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Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology

The ability to pattern proteins and other biomolecules onto substrates is important for capturing the spatial complexity of the extracellular environment. ...

Columbia University

Columbia College

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&#x672C;&#x5730;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x7684; L1 &#x548C; N-&#x9499;&#x7C98;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x591A;&#x7EC4;&#x5206;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x578B;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5DEE;&#x5F02;&#x76F4;&#x63A5;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x3002;

The ability to pattern multiple bioactive cues on a surface is valuable for understanding how neurons interact with their complex extracellular environment. In this report, we introduce a set of methods for creating such surfaces, with the goals of understanding how developing neurons integrate multiple biologically relevant signals and as a tool for studying interactions between multiple neurons. Multiple microcontact printing steps are combined on a single surface to produce an array of polylysine nodes, interconnected by lines of proteins based on the extracellular domains of L1 or N-cadherin. Surprisingly, the N-cadherin protein could also be directly printed onto surfaces while retaining its biological activity. Rat hippocampal neurons selectively attached to the polylysine nodes, differentially extending axonal and dendritic processes along the patterns of L1 and N-cadherin, thus demonstrating control over neuron attachment and outgrowth. Combining these three biomolecules on a single surface revealed a highly complex pattern of protein recognition. Dendrites extended exclusively on N-cadherin patterns, while axons exhibited a very high degree of selectivity on L1 patterns, preferentially at distances greater than 55 mum from the cell body. At shorter distances, axonal processes recognized both L1 and N-cadherin, revealing a new aspect of neuron polarity and axon specification. This onset of L1 selectivity correlated with the establishment of intracellular L1 polarity, suggesting a functional outcome of the process of neuron polarization that has implications in development of neural tissues and creation of in vitro neuron networks.

Local presentation of L1 and N-cadherin in multicomponent, microscale patterns differentially direct neuron function in vitro.

La capacit&#xE9; de motif de multiples indices bioactifs sur une surface est pr&#xE9;cieuse pour comprendre comment les neurones interagissent avec leur environnement extracellulaire complexe. Dans ce rapport, nous pr&#xE9;sentons un ensemble de m&#xE9;thodes pour cr&#xE9;er de telles surfaces, avec les objectifs de comprendre comment les neurones en d&#xE9;veloppement &#xE0; int&#xE9;grer de multiples signaux biologiquement pertinentes et comme un outil pour &#xE9;tudier les interactions entre les neurones multiples. Multiples &#xE9;tapes impression par microcontact sont combin&#xE9;s sur une seule surface pour produire une matrice de noeuds polylysine, interconnect&#xE9;s par des lignes de prot&#xE9;ines &#xE0; partir des domaines extracellulaires de L1 ou N-cadh&#xE9;rine. Surprenante, la prot&#xE9;ine N-cadh&#xE9;rine peut &#xE9;galement &#xEA;tre imprim&#xE9;es directement sur des surfaces, tout en conservant son activit&#xE9; biologique. Neurones de l&#x26;#39;hippocampe de rat s&#xE9;lectivement attach&#xE9;s aux noeuds polylysine, s&#x26;#39;&#xE9;tendant de mani&#xE8;re diff&#xE9;rentielle les processus axonaux et dendritiques long des sch&#xE9;mas de L1 et N-cadh&#xE9;rine, montrant ainsi le contr&#xF4;le de pi&#xE8;ce jointe neurone et l&#x26;#39;excroissance. La combinaison de ces trois biomol&#xE9;cules sur une seule surface ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une structure tr&#xE8;s complexe de la reconnaissance des prot&#xE9;ines. Dendrites &#xE9;tendu exclusivement sur N-cadh&#xE9;rine mod&#xE8;les, tandis que les axones preuve d&#x26;#39;un degr&#xE9; tr&#xE8;s &#xE9;lev&#xE9; de s&#xE9;lectivit&#xE9; sur L1 motifs, de pr&#xE9;f&#xE9;rence &#xE0; des distances sup&#xE9;rieures &#xE0; 55 mum du corps cellulaire. A des distances plus courtes, processus axonaux reconnu &#xE0; la fois L1 et N-cadh&#xE9;rine, r&#xE9;v&#xE9;lant une nouvelle facette de la polarit&#xE9; et la sp&#xE9;cification des neurones axone. Cette apparition de la s&#xE9;lectivit&#xE9; L1 en corr&#xE9;lation avec la mise en place de la polarit&#xE9; intracellulaire L1, sugg&#xE9;rant un r&#xE9;sultat fonctionnel du processus de polarisation neurone qui a des implications dans le d&#xE9;veloppement des tissus nerveux et la cr&#xE9;ation de r&#xE9;seaux de neurones in vitro dans.

Pr&#xE9;sentation locale de la L1 et la N-cadh&#xE9;rine dans multicomposant, Patterns Microscale diff&#xE9;rentiellement la fonction des neurones directe in vitro

Die F&auml;higkeit, mehrere bioaktive Hinweise auf eine Oberfl&auml;che Muster ist wertvoll f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der Interaktion von Neuronen mit ihren komplexen extrazellul&auml;ren Umgebung. In diesem Bericht stellen wir eine Reihe von Methoden zum Erstellen von solchen Oberfl&auml;chen, mit den Zielen des Verst&auml;ndnisses, wie entwickelnde Neuronen mehrere biologisch relevanter Signale integrieren und als Instrument zur Untersuchung von Interaktionen zwischen mehreren Neuronen. Mehrere Microcontact Drucken Schritte werden auf einer einzigen Oberfl&auml;che um ein Array von Polylysin Knoten, miteinander verbunden durch Linien von Proteinen, die basierend auf der extrazellul&auml;ren Dom&auml;nen L1 oder N-Cadherin produzieren kombiniert. &Uuml;berraschenderweise konnte das N-Cadherin-Protein auch direkt auf Oberfl&auml;chen gedruckt werden unter Beibehaltung seiner biologischen Aktivit&auml;t. Ratte-Neuronen selektiv mit der Polylysin-Knoten, differentiell erweitern axonalen und dendritischen Prozesse entlang der Muster von L1 und N-Cadherin, damit demonstrieren Kontrolle &uuml;ber Neuron Anlage und Auswuchs verbunden. Kombination dieser drei Biomolek&uuml;len auf einer einzigen Oberfl&auml;che offenbart ein hochkomplexes Muster der Protein-Anerkennung. Dendriten, die ausschlie&szlig;lich auf N-Cadherin Muster, verl&auml;ngert, w&auml;hrend Axone ein sehr hohes Ma&szlig; an Selektivit&auml;t auf L1-Mustern, vorzugsweise bei Entfernungen gr&ouml;&szlig;er als 55 Mum vom Zellk&ouml;rper ausgestellt. Bei k&uuml;rzeren Entfernungen erkannt axonale Prozesse L1 und N-Cadherin, offenbart einen neuen Aspekt des Neuron Polarit&auml;t und Axon-Spezifikation. Dieser Ausbruch von L1 Selektivit&auml;t korreliert mit der Errichtung des intrazellul&auml;ren L1-Polarit&auml;t, was auf eine funktionale Ergebnis des Prozesses der Neuron-Polarisierung, die Auswirkungen auf die Entwicklung von Nervengewebe und Schaffung von in-vitro-Neuron hat.

Lokale Pr&auml;sentation von L1 und N-Cadherin in Mehrkomponenten, direkte Microscale Muster differentiell Neuron-Funktion in vitro.

La capacit&agrave; di pattern pi&ugrave; bioattivi spunti su una superficie &egrave; preziosa per comprendere come i neuroni interagiscono con l&#39;ambiente extracellulare complesso. In questo rapporto, presentiamo una serie di metodi per la creazione di tali superfici, con l&#39;obiettivo di capire come i neuroni in via di sviluppo integrano molteplici segnali biologicamente rilevanti e come strumento per lo studio delle interazioni tra neuroni multipli. Pi&ugrave; passaggi di stampa microcontatto sono combinati su una singola superficie per generare una matrice di polilisina nodi, collegati tra loro da linee delle proteine basate sui domini extracellulari di L1 o N-caderina. Sorprendentemente, la proteina N-caderina potrebbe anche essere stampata direttamente su superfici mantenendo la sua attivit&agrave; biologica. Rat hippocampal neuroni selettivamente associati ai nodi polilisina, differenzialmente estendendo i processi assonali e dendritico lungo modelli di L1 e N-caderina, dimostrando cos&igrave; il controllo sul neurone attaccamento ed escrescenza. Combinando questi tre biomolecole su una singola superficie, ha rivelato un modello altamente complesso di riconoscimento della proteina. Dendriti estesi esclusivamente sui modelli N-caderina, mentre assoni esposto un alto grado di selettivit&agrave; su L1 patterns, preferenzialmente a distanze superiori a 55 mamma dal corpo cellulare. A brevi distanze, processi assonali riconosciuto sia L1 e N-caderina, rivelando un aspetto nuovo axon specifica e polarit&agrave; del neurone. Questo esordio di L1 selettivit&agrave; correlata con l&#39;istituzione della polarit&agrave; intracellulare di L1, suggerendo un risultato funzionale del processo di polarizzazione del neurone che ha implicazioni nello sviluppo dei tessuti neurali e creazione di reti di neuroni in vitro.

Presentazione locale di L1 e N-caderina in multicomponente, Microscala modelli differenzialmente diretta funzione del neurone in vitro.

&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x6D3B;&#x6027;&#x5408;&#x56F3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x74B0;&#x5883;&#x3068;&#x306E;&#x5BFE;&#x8A71;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3092;&#x7D71;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x76EE;&#x6A19;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x200B;&#x200B;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x3054;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AF;&#x30C8;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;L1&#x307E;&#x305F;&#x306F;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7DDA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x76F8;&#x4E92;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x30CE;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x5370;&#x5237;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x3066;&#x5DEE;&#x52D5;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x3068;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x3001;L1&#x3068;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3068;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x5EF6;&#x9577;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30FC;&#x30C9;&#x306B;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6D77;&#x99AC;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306F;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;55&#x304A;&#x6BCD;&#x3055;&#x3093;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x3001;L1&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x306F;&#x3001;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x6392;&#x4ED6;&#x7684;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x77ED;&#x3044;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x3068;&#x8EF8;&#x7D22;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x5074;&#x9762;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;L1&#x3068;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x305F;&#x3002; L1&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3067;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x5275;&#x9020;&#x306E;&#x767A;&#x5C55;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x6975;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x8EE2;&#x5E30;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;L1&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;

L1&#x3068;&#x591A;&#x6210;&#x5206;&#x306E;N-&#x30AB;&#x30C9;&#x30D8;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5DEE;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xD65C;&#xC131; &#xC2E0;&#xD638; &#xD328;&#xD134; &#xB2A5;&#xB825;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC720;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB274;&#xB7F0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; &#xAD00;&#xB828; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB274;&#xB7F0; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC774;&#xD574;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC11C;&#xD53C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB77C;&#xC778; L1 &#xB610;&#xB294; N cadherin&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAE30;&#xBC18; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; polylysine &#xB178;&#xB4DC;&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131;&#xC744; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; microcontact &#xC778;&#xC1C4; &#xB2E8;&#xACC4; &#xACB0;&#xD569; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, N cadherin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xB3C4; &#xC9C1;&#xC811; &#xC778;&#xC1C4;&#xD560; &#xC218; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C;. &#xC950; hippocampal &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC28;&#xB3D9; L1 &#xBC0F; N-cadherin, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCCA8;&#xBD80; &#xBC0F; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xB530;&#xB77C; axonal &#xBC0F; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xD655;&#xC7A5; polylysine &#xB178;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; biomolecules &#xACB0;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xC2DD;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Dendrites &#xCD95; &#xC0AD; &#xC140; &#xBAB8;&#xC5D0;&#xC11C; 55 &#xC5C4;&#xB9C8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD070; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; L1 &#xD328;&#xD134; &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xD559;&#xC704;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; N cadherin &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xC810;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9E7;&#xC740; &#xAC70;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; axonal &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; l 1&#xACFC; N-cadherin, &#xC2E0;&#xACBD; &#xADF9;&#xC131; &#xBC0F; &#xCD95; &#xC0AD; &#xADDC;&#xACA9;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE21;&#xBA74;&#xC744; &#xB4DC;&#xB7EC;&#xB0B4;&#xB294; &#xC778;&#xC2DD;. L1 &#xC120;&#xD0DD;&#xB3C4;&#xC774; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC774; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xBBC0;&#xB85C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; L1 &#xADF9;&#xC131; &#xC124;&#xB9BD;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xB41C;&#xB2E4;.

Multicomponent&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; l 1&#xACFC; N cadherin &#xB85C;&#xCEEC; &#xD504;&#xB808;&#xC820;&#xD14C;&#xC774;&#xC158; microscale &#xD328;&#xD134; &#xCC28;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C1;&#xC811;.

La capacidad de patr&#xF3;n bioactivos se&#xF1;ales m&#xFA;ltiples en una superficie que es valioso para la comprensi&#xF3;n de c&#xF3;mo las neuronas interact&#xFA;an con su entorno extracelular complejo. En este informe, presentamos un conjunto de m&#xE9;todos para la creaci&#xF3;n de este tipo de superficies, con el objetivo de entender c&#xF3;mo las neuronas en desarrollo a integrar m&#xFA;ltiples se&#xF1;ales de relevancia biol&#xF3;gica y como una herramienta para el estudio de las interacciones entre las neuronas m&#xFA;ltiples. M&#xFA;ltiples pasos de impresi&#xF3;n microcontacto se combinan en una sola superficie para producir una matriz de nodos polilisina, interconectados por l&#xED;neas de prote&#xED;nas en base a los dominios extracelulares de L1 o N-cadherina. Sorprendentemente, la prote&#xED;na N-cadherina tambi&#xE9;n podr&#xED;a imprimirse directamente sobre las superficies conservando su actividad biol&#xF3;gica. Rata selectivamente las neuronas del hipocampo asociadas a los nodos de polilisina, diferente extensi&#xF3;n de los procesos axonales y dendr&#xED;ticas a lo largo de los patrones de la L1 y N-cadherina, lo que demuestra el control de archivo adjunto neurona y consecuencia. La combinaci&#xF3;n de estas tres biomol&#xE9;culas sobre una sola superficie revel&#xF3; un patr&#xF3;n altamente compleja de reconocimiento de prote&#xED;na. Las dendritas extiende exclusivamente en N-cadherina patrones, mientras que los axones exhibi&#xF3; un muy alto grado de selectividad en L1 patrones, preferentemente a distancias mayores de 55 madre desde el cuerpo celular. En distancias m&#xE1;s cortas, los procesos axonales reconocido tanto L1 y N-cadherina, que revela un nuevo aspecto de la polaridad neuronal y la especificaci&#xF3;n del ax&#xF3;n. Este inicio de la selectividad L1 correlacionado con el establecimiento de la polaridad L1 intracelular, lo que sugiere un resultado funcional del proceso de polarizaci&#xF3;n neurona que tiene implicaciones en el desarrollo de los tejidos neurales y la creaci&#xF3;n de redes de neuronas in vitro.

Presentaci&#xF3;n local de la L1 y N-cadherina en los componentes m&#xFA;ltiples, Patrones de microescala diferencialmente la funci&#xF3;n neuronal directa en Vitro

&#x7A7A;&#x95F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x590D;&#x5408;&#x4F53;&#x662F;&#x514D;&#x75AB;&#x7A81;&#x89E6; (IS) &#x7684;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7279;&#x5F81;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8BAF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x76EE;&#x524D;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;T &#x7EC6;&#x80DE; APC &#x6210;&#x5BF9; CD28 &#x96C6;&#x7FA4;&#x88AB;&#x5206;&#x79BB;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x592E;&#x8D85;&#x5206;&#x5B50;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7FA4;&#x96C6; &#xFF08;cSMAC&#xFF09; &#x65F6;&#x4EA7;&#x751F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2-&#x672C;&#x5730;&#x5316; CD3 &#x548C;&#x6210;&#x662F;&#x5916;&#x56F4;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x662F;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x662F;&#x5426;&#x589E;&#x52A0;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2 &#x9A71;&#x52A8;&#x6A21;&#x5F0F;&#x672C;&#x8EAB;&#x6216;&#x6C89;&#x6DC0;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E0A;&#x6E38;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627C;&#x8981;&#x91CD;&#x8FF0;&#x4F7F;&#x7528;&#x542B;&#x6709;&#x6297; CD3 &#x6297;&#x4F53;&#x534F;&#x540C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5E73;&#x9762;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x795E;&#x7ECF;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x548C; CD28&#xFF0C;&#x5305;&#x56F4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x521B;&#x5EFA;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED3;&#x5408;&#x591A;&#x8F6E;&#x7684;&#x5370;&#x5237;&#x672F;&#x5355;&#x4E00;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x3002;&#x5929;&#x771F; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x904D;&#x5386;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9635;&#x5217;&#xFF0C;&#x505C;&#x5728;&#x6297; CD3 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F62;&#x6210;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x660E;&#x63D0;&#x51FA;&#x6297; CD28 &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x56F4;&#xFF0C;&#x56F4;&#x7ED5;&#x6297; CD3 &#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5177;&#x6709; IS &#x7684;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x5408;&#x5E76;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5929;&#x771F; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-2&#x3002;&#x8FD9;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x76F8;&#x5173;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E0E; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x6613;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981; PKB/Akt &#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x4EFB;&#x610F;&#x548C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x63A7;&#x5236;&#x6297; CD3 &#x548C;&#x6297; CD28 &#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x6709;&#x673A;&#x4F1A;&#x68C0;&#x67E5;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0D;&#x6B63;&#x662F;&#x8EAB;&#x5FC3;&#x5065;&#x5EB7;&#x4E2D;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x63A5;&#x53E3;&#x3002;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; CD28 &#x7684;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x5BF9; IL-2 &#x5206;&#x6CCC;&#x6BD4; CD3 &#x5171;&#x5B9A;&#x4F4D;/&#x9694;&#x79BB;&#x6709;&#x8F83;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Micropatterning &#x523A;&#x6FC0;&#x914D;&#x4F53;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86; CD4 + T &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Spatial organization of signaling complexes is a defining characteristic of the immunological synapse (IS), but its impact on cell communication is unclear. In T cell-APC pairs, more IL-2 is produced when CD28 clusters are segregated from central supramolecular activation cluster (cSMAC)-localized CD3 and into the IS periphery. However, it is not clear in these cellular experiments whether the increased IL-2 is driven by the pattern itself or by upstream events that precipitate the patterns. In this article, we recapitulate key features of physiological synapses using planar costimulation arrays containing antibodies against CD3 and CD28, surrounded by ICAM-1, created by combining multiple rounds of microcontact printing on a single surface. NaÃ¯ve T cells traverse these arrays, stopping at features of anti-CD3 antibodies and forming a stable synapse. We directly demonstrate that presenting anti-CD28 in the cell periphery, surrounding an anti-CD3 feature, enhances IL-2 secretion by naÃ¯ve CD4(+) T cells compared with having these signals combined in the center of the IS. This increased cytokine production correlates with NF-kappaB translocation and requires PKB/Akt signaling. The ability to arbitrarily and independently control the locations of anti-CD3 and anti-CD28 offered the opportunity to examine patterns not precisely attainable in cell-cell interfaces. With these patterns, we show that the peripheral presentation of CD28 has a larger impact on IL-2 secretion than CD3 colocalization/segregation.

Micropatterning of costimulatory ligands enhances CD4+ T cell function.

L&#x26;#39;organisation spatiale des complexes de signalisation est une caract&#xE9;ristique d&#xE9;terminante de la synapse immunologique (SI), mais son impact sur la communication cellulaire n&#x26;#39;est pas claire. Dans la cellule T-APC paires, plus l&#x26;#39;IL-2 est produit lorsque les grappes CD28 sont s&#xE9;par&#xE9;es des amas d&#x26;#39;activation centrale supramol&#xE9;culaire (cSMAC)-CD3 et localis&#xE9;e &#xE0; la p&#xE9;riph&#xE9;rie IS. Toutefois, il n&#x26;#39;est pas clair dans ces exp&#xE9;riences cellulaires si l&#x26;#39;augmentation d&#x26;#39;IL-2 est entra&#xEE;n&#xE9; par le mod&#xE8;le lui-m&#xEA;me ou par les &#xE9;v&#xE9;nements en amont qui pr&#xE9;cipitent les mod&#xE8;les. Dans cet article, nous r&#xE9;capitulons les caract&#xE9;ristiques cl&#xE9;s de synapses physiologiques en utilisant des tableaux de co-stimulation planes contenant des anticorps contre CD3 et CD28, entour&#xE9;s de ICAM-1, cr&#xE9;&#xE9; par la combinaison de multiples s&#xE9;ries de l&#x26;#39;impression par microcontact sur une seule surface. Lymphocytes T na&#xEF;fs traversent ces tableaux, en s&#x26;#39;arr&#xEA;tant &#xE0; des caract&#xE9;ristiques de anticorps anti-CD3 et formant une synapse stable. On directement d&#xE9;montrer que pr&#xE9;sentant anti-CD28 dans la p&#xE9;riph&#xE9;rie de la cellule, qui entoure une fonctionnalit&#xE9; anti-CD3, am&#xE9;liore la s&#xE9;cr&#xE9;tion d&#x26;#39;IL-2 par CD4 na&#xEF;fs (+) des cellules T par rapport &#xE0; avoir ces signaux combin&#xE9;s dans le centre de l&#x26;#39;IS. Cette production de cytokines a augment&#xE9; en corr&#xE9;lation avec NF-kappaB translocation et n&#xE9;cessite PKB / Akt signalisation. La capacit&#xE9; de fa&#xE7;on arbitraire et de contr&#xF4;ler ind&#xE9;pendamment les lieux de l&#x26;#39;anti-CD3 et anti-CD28 a &#xE9;t&#xE9; l&#x26;#39;occasion d&#x26;#39;examiner les tendances pas pr&#xE9;cis&#xE9;ment atteignables dans les cellules-cellules interfaces. Avec ces mod&#xE8;les, nous montrons que la pr&#xE9;sentation p&#xE9;riph&#xE9;rique de CD28 a un impact plus important sur la s&#xE9;cr&#xE9;tion d&#x26;#39;IL-2 de CD3 colocalisation / s&#xE9;gr&#xE9;gation.

Micromodelage de ligands costimulation Am&#xE9;liore CD4 + lymphocytes T Fonction

R&auml;umliche Organisation komplexe zu signalisieren ist ein charakteristisches Merkmal der der immunologischen Synapse (IS), aber seine Auswirkungen auf die Zelle Kommunikation ist unklar. T-Zell-APC paarweise, weitere Il wird erzeugt, wenn CD28-Clustern von zentralen supramolekulare Aktivierungs-Cluster (cSMAC) getrennt werden-CD3 lokalisiert und in der IS-Peripherie. Allerdings ist es in diesen zellul&auml;ren Experimenten unklar, ob die erh&ouml;hte IL getrieben wird, indem das Muster selbst oder upstream-Ereignisse, die die Muster auszuf&auml;llen. In diesem Artikel wir rekapitulieren Hauptmerkmale von physiologischen Synapsen mit planaren Costimulation Arrays enth&auml;lt Antik&ouml;rper gegen CD3 und CD28, umgeben von ICAM-1, erstellt durch die Kombination mehrere Wahlrunden Microcontact Drucken auf einer einzigen Oberfl&auml;che. Na&iuml;ve T-Zellen durchlaufen diese Arrays, Halt an Funktionen von Anti-CD3-Antik&ouml;rper und bilden eine stabile Synapse. Wir zeigen direkt, dass Anti-CD28 in der Peripherie der Zelle pr&auml;sentiert, rund um eine Anti-CD3-Funktion, Il Sekretion von naiv-CD4(+) T-Zellen im Vergleich mit diesen Signalen kombiniert in der Mitte der vs verbessert. Dies erh&ouml;ht Cytokine Produktion korreliert mit NF-KappaB Translokation und erfordert PKB/Akt zu signalisieren. Die F&auml;higkeit, willk&uuml;rlich und unabh&auml;ngig voneinander steuern die Speicherorte der Anti-CD3 und Anti-CD28 bot die M&ouml;glichkeit, Muster nicht gerade erreichbar in Zell-Zell-Schnittstellen zu pr&uuml;fen. Mit diesen Mustern zeigen wir, dass die periphere Pr&auml;sentation von CD28 einen gr&ouml;&szlig;eren Einfluss auf Il Sekretion als CD3 Kolokalisation/Trennung hat.

Micropatterning kostimulatorischen Liganden erh&ouml;ht CD4 + T-Zelle-Funktion.

L&#39;organizzazione spaziale di complessi di segnalazione &egrave; una caratteristica distintiva della sinapsi immunologica (IS), ma il suo impatto sulla comunicazione cellulare &egrave; poco chiaro. In coppie di cellule T-APC, pi&ugrave; IL-2 &egrave; prodotta quando CD28 cluster sono segregati dal cluster di attivazione supramolecolare centrale (cSMAC)-localizzato CD3 e in periferia &egrave;. Tuttavia, non &egrave; chiaro in questi esperimenti cellulari se il IL-2 maggiore &egrave; guidato dal modello stesso o da eventi a monte che precipitano i modelli. In questo articolo, abbiamo riassumere le caratteristiche principali di sinapsi fisiologiche utilizzando matrici costimulation planare contenente anticorpi anti-CD3 e CD28, circondato da ICAM-1, creato dalla combinazione di pi&ugrave; cicli di stampa microcontatto su una singola superficie. Le cellule T Na&iuml;ve attraversano queste matrici, fermandosi a caratteristiche di anticorpi anti-CD3 e formando una sinapsi stabile. Noi dimostrare direttamente che presentando anti-CD28 nella periferia della cellula, che circonda una caratteristica anti-CD3, aumenta la secrezione IL-2 dalle cellule T CD4(+) ingenuo rispetto ad avere questi segnali combinati nel centro dell&#39;IS. Questo aumentato cytokine produzione correla con traslocazione di NF-kappaB e richiede segnalazione Akt/PKB. La capacit&agrave; di arbitrariamente e autonomamente controllare la posizione dei anti-CD3 e anti-CD28 ha offerto l&#39;opportunit&agrave; di esaminare i modelli non precisamente raggiungibile nelle interfacce di cellula-cellula. Con questi modelli, mostriamo che la presentazione periferica di CD28 ha un impatto maggiore sulla secrezione di IL-2 di CD3 presenza/segregazione.

Micropatterning di costimolazione ligandi migliora la funzione delle cellule T CD4 +.

&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#xFF08;IS&#xFF09;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; CD28&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#xFF08;cSMAC&#xFF09;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CD3&#x304B;&#x3089;&#x3068;IS&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;-APC&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3067;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;IL-2&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;IL-2&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x81EA;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x6C88;&#x6BBF;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E0A;&#x6D41;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x660E;&#x78BA;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AF;&#x30C8;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;ICAM-1&#x3067;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x305F;CD3&#x3068;CD28&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x3001;&#x542B;&#x3080;&#x5E73;&#x9762;&#x523A;&#x6FC0;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x518D;&#x73FE;&#x3002;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6297;CD3&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3067;&#x505C;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x8D70;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x6297;CD28&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x6297;CD3&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x56F2;&#x3080;&#x3068;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306F;&#x3001;IS&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;CD4&#xFF08;+&#xFF09;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;IL-2&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x306F;NF-&#x3BA;B&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3001;PKB / Akt&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EFB;&#x610F;&#x306B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x6297;CD3&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6297;CD28&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x6B63;&#x78BA;&#x306B;&#x9054;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x4F1A;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CD28&#x306E;&#x5468;&#x8FBA;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;CD3&#x5C40;&#x5728;/&#x5206;&#x96E2;&#x3088;&#x308A;IL-2&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5171;&#x523A;&#x6FC0;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;CD4 + T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;

&#xB2E8;&#xC9C0; &#xC2E0;&#xD638; &#xACF5;&#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xBA74;&#xC5ED; &#xB0C5; (IS)&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xBA85;&#xD655; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. T &#xC138;&#xD3EC;-APC &#xC30D; CD28 &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB294; &#xC911;&#xC559; supramolecular &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; (cSMAC)&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2&#xC774; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;-CD3 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; IS &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2 &#xD328;&#xD134; &#xC790;&#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xCE68;&#xC804;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; cd3&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xD3C9;&#xBA74; costimulation &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC744; &#xC815;&#xB9AC; &#xD558; &#xACE0; CD28, ICAM-1&#xC73C;&#xB85C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC778; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; microcontact &#xC778;&#xC1C4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC870;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E0;. &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; T &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xBC30;&#xC5F4;, &#xC548;&#xD2F0;-CD3 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC911;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xC548;&#xC815; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131; &#xD1B5;&#xACFC;. &#xC9C1;&#xC811; &#xC140; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xC548;&#xD2F0;-CD28 &#xC81C;&#xC2DC;, &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2 IS&#xC758; &#xC911;&#xC2EC;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xC548;&#xD2F0; CD3 &#xAE30;&#xB2A5; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. NF kappaB &#xC804; &#xAC00;&#xC9C4; cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xACFC; PKB/Akt &#xC2E0;&#xD638; &#xD544;&#xC694;. &#xC790;&#xC5F0;&#xACFC; &#xC548;&#xD2F0; CD3 &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0; CD28 &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC140; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xC774;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xB2EC;&#xC131; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xD68C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD328;&#xD134;&#xACFC; CD28 &#xC8FC;&#xBCC0; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158;&#xC740; CD3 colocalization/&#xBD84;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC77C;&#xB9AC;&#xB178;&#xC774;-2 &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xD070; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Micropatterning costimulatory ligands&#xC758; CD4 + T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La organizaci&#xF3;n espacial de los complejos de se&#xF1;alizaci&#xF3;n es una caracter&#xED;stica definitoria de la sinapsis inmunol&#xF3;gica (IS), pero su impacto en la comunicaci&#xF3;n celular no est&#xE1; claro. En T APC c&#xE9;lulas pares, m&#xE1;s IL-2 se produce cuando las agrupaciones CD28 est&#xE1;n separados de c&#xFA;mulo central activaci&#xF3;n supramolecular (cSMAC)-CD3 y localizada en la periferia IS. Sin embargo, no est&#xE1; claro en estos experimentos celulares si el aumento de la IL-2 es impulsado por el mismo patr&#xF3;n o por eventos de aguas arriba que precipitan los patrones. En este art&#xED;culo, se recapitulan las principales caracter&#xED;sticas de las sinapsis fisiol&#xF3;gicos utilizando conjuntos de planos que contienen anticuerpos contra la co-estimulaci&#xF3;n de CD3 y CD28, rodeado de ICAM-1, creado por la combinaci&#xF3;n de m&#xFA;ltiples rondas de impresi&#xF3;n por microcontacto en una sola superficie. Los linfocitos T v&#xED;rgenes atravesar estas matrices, deteni&#xE9;ndose en las caracter&#xED;sticas de los anticuerpos anti-CD3 y la formaci&#xF3;n de una sinapsis estable. Nosotros directamente demostrar que la presentaci&#xF3;n de anti-CD28 en la periferia de la c&#xE9;lula, que rodea una caracter&#xED;stica anti-CD3, aumenta la secreci&#xF3;n de IL-2 por ingenuo CD4 (+) las c&#xE9;lulas T en comparaci&#xF3;n con tener estas se&#xF1;ales combinadas en el centro de la IS. Este aumento de la producci&#xF3;n de citoquinas se correlaciona con translocaci&#xF3;n de NF-kappaB y requiere PKB / Akt. La capacidad de controlar de forma arbitraria y de forma independiente las ubicaciones de los anti-CD3 y anti-CD28 ofreci&#xF3; la oportunidad de examinar los patrones no precisamente asequibles en las interfaces de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula. Con estos modelos, nos muestran que la presentaci&#xF3;n de la perif&#xE9;rica CD28 tiene un mayor impacto en la secreci&#xF3;n de IL-2 que la colocalizaci&#xF3;n CD3 / segregaci&#xF3;n.

Micropatterning de ligandos coestimuladoras Mejora la funci&#xF3;n de c&#xE9;lulas CD4 + de c&#xE9;lulas T

&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x6355;&#x83B7;&#x8702;&#x7A9D;&#x819C;&#x7684;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x548C;&#x5316;&#x5B66;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x7528;&#x4E8E;&#x521B;&#x5EFA;&#x66F2;&#x9762;&#x5305;&#x542B;&#x591A;&#x4E2A;&#x5BF9;&#x9F50;&#x533A;&#x57DF;&#x652F;&#x6301;&#x819C;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x5343;&#x5206;&#x5C3A;&#x548C;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x6269;&#x6563;&#x578B;&#x969C;&#x788D;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x589E;&#x52A0;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x53EF;&#x8FBE;&#x5230;&#x76F4;&#x63A5;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F20;&#x7EDF;&#x53CC;&#x5C42;&#x63D0;&#x82B1;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x5982;&#x5C42;&#x6D41;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x6B64;&#x5E73;&#x53F0;&#x7528;&#x4E8E;&#x914D;&#x4F53;&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1&#xFF0C;&#x88AB;&#x6813;&#x5230;&#x5355;&#x72EC;&#x3001; &#x5BC6;&#x5207;&#x5E76;&#x7F6E;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#xFF0C;&#x6355;&#x6349;&#x81EA;&#x7136;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x6297;&#x539F;&#x63D0;&#x5448;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x51FA;&#x5173;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x914D;&#x4F53;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x548C;&#x5176;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

&#x81EA;&#x5BF9;&#x51C6;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x886C;&#x5E95;&#x754C;&#x9762;&#x3002;

Supported lipid bilayers capture the fluidity and chemical properties of cellular membranes. In this report, we introduce a method for creating surfaces that contain multiple, aligned regions of supported membranes of different compositions at scales of micrometers and smaller. This method uses the design of a diffusional barrier to increase the resolution that can be achieved directly using traditional bilayer patterning techniques, such as laminar flow. We demonstrate the use of this platform for presenting ligands to the T Cell Receptor and LFA-1 that are tethered to separate, closely juxtaposed regions of bilayer, capturing an important aspect of the natural organization observed between T cells and Antigen Presenting Cells. Our results present a novel platform for the study of spatial separation of extracellular ligands and its impact on cell signals.

Self-aligned supported lipid bilayers for patterning the cell-substrate interface.

Bicouches lipidiques support&#xE9;es saisir les propri&#xE9;t&#xE9;s de fluidit&#xE9; et chimiques des membranes cellulaires. Dans ce rapport, nous introduisons une m&#xE9;thode pour cr&#xE9;er des surfaces qui contiennent de multiples r&#xE9;gions align&#xE9;es de membranes support&#xE9;es de compositions diff&#xE9;rentes &#xE0; des &#xE9;chelles de microm&#xE8;tres et plus petits. Cette m&#xE9;thode utilise la conception d&#x26;#39;une barri&#xE8;re de diffusion pour augmenter la r&#xE9;solution qui peut &#xEA;tre atteint directement &#xE0; l&#x26;#39;aide des techniques de dessin traditionnelles bicouche, tels que le flux laminaire. Nous d&#xE9;montrer l&#x26;#39;utilisation de cette plate-forme pour la pr&#xE9;sentation de ligands pour le r&#xE9;cepteur des cellules T et LFA-1 qui sont attach&#xE9;s &#xE0; s&#xE9;parer, les r&#xE9;gions &#xE9;troitement juxtapos&#xE9;s de bicouche, la capture d&#x26;#39;un aspect important de l&#x26;#39;organisation naturelle observ&#xE9;e entre les cellules T et cellules pr&#xE9;sentatrices d&#x26;#39;antig&#xE8;ne. Nos r&#xE9;sultats pr&#xE9;sentent une nouvelle plate-forme pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la s&#xE9;paration spatiale des ligands extracellulaires et son impact sur les signaux cellulaires.

Auto-align&#xE9;s bicouches lipidiques support&#xE9;es pour la mod&#xE9;lisation de l&#x26;#39;interface substrat cellulaire

Unterst&uuml;tzte Lipid-Doppelschichten erfassen die Fluidit&auml;t und chemische Eigenschaften der Zellmembranen. In diesem Bericht stellen wir eine Methode f&uuml;r das Erstellen von Oberfl&auml;chen, die enthalten mehrere Regionen unterst&uuml;tzten Membranen verschiedene Kompositionen auf Skalen Mikrometer und kleinere ausgerichtet. Diese Methode verwendet das Design der Diffusionsprozess Barriere, um die Aufl&ouml;sung zu erh&ouml;hen, die direkt mit traditionellen Techniken wie Laminare Str&ouml;mung Musterung Bilayer erreicht werden k&ouml;nnen. Wir demonstrieren die Verwendung dieser Plattform f&uuml;r die Pr&auml;sentation von Liganden mit den T-Zell-Rezeptor und LFA-1, die auf separaten, eng benachbarten Regionen Bilayer, angebunden sind erfassen einen wichtigen Aspekt der nat&uuml;rlichen Organisation zwischen T-Zellen und Antigen pr&auml;sentiert Zellen beobachtet. Unsere Ergebnisse pr&auml;sentieren eine neuartige Plattform f&uuml;r das Studium der r&auml;umlichen Trennung der extrazellul&auml;ren Liganden und seine Auswirkungen auf Zelle Signale.

Self-Aligned unterst&uuml;tzte Lipid-Doppelschichten f&uuml;r Musterung der Zelle-Substrat-Schnittstelle.

T &#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x81EA;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7BA1;&#x7406;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x80DE;&#x5916;&#x73AF;&#x5883;&#x5FAE;&#x548C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x8282;&#x5F71;&#x54CD; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7528;&#x4E8E;&#x6CBB;&#x7597;&#x76EE;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x67E5;&#x5FAE;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x6F14;&#x793A;&#x6587;&#x7A3F;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5FAE;&#x578B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x7EB3;&#x7C73;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#xFF0C;&#x662F;&#x5982;&#x4F55;&#x5F71;&#x54CD; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x6269;&#x5C55;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x5305;&#x62EC;&#x521A;&#x5EA6;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#xFF0C;&#x5BF9; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6D3B;&#x5316;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x6210;&#x7684;&#x90E8;&#x961F;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x4F7F;&#x5BF9; T &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4EA4;&#x6D41;&#x548C;&#x53D1;&#x5C55;&#x5FAE;/&#x7EB3;&#x7C73;&#x4E00;&#x6B65;&#x5B9A;&#x4E49;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x4F20;&#x9012;-&#x548C;&#x6750;&#x6599;-&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7528;&#x4E8E;&#x5B9A;&#x5236;&#x6536;&#x517B; T &#x7EC6;&#x80DE;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x8D85;&#x5FAE;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

T lymphocytes are a key regulatory component of the adaptive immune system. Understanding how the micro- and nano-scale details of the extracellular environment influence T cell activation may have wide impact on the use of T cells for therapeutic purposes. In this article, we examine how the micro- and nano-scale presentation of ligands to cell surface receptors, including microscale organization and nanoscale mobility, influences the activation of T cells. We extend these studies to include the role of cell-generated forces, and the rigidity of the microenvironment, on T cell activation. These approaches enable delivery of defined signals to T cells, a step toward understanding the cell-cell communication in the immune system, and developing micro/nano- and material- engineered systems for tailoring immune responses for adoptive T cell therapies.

Nanoengineering of Immune Cell Function.

Les lymphocytes T sont un &#xE9;l&#xE9;ment cl&#xE9; de r&#xE9;gulation du syst&#xE8;me immunitaire adaptatif. Comprendre comment les d&#xE9;tails de micro-et nano-&#xE9;chelle de l&#x26;#39;activation cellulaire environnement influence extracellulaire T peuvent avoir un impact sur l&#x26;#39;usage des cellules T &#xE0; des fins th&#xE9;rapeutiques. Dans cet article, nous examinons comment la pr&#xE9;sentation des micro-et nano-&#xE9;chelle de ligands pour les r&#xE9;cepteurs de surface cellulaire, y compris l&#x26;#39;organisation microscopique et de la mobilit&#xE9; &#xE9;chelle nanom&#xE9;trique, influe sur l&#x26;#39;activation des cellules T. Nous &#xE9;tendons ces &#xE9;tudes pour inclure le r&#xF4;le de la cellule forces g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9;es par, et la rigidit&#xE9; du microenvironnement, sur l&#x26;#39;activation des lymphocytes T. Ces approches permettent la fourniture de signaux d&#xE9;finis aux cellules T, une &#xE9;tape vers la compr&#xE9;hension de la communication de cellule &#xE0; cellule du syst&#xE8;me immunitaire, et le d&#xE9;veloppement de micro/nano- et de mat&#xE9;riaux d&#x26;#39;ing&#xE9;nierie des syst&#xE8;mes pour adapter les r&#xE9;ponses immunitaires pour adoptifs th&#xE9;rapies cellulaires T.

Nanoengineering de fonction des cellules immunitaires

T-Lymphozyten sind eine wichtige regulatorische Komponente des adaptiven Immunsystems. Verstehen, wie die Mikro- und Nano-Ma&szlig;stab-Details der extrazellul&auml;ren Umwelt T-ZELLAKTIVIERUNG beeinflussen kann breit zur Nutzung von T-Zellen f&uuml;r therapeutische Zwecke auswirken. In diesem Artikel untersuchen wir, wie die Mikro- und Nano-Ma&szlig;stab-Pr&auml;sentation des Liganden zu Handy-Oberfl&auml;che Rezeptoren, einschlie&szlig;lich Microscale Organisation und nanoskaligen Mobilit&auml;t, die Aktivierung von T-Zellen beeinflusst. Wir erweitern diese Studien auf die Rolle der Zelle erzeugten Kr&auml;fte und die Starrheit der Mikroumgebung auf T-Zell-Aktivierung. Diese Ans&auml;tze erm&ouml;glichen die Lieferung von definierten Signalen an T-Zellen, einen Schritt in Richtung die Zell-Zell-Kommunikation im Immunsystem zu verstehen und die Entwicklung von Mikro-/Nano- und Material - Systeme f&uuml;r das N&auml;hen der Immunantworten f&uuml;r adoptiven T-Zell-Therapien entwickelt.

Nanoengineering Immunzellen Funktion.

I linfociti T sono un componente chiave di regolamentazione del sistema immunitario adattativo. Comprensione di come i dettagli di micro - e nano-scala dell&#39;ambiente extracellulare influenzano attivazione delle cellule T possono avere ampio impatto sull&#39;uso di cellule T per scopi terapeutici. In questo articolo esaminiamo come la presentazione di micro - e nano-scala di ligandi di cellule recettori superficiali, tra cui organizzazione su microscala e mobilit&agrave; su scala nanometrica, influenza l&#39;attivazione delle cellule T. Estendiamo questi studi per comprendere il ruolo delle forze generate delle cellule e la rigidit&agrave; del microambiente, sull&#39;attivazione delle cellule T. Questi approcci attivare il recapito dei segnali definiti a cellule T, un passo verso la comprensione della comunicazione cellula-cellula del sistema immunitario e lo sviluppo di micro/nano- e materiale - engineered systems per sartoria risposte immunitarie per le terapie con cellule T adottiva.

Nanoengineering della funzione delle cellule immunitarie.

T&#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#xB7;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306F;&#x3001;&#x6CBB;&#x7642;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x5E45;&#x5E83;&#x3044;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x6D41;&#x52D5;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3078;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#xB7;&#x30CA;&#x30CE;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x30D7;&#x30EC;&#x30BC;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x8ABF;&#x3079;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8ECD;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x525B;&#x6027;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x990A;&#x5B50;T&#x7D30;&#x80DE;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;T&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7CFB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3057;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B69;micro/nano-&#x3068;&#x6750;&#x6599;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30CA;&#x30CE;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;

T &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC801;&#xC751;&#xC131; &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC; &#xADDC;&#xC81C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xD658;&#xACBD;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBC0F; &#xB098;&#xB178; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C; &#xC138;&#xBD80; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC88C;&#xC6B0; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xC774;&#xD574; T &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBAA9;&#xC801; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB113;&#xC740; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;, microscale &#xC870;&#xC9C1; &#xB4F1; &#xB098;&#xB178; &#xC774;&#xB3D9;&#xC131; ligands&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xBC0F; &#xB098;&#xB178; &#xC2A4;&#xCF00;&#xC77C;&#xC758; &#xD504;&#xB808; &#xC820; &#xD14C;&#xC774; &#xC158; T &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC138;&#xB825;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xACFC; T &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; microenvironment&#xC758; &#xAC15;&#xC131;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; T &#xC138;&#xD3EC;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC5D0; &#xC140; &#xCEE4;&#xBBA4;&#xB2C8;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC744; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;/&#xB098;&#xB178; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC;-&#xC7AC;&#xB8CC;-&#xC785;&#xC591; T &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC870;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC124;&#xACC4;.

Nanoengineering &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Los linfocitos T son un componente clave en la regulaci&#xF3;n del sistema inmune adaptativo. La comprensi&#xF3;n de c&#xF3;mo los detalles micro y nano escala de la activaci&#xF3;n ambiente influencia extracelular de c&#xE9;lulas T puede tener gran impacto sobre el uso de c&#xE9;lulas T con fines terap&#xE9;uticos. En este art&#xED;culo, analizamos c&#xF3;mo la presentaci&#xF3;n de micro-y nano escala de los ligandos a los receptores de superficie celular, incluida la organizaci&#xF3;n microescala y nanoescala, la movilidad influye en la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T. Ampliamos estos estudios para incluir la funci&#xF3;n de c&#xE9;lulas generadas por las fuerzas, y la rigidez del microambiente, en la activaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas T. Estos enfoques permitir la entrega de se&#xF1;ales definidas a las c&#xE9;lulas T, un paso hacia la comprensi&#xF3;n de la comunicaci&#xF3;n de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula en el sistema inmune y el desarrollo de sistemas de ingenier&#xED;a micro/nano- y material para la confecci&#xF3;n de la respuesta inmune de las terapias de c&#xE9;lulas T adoptivos.

Keyue Shen

Department of Biomedical Engineering

Columbia University

Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology

Keyue Shen

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biomedical Engineering

Columbia University

Microcontact Printing of Proteins for Cell Biology

Department of Biomedical Engineering