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Analysis of the Solvent Accessibility of Cysteine Residues on <em>Maize rayado fino virus</em> Virus-like Particles Produced in <em>Nicotiana benthamiana</em> Plants and Cross-linking of Peptides to VLPs

Mimicking  and exploiting virus properties and physicochemical and physical  characteristics holds promise to provide solutions to some of  the world's ...

Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture

&#x6838;&#x7CD6;&#x4F53;&#x7684;&#x5BC4;&#x751F;&#x7EBF;&#x866B;&#x6839;&#x7ED3;&#x7EBF;&#x866B; artiellia &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x8FDB;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x5176;&#x53E4;&#x8001;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x3002;

Structural and evolutionary analysis of the ribosomal genes of the parasitic nematode Meloidogyne artiellia suggests its ancient origin.

Analyse structurale et &eacute;volutive des g&egrave;nes ribosomiques de l&#39;artiellia de Meloidogyne n&eacute;matode parasite sugg&egrave;re son origine ancienne.

Strukturelle und evolution&auml;re Analyse der ribosomal Gene von der parasit&auml;ren Fadenw&uuml;rmer Meloidogyne Artiellia schl&auml;gt seinen alten Ursprung.

Analisi strutturale ed evolutivo dei geni ribosomiali del parassita nematode Meloidogyne artiellia suggeriscono la sua antica origine.

&#x5BC4;&#x751F;&#x7DDA;&#x866B;&#x30B5;&#x30C4;&#x30DE;&#x30A4;&#x30E2;&#x30CD;&#x30B3;&#x30D6;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A6; artiellia &#x306E;&#x30EA;&#x30DC;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9032;&#x5316;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x53E4;&#x4EE3;&#x8D77;&#x6E90;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xAE30;&#xC0DD; &#xC120; &#xCDA9; &#xB958; Meloidogyne artiellia ribosomal &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD654; &#xBD84;&#xC11D; &#xC81C;&#xC548; &#xACE0; &#xB300; &#xAE30;&#xC6D0;.

An&aacute;lisis estructural y evolutivo de los genes ribos&oacute;micos de la artiellia de Meloidogyne nematodo par&aacute;sito sugiere su antiguo origen.

&#x5148;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8863;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0; (CP) &#x7684;&#x9EC4;&#x74DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; (CMV) &#x7F6E;&#x4E8E;&#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F6C;&#x5F55;&#x63A7;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E0B; X PVX &#x57FA;&#x4E8E;&#x77E2;&#x91CF;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;PVX &#x8868;&#x793A;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2; CP &#x5F62;&#x6210;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92;&#xFF0C;&#x5145;&#x5F53;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x5F02;&#x79CD;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x65B0;&#x57CE;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2; (NDV)&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5E94;&#x7528;&#x690D;&#x7269;&#x6E90;&#x6027;&#x75AB;&#x82D7;&#x9488;&#x5BF9;&#x79BD;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x5BF9;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x4E8C;&#x5341;&#x4E09;&#x4E2A;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x957F;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2; M2 &#x86CB;&#x767D; &#xFF08;M2e&#xFF09; &#x5DE5;&#x7A0B;&#x5230;&#x5185;&#x90E8;&#x6BCD;&#x9898; 5 &#x7684;&#x9EC4;&#x74DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; CP &#x548C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x57FA;&#x56E0;&#x7136;&#x540E;&#x77AC;&#x6001;&#x8868;&#x793A;&#x901A;&#x8FC7; PVX &#x77E2;&#x91CF;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x4E0E;&#x5BF9; h5n1 &#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x682A;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D; M2e &#x5408;&#x6210;&#x4EA7;&#x751F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#x53CD;&#x5E94;&#x5D4C;&#x5408;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2; capsids&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;CMV CP M2e &#x86CB;&#x767D;&#x6709;&#x4EBA;&#x5230;&#x5927;&#x80A0;&#x57C3;&#x5E0C;&#x6C0F;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x5E76;&#x627F;&#x8BA4;&#x5BF9;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x548C; M2e &#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x8FD9;&#x4EFD;&#x521D;&#x6B65;&#x62A5;&#x544A;&#x6F14;&#x793A;&#x4F7F;&#x7528;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684; h5n1 &#x578B;&#x79BD;&#x6D41;&#x611F;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x3002;

&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x79BD;&#x6D41;&#x611F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x8D28;&#x86CB;&#x767D; 2 &#xFF08;M2e&#xFF09; &#x7684;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

We have previously reported an expression system based on the capsid protein gene (CP) of cucumber mosaic virus (CMV) placed under transcriptional control of a potato virus X (PVX)-based vector. PVX-expressed CMV CP formed virus-like particles, which served as carriers for heterologous antigens of the Newcastle disease virus (NDV). In this work, we applied our expression tool toward the development of plant-derived vaccine candidate against avian influenza A virus. Twenty-three amino acid-long extracellular domain of the viral M2 protein (M2e) was engineered into the internal motif 5 of CMV CP and the recombinant gene then was transiently expressed in plants through a PVX vector. Chimeric CMV capsids reacted with specific antibodies produced to synthetic M2e epitope of the H5N1 strain of the virus. In addition, CMV CP-M2e protein was expressed to high levels in Escherichia coli bacterial cells and was recognized by antibodies to both CMV and M2e. This initial study demonstrates the feasibility of using plant virus-based vectors for expression of antigenic epitopes of H5N1 avian influenza in plants.

Transient expression of the ectodomain of matrix protein 2 (M2e) of avian influenza A virus in plants.

Nous avons d&eacute;j&agrave; rapport&eacute; qu&#39;un syst&egrave;me d&#39;expression fond&eacute;e sur le g&egrave;ne de la prot&eacute;ine de capside (CP) du virus de la mosa&iuml;que du concombre (CMV) plac&eacute; sous le contr&ocirc;le transcriptionnel d&#39;un virus de la pomme de terre X PVX vectoriel. Exprim&eacute;s PVX CMV CP form&eacute; Pseudo-particules virales, qui servait de transporteurs pour les antig&egrave;nes h&eacute;t&eacute;rologues du virus de la maladie de Newcastle (NDV). Dans ce travail, nous avons appliqu&eacute; notre outil d&#39;expression vers le d&eacute;veloppement des v&eacute;g&eacute;taux vaccin candidat contre le virus de l&#39;influenza aviaire A. Vingt-trois acides amin&eacute;s long domaine extracellulaire de la prot&eacute;ine virale de M2 (M2e) a &eacute;t&eacute; con&ccedil;u dans le motif interne 5 du CP CMV et le g&egrave;ne recombinant puis a &eacute;t&eacute; exprim&eacute; transitoirement chez les plantes &agrave; travers un vecteur PVX. Chim&eacute;riques capsides CMV r&eacute;agissent avec des anticorps sp&eacute;cifiques produits synth&eacute;tiques M2e &eacute;pitope de la souche H5N1 du virus. En outre, CMV CP-M2e prot&eacute;ine a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e &agrave; des niveaux &eacute;lev&eacute;s dans les cellules bact&eacute;riennes Escherichia coli et a &eacute;t&eacute; reconnu par l&#39;anticorps anti-CMV tant M2e. Cette premi&egrave;re &eacute;tude montre la faisabilit&eacute; d&#39;utiliser des vecteurs de base de virus de plante pour l&#39;expression des &eacute;pitopes antig&eacute;niques de la grippe aviaire H5N1 chez les plantes.

Expression transitoire de l&#39;ectodomaine de prot&eacute;ine de la matrice 2 (M2e) du virus de la grippe aviaire A chez les plantes.

Wir haben bereits berichtet, eine Ausdruck-System basierend auf das Kapsid-Protein-gen (CP) des Cucumber Mosaic Virus (CMV) transkriptionelle Kontrolle eines Kartoffel-Virus Vektor X PVX-basierte. CMV-CP PVX-ausgedr&uuml;ckt gebildet virus&auml;hnliche Partikel, die als Tr&auml;ger f&uuml;r heterologe Antigene von Newcastle Disease Virus (NDV) serviert. In dieser Arbeit angewendet wir unser Ausdruck Tool zur Entwicklung von pflanzlichen Impfstoff-Kandidat gegen avi&auml;re Influenza-A-Virus. Dreiundzwanzig Aminos&auml;ure langen extrazellul&auml;ren Dom&auml;ne des viralen M2 Proteins (M2e) wurde entwickelt, in das innere Motiv 5 der CMV-CP und das rekombinante gen war dann vor&uuml;bergehend in Pflanzen durch einen Vektor PVX ausgedr&uuml;ckt. Chim&auml;ren CMV Capsids reagierte mit spezifischen Antik&ouml;rpern zu synthetischen M2e-Epitop der H5N1-Stamm des Virus produziert. Dar&uuml;ber hinaus CMV CP-M2e Protein dr&uuml;ckte hohen in Escherichia coli Bakterienzellen und wurde von Antik&ouml;rper gegen CMV und M2e anerkannt. Dieser ersten Studie veranschaulicht die Machbarkeit mit Pflanze Virus-basierte Vektoren zur Interessenbekundung Antigen Epitopes von H5N1-Vogelgrippe in Pflanzen.

Transiente Ausdruck des APPs&alpha; der Matrixprotein 2 (M2e) der avi&auml;ren Influenza-A-Virus in Pflanzen.

In precedenza abbiamo segnalato che un sistema di espressione basata su gene (CP) della proteina del capside del virus del mosaico del cetriolo (CMV) posizionato sotto il controllo trascrizionale di un virus della patata PVX X-base vettoriale. Espresso PVX CMV CP formano particelle virus-simili, che serviva come vettori per eterologo antigeni del virus della malattia di Newcastle (NDV). In questo lavoro, abbiamo applicato il nostro strumento di espressione verso lo sviluppo del candidato vegetali vaccino contro il virus a dell&#39;influenza aviaria. Venti-tre aminoacidi lungo dominio extracellulare della proteina virale M2 (M2e) &egrave; stato progettato nel motivo interno 5 del CMV CP ed il gene ricombinante poi transitoriamente &egrave; stato espresso nelle piante attraverso un vettore PVX. Chimerici capsidi CMV hanno reagito con gli anticorpi specifici prodotti sintetico M2e epitopo del ceppo del virus H5N1. Inoltre, CMV CP-M2e proteina &egrave; stata espressa ad alti livelli nelle cellule batteriche di Escherichia coli e fu riconosciuta dagli anticorpi anti-CMV sia M2e. Questo studio iniziale dimostra la fattibilit&agrave; dell&#39;utilizzo di vettori basati su virus vegetali per l&#39;espressione di epitopi antigenici dell&#39;influenza aviaria H5N1 in piante.

Espressione transitoria del ectodomain di proteina matrice 2 (M2e) del virus a dell&#39;influenza aviaria negli impianti.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D; X PVX &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; &#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (CP) &#x306E;&#x30B8;&#x30E3;&#x30AC;&#x30A4;&#x30E2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x7BA1;&#x7406;&#x4E0B;&#x306B;&#x7F6E;&#x304B;&#x30AD;&#x30E5;&#x30A6;&#x30EA; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (CMV) &#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x5F0F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PVX &#x8868;&#x73FE; CMV CP &#x7570;&#x7A2E;&#x6297;&#x539F;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30B9;&#x30EB;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (NDV) &#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x8868;&#x73FE;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x9CE5;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6; A &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x7531;&#x6765;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5019;&#x88DC;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;20-3 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x9577;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; M2 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (M2e) CMV CP &#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; 5 &#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3001;&#x4E00;&#x904E;&#x6027; PVX &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x690D;&#x7269;&#x4F53;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x306E; CMV &#x30AB;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x5408;&#x6210; M2e &#x6297;&#x539F; h5n1 &#x578B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x305F;.&#x307E;&#x305F;&#x3001;CMV CP M2e &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x9AD8;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;CMV &#x3068; M2e &#x3078;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; h5n1 &#x578B;&#x9CE5;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6;&#x6297;&#x539F;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x690D;&#x7269;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9CE5;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B6; A &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 2 (M2e) &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC624;&#xC774; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CMV) &#xAC10;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; transcriptional &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; capsid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (CP) X PVX &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130; &#xAE30;&#xBC18; &#xC2DD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBCF4;&#xACE0;. CMV CP PVX &#xD45C;&#xD604; &#xB274;&#xCE90;&#xC2AC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (NDV)&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xD56D; &#xC6D0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; &#xD615;&#xC131;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC870;&#xB958; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC720;&#xB798; &#xBC31;&#xC2E0; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xD5A5;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2DD; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC801;&#xC6A9;. 20-3 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xAE34; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; M2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (M2e)&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; CMV CP&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; 5&#xB85C; &#xC124;&#xACC4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB2E4;&#xC74C; transiently PVX &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. Chimeric CMV capsids &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; h 5 n 1 &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xD569;&#xC131; M2e epitope&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xBC18;&#xC751;. &#xB610;&#xD55C;, CMV CP M2e &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; Escherichia&#xC758; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; CMV&#xC640; M2e &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC815; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xCD08;&#xAE30; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xB958; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; h 5 n 1&#xC758; &#xD56D; &#xC6D0; epitopes&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 2 (M2e) &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xB958; &#xC778;&#xD50C;&#xB8E8;&#xC5D4;&#xC790; A &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; ectodomain&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Hemos divulgado previamente que un sistema de expresi&oacute;n basada en el gene de la prote&iacute;na c&aacute;pside (CP) del virus del mosaico del pepino (CMV) puestas bajo el control transcripcional de un virus de patata vector X PVX-basado. PVX-expres&oacute; CMV CP forman part&iacute;culas similares a los virus, que sirvi&oacute; como portadores de ant&iacute;genos heter&oacute;logos de los virus de la enfermedad de Newcastle (NDV). En este trabajo, aplicamos nuestra herramienta de expresi&oacute;n hacia el desarrollo del candidato de origen vegetal de la vacuna contra el virus de la gripe aviar. Veintitr&eacute;s amino&aacute;cidos de largo dominio extracelular de la prote&iacute;na viral M2 (M2e) fue dise&ntilde;ado en el motivo interno 5 de CP de CMV y luego el gen recombinante transitoriamente se expres&oacute; en las plantas a trav&eacute;s de un vector PVX. Quim&eacute;rica c&aacute;psida de CMV reaccion&oacute; con anticuerpos espec&iacute;ficos producidos a sint&eacute;tico M2e epitopo de la cepa H5N1 del virus. Adem&aacute;s, la prote&iacute;na de CMV CP-M2e expres&oacute; a altos niveles en c&eacute;lulas bacterianas de Escherichia coli y fue reconocida por los anticuerpos frente al CMV tanto M2e. Este estudio inicial demuestra la viabilidad del uso de plantas basadas en virus vectores para la expresi&oacute;n de ep&iacute;topos antig&eacute;nicos de gripe aviar H5N1 en las plantas.

Expresi&oacute;n transitoria del ectodominio de prote&iacute;na de la matriz 2 (M2e) del virus de la gripe aviar en las plantas.

&#x5148;&#x524D;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x7684;&#x9EC4;&#x74DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; (CMV) &#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x75C5;&#x6BD2; X &#x8868;&#x793A;&#x5916;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#x5F62;&#x6210;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92; (VLPs) &#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F7D;&#x4F53;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7C07;&#x7684;&#x65B0;&#x57CE;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;NDV&#xFF09; &#x7684;&#x663E;&#x793A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x5DE5;&#x4F5C;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4FEE;&#x6539;&#x91CD;&#x7EC4; VLPs &#x643A;&#x5E26;&#x77ED;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x65B0;&#x57CE;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5206;&#x79BB;&#x7EAF;&#x5316;&#x534F;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x8863;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6682;&#x6001;&#x8868;&#x793A;&#x4ECE;&#x5916;&#x6E90;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6253;&#x5305;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A; virions &#x5F62;&#x6001;&#x4E0A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x533A;&#x5206;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x9897;&#x7C92;&#x3002;&#x540C;&#x8D28;&#x6027;&#x7684;&#x6700;&#x540E;&#x51C6;&#x5907;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6BD4;&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;VLPs &#x53D1;&#x73B0;&#x662F;&#x53EF;&#x53D8;&#x5927;&#x5C0F;&#x7684;&#x9884;&#x4ED8;&#x6B3E;&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; VLPs &#x514D;&#x75AB;&#x9E21;&#x5F00;&#x53D1;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

PVX/&#x9EC4;&#x74DC;&#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; CP &#x663E;&#x793A;&#x77ED;&#x671F;&#x5916;&#x56FD;&#x6297;&#x539F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x6539;&#x8FDB;&#x3002;

We have previously reported that Potato virus X-expressed coat protein of Cucumber mosaic virus (CMV) formed virus-like particles (VLPs), which served as carriers for display of different neutralizing epitopes of Newcastle disease virus (NDV). In this work, we further modified the purification protocol of recombinant VLPs carrying short neutralizing epitopes of the NDV proteins and demonstrated that self-contained capsid protein subunits of CMV transiently expressed from heterologous virus packaged into individual virions morphologically resembling and/or indistinguishable from wild type CMV particles. Homogeneity of the final preparation represents an advance over our previous study, where VLPs were found to be of variable size. Chickens immunized with purified VLPs developed antigen-specific response.

Improvement of PVX/CMV CP expression tool for display of short foreign antigens.

Nous avons d&eacute;j&agrave; rapport&eacute; que Potato virus X exprim&eacute;s prot&eacute;ine du virus de la mosa&iuml;que du concombre (CMV) form&eacute; des Pseudo-particules virales (VLP), qui a servi comme porteurs pour l&#39;affichage des diff&eacute;rents &eacute;pitopes neutralisants du virus de la maladie de Newcastle (NDV). Dans ce travail, nous encore modifi&eacute; le protocole de purification du PPV recombinants transportant des &eacute;pitopes neutralisants courts des prot&eacute;ines NDV et a d&eacute;montr&eacute; que les sous-unit&eacute;s de prot&eacute;ines de capside autonome du CMV exprim&eacute; transitoirement de virus h&eacute;t&eacute;rologue emball&eacute;s dans des virions individuelles ressemblant morphologiquement ou indiscernable de type sauvage particules CMV. Homog&eacute;n&eacute;it&eacute; de la pr&eacute;paration finale repr&eacute;sente une avanc&eacute;e au cours de notre &eacute;tude pr&eacute;c&eacute;dente, o&ugrave; VLP s&#39;est av&eacute;r&eacute; pour &ecirc;tre de taille variable. Poulets vaccin&eacute;s au PPV purifi&eacute;es d&eacute;velopp&eacute;s r&eacute;action antig&egrave;ne-sp&eacute;cifiques.

Am&eacute;lioration de l&#39;outil d&#39;expression PVX/CMV CP pour l&#39;affichage des antig&egrave;nes &eacute;trangers courts.

Wir haben bereits berichtet, dass Virus X-ausgedr&uuml;ckt Mantel Kartoffelprotein Cucumber Mosaic Virus (CMV) virus&auml;hnliche Partikel (VLPs), gebildet, die als Tr&auml;ger f&uuml;r die Anzeige von verschiedenen neutralisierende Epitopes von Newcastle Disease Virus (NDV) serviert. In dieser Arbeit wir weiter ver&auml;ndert das Reinigung-Protokoll des rekombinanten VLPs tragen kurze neutralisierende Epitope der NDV-Proteine und gezeigt, dass eigenst&auml;ndige Kapsid Protein-Untereinheiten der CMV vor&uuml;bergehend heterologe Virus verpackt in einzelnen Virionen morphologisch &auml;hnlich und/oder nicht von Wildtyp CMV Partikel ausgedr&uuml;ckt. Homogenit&auml;t der endg&uuml;ltigen Zubereitung stellt einen Vorschuss gegen&uuml;ber unserer fr&uuml;heren Studie, in der VLPs gefunden wurden, von variabler Gr&ouml;&szlig;e sein. H&uuml;hner geimpft mit gereinigtem VLPs entwickelt Antigen-spezifische Reaktion.

Verbesserung der PVX/CMV CP Ausdruck Tool f&uuml;r die Anzeige der kurzen fremde Antigene.

In precedenza abbiamo segnalato che Potato virus X-espresso cappotto proteina del virus del mosaico del cetriolo (CMV) formata particelle virus-simili (VLP), che serviva come vettori per la visualizzazione di diversi epitopi neutralizzanti del virus della malattia di Newcastle (NDV). In questo lavoro, abbiamo ulteriormente modificato il protocollo di purificazione di VLP ricombinante che trasportano gli epitopi neutralizzanti brevi delle proteine NDV e dimostrato che subunit&agrave; proteiche del capside autonomo del CMV transitoriamente espresso da virus eterologo indistinguibile da wild type o confezionati in singoli virioni morfologicamente simile a particelle di CMV. Omogeneit&agrave; della preparazione finale rappresenta un anticipo sul nostro studio precedente, dove le VLP sono state trovate per essere di dimensioni variabili. Polli immunizzati con VLP purificata sviluppato risposta antigene-specifica.

Miglioramento dello strumento espressione PVX/CMV CP per la visualizzazione di brevi antigeni estranei.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x30B8;&#x30E3;&#x30AC;&#x30A4;&#x30E2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; X &#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5916;&#x88AB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30AD;&#x30E5;&#x30A6;&#x30EA; &#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (CMV) &#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30B9;&#x30EB;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (NDV) &#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4E2D;&#x548C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30EA;&#x30A2;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50; (&#x7FA4;&#x96C6;) &#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4F5C;&#x54C1;&#x3067;&#x3055;&#x3089;&#x306B; NDV &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x4E2D;&#x548C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306E;&#x7FA4;&#x96C6;&#x306E;&#x6D44;&#x5316;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;CMV &#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x5B8C;&#x7D50;&#x578B;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D7;&#x30B7;&#x30C9;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E9C;&#x5358;&#x4F4D;&#x3092;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304B;&#x3089;&#x533A;&#x5225;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x304B;&#x3089; CMV &#x7C92;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x5747;&#x4E00;&#x6027;&#x3001;&#x4E8B;&#x524D;&#x7FA4;&#x96C6;&#x306E;&#x53EF;&#x5909;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0A;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x306E;&#x7FA4;&#x96C6;&#x3092;&#x514D;&#x75AB;&#x3057;&#x305F;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30EA;&#x6297;&#x539F;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

PVX/CMV CP &#x8868;&#x73FE;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x77ED;&#x3044;&#x5916;&#x56FD;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6539;&#x5584;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC624;&#xC774; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (CMV)&#xC758; &#xAC10;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; X &#xD45C;&#xD604; &#xC678; &#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD615;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; (VLPs), &#xB274;&#xCE90;&#xC2AC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (NDV)&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC911;&#xD654; epitopes&#xC758; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC5C5;&#xC790;&#xB85C; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xC774; &#xC791;&#xD488;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB354; &#xB4E4;&#xACE0; &#xC9E7;&#xC740; &#xC911;&#xD654; epitopes NDV &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; VLPs &#xC815;&#xD654; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C;&#xC744; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; CMV&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; capsid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; transiently&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xAC1C;&#xBCC4; virions &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC744; &#xB2EE;&#xC740;&#xC73C;&#xB85C; &#xD328;&#xD0A4;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; &#xC640;&#xC77C;&#xB4DC; &#xC720;&#xD615;&#xC744; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; CMV &#xC785;&#xC790; &#xC2DC;&#xC5F0;. &#xCD5C;&#xC885; &#xC900;&#xBE44;&#xC758; &#xB3D9;&#xC9C8;&#xC131; VLPs &#xAC00;&#xBCC0; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xAC83; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xD559;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xB9AC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2ED; &#xC21C;&#xD654; VLPs &#xC811;&#xC885; &#xD56D; &#xC6D0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;.

&#xC9E7;&#xC740; &#xC678;&#xAD6D; &#xD56D; &#xC6D0; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; PVX/CMV CP expression &#xB3C4;&#xAD6C;&#xC758; &#xAC1C;&#xC120;.

Hemos divulgado previamente que la prote&iacute;na de la c&aacute;psida de X-expres&oacute; de patata virus del virus del mosaico del pepino (CMV) forma part&iacute;culas similares a virus (VLPs), que sirvi&oacute; como portadores para la exhibici&oacute;n de diferentes epitopos neutralizantes del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV). En este trabajo, adem&aacute;s modificar el protocolo de purificaci&oacute;n de VLPs recombinantes llevar corto epitopos neutralizantes de las prote&iacute;nas NDV y demostr&oacute; que subunidades de prote&iacute;na de la c&aacute;pside aut&oacute;nomo de CMV transitoriamente expresaron heter&oacute;loga virus indistinguible de tipo salvaje o envasados en viriones individuales morfol&oacute;gicamente parecido a part&iacute;culas de CMV. Homogeneidad de la preparaci&oacute;n final representa un avance en nuestro estudio anterior, donde se encontraron VLPs de tama&ntilde;o variable. Pollos inmunizados con VLPs purificadas desarrollaron respuesta ant&iacute;geno-espec&iacute;fica.

Mejora de la herramienta de expresi&oacute;n de PVX/CMV CP para la exhibici&oacute;n de cortos ant&iacute;genos extra&ntilde;os.

&#x7389;&#x7C73; rayado &#x7EB7;&#x8DEF;&#x53CC;&#x628A;&#x75C5;&#x6BD2; (MRFV) &#x75C5;&#x6BD2;-&#x7C7B;&#x4F3C;&#x9897;&#x7C92; (VLPs) &#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x7269;&#x4E3A;&#x5176;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65B0;&#x578B;&#x5E73;&#x53F0;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5171;&#x4EF7;&#x952E;&#x65F6;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x901A;&#x8FC7;&#x57FA;&#x4E8E; X PVX &#x7684;&#x9A6C;&#x94C3;&#x85AF;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5BA1;&#x67E5;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5316;&#x5B66;&#x4FEE;&#x6539;&#x951A;&#x70B9;&#xFF0C;&#x7531;&#x4EE3;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; MRFV VLPs &#x4E0E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x58F3;&#x4E0A;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x521B;&#x5EFA;&#x4E09;&#x4E2A; Cys-MRFV-VLPs &#x7A81;&#x53D8;&#x3002;&#x6307;&#x5B9A; Cys 2 VLPs &#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x672C;&#x673A;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA; bioconjugation &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E00;&#x79CD;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x5DEF;&#x57FA;&#x53CD;&#x5E94;&#x6027;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6B64; Cys 2-VLPs &#x88AB;&#x4EA4;&#x8054; NHS-PEG4-&#x9A6C;&#x6765;&#x81F3; 17 (F) &#x548C; 8 (HN) &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x957F;&#x80BD;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x7684;&#x65B0;&#x57CE;&#x75AB;&#x75C5;&#x6BD2; (NDV)&#x3002;&#x7531;&#x6B64;&#x4EA7;&#x751F; Cys 2-VLPs-F &#x548C; Cys 2-VLPs-HN &#x5F97;&#x5230;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684;&#x897F;&#x65B9;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x4EE5;&#x53CA; F &#x548C; HN MRFV &#x7684;&#x87BA;&#x6813;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x5382;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684; MRFV VLPs &#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x591A;&#x4EF7;&#x663E;&#x793A;&#x8868;&#x9762;&#x914D;&#x4F53;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x5E73;&#x53F0;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

&#x7389;&#x7C73; rayado &#x7EB7;&#x8DEF;&#x53CC;&#x628A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6837;&#x9897;&#x7C92;&#x5728;&#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x682A;&#x4E2D;&#x8868;&#x793A;&#xFF1A; &#x4E3A;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x9009;&#x62E9;&#x6027; bioconjugation &#x80BD;&#x663E;&#x793A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65B0;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

Maize rayado fino virus (MRFV) virus-like-particles (VLPs) produced in tobacco plants were examined for their ability to serve as a novel platform to which a variety of peptides can be covalently displayed when expressed through a Potato virus X (PVX)-based vector. To provide an anchor for chemical modifications, three Cys-MRFV-VLPs mutants were created by substituting several of the amino acids present on the shell of the wild-type MRFV-VLPs with cysteine residues. The mutant designated Cys 2-VLPs exhibited, under native conditions, cysteine thiol reactivity in bioconjugation reactions with a fluorescent dye. In addition, this Cys 2-VLPs was cross-linked by NHS-PEG4-Maleimide to 17 (F) and 8 (HN) amino acid long peptides, corresponding to neutralizing epitopes of Newcastle disease virus (NDV). The resulting Cys 2-VLPs-F and Cys 2-VLPs-HN were recognized in Western blots by antibodies to MRFV as well as to F and HN. The results demonstrated that plant-produced MRFV-VLPs have the ability to function as a novel platform for the multivalent display of surface ligands.

Maize rayado fino virus virus-like particles expressed in tobacco plants: A new platform for cysteine selective bioconjugation peptide display.

Ma&iuml;s rayado fino (MRFV) virus-comme-particules virales (VLP) produits dans des usines de tabac ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s pour leur capacit&eacute; &agrave; servir de plateforme roman auquel une vari&eacute;t&eacute; de peptides par covalence affichable lorsqu&#39;elle est exprim&eacute;e &agrave; travers un Potato virus X PVX vectoriel. Pour fournir un point d&#39;ancrage &agrave; des modifications chimiques, trois mutants Cys-MRFV-PPV ont &eacute;t&eacute; cr&eacute;&eacute;s en rempla&ccedil;ant plusieurs des acides amin&eacute;s pr&eacute;sents sur la coque de la MRFV-PPV du type sauvage avec des r&eacute;sidus de cyst&eacute;ine. Le mutant d&eacute;sign&eacute; Cys 2-VLP expos&eacute;es, sous des conditions natives, r&eacute;activit&eacute; de thiol de cyst&eacute;ine dans les r&eacute;actions de bioconjugaison avec un colorant fluorescent. En outre, ce 2 Cys-VLP a &eacute;t&eacute; r&eacute;ticul&eacute; par NHS-PEG4-mal&eacute;imide &agrave; 17 (F) et 8 (HN) acides amin&eacute;s longs peptides, correspondant &agrave; neutraliser les &eacute;pitopes du virus de la maladie de Newcastle (NDV). La r&eacute;sultante Cys 2-VLP-F et Cys 2-VLP-HN ont &eacute;t&eacute; reconnues en taches occidentales par anticorps anti-MRFV, aussi bien quant &agrave; F et HN. Les r&eacute;sultats ont d&eacute;montr&eacute; que plante-produit MRFV-VLP ont la capacit&eacute; de fonctionner comme une plate-forme novatrice pour l&#39;affichage multivalent de ligands de surfaces.

Pseudo-particules virales virus de ma&iuml;s rayado fino exprim&eacute;es dans les plants de tabac : une nouvelle plate-forme pour l&#39;affichage de peptide cyst&eacute;ine bioconjugaison s&eacute;lective.

Mais Rayado Fino Virus (MRFV) Virus-&auml;hnliche-Partikel (VLPs) in Tabakbetriebe produziert wurden wegen ihrer F&auml;higkeit, als neue Plattform dienen, dem eine Vielzahl von Peptiden kovalent angezeigt werden kann, wenn durch eine Kartoffel Virus X PVX basierenden Vektor ausgedr&uuml;ckt, untersucht. Um einen Anker f&uuml;r chemische Modifikationen bereitzustellen, wurden drei Cys-MRFV-VLPs Mutanten geschaffen, mit der Ma&szlig;gabe verschiedener Aminos&auml;uren auf der Schale der Wildtyp MRFV-VLPs mit Cystein R&uuml;ckst&auml;nde vorhanden. Der Mutant bezeichneten Cys 2-VLPs ausgestellt, unter einheitlichen Bedingungen Cystein-Thiol-Reaktivit&auml;t in Bioconjugation Reaktionen mit einer Leuchtstofff&auml;rbung. Dar&uuml;ber hinaus wurde diese Cys 2-VLPs von NHS-PEG4-Maleimide 17 (F) und 8 (HN) Aminos&auml;ure lange Peptide, Neutralisierung Epitopes von Newcastle Disease Virus (NDV) entsprechend vernetzt. Die resultierende Cys 2-VLPs-F und Cys 2-VLPs-HN anerkannt wurden westliche Flecken von Antik&ouml;rpern gegen MRFV sowie F und HN. Die Ergebnisse zeigten, dass Pflanze produzierten MRFV-VLPs die M&ouml;glichkeit haben, als eine neuartige Plattform f&uuml;r das multivalenter Display Oberfl&auml;che Liganden fungieren.

Mais Rayado Fino Virus Virus-&auml;hnliche Partikel in Tabakbetriebe ausgedr&uuml;ckt: eine neue Plattform f&uuml;r Cystein selektive Bioconjugation Peptid-Display.

Mais rayado fino virus (MRFV) virus-simili-particelle (VLP) prodotte nelle piante di tabacco sono stati esaminati per la loro capacit&agrave; di servire come piattaforma di romanzo a cui una variet&agrave; di peptidi pu&ograve; essere covalentemente visualizzata quando si esprime attraverso un vettore di base X PVX Potato virus. Per fornire un punto di ancoraggio per modifiche chimiche, sono stati creati tre mutanti Cys-MRFV-VLP sostituendo alcuni degli amminoacidi presenti sul guscio del selvaggio-tipo MRFV-VLP con residui di cisteina. Il mutante designato Cys 2-VLP esposto, in condizioni native, reattivit&agrave; tiolo cisteina nelle reazioni di bioconjugation con un colorante fluorescente. Inoltre, questo 2-VLP Cys era reticolato di NHS-PEG4-con 17 (F) e 8 peptidi di (HN) degli aminoacidi lunghi, corrispondente a neutralizzare gli epitopi del virus della malattia di Newcastle (NDV). Il risultante Cys 2-VLP-F e Cys 2-VLP-HN sono stati riconosciuti nel Western blots da anticorpi anti-MRFV pure quanto F e HN. I risultati hanno dimostrato che pianta-prodotti MRFV-VLP hanno la capacit&agrave; di funzionare come una romanzo piattaforma per la visualizzazione polivalente di ligandi superficiali.

Mais rayado fino particelle virali virus-simili espressi in piante di tabacco: una nuova piattaforma per la visualizzazione del peptide di cisteina bioconjugation selettiva.

&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7; rayado &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (MRFV) &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A; - &#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x5DE5;&#x5834;&#x3067;&#x88FD;&#x9020;&#x3055;&#x308C;&#x7C92;&#x5B50;&#x7FA4;&#x96C6;&#x3092;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x30B8;&#x30E3;&#x30AC;&#x30A4;&#x30E2; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; X PVX &#x30D9;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8868;&#x793A; &#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; MRFV &#x7FA4;&#x96C6;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E; MRFV &#x7FA4;&#x96C6;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3068;&#x306E;&#x30B7;&#x30A7;&#x30EB;&#x4E0A;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; 2 &#x7FA4;&#x96C6;&#x3092;&#x6307;&#x5B9A;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30C1;&#x30AA;&#x30FC;&#x30EB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x6027;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306B;&#x86CD;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x3067;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; 2 &#x7FA4;&#x96C6;&#x306F; NHS-PEG4-&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9; 17 (F) &#x3068;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30AB;&#x30C3;&#x30B9;&#x30EB;&#x75C5;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (NDV) &#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B; 8 (&#x30DB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E5;&#x30E9;&#x30B9;) &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x9577;&#x9396;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3001;&#x67B6;&#x6A4B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; 2-&#x7FA4;&#x96C6;-F &#x3068;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3; 2 &#x7FA4;&#x96C6; HN &#x3067;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x306E; MRFV &#x3082; F &#x3068; HN &#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3002;&#x5DE5;&#x5834;&#x751F;&#x7523;&#x306E; MRFV &#x7FA4;&#x96C6;&#x8868;&#x9762;&#x914D;&#x4F4D;&#x5B50;&#x306E;&#x591A;&#x4FA1;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7; rayado &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x69D8;&#x7C92;&#x5B50;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;: &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x9078;&#x629E;&#x5316;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x8868;&#x793A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3002;

&#xC625;&#xC218;&#xC218; rayado &#xD53C;&#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (MRFV) &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;-&#xAC19;&#xC740;-&#xC785;&#xC790; (VLPs) &#xB2F4;&#xBC30; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB418;&#xB294; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#x70AD; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD560; &#xB54C; &#xAC10;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; X PVX &#xAE30;&#xBC18; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC870;&#xC0AC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xD654;&#xD559; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC575;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;, 3 &#xBA85;&#xC758; Cys-MRFV-VLPs &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; MRFV Vlps&#xC758; &#xAECD;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC84C;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cys 2-Vlps&#xB97C; &#xC9C0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC640; bioconjugation &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778;&#xC758; thiol &#xBC18;&#xC751;&#xC131; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC870;&#xAC74; &#xC804;&#xC2DC;. &#xB610;&#xD55C;, Cys 2 Vlps&#xC774; &#xBCF4; &#xAC74;&#xAD6D;-PEG4-Maleimide 17 (F) &#xD558; &#xACE0; &#xD3A9; &#xD2F0; 8 (HN) &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xAE34; &#xB4DC;, &#xD574;&#xB2F9; epitopes &#xB274;&#xCE90;&#xC2AC; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (NDV)&#xC744; &#xC911;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2ED;&#xC790;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC; Cys 2-VLPs-F&#xC640; Cys 2-VLPs-HN&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; F &#xBC0F; HN &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; MRFV&#xC5D0;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC11C; &#xBAB0;&#xC544;&#xB0B4;&#xACE0;. &#xACB0;&#xACFC; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC0DD;&#xC0B0; MRFV VLPs &#xD45C;&#xBA74; ligands&#xC758; &#xB610;&#xD55C; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC625;&#xC218;&#xC218; rayado &#xD53C;&#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC790; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;: &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; bioconjugation &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB514;&#xC2A4;&#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;.

Ma&iacute;z rayado fino (MRFV) virus-como-part&iacute;culas del virus (VLPs) producidas en plantas de tabaco fueron examinadas por su capacidad servir como una plataforma de novela que una variedad de p&eacute;ptidos puede covalente mostrarse cuando se expresa a trav&eacute;s de un vector basado en X PVX virus de patata. Para proporcionar un ancla para modificaciones qu&iacute;micas, tres Cys-MRFV-VLPs mutantes fueron creados mediante la sustituci&oacute;n de varios de los amino&aacute;cidos presentes en la c&aacute;scara de las wild-type MRFV-VLPs con residuos de ciste&iacute;na. El mutante designado Cys 2-VLPs exhibi&oacute;, en condiciones nativas, reactividad de tiol de ciste&iacute;na en reacciones de bioconjugation con un colorante fluorescente. Adem&aacute;s, esta Cys 2-VLPs fue reticulado por NHS-PEG4-maleimida a 17 (F) y 8 (HN) del amino&aacute;cido largos p&eacute;ptidos, correspondiente a neutralizar los epitopos del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV). La resultante Cys 2-VLPs-F y Cys 2-VLPs-HN, se contabilizaron en manchas blancas /negras occidentales por anticuerpos a MRFV as&iacute; como a F y HN. Los resultados demostraron que MRFV-VLPs producidos en planta tienen la capacidad para funcionar como una nueva plataforma para Mostrar superficies ligandos multivalente.

Part&iacute;culas del virus similares a los virus de ma&iacute;z rayado fino expresadas en plantas de tabaco: una nueva plataforma para la exhibici&oacute;n de p&eacute;ptido de bioconjugation selectiva de ciste&iacute;na.

&#x591A;&#x5E74;&#x751F;&#x9ED1;&#x9EA6;&#x8349; &#xFF08;LoLV &#xFF1B; Lolavirus&#xFF0C;&#x5C5E;&#x5BB6;&#x5EAD; Alphaflexiviridae&#xFF09; &#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x662F;&#x6309;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7FA7;&#x57FA; coterminal &#x5916;&#x5957;&#x86CB;&#x767D; (CP) &#x6B3E;&#x5F0F; (&#x7EA6; 28 &#x548C; 33 kDa)&#xFF0C;encapsidated &#x7B49;&#x6469;&#x5C14;&#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3002;CP &#x8113;&#x75B1;&#x5305;&#x542B;&#x4E24;&#x4E2A; 5&#39;-&#x8FD1;&#x7AEF; AUGs &#x7F16;&#x7801;&#x6EE1;&#x8DB3; 1 &#x548C;&#x6EE1;&#x8DB3; 49&#x3001; &#x5206;&#x522B;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x7FFB;&#x8BD1; 33 &#x548C; 28 kDa CP &#x53D8;&#x79CD;&#x3002;CP N &#x7AEF;&#x57DF;&#x5305;&#x62EC; 42 aa &#x5E8F;&#x5217;&#x7F16;&#x7801;&#x6307;&#x8BA4;&#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x80BD;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5927;&#x7EA6; 28 kDa &#x5A01;&#x5C14; Mutational &#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x88C2;&#x89E3;&#x548C;&#x66FF;&#x4EE3;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684; 33 kDa &#x5728;&#x8D77;&#x59CB;&#x5BC6;&#x7801;&#x5B50;&#x5E27;&#x548C;&#x5047;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x88C2;&#x89E3;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;N-&#x672B;&#x7AEF;&#x5E8F;&#x5217;&#x662F;&#x9AD8;&#x6548;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3001; &#x5168;&#x8EAB;&#x8FD0;&#x52A8;&#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x540C;&#x6E90; CP &#x4EA4;&#x4E92;&#x548C;&#x7C92;&#x5B50;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x6240;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x3002;&#x963B;&#x585E; 28 kDa CP &#x7531;&#x5185;&#x90E8;&#x5F00;&#x59CB;&#x751F;&#x4EA7;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x6210;&#x679C;&#xFF0C;&#x800C;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x9632;&#x6B62;&#x5728;&#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x88C2;&#x89E3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x5DE8;&#x5927;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x591A;&#x82B1;&#x9ED1;&#x9EA6;&#x8349;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x75C5;&#x6BD2; (Alphaflexiviridae) &#x5916;&#x58F3;&#x86CB;&#x767D;&#xFF1A; &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x548C;&#x51FD;&#x6570;&#x4E2D;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x690D;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;

The genome of Lolium latent virus (LoLV; genus Lolavirus, family Alphaflexiviridae) is encapsidated by two carboxy-coterminal coat protein (CP) variants (about 28 and 33 kDa), in equimolar proportions. The CP ORF contains two 5'-proximal AUGs encoding Met 1 and Met 49, respectively promoting translation of the 33 and 28 kDa CP variants. The 33 kDa CP N-terminal domain includes a 42 aa sequence encoding a putative chloroplast transit peptide, leading to protein cleavage and alternative derivation of the approximately 28 kDa CP. Mutational analysis of the two in-frame start codons and of the putative proteolytic-cleavage site showed that the N-terminal sequence is crucial for efficient cell-to-cell movement, functional systemic movement, homologous CP interactions and particle formation, but is not required for virus replication. Blocking production of the 28 kDa CP by internal initiation shows no major outcome, whereas additional mutation to prevent proteolytic cleavage at the chloroplast membrane has a dramatic effect on virus infection.

Lolium latent virus (Alphaflexiviridae) coat proteins: expression and functions in infected plant tissue.

Le g&eacute;nome du virus latent de Lolium (LoLV, genre Lolavirus, famille des Alphaflexiviridae) est encapsid&eacute;s par deux variantes de la prot&eacute;ine (CP) carboxy-acquis manteau (environ 28 et 33 kDa), dans des proportions &eacute;quimolaires. L&#39;ORF CP contient deux AUGs 5&#39;-proximales codant Met 1 et 49 se sont r&eacute;unis, promouvoir la traduction des variantes kDa CP 33 et 28 respectivement. Les 33 kDa domaine N-terminal de CP comprend une s&eacute;quence d&#39;aa 42 codant un peptide putatif chloroplaste, conduisant &agrave; la prot&eacute;ine clivage et alternative d&eacute;rivation du kDa environ 28; cf. Mutational analysis of les deux codons de d&eacute;part dans le cadre et du site de clivage prot&eacute;olytique putatif a montr&eacute; que la s&eacute;quence N-terminale est cruciale pour efficace mouvement de cellule &agrave; cellule, circulation syst&eacute;mique fonctionnelle, des interactions CP homologues et la formation de particules, mais n&#39;est pas requis pour la r&eacute;plication du virus. Bloque la production de la kDa 28 CP par initiation interne ne montre aucun r&eacute;sultat majeur, alors que la mutation suppl&eacute;mentaire afin d&#39;&eacute;viter un clivage prot&eacute;olytique au niveau de la membrane chloroplastique a un effet dramatique sur l&#39;infection par le virus.

Lolium prot&eacute;ines de virus latent (Alphaflexiviridae): expression et fonctions dans infect&eacute;s des tissus v&eacute;g&eacute;taux.

Das Genom von Lolium latent Virus (LoLV; Gattung Lolavirus, Familie Alphaflexiviridae) ist Encapsidated von zwei Carboxy-Erg&auml;nzungs-Mantel Protein (CP) Varianten (&uuml;ber 28 und 33 kDa), in equimolar Proportionen. Der CP-ORF enth&auml;lt zwei 5&#39;-proximale Zutritts Codierung 1 traf und traf 49, &Uuml;bersetzung der 33 und 28 kDa CP-Varianten bzw. zu f&ouml;rdern. Die 33 kDa CP N-terminalen Dom&auml;ne ein 42 aa Codierung ein mutma&szlig;liches Chloroplast Transit Peptid, was zu Protein Spaltung und Alternative Ableitung von den rund 28 kDa vgl. Mutational Analyse der beiden Aufgabensequenz in-Frame Start Codons und der vermeintliche proteolytische Spaltung Website zeigte, dass die N-terminale Sequenz entscheidend f&uuml;r effiziente Bewegung von Zelle zu Zelle, funktionellen systemische Bewegung, homologe CP-Interaktionen und Partikelbildung, aber ist nicht erforderlich f&uuml;r die Replikation des Virus. Blockierung der Produktion von den 28 kDa CP durch interne Einleitung zeigt keine wichtige Ergebnis, w&auml;hrend zus&auml;tzliche Mutation proteolytische Spaltung bei der Chloroplast Membrane verhindern einen dramatischen Effekt auf Virusinfektion hat.

Lolium latent Virus (Alphaflexiviridae) Mantel Proteine: Ausdruck und Funktionen in infizierten Pflanzengewebe.

Il genoma del virus latente Lolium (LoLV; genere Lolavirus, famiglia Alphaflexiviridae) &egrave; incapsidato da due varianti di proteina (CP) cappotto di carboxy-coterminal (circa 28 e 33 kDa), in proporzioni equimolare. Il ORF CP contiene due 5&#39;-prossimale meglio codifica 1 ha incontrato e ha incontrato 49, rispettivamente promuovere la traduzione delle varianti kDa CP 33 e 28. Il kDa 33 CP N-terminale dominio comprende una sequenza di aa 42 codifica un peptide di transito cloroplasto putativo, portando a derivazione clivaggio e alternativa della proteina del kDa circa 28 ammesso CP. analisi delle due codoni di inizio nel telaio e del sito di clivaggio proteolitico putativo ha mostrato che la sequenza N-terminale &egrave; cruciale per efficiente cella al movimento, movimento sistemico funzionale, omologhe CP interazioni e formazione delle particelle, ma non &egrave; richiesto per la replicazione del virus. Bloccando la produzione del 28 kDa CP di iniziazione interno non mostra nessun risultato importante, considerando che la mutazione supplementare per prevenire il clivaggio proteolitico presso la membrana del cloroplasto ha un effetto drammatico sull&#39;infezione da virus.

Proteine cappotto di Lolium latent virus (Alphaflexiviridae): espressione e funzioni in infettato tessuto vegetale.

Lolium &#x6F5C;&#x5728;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (LoLV; &#x5C5E; Lolavirus&#x3001;&#x5BB6;&#x65CF; Alphaflexiviridae) &#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7; coterminal &#x30B3;&#x30FC;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (CP) &#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#xFF08;&#x7D04; 28 &#x304A;&#x3088;&#x3073; 33 kDa)&#x3001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x306E;&#x7B49;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3067;&#x3059;&#x3002;CP ORF &#x306B;&#x306F; 1 &#x4F1A;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x51FA;&#x4F1A;&#x3063;&#x305F; 49 &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C; 33 &#x304A;&#x3088;&#x3073; 28 kDa CP &#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; 2 &#x3064;&#x306E; 5&#39; &#x8FD1;&#x4F4D; AUGs &#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;CP &#x306E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x7D04; 28 kDa &#x78BA;&#x8A8D;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x89E3;&#x6790;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x80F8;&#x306E;&#x8C37;&#x9593;&#x3068;&#x4EE3;&#x66FF;&#x6D3E;&#x751F;&#x3068;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30C3;&#x30C8; &#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9; &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; 42 aa &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x306F; 33 kDa &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x958B;&#x59CB;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x958B;&#x88C2;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E; N &#x30BF;&#x30FC;&#x30DF;&#x30CA;&#x30EB; &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7D30;&#x80DE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x52D5;&#x304D;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x5168;&#x8EAB;&#x904B;&#x52D5;&#x3001;&#x76F8;&#x540C;&#x306E; CP &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001;&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5206;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x819C;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x958B;&#x88C2;&#x3092;&#x9632;&#x3050;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9; 28 kDa CP &#x5185;&#x90E8;&#x4E3B;&#x5C0E;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6210;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

Lolium &#x6F5C;&#x5728;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (Alphaflexiviridae) &#x306E;&#x5916;&#x88AB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;: &#x5F0F;&#x3068;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x690D;&#x7269;&#x7D44;&#x7E54;&#x3002;

Lolium &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (LoLV; &#xC18D; Lolavirus, &#xAC00;&#xC871; Alphaflexiviridae)&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; (&#xC57D; 28&#xC640; 33 kDa), &#xB450; carboxy coterminal &#xC678; &#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (CP) &#xBCC0;&#xC885; &#xD558; &#xC5EC; encapsidated equimolar &#xBE44;&#xC728;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. CP ORF &#xB9CC;&#xB09C; 1&#xACFC; &#xB9CC;&#xB09C; 49 &#xC778;&#xCF54;&#xB529;, &#xAC01;&#xAC01; 33&#xC640; 28 kDa CP &#xC774;&#xCCB4;&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xB450; &#xADFC; 5&#39;-&#xC704; Augs&#xC5D0; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CP N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; putative &#xC5FD;&#xB85D;&#xCCB4; &#xAD50;&#xD1B5; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC808;&#xB2E8;, &#xB300;&#xC548; &#xD30C;&#xC0DD; &#xC57D; 28 kDa &#xB450; CP. Mutational &#xBD84;&#xC11D;&#xC758;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294; 42 &#xAE08;&#xC8FC; &#xC21C;&#xC11C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; 33 kDa &#xD504;&#xB808;&#xC784; &#xC2DC;&#xC791; codons&#xC640; &#xC0C1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; N &#xB2E8;&#xC790; &#xC21C;&#xC11C;&#xB294; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xAE30;&#xB2A5; &#xCCB4;&#xACC4;&#xC801; &#xC6B4;&#xB3D9;, &#xB3D9;&#xC885; CP &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC785;&#xC790; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5FD;&#xB85D;&#xCCB4; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xBC18;&#xBA74; &#xB0B4;&#xBD80; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xD558; &#xC5EC; 28 kDa CP&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC544;&#xBB34; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Lolium &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (Alphaflexiviridae) &#xC678; &#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;:&#xC5D0;&#xC11C; &#xD568;&#xC218;&#xC640; &#xC2DD; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC;.

El genoma del virus latente de Lolium (LoLV; g&eacute;nero Lolavirus, familia Alphaflexiviridae) es el genoma de dos variantes de carboxi-coterminales capa de prote&iacute;na (PC) (alrededor de 28 y 33 kDa), en proporciones equimolares. El ORF CP contiene dos AUGs 5&#39;-proximales codificaci&oacute;n Met 1 y 49 se reuni&oacute;, promover la traducci&oacute;n de las variantes de kDa CP 33 y 28 respectivamente. Los 33 kDa dominio N-terminal de CP incluye una secuencia de aa 42 codificaci&oacute;n un p&eacute;ptido de tr&aacute;nsito cloroplasto putativo, llevando a la derivaci&oacute;n de escote y alternativa de prote&iacute;nas de las aproximadamente 28 kDa Mutational CP. An&aacute;lisis de los dos codones de inicio en el marco y del sitio de clivaje proteol&iacute;tico putativo demostr&oacute; que la secuencia N-terminal es crucial para el movimiento eficiente de c&eacute;lula a c&eacute;lula, movimiento sist&eacute;mico funcional, interacciones de CP hom&oacute;logas y formaci&oacute;n de part&iacute;culas, pero no es necesario para la replicaci&oacute;n del virus. Bloquean la producci&oacute;n de los 28 kDa CP por iniciaci&oacute;n interna no muestra ning&uacute;n resultado importante, mientras que la mutaci&oacute;n adicional para evitar el clivaje proteol&iacute;tico en la membrana del cloroplasto tiene un efecto dram&aacute;tico sobre la infecci&oacute;n por el virus.

Angela Natilla

Plant Sciences Institute,
Molecular Plant Pathology Laboratory

Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture

Analysis of the Solvent Accessibility of Cysteine Residues on Maize rayado fino virus Virus-like Particles Produced in Nicotiana benthamiana Plants and Cross-linking of Peptides to VLPs

Angela Natilla

Plant Sciences Institute,Molecular Plant Pathology Laboratory

Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture

Analysis of the Solvent Accessibility of Cysteine Residues on Maize rayado fino virus Virus-like Particles Produced in Nicotiana benthamiana Plants and Cross-linking of Peptides to VLPs

Plant Sciences Institute,
Molecular Plant Pathology Laboratory