iacute;sicamente agrupados genes incluyendo loci dirigir pseurotin, gliotoxina y sider&oacute;foro bios&iacute;ntesis son una caracter&iacute;stica prominente. Expresi&oacute;n del gen locationally sesgada a. fumigatus no es impulsada por la limitaci&oacute;n de hierro in vitro, &aacute;cido, alcalino, anaerobio u oxidativo estr&eacute;s. Sin embargo, subtelom&eacute;ricas genes es favorecido tras ex vivo exposici&oacute;n neutr&oacute;filos y en an&aacute;lisis comparativos de germlings rico y mal nutrida laboratorio cultivada. Encontramos notable concordancia entre el transcriptoma de anfitri&oacute;n-adaptaci&oacute;n de a. fumigatus y las derivadas de depleci&oacute;n de hierro in vitro, cambio alcalino, hambre de nitr&oacute;geno y p&eacute;rdida de la metiltransferasa LaeA. Esta primera instant&aacute;nea transcripcional de un genoma de hongo durante la iniciaci&oacute;n de mam&iacute;fera infecci&oacute;n proporciona la perspectiva global necesaria para dirigir tan necesaria diagn&oacute;stica y terap&eacute;utica estrategias y revela genoma organizaci&oacute;n subtelom&eacute;ricas diversidad y como potencial dinamizadores en la evoluci&oacute;n de la patogenicidad del g&eacute;nero Aspergillus.

Sub-telomere dirige la expresi&oacute;n g&eacute;nica durante la iniciaci&oacute;n de la aspergilosis invasora.

&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0; (&#x805A;-P) &#x7531;&#x521A;&#x94FE;&#x78F7;&#x9178;&#x7EC4;&#x9AD8;&#x80FD;&#x6E90;&#x503A;&#x5238;&#x7531;&#x94FE;&#x63A5;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x5B83;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E00;&#x4E2A;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x5E76;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x4E86;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0;&#x5B58;&#x50A8;&#x3001; &#x51DD;&#x8840;&#x3001; &#x548C;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027;&#xFF09;&#x3002;&#x5176;&#x4EE3;&#x8C22;&#x4E3B;&#x8981;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7814;&#x7A76;&#x5176;&#x4F59;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x65E0;&#x771F;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x6709;&#x4EBA;&#x63D0;&#x51FA;&#x8BE5;&#x805A;&#x78F7;&#x4EE3;&#x8C22;&#x76F8;&#x8FDE;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x78F7;&#x9178;&#x7684;&#x808C;&#x9187;&#x7269;&#x79CD; (&#x808C;&#x9187; pyrophosphates)&#x3002;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x662F;&#x5176;&#x4E2D;&#x78F7;&#x9178;&#x7FA4;&#x4F53;&#x4EBA;&#x6570;&#x8D85;&#x8FC7;&#x78B3;&#x539F;&#x5B50;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x591A;&#x6676;&#x7845;-P &#x50CF;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5305;&#x542B;&#x9AD8;&#x80FD;&#x6E90;&#x503A;&#x5238;&#x548C;&#x626E;&#x6F14;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x65E0;&#x6CD5;&#x51FA;&#x793A;&#x808C;&#x9187; pyrophosphates &#x90FD;&#x65E0;&#x6CD5;&#x5BDF;&#x89C9;&#x7684;&#x4FDD;&#x5229;&#x4F53;&#x80B2;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5206;&#x5B50;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x7A81;&#x51FA;&#x4EE3;&#x8C22;&#x5E76;&#x884C;&#x3002;&#x66F4;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; DDP1&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; diadenosine &#x548C; diphosphoinositol phosphohydrolase&#xFF0C;&#x62E5;&#x6709;&#x5F3A;&#x5065;&#x7684;&#x591A;&#x6676;&#x7845; P endopolyphosphohydrolase &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x662F;&#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Nudix &#x6C34;&#x89E3;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;DIPP1&#xFF0C;DIPP2 &#x548C; DIPP3&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A; Ddp1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x4E5F;&#x662F;&#x964D;&#x89E3;&#x805A;&#x4F53;&#x80B2;

&#x65E0;&#x673A;&#x78F7;&#x9178;&#x76D0; endopolyphosphatases &#x8FDB;&#x5316;&#x4FDD;&#x6301;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x6807;&#x8BC6;&#x3002;

Inorganic polyphosphate (poly-P) consists of just a chain of phosphate groups linked by high energy bonds. It is found in every organism and is implicated in a wide variety of cellular processes (e.g. phosphate storage, blood coagulation, and pathogenicity). Its metabolism has been studied mainly in bacteria while remaining largely uncharacterized in eukaryotes. It has recently been suggested that poly-P metabolism is connected to that of highly phosphorylated inositol species (inositol pyrophosphates). Inositol pyrophosphates are molecules in which phosphate groups outnumber carbon atoms. Like poly-P they contain high energy bonds and play important roles in cell signaling. Here, we show that budding yeast mutants unable to produce inositol pyrophosphates have undetectable levels of poly-P. Our results suggest a prominent metabolic parallel between these two highly phosphorylated molecules. More importantly, we demonstrate that DDP1, encoding diadenosine and diphosphoinositol phosphohydrolase, possesses a robust poly-P endopolyphosphohydrolase activity. In addition, we prove that this is an evolutionarily conserved feature because mammalian Nudix hydrolase family members, the three Ddp1 homologues in human cells (DIPP1, DIPP2, and DIPP3), are also capable of degrading poly-P.

Identification of an evolutionarily conserved family of inorganic polyphosphate endopolyphosphatases.

Polyphosphate min&#xE9;ral (poly-P) se compose de seulement une cha&#xEE;ne de groupes phosphate li&#xE9;s par des liaisons &#xE0; haute &#xE9;nergie. Il se trouve dans chaque organisme et est impliqu&#xE9; dans une grande vari&#xE9;t&#xE9; de processus cellulaires (p. ex phosphate de stockage, la coagulation du sang, et la pathog&#xE9;nicit&#xE9;). Son m&#xE9;tabolisme a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; principalement dans les bact&#xE9;ries tout en restant largement non caract&#xE9;ris&#xE9;s chez les eucaryotes. Il a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cemment sugg&#xE9;r&#xE9; que le poly-P m&#xE9;tabolisme est li&#xE9; &#xE0; celui de tr&#xE8;s phosphoryl&#xE9;es esp&#xE8;ces inositol (pyrophosphates inositol). Pyrophosphates inositol sont des mol&#xE9;cules dans lesquelles les groupes phosphates sont plus nombreux que des atomes de carbone. Comme poly-P, ils contiennent des liaisons &#xE0; haute &#xE9;nergie et de jouer des r&#xF4;les importants dans la signalisation cellulaire. Ici, nous montrons que les mutants de levure en herbe incapables de produire pyrophosphates inositol ont des niveaux ind&#xE9;tectables de poly-P. Nos r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un parall&#xE8;le m&#xE9;tabolique importante entre ces deux mol&#xE9;cules hautement phosphoryl&#xE9;s. Plus important encore, nous d&#xE9;montrons que DDP1, codant phosphohydrolase diad&#xE9;nosine et diphosphoinositol, poss&#xE8;de une activit&#xE9; endopolyphosphohydrolase robuste poly-P. En outre, nous montrons que cette fonctionnalit&#xE9; est &#xE9;volutif conserv&#xE9;e parce mammif&#xE8;res membres de la famille Nudix hydrolase, les trois DDP1 homologues dans les cellules humaines (DIPP1, DIPP2, et DIPP3), sont &#xE9;galement capables de d&#xE9;grader le poly-P.

Identification d&#x26;#39;une famille &#xE9;volutives conserv&#xE9;es de Endopolyphosphatases polyphosphate inorganique

Anorganische Polyphosphate (Poly-P) besteht aus nur einer Kette von Phosphatgruppen, die durch energiereiche Bindungen verkn&uuml;pft. Es findet sich in jedem Organismus und ist in einer Vielzahl zellul&auml;rer Prozesse (z.B. Phosphat Speicher, Blutgerinnung und Pathogenit&auml;t) verwickelt. Seinen Stoffwechsel wurde haupts&auml;chlich in Bakterien bleiben Sie weitgehend in den Eukaryotes uncharakterisiertes untersucht. Vor kurzem wurde vermutet, dass diese Poly-P-Stoffwechsel, die stark Phosphorylierte Inosit-Arten (Inosit Pyrophosphates) angeschlossen ist. Inosit Pyrophosphates sind Molek&uuml;le, die in denen Phosphatgruppen Kohlenstoffatome &uuml;berwiegen. Wie Poly-P sie enthalten energiereiche Bindungen und spielen eine wichtige Rolle in der Zelle zu signalisieren. Hier zeigen wir, dass angehende Hefe-Mutanten, die nicht in der Lage, Inosit Pyrophosphates zu produzieren haben nicht nachweisbar Poly-P. Unsere Ergebnisse legen nahe, eine prominente metabolische Parallele zwischen diese beiden stark phosphorylierte Molek&uuml;le. Noch wichtiger ist, beweisen wir, dass DDP1, Codierung Diadenosine und Diphosphoinositol-Phosphohydrolase, eine robuste Poly-P-Endopolyphosphohydrolase-Aktivit&auml;t besitzt. Dar&uuml;ber hinaus beweisen wir, dass dies eine evolution&auml;r konservierte Feature ist, weil S&auml;ugetier-Nudix Hydrolase Familienangeh&ouml;rigen, die drei Ddp1 Homologen in den menschlichen Zellen (DIPP1, DIPP2 und DIPP3), auch erniedrigender Poly-P. Lage sind

Kennung einer evolution&auml;r konservierte Familie anorganischer Polyphosphate Endopolyphosphatases.

Inorganico polifosfato (poly-P) &egrave; costituito da solo una catena di gruppi fosfato legati da legami ad alta energia. E si trova in ogni organismo ed &egrave; coinvolto in un&#39;ampia variet&agrave; di processi cellulari (ad esempio deposito di fosfato, la coagulazione del sangue e patogenicit&agrave;). Il metabolismo &egrave; stato studiato principalmente nei batteri, pur rimanendo in gran parte atipici negli eucarioti. Recentemente &egrave; stato suggerito che metabolismo poly-P &egrave; collegato a quello di specie altamente fosforilato inositolo (pirofosfati inositolo). Pirofosfati inositolo sono molecole in cui gruppi fosfato superano gli atomi di carbonio. Come poli-P che contengono legami ad alta energia e svolgono un ruolo importante nella segnalazione delle cellule. Qui, ci mostra che in erba mutanti lievito incapace di produrre pirofosfati inositolo hanno livelli rilevabili di poli-P. I nostri risultati suggeriscono un parallelo metabolico importante tra queste due molecole altamente fosforilate. Ancora pi&ugrave; importante, ci dimostrano che DDP1, codifica diadenosine e diphosphoinositol phosphohydrolase, possiede un&#39;attivit&agrave; di endopolyphosphohydrolase robusta poli-P. Inoltre, dimostriamo che questa &egrave; una caratteristica evolutivamente conservata perch&eacute; mammiferi Nudix idrolasi membri della famiglia, i tre omologhi Ddp1 nelle cellule umane (DIPP1, DIPP2 e DIPP3), sono anche in grado di degradare poly-P.

Identificazione di una famiglia evolutivamente conservata di inorganico polifosfato endopolyphosphatases.

&#x7121;&#x6A5F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF08;&#x30DD;&#x30EA;-P&#xFF09;&#x306F;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9023;&#x7D50;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x57FA;&#x306E;&#x3061;&#x3087;&#x3046;&#x3069;&#x30C1;&#x30A7;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x8CAF;&#x8535;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x51DD;&#x56FA;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#xFF09;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x672A;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x691C;&#x8A0E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x7A2E;&#xFF08;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#xFF09;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306F;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x57FA;&#x306F;&#x3001;&#x70AD;&#x7D20;&#x539F;&#x5B50;&#x6570;&#x3092;&#x4E0A;&#x56DE;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x9AD8;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x542B;&#x307F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D4;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x9593;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306E;&#x5E73;&#x884C;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DDP1&#x306F;&#x3001;diadenosine&#x3068;diphosphoinositol&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x5805;&#x7262;&#x306A;&#x30DD;&#x30EA;-P endopolyphosphohydrolase&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;Nudix&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x9175;&#x7D20;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;3 Ddp1&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#xFF08;DIPP1&#x3001;DIPP2&#x3001;&#x3068;DIPP3&#xFF09;&#x304C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;-P&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7121;&#x6A5F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x306E;Endopolyphosphatases&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;

&#xBB34;&#xAE30; polyphosphate (&#xD3F4; &#xB9AC;-P) &#xB192;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xCCB4;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; (&#xC608;: &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;, &#xD608;&#xC561; &#xC751;&#xACE0;, &#xACF5;&#xAC04;&#xACFC; pathogenicity)&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xB300;&#xC0AC;&#xB294; &#xC8FC;&#xB85C; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xADF8; &#xD3F4; &#xB9AC; P &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC885; &#xB192;&#xC740; phosphorylated &#xC774;&#xB178; &#xC2DC; &#xD1A8; (inositol pyrophosphates)&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Inositol pyrophosphates&#xB294; &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC; &#xADF8;&#xB8F9; &#xC22B; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD0C4;&#xC18C; &#xC6D0;&#xC790; &#xBD84;&#xC790;. &#xD3F4; &#xB9AC;-P &#xCC98;&#xB7FC; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; inositol pyrophosphates&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3F4; &#xB9AC;-&#xD53C;&#xC758; &#xBC1C;&#xACAC;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC218;&#xCE58;&#xAC00; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC774; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB9E4;&#xC6B0; phosphorylated &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC; &#xBCD1;&#xB82C;&#xC744; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, DDP1, &#xC778;&#xCF54;&#xB529; diadenosine &#xBC0F; diphosphoinositol phosphohydrolase&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD3F4; &#xB9AC;-P endopolyphosphohydrolase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; Nudix &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;, 3 Ddp1 homologues (DIPP1, DIPP2, &#xBC0F; DIPP3), &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD3F4; &#xB9AC;. &#xAD74;&#xC695;&#xC758; &#xC99D;&#xBA85;

&#xBB34;&#xAE30; polyphosphate endopolyphosphatases&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;.

Polifosfato inorg&#xE1;nico (poli-P) consta de s&#xF3;lo una cadena de grupos fosfato unidos por enlaces de alta energ&#xED;a. Se encuentra en todos los organismos y est&#xE1; implicado en una amplia variedad de procesos celulares (por ejemplo fosfato de almacenamiento, coagulaci&#xF3;n de la sangre, y la patogenicidad). Su metabolismo se ha estudiado principalmente en las bacterias sin dejar de ser en gran medida no caracterizados en las c&#xE9;lulas eucariotas. Recientemente se ha sugerido que la poli-P metabolismo est&#xE1; conectado a la de las especies altamente inositol fosforilado (pirofosfatos inositol). Pirofosfatos inositol son mol&#xE9;culas en las que los grupos fosfato son m&#xE1;s numerosos que los &#xE1;tomos de carbono. Como poli-P que contienen enlaces de alta energ&#xED;a y desempe&#xF1;an un papel importante en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular. Aqu&#xED;, mostramos que los mutantes de levadura en ciernes que no pueden producir pirofosfatos inositol tener niveles indetectables de poli-P. Nuestros resultados sugieren un paralelismo metab&#xF3;lica m&#xE1;s importante entre estas dos mol&#xE9;culas altamente fosforilados. M&#xE1;s importante a&#xFA;n, nos demuestran que DDP1, que codifica fosfohidrolasa diadenosine y diphosphoinositol, posee una s&#xF3;lida actividad de poli-P endopolyphosphohydrolase. Adem&#xE1;s, se demuestra que esta es una caracter&#xED;stica conservada evolutivamente, ya miembros de la familia de mam&#xED;feros NUDIX hidrolasa, los tres Ddp1 hom&#xF3;logos en las c&#xE9;lulas humanas (DIPP1, DIPP2 y DIPP3), tambi&#xE9;n son capaces de degradar poli-P.

Omar Loss

Medical Research Council (MRC),
Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology,
Medical Research Council (MRC), Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology

University College London

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

Omar Loss

Medical Research Council (MRC),Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology,Medical Research Council (MRC), Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology

University College London

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

Medical Research Council (MRC),
Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology,
Medical Research Council (MRC), Cell Biology Unit and Laboratory for Molecular Cell Biology