Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive <em>In vivo</em> Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

Intravital imaging has emerged as an indispensable tool in biological research.  In the process, many imaging techniques have been developed to study ...

University of Miami Miller School of Medicine

&#x5229;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1 (LFA-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x5BF9; Jurkat T &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;-2 (&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2&#xFF09; &#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x90E8;&#x961F;&#x7684; LFA-1/&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1/&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8C31; &#xFF08;&#x5373;&#x4E0E;&#x52A0;&#x8F7D;&#x901F;&#x7387;&#x7684;&#x89E3;&#x9664;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x90E8;&#x961F;&#xFF09; &#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x52A0;&#x8F7D;&#x901F;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x6DB5;&#x76D6; 3 &#x4E2A;&#x6570;&#x91CF;&#x7EA7; &#xFF08;50 60,000 pN/s&#xFF09; &#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x5FEB;&#x901F;&#x52A0;&#x8F7D;&#x5236;&#x5EA6;&#x548C;&#x6162;&#x52A0;&#x8F7D;&#x5236;&#x5EA6;&#x3002;&#x8FD9;&#x6307;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x89E3;&#x79BB;&#x6D89;&#x53CA;&#x514B;&#x670D;&#x9661;&#x5CED;&#x7684;&#x5185;&#x90E8;&#x548C;&#x5E7F;&#x5916;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;Mg(2+) &#x52A0;&#x6162;&#x52A0;&#x8F7D;&#x5236;&#x5EA6;&#x52A0;&#x5F3A;&#x4E86; LFA 1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2&#x3002;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1/&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1/&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F52;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2 &#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x5176;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x7684;&#x62C9;&#x529B;&#x6BD4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; 1 &#x590D;&#x6742;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x58C1;&#x5792;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;

&#x529B;&#x8C31; LFA-1 &#x548C;&#x5176;&#x914D;&#x4F53;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-2&#x3002;

Single-molecule measurements of the interaction of leukocyte function-associated antigen-1 (LFA-1), expressed on Jurkat T cells, with intercellular adhesion molecules-1 and -2 (ICAM-1 and ICAM-2) were conducted using atomic force microscopy (AFM). The force spectra (i.e., unbinding force versus loading rate) of both the LFA-1/ICAM-1 and LFA-1/ICAM-2 interactions were acquired at a loading rate range covering 3 orders of magnitude (50-60,000 pN/s) and revealed a fast loading regime and a slow loading regime. This indicates that the dissociation of both complexes involves overcoming a steep inner and a wide outer activation barrier. LFA-1 binding to ICAM-1 and ICAM-2 was strengthened in the slow loading regime by the addition of Mg(2+). Differences in the dynamic strength of the LFA-1/ICAM-1 and LFA-1/ICAM-2 interactions can be attributed to the presence of wider barriers in the ICAM-2 complex, making it more responsive to a pulling force than the ICAM-1 complex.

Force spectroscopy of LFA-1 and its ligands, ICAM-1 and ICAM-2.

Mesures de la mol&eacute;cule unique de l&#39;interaction des leucocytes function-associated antigen-1 (LFA-1), exprim&eacute;e sur les cellules T Jurkat, avec les mol&eacute;cules d&#39;adh&eacute;sion intercellulaire-1 et -2 (ICAM-1 et ICAM-2) ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es &agrave; l&#39;aide de la microscopie &agrave; force atomique (AFM). L&#39;&eacute;quipe spectra (c&#39;est-&agrave;-dire la force sans engagement par rapport aux taux de charge) de la LFA-1/ICAM-1 et les interactions de LFA-1 et ICAM-2 ont &eacute;t&eacute; acquises &agrave; un taux de charge vont couvrant 3 ordres de grandeur (50-60 000 pN/s) et a r&eacute;v&eacute;l&eacute; un chargement rapide et un r&eacute;gime de lenteur de chargement. Cela indique que la dissociation des deux complexes implique de surmonter un int&eacute;rieur raide et une barri&egrave;re d&#39;activation large ext&eacute;rieure. LFA-1 liaison ICAM-1 et ICAM-2 a &eacute;t&eacute; renforc&eacute;e dans le r&eacute;gime de la lenteur de chargement par l&#39;addition de Mg(2+). Diff&eacute;rences dans la r&eacute;sistance dynamique de la LFA-1/ICAM-1 et les interactions de LFA-1 et ICAM-2 peuvent &ecirc;tre attribu&eacute;es &agrave; la pr&eacute;sence d&#39;obstacles plus larges dans le complexe de l&#39;ICAM-2, rend plus sensible &agrave; une force de traction que le complexe de l&#39;ICAM-1.

Forcer la spectroscopie LFA-1 et ses ligands, ICAM-1 et ICAM-2.

Einzelmolek&uuml;l-Messungen der Interaktion von Leukozyten Funktion-assoziierte Antigen-1 (LFA-1), ausgedr&uuml;ckt in Jurkat T-Zellen, mit der Adh&auml;sion Molek&uuml;le-1 und-2 (ICAM-1 und ICAM-2) wurden mit Rasterkraftmikroskopie (AFM) durchgef&uuml;hrt. Die Kraft, die Spektren (d.h. unverbindliche Kraft im Vergleich zu beladende Rate) sowohl der LFA-1/ICAM-2 Interaktionen der LFA-1/ICAM-1 mit einer laden-Rate erworben wurden reichen umfasst 3 Gr&ouml;&szlig;enordnungen (50-60.000 pN/s) und offenbart eine schnelle Be-Regime und ein langsames laden. Dies bedeutet, dass die Spaltung der beiden komplexe beinhaltet einen steilen inneren und eine breite &auml;u&szlig;ere Aktivierungs-Barriere zu &uuml;berwinden. LFA-1 Bindung an ICAM-1 und ICAM-2 wurde das Langsames Laden-Regime durch die Zugabe von Mg(2+) verst&auml;rkt. Unterschiede in der dynamischen Kraft des LFA-1/ICAM-1 und LFA-1/ICAM-2 Interaktionen k&ouml;nnen auf das Vorhandensein von gr&ouml;&szlig;eren Barrieren im ICAM-2 Komplex, so dass es st&auml;rker auf eine Zugkraft als die ICAM-1-Anlage zur&uuml;ckzuf&uuml;hren.

Spektroskopie von LFA-1 und ihrer Liganden ICAM-1 und ICAM-2 zu erzwingen.

Misure singola molecola dell&#39;interazione del leucocita associata funzione antigene-1 (LFA-1), espresso sulle cellule Jurkat T, con molecole di adesione intercellulare-1 e -2 (ICAM-1 e ICAM-2) sono stati condotti utilizzando la microscopia a forza atomica (AFM). La forza di spettri (cio&egrave;, non vicolante force versus tasso di caricamento) del LFA-1/ICAM-1 e LFA-1/ICAM-2 interazioni sono stati acquisiti con un tasso di carico vanno a coprire 3 ordini di grandezza (50-60.000 pN/s) e ha rivelato un regime di caricamento veloce e un regime di caricamento lento. Questo indica che la dissociazione dei due complessi coinvolge superando un ripido interiore e una barriera di attivazione ampio esterno. LFA-1 associazione di ICAM-1 e ICAM-2 &egrave; stata rafforzata nel regime di caricamento lento con l&#39;aggiunta di Mg(2+). Differenze nella forza dinamica della LFA-1/ICAM-1 e LFA-1/ICAM-2 interazioni possono essere attribuite alla presenza di barriere pi&ugrave; ampie nel complesso ICAM-2, rendendola pi&ugrave; reattiva ad una forza di trazione rispetto al complesso di ICAM-1.

Forza di spettroscopia di LFA-1 e suoi ligandi, ICAM-1 e ICAM-2.

Jurkat T &#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x3068;-2 (ICAM-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; ICAM-2&#xFF09; &#x306B;&#x767D;&#x8840;&#x7403;&#x6A5F;&#x80FD;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;-1 (LFA-1) &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E; 1 &#x5206;&#x5B50;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (AFM) &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;LFA 1/ICAM 1 LFA 1/ICAM 2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB; (&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x529B;&#x3068;&#x8F09;&#x8377;&#x901F;&#x5EA6;) &#x304C;&#x8AAD;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x901F;&#x5EA6;&#x3067;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x305F;&#x529B;&#x306F;&#x3001;3 &#x6841; &#xFF08;50-60,000 pN/&#x79D2;&#xFF09; &#x3092;&#x30AB;&#x30D0;&#x30FC;&#x3059;&#x308B;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3057;&#x3001;&#x9AD8;&#x901F;&#x306A;&#x8AAD;&#x307F;&#x8FBC;&#x307F;&#x4F53;&#x5236;&#x3068;&#x9045;&#x3044;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x4F53;&#x5236;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x932F;&#x4F53;&#x306E;&#x89E3;&#x96E2;&#x304C;&#x6025;&#x306A;&#x5185;&#x5074;&#x3068;&#x5E83;&#x3044;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;LFA 1 ICAM-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; ICAM-2 &#x3078;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x653F;&#x6A29; Mg(2+) &#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;LFA 1/icam-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; LFA 1/ICAM 2 &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306F;&#x3001;ICAM 1 &#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3088;&#x308A;&#x5F15;&#x304D;&#x529B;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x3066;&#x306E; ICAM-2 &#x8907;&#x5408;&#x5E83;&#x3044;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

LFA 1 &#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306E; ICAM-1 &#x304A;&#x3088;&#x3073; ICAM-2 &#x306E;&#x5206;&#x5149;&#x3092;&#x5F37;&#x5236;&#x7684;&#x306B;&#x3002;

Jurkat T&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;-1&#xACFC;-2 (ICAM-1&#xACFC; ICAM-2)&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xBC31;&#xD608;&#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0;-1 (LFA-1)&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xCE21;&#xC815; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. LFA-1/ICAM-1 LFA-1/ICAM-2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; (&#xC989;, &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD574;&#xC81C; &#xAC15;&#xC81C; &#xB85C;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB300;) &#xB85C;&#xB529; &#xC18D;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC778;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4; &#xD798; 3 &#xBC30;&#xB098; (50-60, 000 pN/s)&#xB97C; &#xB2E4;&#xB8E8;&#xB294; &#xBC94;&#xC704;&#xC640; &#xBE60;&#xB978; &#xB85C;&#xB529; &#xC815;&#xAD8C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB290;&#xB9B0; &#xB85C;&#xB529; &#xC815;&#xAD8C;. &#xC774; &#xB450; &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xBD84;&#xB9AC; &#xAC00;&#xD30C;&#xB978; &#xB0B4;&#xBD80;&#xC640; &#xB113;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD3EC;&#xD568;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. ICAM-1&#xACFC; ICAM 2 LFA-1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB290;&#xB9B0; &#xB85C;&#xB529; &#xC815;&#xAD8C;&#xC5D0;&#xC11C; mg(2+)&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC758;&#xD574; &#xAC15;&#xD654; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. LFA-1/ICAM-1&#xACFC; LFA-1/ICAM-2 &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xD798;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; ICAM-1 &#xB2E8;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xB2E4;&#xB294; &#xB2F9;&#xAE30;&#xB294; &#xD798;&#xC5D0; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; ICAM-2 &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB113;&#xC740; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

LFA-1&#xACFC; &#xADF8; ligands, ICAM-1&#xACFC; ICAM-2&#xC758; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xAC15;&#xC81C;&#xB85C;.

Se realizaron mediciones de una sola mol&eacute;cula de la interacci&oacute;n de leucocitos funci&oacute;n-asociada antigen-1 (LFA-1), presentes en las c&eacute;lulas Jurkat T, con las mol&eacute;culas de adhesi&oacute;n intercelular-1 y -2 (ICAM-1 y ICAM-2) mediante microscop&iacute;a de fuerza at&oacute;mica (AFM). La fuerza (es decir, desvinculaci&oacute;n fuerza versus velocidad de carga) los espectros de la LFA-1/ICAM-1 y LFA-1/ICAM-2 interacciones fueron adquiridos a un ritmo de carga van cubriendo 3 &oacute;rdenes de magnitud (50-60.000 pN/s) y revel&oacute; un r&eacute;gimen de carga r&aacute;pida y un r&eacute;gimen de carga lenta. Esto indica que la disociaci&oacute;n de ambos complejos implica superar un escarpado interior y una barrera de activaci&oacute;n ancho exterior. Enlace de LFA-1, ICAM-1 y ICAM-2 fue consolidada en el r&eacute;gimen de carga lenta por la adici&oacute;n de mg. Diferencias en la fuerza din&aacute;mica de la LFA-1/ICAM-1 y LFA-1/ICAM-2 interacciones pueden atribuirse a la presencia de barreras m&aacute;s amplias en el complejo de ICAM-2, lo que responde m&aacute;s a una fuerza de tracci&oacute;n que el complejo de ICAM-1.

Fuerza de espectroscopia de LFA-1 y sus ligandos, ICAM-1 y ICAM-2.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; apposing &#x6D6E;&#x52A8;&#x53CC;&#x5C42;&#x86CB; L-&alpha;-&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1; (PC &#x86CB;&#xFF09; &#x6216; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine &#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x90E8;&#x961F;&#x6839;&#x636E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x538B;&#x7F29;&#x7387;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x4EE5;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8102;&#x8D28;&#x6210;&#x5206;&#x548C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x80FD;&#x6E90;&#x683C;&#x5C40;&#x3002;&#x538B;&#x7F29;&#x7387;&#x7684;&#x5927;&#x7EA6; 1000&#x5E74;&#x81F3;&#x5927;&#x7EA6; 100,000 pN/s&#xFF0C;&#x65BD;&#x52A0;&#x7684;&#x529B;&#xFF0C;&#x8303;&#x56F4;&#x4ECE;&#x5927;&#x7EA6; 100 &#x5230;&#x5927;&#x7EA6; 500 pN &#x5BFC;&#x81F4;&#x6D6E;&#x52A8;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E3B;&#x8981;&#x80FD;&#x6E90;&#x969C;&#x788D;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x540E;&#x5929;&#x52A8;&#x6001;&#x529B;&#x8C31;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x4E00;&#x79CD;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8FC7;&#x6E21;&#x6001;&#x7406;&#x8BBA;&#x4E0E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x662F;&#x7EBF;&#x6027;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x7684;&#x7B80;&#x5355;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x80FD;&#x6E90;&#x683C;&#x5C40;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x8F6C;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#x53CC;&#x5C42;&#x6D41;&#x52A8;&#x6027;&#x53CA;&#x7EC4;&#x6210;&#x88AB;&#x4FEE;&#x6539;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x7531;&#x6E29;&#x5EA6;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x6D53;&#x5EA6; &#xFF08;15%&lt; &#x6216; = chol &lt; &#x6216; = 25%)&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FEE;&#x6539;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8D85;&#x8FC7; PC &#x86CB;&#x548C; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine &#x6D6E;&#x52A8;&#x53CC;&#x5C42;&#x878D;&#x5408;&#x80FD;&#x91CF;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x3002;&#x589E;&#x52A0; 25%&#x80C6;&#x56FA;&#x9187;&#x9E21;&#x86CB; PC &#x53CC;&#x5C42;&#x589E;&#x52A0;&#x7EA6; 1.0 k (B) T &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x53CC;&#x5C42;&#x86CB; PC &#x4EC5;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x80FD;&#x91CF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6269;&#x9614;&#x80FD;&#x91CF;&#x5C4F;&#x969C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x51CF;&#x5C11;&#x5176;&#x8FB9;&#x5761;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7814;&#x7A76;&#x6D6E;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

This study investigated the fusion of apposing floating bilayers of egg L-alpha-phosphatidylcholine (egg PC) or 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine. Atomic force microscope measurements of fusion forces under different compression rates were acquired to reveal the energy landscape of the fusion process under varied lipid composition and temperature. Between compression rates of approximately 1000 and approximately 100,000 pN/s, applied forces in the range from approximately 100 to approximately 500 pN resulted in fusion of floating bilayers. Our atomic force microscope measurements indicated that one main energy barrier dominated the fusion process. The acquired dynamic force spectra were fit with a simple model based on the transition state theory with the assumption that the fusion activation potential is linear. A significant shift in the energy landscape was observed when bilayer fluidity and composition were modified, respectively, by temperature and different cholesterol concentrations (15% < or = chol < or = 25%). Such modifications resulted in a more than twofold increase in the width of the fusion energy barrier for egg PC and 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine floating bilayers. The addition of 25% cholesterol to egg PC bilayers increased the activation energy by approximately 1.0 k(B)T compared with that of bilayers with egg PC alone. These results reveal that widening of the energy barrier and consequently reduction in its slope facilitated membrane fusion.

Atomic force microscope studies of the fusion of floating lipid bilayers.

Cette &eacute;tude examine la fusion de relater les bicouches flottants d&#39;oeuf alpha-L-phosphatidylcholine (PC d&#39;oeuf) ou 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine. Mesures microscope atomique de force des forces de fusion sous le taux de compression diff&eacute;rent ont &eacute;t&eacute; acquises pour r&eacute;v&eacute;ler le paysage &eacute;nerg&eacute;tique du processus de fusion en vertu de la composition lipidique vari&eacute;e et de la temp&eacute;rature. Entre les taux de compression d&#39;environ 1000 et environ 100 000 pN/s, forces appliqu&eacute;es dans la plage de 100 &agrave; environ 500 pN a abouti &agrave; la fusion de flottement des bicouches. Nos mesures de microscopie de force atomique a indiqu&eacute; qu&#39;une barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie principale domin&eacute;e par le processus de fusion. Les spectres acquis force dynamique ont &eacute;t&eacute; ajust&eacute;s avec un mod&egrave;le simple bas&eacute; sur la th&eacute;orie d&#39;&eacute;tat de transition avec l&#39;hypoth&egrave;se que l&#39;activation de la fusion potentielle est lin&eacute;aire. Un important changement dans le paysage de l&#39;&eacute;nergie a &eacute;t&eacute; observ&eacute; lorsque fluidit&eacute; bicouche et composition ont &eacute;t&eacute; modifi&eacute;s, respectivement, de la temp&eacute;rature et des concentrations de cholest&eacute;rol diff&eacute;rents (15 % &lt; ou = chol &lt; ou = 25 %). De telles modifications a entra&icirc;n&eacute; une plus que doubl&eacute; dans la largeur de la barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie de fusion pour les &oelig;ufs PC et 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine bicouches flottants. L&#39;addition de 25 % de cholest&eacute;rol aux &oelig;uf bicouches de PC augmente l&#39;&eacute;nergie d&#39;activation d&#39;environ 1,0 k (B) T compar&eacute;e &agrave; celle des bicouches avec oeuf PC seul. Ces r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent que l&#39;&eacute;largissement de la barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie et, par cons&eacute;quent, la r&eacute;duction de sa pente facilit&eacute; fusion membranaire.

&Eacute;tudes, au microscope atomique de force de la fusion de flottement des bicouches lipidiques.

Diese Studie untersuchte die Verschmelzung von schwimmende Doppelschichten Ei L-Alpha-Phosphatidylcholin (PC Ei) oder 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine apposing. Rasterkraft-Mikroskop-Messungen Fusion-Streitkr&auml;fte unter verschiedenen Kompressionsraten wurden erworben, um die Energielandschaft der Fusionsprozess unter vielf&auml;ltigen Lipid-Zusammensetzung und Temperatur zu offenbaren. Kompressionsraten von ca. 1000 bis ca. 100.000 pN/s f&uuml;hrte einwirkenden Kr&auml;fte im Bereich von ca. 100 bis ca. 500 pN Verschmelzung von schwimmenden Doppelschichten. Unsere Rasterkraft-Mikroskop-Messungen angegeben, dass diese einen wesentlichen Energiebarriere der Fusionsprozess beherrscht wird. Die erworbenen dynamischen Kraft-Spektren wurden mit einem einfachen Modell, basierend auf der &Uuml;bergangs-State-Theorie mit der Annahme, dass die Fusion-Aktivierung potenzieller lineare passen. Ein deutlichen Wandel in der Energielandschaft wurde beobachtet, wenn Bilayer Fl&uuml;ssigkeit und Zusammensetzung, bzw. durch Temperatur und verschiedenen Cholesterin-Konzentrationen ge&auml;ndert wurden (15 % &lt; oder Chol = &lt; oder = 25 %). Solche &Auml;nderungen f&uuml;hrten zu einer mehr als Verdoppelung in der Breite der Fusion Energiebarriere f&uuml;r Ei PC und 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine schwimmende Doppelschichten. Der Zusatz von 25 % Cholesterin zu PC-Doppelschichten Ei erh&ouml;ht die Aktivierungsenergie von ca. 1,0 k (B) T im Vergleich zu Doppelschichten mit Ei PC allein. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Ausweitung der Energiebarriere und somit Reduzierung der seine Neigung Membrane Fusion erleichtert.

Rasterkraft-Mikroskop-Studien der Verschmelzung von schwimmenden Lipid-Doppelschichten.

Questo studio ha studiato la fusione di apposite bilayer galleggiante di uovo L-alfa-fosfatidilcolina (PC uovo) o 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine. Misurazioni microscopio atomico della forza delle forze di fusione sotto tassi di compressione differenti sono state acquisite per rivelare il panorama energetico del processo di fusione sotto temperatura e composizione lipidica varia. Tra tassi di compressione di circa 1000 e circa 100.000 pN/s, forze applicate nella gamma da circa 100 a circa 500 pN portato a fusione di galleggiante fosfolipidici. Nostre misurazioni microscopio atomico della forza ha indicato che una barriera di energia principale dominato il processo di fusione. Gli spettri acquisiti forza dinamica erano montare con un semplice modello basato sulla teoria dello stato di transizione con il presupposto che l&#39;attivazione di fusione potenziale &egrave; lineare. Un cambiamento significativo nel paesaggio energia &egrave; stato osservato quando fluidit&agrave; del doppio strato e la composizione sono stati modificati, rispettivamente, di temperatura e le concentrazioni di colesterolo diversi (15% &lt; o = chol &lt; o = 25%). Tali modifiche ha provocato un pi&ugrave; di duplice aumento della larghezza della barriera di energia di fusione per uovo PC e 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine fosfolipidici galleggiante. L&#39;aggiunta di colesterolo 25% a uovo bilayer PC aumentato l&#39;energia di attivazione di circa 1.0 k (B) T rispetto a quello del bilayer con uovo PC da solo. Questi risultati rivelano che allargamento della barriera di energia e di conseguenza riduzione del relativo pendio facilitato fusione di membrana.

Studi di forza atomica microscopio della fusione del galleggiante lipidici.

&#x5375; L-&alpha;-&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30C1;&#x30B8;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3; &#xFF08;PC &#x306E;&#x5375;&#xFF09; &#x3084; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine &#x306E;&#x6D6E;&#x52D5;&#x819C; apposing &#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x529B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x5727;&#x7E2E;&#x7387;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x8A08;&#x6E2C;&#x878D;&#x5408;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x8102;&#x8CEA;&#x7D44;&#x6210;&#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x5730;&#x5F62;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CB7;&#x53CE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5727;&#x7E2E;&#x7387;&#x306E;&#x7D04; 1000&#x5E74; &#xFF5E; &#x7D04; 100,000 pN/&#x79D2;&#x7D04; 500 pN &#x7D04; 100 &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x5FDC;&#x7528;&#x529B;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x878D;&#x5408;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x53D6;&#x5F97;&#x3057;&#x305F;&#x529B;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x9077;&#x79FB;&#x72B6;&#x614B;&#x7406;&#x8AD6;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x304C;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x524D;&#x63D0;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x30D4;&#x30C3;&#x30BF;&#x30EA;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306E;&#x6D41;&#x52D5;&#x6027;&#x3068;&#x7D44;&#x6210;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3068;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x98A8;&#x666F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F; (15% &lt; &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x54F2; = &lt; &#x307E;&#x305F;&#x306F; = 25%)&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x306E; PC &#x3068; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine &#x6D6E;&#x52D5;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x5E45;&#x306E; 2 &#x500D;&#x5897;&#x52A0;&#x3088;&#x308A;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;PC &#x819C;&#x3092;&#x5375;&#x306B; 25% &#x30B3;&#x30EC;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x6DFB;&#x52A0;&#x7D04; 1.0 k &#xFF08;B&#xFF09; &#x819C;&#x3068;&#x5375;&#x3060;&#x3051;&#x3067; PC &#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066; T &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x524A;&#x6E1B;&#x305D;&#x306E;&#x659C;&#x9762;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4FC3;&#x9032;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC0AC; &#xACC4;&#xB780; L &#xC54C;&#xD30C; phosphatidylcholine (&#xACC4;&#xB780; PC) &#xB610;&#xB294; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine&#xC758; &#xBD80;&#xB3D9; bilayers apposing&#xC758; &#xC735;&#xD569;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC555;&#xCD95; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD4E8;&#xC804; &#xC138;&#xB825;&#xC758; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xD48D;&#xACBD;&#xC744; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xC870;&#xC131;&#xACFC; &#xC628;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC735;&#xD569; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB97C; &#xC778;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC57D; 1000&#xC758; &#xC555;&#xCD95; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC57D; 100000 pN/s &#xC0AC;&#xC774;, &#xC57D; 100 &#xC57D; 500 pN &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; &#xD798; bilayers &#xBD80;&#xB3D9;&#xC758; &#xC735;&#xD569; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xCE21;&#xC815; &#xADF8; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xC9C0;&#xBC30; &#xD4E8;&#xC804; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC778;&#xC218; &#xB3D9;&#xC801; &#xD798; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC735;&#xD569; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xC120;&#xD615; &#xAC00;&#xC815; &#xC804;&#xC774; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC774;&#xB860;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB9DE;&#xAC8C; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xD48D;&#xACBD;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xB54C; bilayer &#xC720;&#xB3D9;&#xC131; &#xBC0F; &#xAD6C;&#xC131; &#xC218;&#xC815;, &#xAC01;&#xAC01;, &#xC628;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; (15% &lt; &#xCCA0; = &#xB610;&#xB294; &lt; &#xB610;&#xB294; = 25%). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC218;&#xC815; &#xACC4;&#xB780; PC &#xBC0F; 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine &#xBD80;&#xB3D9; bilayers &#xC735;&#xD569; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC758; &#xD3ED; 2 &#xC911; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. PC bilayers &#xACC4;&#xB780;&#xC744; &#xCF5C;&#xB808;&#xC2A4;&#xD14C;&#xB864; 25%&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xC57D; 1.0 k (B) T bilayers &#xACC4;&#xB780; &#xD63C;&#xC790; PC&#xC758; &#xADF8;&#xAC83;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC2AC;&#xB85C;&#xD504;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xACF5;&#xAC1C;.

&#xC9C0;&#xC9C8; bilayers &#xBD80;&#xB3D9;&#xC758; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xC5F0;&#xAD6C;.

Este estudio investig&oacute; la fusi&oacute;n de apposing flotantes bicapas de huevo L-alfa-fosfatidilcolina (PC de huevo) o 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine. Mediciones de microscopio de fuerza at&oacute;mica de fuerzas de fusi&oacute;n bajo tasas de compresi&oacute;n diferentes fueron adquiridas para descubrir el paisaje de la energ&iacute;a del proceso de fusi&oacute;n bajo temperatura y composici&oacute;n lip&iacute;dica variada. Entre las tasas de compresi&oacute;n de aproximadamente 1000 y aproximadamente 100.000 pN/s, fuerzas aplicadas en el rango de aproximadamente 100 a aproximadamente 500 pN dio lugar a la fusi&oacute;n de bicapas de flotaci&oacute;n. Nuestras mediciones de microscopio de fuerza at&oacute;mica indican que una barrera de energ&iacute;a principal dominado el proceso de fusi&oacute;n. Se ajustaron los espectros de fuerza din&aacute;mica adquirida con un modelo simple basado en la teor&iacute;a del estado de transici&oacute;n con la suposici&oacute;n de que la activaci&oacute;n de fusi&oacute;n potencial es lineal. Un cambio significativo en el panorama de la energ&iacute;a se observ&oacute; cuando fluidez de la bicapa y composici&oacute;n se modificaron, respectivamente, por la temperatura y las concentraciones de colesterol diferentes (15% &lt; o = chol &lt; o = 25%). Tales modificaciones resultaron en un m&aacute;s de doble aumento en la anchura de la barrera de la energ&iacute;a de fusi&oacute;n para huevo PC y bicapas flotantes 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine. La adici&oacute;n de colesterol de 25% a huevo bicapas de PC aument&oacute; la energ&iacute;a de activaci&oacute;n por aproximadamente 1.0 k (B) T comparada con la de bicapas con huevo PC solamente. Estos resultados revelan que ampliaci&oacute;n de la barrera de la energ&iacute;a y en consecuencia la reducci&oacute;n en su vertiente facilit&oacute; la fusi&oacute;n de la membrana.

Estudios de microscopio de fuerza at&oacute;mica de la fusi&oacute;n de bicapas lip&iacute;dicas de flotaci&oacute;n.

&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5BF9;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x86CB; L-&alpha;-&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x53CC;&#x5C42;&#x4F7F;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x8C31; N ethylmaleimide &#x654F;&#x611F;&#x56E0;&#x5B50;&#x9644;&#x4EF6;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;SNAP&#xFF09; &#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;&#x5708;&#x5957;&#xFF09; &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x529B;&#x538B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x4EE5;&#x63ED;&#x793A;&#x80FD;&#x6E90;&#x666F;&#x89C2;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x5173;&#x4E8E;&#x878D;&#x5408;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5355;&#x4E3B;&#x8981;&#x80FD;&#x6E90;&#x5C4F;&#x969C;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x7F3A;&#x5E2D;&#x4E0E;&#x5728;&#x573A;&#x7684;&#x5708;&#x5957;&#x53CC;&#x5C42;&#x8584;&#x819C;&#x4E2D;&#x3002;&#x4E0B;&#x538B;&#x7F29;&#xFF0C;&#x878D;&#x5408;&#x52A8;&#x6001;&#x529B;&#x8C31;&#x7684;&#x91CD;&#x5927;&#x4E0B;&#x884C;&#x8F6C;&#x53D8;&#x6307;&#x51FA;&#x540C;&#x6E90;&#x7684; v &#x548C; t &#x5708;&#x5957;&#x5728;&#x573A;&#x5BF9;&#x9762;&#x53CC;&#x5C42;&#x8584;&#x819C;&#x3002;&#x5E76;&#x5217;&#x53CC;&#x5C42;&#x8584;&#x819C;&#x7684;&#x56CA;&#x6CE1;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x819C;&#x86CB;&#x767D; (&#x978B;&#x9762;) &#x548C;&#x4E8C;&#x8FDB;&#x5236; syntaxin &#x548C;&#x5BF9;&#x9F50; 25 &#x5B58;&#x5728;&#x9020;&#x6210;&#x6F5C;&#x5728;&#x6D3B;&#x5316;&#x7684;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x7531;&#x5927;&#x7EA6; 1.3 k (B) T &#x548C; &gt; &#x4E8C;&#x6298;&#x589E;&#x52A0;&#x80FD;&#x91CF;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x5BBD;&#x5EA6;&#x3002;&#x6269;&#x5927;&#x80FD;&#x6E90;&#x5C4F;&#x969C;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x9677;&#x9631;&#x88AB;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E3A;&#x589E;&#x52A0;&#x5728;&#x819C;&#x7684;&#x53EF;&#x538B;&#x7F29;&#x6027;&#x6362;&#x53E5;&#x8BDD;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x66F4;&#x4FBF;&#x6377;&#x7684;&#x53CC;&#x5C42;&#x53D8;&#x5F62;&#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x538B;&#x7F29;&#x4E0B;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6709;&#x4EBA;&#x53EA;&#x7F51;&#x7F57;&#x4E86;&#x76EE;&#x524D;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53CC;&#x5C42;&#x8584;&#x819C;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x53E6;&#x5916;&#x7684;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x7684;&#x978B;&#x9762;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x59A8;&#x788D;&#x4E86;&#x4EA4;&#x4E92;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5BF9;&#x7ACB; v-&#x548C; t-&#x5708;&#x5957;&#xFF0C;&#x963B;&#x6B62;&#x8FD9;&#x79CD;&#x4FBF;&#x5229;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x53D7;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x53CD;&#x5BF9;&#x5708;&#x5957;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4FBF;&#x5229;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x7531;&#x4E0D;&#x7A33;&#x5B9A;&#x901A;&#x8FC7;&#x62C9;&#x52A8;&#x5176;&#x8DE8;&#x819C;&#x6BB5;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x538B;&#x7F29;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53D1;&#x73B0;&#x7F51;&#x7F57;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x63A5;&#x7740;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5927;&#x7EA6; 5 nm &#x6298;&#x53E0;&#x7684;&#x819C;&#xFF0C;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x5728;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#x7684; hemifused &#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3002;

&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5149;&#x8C31;&#x663E;&#x793A; hemifusion &#x4E2D;&#x95F4;&#x671F;&#x95F4;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N ethylmaleimide &#x654F;&#x611F;&#x56E0;&#x5B50;&#x9644;&#x4EF6;&#x86CB;&#x767D;&#x53D7;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

This study investigated the effect of soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor-attachment protein (SNAP) receptors (SNAREs) on the fusion of egg L-alpha-phosphatidylcholine bilayers using atomic force microscope (AFM) spectroscopy. AFM measurements of the fusion force under compression were acquired to reveal the energy landscape of the fusion process. A single main energy barrier governing the fusion process was identified in the absence and presence of SNAREs in the bilayers. Under compression, a significant downward shift in the fusion dynamic force spectrum was observed when cognate v- and t-SNAREs were present in the opposite bilayers. The presence of vesicle-associated membrane protein (VAMP) and binary syntaxin and SNAP 25 in the apposed bilayers resulted in a reduction in the height of the activation potential by approximately 1.3 k(B)T and a >2-fold increase in the width of the energy barrier. The widening of the energy barrier in the presence SNAREs is interpreted as an increase in the compressibility of the membranes, which translates to a greater ease in the bilayer deformation and subsequently the fusion of the membranes under compression. Facilitation of membrane fusion was observed only when SNAREs were present in both bilayers. Moreover, addition of the soluble cytoplasmic domain of VAMP, which interferes with the interaction between opposing v- and t-SNAREs, prevented such facilitation. These observations implicated the interaction between the cytoplasmic domains of opposing SNAREs in the observed fusion facilitation, possibly by destabilizing the bilayers through pulling on their transmembrane segments. Our AFM compression measurements revealed that SNARE-mediated membrane fusion proceeded through a sequence of two approximately 5 nm collapses of the membrane, an observation that is consistent with the existence of a hemifused state during the fusion process.

Atomic force microscope spectroscopy reveals a hemifusion intermediate during soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor-attachment protein receptors-mediated membrane fusion.

Cette &eacute;tude examine l&#39;effet des r&eacute;cepteurs solubles de la prot&eacute;ine (SNAP) sur les facteur-fixation de N-&eacute;thylmal&eacute;imide-sensibles (collets) sur la fusion des bicouches alpha-L-phosphatidylcholine d&#39;oeuf &agrave; l&#39;aide de la spectroscopie de force atomique (AFM) de microscope. Mesures de l&#39;AFM de la force de fusion sous compression ont &eacute;t&eacute; acquises pour r&eacute;v&eacute;ler le paysage &eacute;nerg&eacute;tique du processus de fusion. Une barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie principale unique r&eacute;gissant le processus de fusion a &eacute;t&eacute; identifi&eacute;e en absence et en pr&eacute;sence de pi&egrave;ges dans les bicouches. Sous compression, une &eacute;volution &agrave; la baisse significative dans le spectre de force dynamique de fusion a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e lorsque v et t-pi&egrave;ges apparent&eacute;s &eacute;taient pr&eacute;sents dans les bicouches oppos&eacute;es. La pr&eacute;sence de prot&eacute;ines associ&eacute;es aux v&eacute;sicules membranaires (VAMP) et binaire syntaxine et SNAP 25 dans les bicouches appos&eacute;es a entra&icirc;n&eacute; une r&eacute;duction de la hauteur de l&#39;activation du potentielle d&#39;environ 1,3 k (B) T et un &gt; augmentation 2 fois la largeur de la barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie. L&#39;&eacute;largissement de la barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie aux pr&eacute;sence de pi&egrave;ges est interpr&eacute;t&eacute; comme une augmentation dans la compressibilit&eacute; des membranes, qui se traduit par un plus grand confort dans la d&eacute;formation de la bicouche et par la suite de la fusion des membranes sous compression. Facilitation de la fusion membranaire a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e seulement lorsque pi&egrave;ges &eacute;taient pr&eacute;sents dans les bicouches. En outre, ajout du domaine cytoplasmique soluble de VAMP, qui interf&egrave;re avec l&#39;interaction entre adverse v - et t-SNAREs, a emp&ecirc;ch&eacute; cette facilitation. Ces observations mis en cause l&#39;interaction entre les domaines cytoplasmiques de s&#39;opposer &agrave; collets dans la facilitation de la fusion observ&eacute;e, &eacute;ventuellement par d&eacute;stabiliser les bicouches par tirant sur leurs segments transmembranaires. Nos mesures de compression AFM a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la fusion membranaire induite par le pi&egrave;ge s&#39;est d&eacute;roul&eacute; &agrave; travers une s&eacute;quence de deux effondrements de nm environ 5 de la membrane, une observation qui est compatible avec l&#39;existence d&#39;un &eacute;tat de hemifused au cours du processus de fusion.

Spectroscopie de microscopie de force atomique r&eacute;v&egrave;le une hemifusion interm&eacute;diaire pendant soluble sensible N-&eacute;thylmal&eacute;imide facteur-fixation prot&eacute;ique m&eacute;di&eacute;e par les r&eacute;cepteurs membranaires fusion.

Diese Studie untersucht die Auswirkungen von l&ouml;slichen N-Ethylmaleimid-Sensitive-Faktor-Anlage-Protein (SNAP) Rezeptoren (SNAREs) auf die Verschmelzung von Ei L-Alpha-Phosphatidylcholin Doppelschichten mit Rasterkraft-Mikroskop (AFM)-Spektroskopie. AFM-Messungen der Verschmelzung Kraft unter Kompression wurden erworben, um die Energielandschaft von den Fusionsprozess zu offenbaren. Eine einzelne wichtigste Energiebarriere, die EZB den Fusionsprozess wurde und Abwesenheit von SNAREs in den Doppelschichten identifiziert. Unter Komprimierung wurde deutlicher nach unten Verschiebung der Verschmelzung dynamische Kraft Spektrums beobachtet als verwandten v und t-SNAREs in der gegen&uuml;berliegenden Doppelschichten vorhanden waren. Das Vorhandensein von Vesikel-assoziiertes Membranprotein (VAMP) und bin&auml;re Syntaxin und SNAP-25 in die adaptiert Doppelschichten f&uuml;hrte zu einer Reduktion in der H&ouml;he der m&ouml;glichen Aktivierung von etwa 1,3 k (B) T und eine &gt; 2-fold Zunahme der Breite der Energiebarriere. Die Ausweitung des die Energiebarriere in Snaresinseln Pr&auml;senz wird als eine Erh&ouml;hung in die Kompressibilit&auml;t der Membranen, interpretiert was ein gr&ouml;&szlig;erer Leichtigkeit in die Bilayer-Verformung und sp&auml;ter die Fusion der Membranen unter Kompression bedeutet. Erleichterung der Membrane Fusion wurde beobachtet, nur, wenn der Kessel in beiden Doppelschichten vorhanden waren. Dar&uuml;ber hinaus verhindert die Erg&auml;nzung der l&ouml;slichen zytoplasmatischen Dom&auml;ne des VAMP, die die Interaktion zwischen gegnerischen V - und t-SNAREs, behindert solche Erleichterung. Diese Beobachtungen verwickelt die Interaktion zwischen den zytoplasmatischen Dom&auml;nen der gegnerischen SNAREs in der beobachteten Verschmelzung Facilitation, m&ouml;glicherweise durch die Doppelschichten durch Ziehen an ihren Transmembran-Segmenten zu destabilisieren. Unsere AFM Kompression Messungen ergeben, da&szlig; SNARE-vermittelte Membrane Fusion durch eine Abfolge von zwei ca. 5 nm Zusammenbr&uuml;che der Membran, eine Beobachtung, die die Existenz eines Hemifused Staates w&auml;hrend der Fusionsprozess entspricht.

Rasterkraft-Mikroskop Spektroskopie zeigt einen Hemifusion Mittelstufe w&auml;hrend l&ouml;sliche N-Ethylmaleimid-Sensitive Faktor-Anlage Protein-Rezeptoren vermittelte Membrane Fusion.

Questo studio ha studiato l&#39;effetto di solubile N-ethylmaleimide-sensibile fattore-attachment protein (SNAP) receptors (insidie) sulla fusione del bilayer uovo L-alfa-fosfatidilcolina usando la forza atomica (AFM) microscopio spettroscopia. Misure AFM della forza di fusione sotto compressione sono state acquisite per rivelare il panorama energetico del processo di fusione. Una barriera di energia principale singolo che regolano il processo di fusione &egrave; stata identificata in assenza che in presenza di insidie del bilayer. Sotto compressione, &egrave; stato osservato un significativo spostamento verso il basso nello spettro di forza dinamica fusione quando erano presenti nel bilayer opposto affine v - e t-SNAREs. La presenza della proteina di membrana la vescicola-associato (VAMP) e binario Sintaxina e SNAP 25 nel bilayer apposed ha portato a una riduzione dell&#39;altezza dell&#39;attivazione potenziale di circa 1.3 k (B) T e un &amp;gt; aumento 2 volte la larghezza della barriera di energia. L&#39;ampliamento della barriera energetica nelle insidie presenza viene interpretata come un aumento nella compressibilit&agrave; delle membrane, che si traduce in una maggiore facilit&agrave; nella deformazione doppio strato e, successivamente, la fusione delle membrane sotto compressione. Facilitazione della fusione della membrana &egrave; stata osservata solo quando le insidie erano presenti in entrambi fosfolipidici. Inoltre, aggiunta del dominio citoplasmatico solubile della VAMP, che interferisce con l&#39;interazione tra opposti v - e t-SNAREs, impedito tale agevolazione. Queste osservazioni implicato l&#39;interazione tra i domini citoplasmatici di opposte insidie nella facilitazione di fusione osservato, possibilmente da destabilizzare il bilayer attraverso tirando loro segmenti transmembrane. Nostre misurazioni di compressione AFM ha rivelato che la fusione di membrana SNARE-mediata ha proceduto attraverso una sequenza di due crolli circa 5 nm della membrana, un&#39;osservazione che &egrave; coerenza con l&#39;esistenza di uno stato hemifused durante il processo di fusione.

Spettroscopia di microscopio atomico della forza rivela un hemifusion intermedio durante la fusione del mediata da recettori di membrana di proteina del fattore-attaccamento di N-ethylmaleimide-sensitive solubile.

&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (AFM) &#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5375; L &alpha;-&#x30EA;&#x30F3;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N n-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (&#x308F;&#x306A;) &#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5727;&#x7E2E;&#x4E0B;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x529B;&#x306E; AFM &#x6E2C;&#x5B9A;&#x878D;&#x5408;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x5730;&#x5F62;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8CB7;&#x53CE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x878D;&#x5408;&#x904E;&#x7A0B;&#x3092;&#x7BA1;&#x7406;&#x3059;&#x308B; 1 &#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x7F60;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5727;&#x7E2E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x4E0B;&#x65B9;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x529B;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3068;&#x304D;&#x540C;&#x7A2E; v &#x3068; t &#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x7A4D;&#x5C64;&#x819C;&#x306E;&#x53CD;&#x5BFE;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EC;&#x30ED;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#x819C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;&#x30D0;&#x30F3;&#x30D7;&#xFF09; &#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30EA; &#x30B7;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; &#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7; 25 &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3067;&#x3001;&#x9AD8;&#x3055;&#x7D04; 1.3 k (B) T &#x4F4E;&#x4E0B;&#x3001;&#x76EE;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x5E45;&#x306E; 2 &#x500D;&#x5897;&#x52A0;&#x3002;&#x5B58;&#x5728;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3084;&#x3059;&#x304F;&#x4E8C;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306E;&#x5909;&#x5F62;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5727;&#x7E2E;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x5727;&#x7E2E;&#x6027;&#x3067;&#x89E3;&#x91C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x4FC3;&#x9032;&#x306E;&#x307F;&#x3068;&#x304D;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x7A4D;&#x5C64;&#x819C;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x9593;&#x53CD;&#x5BFE; v- &#x3068; t-&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3001;&#x59A8;&#x3052;&#x5996;&#x5A66;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x5186;&#x6ED1;&#x5316;&#x9632;&#x6B62;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306E;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x4FC3;&#x9032;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x5F15;&#x3063;&#x5F35;&#x3063;&#x3066;&#x819C;&#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x53CD;&#x5BFE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5727;&#x7E2E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x904E;&#x7A0B; hemifused &#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7D04; 5 nm &#x5D29;&#x58CA;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x9032;&#x3093;&#x3060;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5206;&#x5149;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N n-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x4E2D;&#x306B;&#x4E2D;&#x9593;&#x306E; hemifusion &#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC870;&#xC0AC; &#xACC4;&#xB780; L &#xC54C;&#xD30C; phosphatidylcholine bilayers &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM) &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; N ethylmaleimide &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;-&#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C; (&#xC2A4;&#xB0C5;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (SNAREs)&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;. &#xC555;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD4E8;&#xC804; &#xD3EC;&#xC2A4;&#xC758; AFM &#xCE21;&#xC815; &#xC735;&#xD569; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xD48D;&#xACBD; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB97C; &#xC778;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC740; &#xD4E8;&#xC804; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB9AC; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC640; Snares&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; bilayers&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC555;&#xCD95;, &#xC544;&#xB798; &#xD4E8;&#xC804; &#xB3D9;&#xC801; &#xD798; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xD558;&#xD5A5; &#xBCC0;&#xD654; &#xB3D9;&#xC871; v &#xBC0F; t SNAREs &#xBC18;&#xB300; bilayers&#xC5D0; &#xC788;&#xB358; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. Apposed bilayers&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xB9C9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xBC40;&#xD30C;&#xC774;&#xC5B4;)&#xC640; &#xC774;&#xC9C4; syntaxin &#xC2A4;&#xB0C5; 25&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC57D; 1.3 k (B) T &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB192;&#xC774; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xACE0;&#xB294; &amp;gt; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC758; &#xD3ED; 2-fold &#xC99D;&#xAC00;. &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC774; &#xC874;&#xC7AC; Snares&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xB300; &#xBCC0;&#xD658; bilayer &#xBCC0;&#xD615; &#xBC0F; &#xC555;&#xCD95;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xB354; &#xC27D;&#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xACE0; &#xB9C9;&#xC758; &#xC555;&#xCD95; &#xC131;&#xC5D0; &#xC99D;&#xAC00;&#xB85C; &#xD574;&#xC11D; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC758; &#xCD09;&#xC9C4; SNAREs &#xD588;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB450; bilayers&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xB54C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0C1;&#xD638; &#xAC04;&#xC758; &#xBC18;&#xB300; v-&#xBC0F; t-SNAREs, &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xBC40;&#xD30C;&#xC774;&#xC5B4;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC19;&#xC740; &#xCD09;&#xC9C4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; bilayers &#xBD88;&#xC548;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xC735;&#xD569; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC5D0; SNAREs &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xBC18;&#xB300; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; AFM &#xC555;&#xCD95; &#xCE21;&#xC815; &#xBC1D;&#xD600; &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xC7AC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; hemifused &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xCE21;&#xC758; &#xB450; &#xC57D; 5 nm &#xBD95;&#xAD34;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC9C4;&#xD589; &#xB410;&#xB2E4;.

&#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559; hemifusion&#xC744; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; N ethylmaleimide &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xCCA8;&#xBD80; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;-&#xC911;&#xC7AC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xC911; &#xC911;&#xAC04;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;.

Este estudio investig&oacute; el efecto de receptores sensibles a N-etilmaleimida factor-accesorio prote&iacute;na (SNAP) solubles (trampas) en la fusi&oacute;n de bicapas de huevo L-alfa-fosfatidilcolina usando la espectroscopia de fuerza at&oacute;mica (AFM) del microscopio. Mediciones de AFM de la fuerza de la fusi&oacute;n bajo compresi&oacute;n fueron adquiridas para descubrir el paisaje de la energ&iacute;a del proceso de fusi&oacute;n. Una barrera de energ&iacute;a principal solo que rigen el proceso de fusi&oacute;n fue identificada en la ausencia y la presencia de trampas en las bicapas. Bajo compresi&oacute;n, se observ&oacute; un cambio significativo hacia abajo en el espectro de la fuerza din&aacute;mica de fusi&oacute;n cuando estaban presentes en los opuesto bicapas cognado v - y t-SNAREs. La presencia de la prote&iacute;na de membrana asociada a ves&iacute;culas (VAMP) y sintaxina binario y SNAP 25 en las aposici&oacute;n bicapas result&oacute; en una reducci&oacute;n en la altura de la activaci&oacute;n del potencial de aproximadamente 1.3 k (B) T y un &gt; doble aumento en la anchura de la barrera de la energ&iacute;a. La ampliaci&oacute;n de la barrera de la energ&iacute;a en las trampas de presencia se interpreta como un aumento en la compresibilidad de las membranas, que se traduce en una mayor facilidad en la deformaci&oacute;n de la bicapa y posteriormente la fusi&oacute;n de las membranas bajo compresi&oacute;n. Facilitaci&oacute;n de la fusi&oacute;n de la membrana se observ&oacute; s&oacute;lo cuando trampas estaban presentes en ambos bicapas. Por otra parte, adem&aacute;s del dominio citopl&aacute;smico soluble de VAMP, que interfiere con la interacci&oacute;n entre oposici&oacute;n v - y t-SNAREs, impidieron tal facilitaci&oacute;n. Estas observaciones hab&iacute;an implicado la interacci&oacute;n entre los dominios citoplasm&aacute;ticos de oposici&oacute;n trampas en la facilitaci&oacute;n de fusi&oacute;n observada, posiblemente por desestabilizar las bicapas a trav&eacute;s de sus segmentos transmembrana. Nuestras medidas de compresi&oacute;n de AFM revelaron que la fusi&oacute;n de membrana mediada por trampa procedi&oacute; a trav&eacute;s de una secuencia de dos colapsos de nm aproximadamente 5 de la membrana, una observaci&oacute;n que es consistente con la existencia de un estado hemifused durante el proceso de fusi&oacute;n.

Espectroscopia de microscopio de fuerza at&oacute;mica revela un hemifusion intermedio durante soluble fusi&oacute;n de membrana mediada por receptores sensibles a N-etilmaleimida factor-accesorio prote&iacute;na.

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&#x62C9;&#x529B;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5708;&#x5957;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x819C; hemifusion&#x3002;

In biological systems, membrane fusion is mediated by specialized proteins. Although soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein (SNAP) receptors (SNAREs) provide the minimal molecular machinery required to drive membrane fusion, the precise mechanism for SNARE-mediated fusion remains to be established. Here, we used atomic force microscope (AFM) spectroscopy to determine whether the pulling force generated by interacting SNAREs is directly coupled to membrane fusion. The mechanical strength of the SNARE binding interaction was determined by single molecule force measurements. It was revealed that the forced unbinding of the SNARE complex formed between opposing (trans) bilayers involves two activation barriers; where the steep inner barrier governs the transition from the bound to an intermediate state and the outer barrier governs the transition between the intermediate and the unbound state. Moreover, truncation of either SNAP-25 or VAMP 2 reduced the slope of the inner barrier significantly and, consequently, reduced the pulling strength of the SNARE complex; thus, suggesting that the inner barrier determines the binding strength of the SNARE complex. In parallel, AFM compression force measurements revealed that truncated SNAREs were less efficient than native SNAREs in facilitating hemifusion of the apposed bilayers. Together, these findings reveal a mechanism by which a pulling force generated by interacting trans-SNAREs reduces the slope of the hemifusion barrier and, subsequently, facilitates hemifusion and makes the membranes more prone to fusion.

Pulling force generated by interacting SNAREs facilitates membrane hemifusion.

Dans les syst&egrave;mes biologiques, la fusion membranaire est m&eacute;di&eacute;e par les prot&eacute;ines sp&eacute;cialis&eacute;es. Bien que les r&eacute;cepteurs prot&eacute;iques (SNAP) solubles sensible N-&eacute;thylmal&eacute;imide facteur accessoire (collets) offrent la machinerie mol&eacute;culaire minimale n&eacute;cessaire &agrave; la fusion membranaire en voiture, le m&eacute;canisme pr&eacute;cis pour SNARE-mediated fusion reste &agrave; &eacute;tablir. Ici, nous avons utilis&eacute; la spectroscopie de force atomique (AFM) de microscope pour d&eacute;terminer si la force de traction g&eacute;n&eacute;r&eacute;e par l&#39;interactions SNAREs est directement coupl&eacute;e &agrave; la fusion membranaire. La r&eacute;sistance m&eacute;canique de l&#39;interaction de liaison SNARE a &eacute;t&eacute; d&eacute;termin&eacute;e par la mesure de la force seule mol&eacute;cule. Il a &eacute;t&eacute; r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la s&eacute;paration forc&eacute;e de la complexe SNARE form&eacute; entre oppos&eacute;es (trans) bicouches implique deux barri&egrave;res d&#39;activation ; o&ugrave; la barri&egrave;re interne raide r&eacute;git le passage de la limite &agrave; un &eacute;tat interm&eacute;diaire et la barri&egrave;re externe r&eacute;git la transition entre l&#39;interm&eacute;diaire et l&#39;&Eacute;tat ind&eacute;pendant. En outre, troncature de la SNAP-25 ou VAMP 2 consid&eacute;rablement r&eacute;duit la pente de la barri&egrave;re interne et, par cons&eacute;quent, r&eacute;duit la force de traction de la caisse claire complexe ; ainsi, ce qui sugg&egrave;re que la barri&egrave;re interne d&eacute;termine la force de la liaison du complexe SNARE. En parall&egrave;le, les mesures de force de compression AFM a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que collets tronqu&eacute;es &eacute;taient moins efficaces que les collets natives pour faciliter la hemifusion des bicouches appos&eacute;es. Ensemble, ces r&eacute;sultats r&eacute;v&egrave;lent un m&eacute;canisme par lequel une force de traction g&eacute;n&eacute;r&eacute;e par l&#39;interactions trans-collets r&eacute;duit la pente de la barri&egrave;re hemifusion et, par la suite, facilite les hemifusion et rend les membranes plus sujettes &agrave; la fusion.

Tirant la force g&eacute;n&eacute;r&eacute;e par l&#39;interactions des collets facilite la membrane hemifusion.

In biologischen Systemen ist die Membrane Fusion durch spezielle Proteine vermittelt. Obwohl l&ouml;sliche N-Ethylmaleimid-Sensitive Faktor-Anlage-Protein (SNAP) Rezeptoren (SNAREs) die minimale molekulare Maschinen, die mit dem Membrane Fusion n&ouml;tig bieten, bleibt der genaue Mechanismus f&uuml;r SNARE-vermittelte Fusion hergestellt werden. Hier haben wir Rasterkraft-Mikroskop (AFM)-Spektroskopie verwendet, um festzustellen, ob die Zugkraft von interagierenden Ozon erzeugt direkt zu Membrane Fusion gekoppelt ist. Die mechanische Festigkeit der SNARE Bindung Interaktion wurde durch Messungen der Einzelmolek&uuml;l-Kraft bestimmt. Es wurde aufgedeckt, dass die erzwungenen Bindung von der SNARE-Komplex gebildet zwischen gegnerischen Doppelschichten (Trans) zwei Aktivierung Schranken umfasst; wo die steile innere Schranke regelt den &Uuml;bergang von der Grenze zu einem Zwischenzustand und die &auml;u&szlig;ere Barriere regelt den &Uuml;bergang zwischen der Mittelstufe und der ungebundenen Zustand. Dar&uuml;ber hinaus, Abschneiden von SNAP-25 oder VAMP 2 die Steigung der innere Barriere deutlich reduziert und daher reduziert die ziehende St&auml;rke der SNARE-Komplex; also darauf hindeutet, dass die innere Barriere die Bindungsst&auml;rke des SNARE-Komplexes bestimmt. Gleichzeitig ergab AFM Kompression Kraft Messungen, dass abgeschnittene SNAREs weniger effizient als native SNAREs Hemifusion von adaptiert Doppelschichten zu erleichtern. Zusammen decken diese Erkenntnisse einen Mechanismus, durch den eine Zugkraft von interagierenden Trans-SNAREs generiert reduziert die Neigung der Hemifusion Barriere und anschlie&szlig;end Hemifusion erleichtert und macht die Membranen anf&auml;lliger f&uuml;r die Verschmelzung.

Membran Hemifusion erleichtert die Zugkraft von interagierenden SNAREs generiert.

Nei sistemi biologici, fusione di membrana &egrave; mediata da proteine specializzate. Anche se solubili N-ethylmaleimide-sensibile fattore accessorio proteina (SNAP) recettori (insidie) forniscono macchine molecolari minima necessaria alla fusione di membrana in auto, il meccanismo preciso per fusione SNARE-mediata rimane essere stabilito. Qui, abbiamo utilizzato la spettroscopia di forza atomica (AFM) microscopio per determinare se la forza tira generata da insidie interagenti &egrave; direttamente accoppiata alla fusione di membrana. La resistenza meccanica dell&#39;interazione associazione SNARE &egrave; stata determinata da misurazioni di forza singola molecola. Fu rivelato che la separazione forzata del complesso SNARE formata tra opposte fosfolipidici (trans) coinvolge due barriere di attivazione; dove la barriera interna ripida governa la transizione dal limite di uno stato intermedio e la barriera esterna governa la transizione tra l&#39;intermedio e lo stato non associato. Inoltre, troncamento di SNAP-25 o VAMP 2 ridotto significativamente la pendenza della barriera interna e, di conseguenza, ridotto la forza tira del laccio complessa; cos&igrave;, suggerendo che la barriera interna determina la forza vincolante del complesso SNARE. In parallelo, le misure di forza di compressione AFM ha rivelato che troncati insidie erano meno efficienti SNAREs nativo nel facilitare hemifusion del bilayer apposed. Insieme, questi risultati rivelano un meccanismo mediante il quale una forza tira generata dall&#39;interazione trans-SNAREs riduce la pendenza della barriera hemifusion e, successivamente, facilita il hemifusion e rende pi&ugrave; inclini alla fusione delle membrane.

Tirando la forza generata da insidie interazione facilita la membrana hemifusion.

&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7279;&#x6B8A;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N n-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (&#x308F;&#x306A;) &#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x6B8B;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8A98;&#x60D1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5F15;&#x304D;&#x529B;&#x304C;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (AFM) &#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x7D50;&#x5408;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x529B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;(&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;) &#x819C;&#x306B;&#x53CD;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x9593;&#x5F62;&#x6210;&#x5F37;&#x5236;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x30A2;&#x30F3;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; 2 &#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x969C;&#x58C1;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6025;&#x306A;&#x5185;&#x90E8;&#x969C;&#x58C1;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x304B;&#x3089;&#x4E2D;&#x9593;&#x72B6;&#x614B;&#x3068;&#x5916;&#x90E8;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x4E2D;&#x9593;&#x3068;&#x975E;&#x9023;&#x7D50;&#x72B6;&#x614B;&#x9593;&#x306E;&#x9077;&#x79FB;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7; 25 &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x9B54;&#x6027;&#x306E;&#x5973; 2 &#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x5185;&#x90E8;&#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x659C;&#x9762;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x5F15;&#x3063;&#x5F35;&#x308A;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x969C;&#x58C1; SNARE &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E26;&#x5217;&#x306B; AFM &#x5727;&#x7E2E;&#x529B;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x5207;&#x308A;&#x6368;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306B;&#x3042;&#x3066;&#x308B;&#x819C;&#x306E; hemifusion &#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x308F;&#x306A;&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304C;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9; &#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F15;&#x304D;&#x529B; hemifusion &#x969C;&#x58C1;&#x306E;&#x659C;&#x9762;&#x3092;&#x4F4E;&#x6E1B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;hemifusion &#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;

&#x727D;&#x5F15;&#x529B;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x8A98;&#x60D1;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C; hemifusion &#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;, &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD4E8;&#xC804; &#xD2B9;&#xC218; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC131; N ethylmaleimide &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xCCA8;&#xBD80; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (&#xC2A4;&#xB0C5;) &#xC218;&#xC6A9; (SNAREs) &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xAE30;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;, &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xC7AC; &#xD4E8;&#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC124;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xB9C9; &#xC735;&#xD569;&#xC744; SNAREs &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB2F9;&#xAE30; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xC9C1;&#xC811; &#xACB0;&#xD569; &#xC5EC;&#xBD80; &#xD655;&#xC778;&#xC744; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM) &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC62C; &#xBB34; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xAC15;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xD798;&#xC744; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8; &#xC7A5;&#xBCBD;; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB450; &#xD3EC;&#xD568; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xAC15;&#xC81C; &#xD574;&#xC81C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC62C; &#xBB34;&#xC758; &#xBC18;&#xB300; (&#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;) bilayers &#xC0AC;&#xC774; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4; &#xC5B4;&#xB514; &#xAC00;&#xD30C;&#xB978; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC7A5;&#xBCBD; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC911;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBC0F; &#xC678;&#xBD80; &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB97C; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xD658; &#xC911;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC5B8;&#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC804;&#xD658;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC798;&#xB77C;&#xB0B4;&#xAE30; &#xC2A4;&#xB0C5;-25 &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; VAMP 2&#xC758; &#xB0B4;&#xBD80; &#xBCBD;&#xC758; &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;&#xB97C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F;, &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;; &#xC62C; &#xBB34;&#xC758; &#xB2F9;&#xAE30; &#xAC15;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xB0B4;&#xBD80; &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xC758; &#xC62C; &#xBB34; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC15;&#xB3C4; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xC790;. &#xBCD1;&#xB82C;&#xB85C;, AFM &#xC555;&#xCD95; &#xD798;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xC798;&#xB9B0;&#xB41C; SNAREs apposed bilayers&#xC758; hemifusion&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; SNAREs &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBE44;&#xD6A8;&#xC728;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;&#xACE0; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xACF5;&#xAC1C;&#xB294; &#xB2F9;&#xAE30; &#xD798; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; Snares&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; hemifusion &#xBC29; &#xBCBD;&#xC758; &#xAE30;&#xC6B8;&#xAE30;, &#xADF8; &#xD6C4;, hemifusion&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

&#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; hemifusion &#xC6A9;&#xC774; SNAREs &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xD798;&#xC774; &#xACA0; &#xC9C0;.

En los sistemas biol&oacute;gicos, fusi&oacute;n de la membrana est&aacute; mediada por prote&iacute;nas especializadas. Aunque los receptores de prote&iacute;na (SNAP) sensibles a N-etilmaleimida factor accesorio (trampas) solubles ofrecen la maquinaria molecular m&iacute;nima necesaria para la fusi&oacute;n de membrana en coche, el mecanismo exacto para la fusi&oacute;n mediada por trampa queda establecerse. Aqu&iacute;, utilizamos espectroscopia de fuerza at&oacute;mica (AFM) del microscopio para determinar si la fuerza de tracci&oacute;n generada por la interacci&oacute;n de trampas se acopla directamente a la fusi&oacute;n de la membrana. La resistencia mec&aacute;nica de la interacci&oacute;n de atascamiento de la trampa fue determinada por las medidas de fuerza sola mol&eacute;cula. Se supo que la desvinculaci&oacute;n forzada de la trampa compleja formado entre opuestos (trans) bicapas implica dos barreras de activaci&oacute;n; donde la barrera interior escarpada rige la transici&oacute;n desde el l&iacute;mite a un estado intermedio y la barrera exterior rige la transici&oacute;n entre el intermedio y el estado independiente. Por otra parte, el truncamiento de SNAP-25 o VAMP 2 redujo significativamente la pendiente de la barrera interna y, en consecuencia, reduce la fuerza de tracci&oacute;n de la trampa compleja; por lo tanto, lo que sugiere que la barrera interna determina la fuerza del complejo SNARE. Paralelamente, las medidas de fuerza de compresi&oacute;n de AFM revelaron que truncado trampas eran menos eficientes que los nativos trampas para facilitar el hemifusion de las aposici&oacute;n bicapas. Juntos, estos resultados revelan un mecanismo por el cual una fuerza de tracci&oacute;n generada por la interacci&oacute;n de trans-trampas reduce la pendiente de la barrera hemifusion y, posteriormente, facilita hemifusion y hace que las membranas m&aacute;s propensos a la fusi&oacute;n.

Tira de la fuerza generada por la interacci&oacute;n de trampas facilita la membrana hemifusion.

Fusion membranaire est entra&icirc;n&eacute;e par les prot&eacute;ines sp&eacute;cialis&eacute;es qui r&eacute;duisent la peine d&#39;&eacute;nergie libre pour le processus de fusion. R&eacute;cepteurs solubles de la prot&eacute;ine (SNAP) sur les facteur-fixation de N-&eacute;thylmal&eacute;imide-sensibles (collets) la m&eacute;diation dans les neurones et les cellules s&eacute;cr&eacute;trices, la fusion des v&eacute;sicules avec la membrane plasmique lors de publication de contenu v&eacute;siculaire. Bien que, les pi&egrave;ges ont &eacute;t&eacute; largement accept&eacute;es comme des instruments minime &agrave; la fusion membranaire, le m&eacute;canisme sp&eacute;cifique utilis&eacute; pour la fusion membranaire induite par le SNARE reste un sujet de recherche active. Nous r&eacute;sumons ici, des d&eacute;couvertes r&eacute;centes bas&eacute;es sur la mesure de la force acquise dans un nouveau syst&egrave;me exp&eacute;rimental utilisant la spectroscopie de force force atomique (AFM) de microscope pour enqu&ecirc;ter sur les m&eacute;canismes de fusion membranaire et le r&ocirc;le des collets en facilitant la membrane hemifusion au cours de la fusion induite par la caisse claire. Dans ce syst&egrave;me, les bicouches lipidiques sans prot&eacute;ine et SNARE-reconstitu&eacute;e sont forment sur l&#39;oppos&eacute; des substrats (trans) et les forces n&eacute;cessaires pour provoquer la fusion et hemifusion de la membrane ou lors de la dissociation simple v- / complexes t-SNARE sont mesur&eacute;es. Les r&eacute;sultats obtenus prouvent un m&eacute;canisme par lequel la force de traction g&eacute;n&eacute;r&eacute;e par l&#39;interactions trans-SNAREs offre une proximit&eacute; critique entre les membranes et d&eacute;stabilise les bicouches sur les sites de la fusion par l&#39;&eacute;largissement de la barri&egrave;re d&#39;&eacute;nergie hemifusion et par cons&eacute;quent rendre les membranes plus sujettes &agrave; la fusion.

&Eacute;tude du m&eacute;canisme de Fusion de Membrane induite par le collet &agrave; l&#39;aide de la microscopie &agrave; Force atomique.

&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x662F;&#x7531;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x51CF;&#x5C11;&#x81EA;&#x7531;&#x80FD;&#x6E90;&#x5211;&#x7F5A;&#x4E3A;&#x878D;&#x5408;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;N ethylmaleimide &#x654F;&#x611F;&#x56E0;&#x5B50;&#x9644;&#x4EF6;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; &#xFF08;SNAP&#xFF09; &#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;&#x5708;&#x5957;&#xFF09; &#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x89E3;&#x671F;&#x95F4;&#x6C34;&#x75B1;&#x5185;&#x5BB9;&#x53D1;&#x5E03;&#x4E0E;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x56CA;&#x6CE1;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5708;&#x5957;&#x5DF2;&#x88AB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x63A5;&#x53D7;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x6700;&#x5C0F;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#xFF0C;&#x7F51;&#x7F57;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6D3B;&#x8DC3;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x603B;&#x7ED3;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#xFF0C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x529B;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4F7F;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C; &#xFF08;AFM&#xFF09; &#x529B;&#x8C31;&#x5728;&#x671F;&#x95F4;&#x7F51;&#x7F57;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x878D;&#x5408;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x819C; hemifusion &#x8C03;&#x67E5;&#x7684;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x9677;&#x9631;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x65E0;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x7F51;&#x7F57;&#x91CD;&#x7EC4;&#x8102;&#x53CC;&#x5C42;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0A;&#x5BF9;&#x9762; (&#x8DE8;) &#x57FA;&#x677F;&#x548C;&#x90E8;&#x961F;&#x9700;&#x8981;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x819C; hemifusion &#x548C;&#x878D;&#x5408;&#xFF0C;&#x6216;&#x8981;&#x89E3;&#x9664;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5355;&#x4E2A; v-/ t &#x7F51;&#x7F57;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x83B7;&#x53D6;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x8DE8;&#x5708;&#x5957;&#x7684;&#x62C9;&#x529B;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5173;&#x952E;&#x63A5;&#x8FD1;&#x819C;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5E76;&#x901A;&#x8FC7;&#x6269;&#x5927; hemifusion &#x80FD;&#x91CF;&#x5C4F;&#x969C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x7834;&#x574F;&#x878D;&#x5408;&#x5730;&#x70B9;&#x53CC;&#x5C42;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x5708;&#x5957;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;

Membrane fusion is driven by specialized proteins that reduce the free energy penalty for the fusion process. In neurons and secretory cells, soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor-attachment protein (SNAP) receptors (SNAREs) mediate vesicle fusion with the plasma membrane during vesicular content release. Although, SNAREs have been widely accepted as the minimal machinery for membrane fusion, the specific mechanism for SNARE-mediated membrane fusion remains an active area of research. Here, we summarize recent findings based on force measurements acquired in a novel experimental system that uses atomic force microscope (AFM) force spectroscopy to investigate the mechanism(s) of membrane fusion and the role of SNAREs in facilitating membrane hemifusion during SNARE-mediated fusion. In this system, protein-free and SNARE-reconstituted lipid bilayers are formed on opposite (trans) substrates and the forces required to induce membrane hemifusion and fusion or to unbind single v-/t-SNARE complexes are measured. The obtained results provide evidence for a mechanism by which the pulling force generated by interacting trans-SNAREs provides critical proximity between the membranes and destabilizes the bilayers at fusion sites by broadening the hemifusion energy barrier and consequently making the membranes more prone to fusion.

Investigation of SNARE-Mediated Membrane Fusion Mechanism Using Atomic Force Microscopy.

Membrane Fusion ist durch spezielle Proteine gesteuert, der die freie Energie-Strafe f&uuml;r den Fusionsprozess zu reduzieren. In Neuronen und sekretorischen Zellen vermitteln l&ouml;sliche N-Ethylmaleimid-Sensitive-Faktor-Anlage-Protein (SNAP) Rezeptoren (SNAREs) des Vesicle Fusion mit der Plasmamembran w&auml;hrend vesikul&auml;ren Content-Release. Obwohl, SNAREs, die weithin als die minimale Maschinen f&uuml;r Membrane Fusion angenommen worden sind, bleibt der spezifische Mechanismus f&uuml;r SNARE-vermittelte Membrane Fusion ein aktives Gebiet der Forschung. Hier fassen wir die j&uuml;ngsten Erkenntnisse basieren auf Messungen der Kraft erwarb eine neuartige experimentelle System, das Rasterkraft-Mikroskop (AFM)-Kraft-Spektroskopie verwendet, um die Mechanismen der Membrane Fusion und die Rolle der SNAREs untersuchen Membran Hemifusion w&auml;hrend SNARE-vermittelte Verschmelzung zu erleichtern. In diesem System proteinfreie und SNARE-rekonstituiert Lipid-Doppelschichten bilden sich am gegen&uuml;berliegenden (Trans) Substrate und die Kr&auml;fte, die ben&ouml;tigt Membran Hemifusion und Fusion zu veranlassen oder um einzelne V - Bindung / t-SNARE-komplexe werden gemessen. Die erzielten Ergebnisse belegen einen Mechanismus, durch den die Zugkraft von interagierenden Trans-SNAREs generiert enth&auml;lt kritische N&auml;he zwischen den Membranen und destabilisiert die Doppelschichten an Fusion-Standorten durch Verbreiterung der Energiebarriere Hemifusion und folglich machen die Membranen anf&auml;lliger f&uuml;r Fusion.

Untersuchung der SNARE-vermittelte Membrane Fusion Mechanismus mit Rasterkraftmikroskopie.

Fusione della membrana &egrave; guidato da speciali proteine che riducono la pena di energia libera per il processo di fusione. In neuroni e cellule secretorie, solubile N-ethylmaleimide-sensibile fattore-attachment protein (SNAP) receptors (insidie) mediano la fusione della vescicola con la membrana plasmatica durante il rilascio di contenuto vescicolare. Anche se, insidie sono stati ampiamente accettati come il minimo macchinari per la fusione della membrana, il meccanismo specifico per la fusione di membrana SNARE-mediata rimane un&#39;area attiva di ricerca. Qui, riassumiamo le recenti scoperte sulla base di misurazioni di forza acquisite in un innovativo sistema sperimentale che utilizza spettroscopia di forza forza atomica (AFM) microscopio per indagare i meccanismi comprendono di fusione di membrana e il ruolo di insidie nel facilitare la membrana hemifusion durante la fusione SNARE-mediata. In questo sistema, privo di proteine e SNARE-ricostituito lipidici si formano su substrati (trans) opposti e le forze necessarie per indurre la fusione e la membrana hemifusion o per disassociare singolo v- / complessi t-SNARE sono misurati. I risultati ottenuti forniscono la prova per un meccanismo mediante il quale la forza tira generata dall&#39;interazione trans-SNAREs fornisce critica vicinanza tra le membrane e destabilizza il bilayer presso siti di fusione ampliando la barriera di energia di hemifusion e di conseguenza rendendo le membrane pi&ugrave; incline alla fusione.

Indagine del meccanismo di fusione membrana SNARE-mediata mediante microscopia a forza atomica.

&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x878D;&#x5408;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x81EA;&#x7531;&#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x306E;&#x30DA;&#x30CA;&#x30EB;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x5C02;&#x9580;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x99C6;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; N n-&#x30A8;&#x30C1;&#x30EB;&#x30DE;&#x30EC;&#x30A4;&#x30DF;&#x30C9;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (&#x30B9;&#x30CA;&#x30C3;&#x30D7;) &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; (&#x308F;&#x306A;) &#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x6642;&#x306B;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5E83;&#x304F;&#x53D7;&#x3051;&#x5165;&#x308C;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x7F60;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x6D3B;&#x767A;&#x306A;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1; (AFM) &#x529B;&#x5206;&#x5149;&#x6CD5;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x878D;&#x5408;&#x4E2D;&#x819C; hemifusion &#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x4E0A;&#x3067;&#x306E;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x53D6;&#x5F97;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x529B;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8981;&#x7D04;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x53CD;&#x5BFE; (&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;) &#x57FA;&#x677F;&#x3068;&#x819C;&#x306E; hemifusion &#x3068;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B; 1 &#x3064;&#x306E; v-&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3092;&#x89E3;&#x9664;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x529B;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x518D;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x8102;&#x8CEA;&#x4E8C;&#x91CD;&#x819C;&#x304C;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x308B;/t SNARE &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9; &#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F15;&#x304D;&#x529B;&#x306F;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x9593;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3001;hemifusion &#x30A8;&#x30CD;&#x30EB;&#x30AE;&#x30FC;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x62E1;&#x5927;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x4E0D;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B9;&#x30CD;&#x30A2;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x878D;&#x5408;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3002;

&#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xD4E8;&#xC804; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC790;&#xC720; &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xD615;&#xBC8C;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD2B9;&#xC218; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xBD84; &#xC140;, &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; N ethylmaleimide &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C;-&#xCCA8;&#xBD80; &#xD30C;&#xC77C; (&#xC2A4;&#xB0C5;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (SNAREs) &#xC911;&#xC7AC; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30; &#xD4E8;&#xC804;. SNAREs &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xAE30;&#xACC4;&#xB85C; &#xB110;&#xB9AC; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xC7AC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xD65C;&#xC131; &#xC601;&#xC5ED;&#xC744; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; (AFM) &#xD798; &#xBD84;&#xAD11;&#xD559;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD4E8;&#xC804; &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xC7AC; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C9; hemifusion &#xCD09;&#xC9C4;&#xC5D0; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804;&#xC758; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; SNAREs &#xC5ED;&#xD560; &#xC870;&#xC0AC; &#xC18C;&#xC124; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC778;&#xC218; &#xD798; &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC694;&#xC57D;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACE0; &#xC62C; &#xBB34; &#xC7AC;&#xAD6C;&#xC131; &#xC9C0;&#xC9C8; bilayers &#xB9C9; hemifusion&#xC640; &#xD4E8;&#xC804;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD574;&#xC81C; &#xD55C; v-&#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xB825;&#xACFC; &#xBC18;&#xB300; (&#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;) &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131;/t-&#xC62C; &#xBB34; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xCE21;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5BB;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; &#xB2F9;&#xAE30; &#xD798; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4; Snares&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xADFC;&#xC811;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; hemifusion &#xC5D0;&#xB108;&#xC9C0; &#xBC30;&#xB9AC;&#xC5B4;&#xB97C; &#xB300;&#xD3ED; &#xD655;&#xB300; &#xD558; &#xACE0; &#xACB0;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC735;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xD558; &#xC5EC; &#xD4E8;&#xC804; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; bilayers&#xB97C; destabilizes &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC62C; &#xBB34; &#xC911;&#xC7AC; &#xB9C9; &#xD4E8;&#xC804; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC870;&#xC0AC;.

Fusi&oacute;n de la membrana es conducida por prote&iacute;nas especializadas que reducen la pena para el proceso de fusi&oacute;n de energ&iacute;a libre. En las neuronas y c&eacute;lulas secretoras, receptores de prote&iacute;na (SNAP) factor-accesorio sensibles a N-etilmaleimida solubles (trampas) median fusi&oacute;n de la ves&iacute;cula con la membrana plasm&aacute;tica durante el lanzamiento de contenido vesicular. Aunque, trampas han sido ampliamente aceptados como la maquinaria m&iacute;nima para la fusi&oacute;n de la membrana, el mecanismo espec&iacute;fico para la fusi&oacute;n de membrana mediada por trampa sigue siendo un &aacute;rea activa de investigaci&oacute;n. Aqu&iacute;, resumimos los hallazgos recientes basados en mediciones de la fuerza adquiridas en un novedoso sistema experimental que utiliza la espectroscopia de fuerza de fuerza at&oacute;mica (AFM) de microscopio para investigar los mecanismos de fusi&oacute;n de la membrana y el papel de trampas para facilitar la hemifusion de la membrana durante la fusi&oacute;n mediada por trampa. En este sistema, se forman bicapas lip&iacute;dicas de prote&iacute;nas y la trampa-reconstituido sobre sustratos de opuestos (trans) y las fuerzas necesarias para inducir la fusi&oacute;n y la membrana hemifusion o desvincular solo v- / complejos de t-SNARE se miden. Los resultados obtenidos evidencian un mecanismo por el cual la fuerza de tracci&oacute;n generada por la interacci&oacute;n de trans-trampas proporciona proximidad cr&iacute;tica entre las membranas y desestabiliza las bicapas en sitios de fusi&oacute;n ampliando la barrera de la energ&iacute;a de hemifusion y por lo tanto hacer las membranas m&aacute;s propensos a la fusi&oacute;n.

Investigaci&oacute;n del mecanismo de fusi&oacute;n de membrana mediada por trampa mediante microscop&iacute;a de fuerza at&oacute;mica.

&#x5916;&#x90E8;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x6570;&#x3068;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306F;&#x5287;&#x7684;&#x306B;&#x90E8;&#x5C4B;&#x3084;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x4F4E;&#x6E29;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50; 1 &#xFF08;ICAM-1&#xFF09; &#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x5358;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x7CFB; THP 1 &#x306E;&#x5BC6;&#x7740;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Thp-1 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x30D1;&#x7403;&#x6A5F;&#x80FD;&#x95A2;&#x9023;&#x6297;&#x539F;-1 (LFA-1)&#x3001;ICAM - 1 &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x539F;&#x5B50;&#x9593;&#x529B;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F3E;&#x529B;&#x6027;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x529B;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x529B;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x4F5C;&#x696D;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x525B;&#x6027;&#x306E;&#x6F38;&#x6E1B;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3068; de-adhesion&#x3002;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x5206;&#x5B50;&#x8A08;&#x6E2C; LFA 1/ICAM 1 &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7834;&#x65AD;&#x529B;&#x3068;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x529B;&#x66F2;&#x7DDA;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5909;&#x8ABF;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x5909;&#x5F62;&#x3057;&#x3066;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x9577;&#x304F;&#x819C;&#x30C6;&#x30B6;&#x30FC;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x4E3B;&#x306B;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30BB;&#x30EB;&#x819C;&#x9AA8;&#x683C;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x65B9;&#x5F0F;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x5909;&#x8ABF;&#x3002;

In risposta a stimoli esterni, cellule modulano il loro stato adesivo regolando il numero e l&#39;intrinseca affinit&agrave; del recettore/ligando obbligazioni. Numerosi studi hanno dimostrato che adesione delle cellule &egrave; ridotto drammaticamente in camera o temperature inferiori rispetto alla temperatura fisiologica. Tuttavia, il meccanismo sottostante che modula l&#39;adesione &egrave; ancora poco chiaro. Qui, abbiamo studiato l&#39;adesione della linea monocitica cellule THP-1 per una superficie rivestita con la molecola di adesione intercellulare-1 (ICAM-1) in funzione della temperatura. THP-1 cellule esprimono l&#39;integrina linfocita funzione associata antigene-1 (LFA-1), un recettore per ICAM-1. Misure di forza diretta di adesione cellulare e l&#39;elasticit&agrave; delle cellule sono state effettuate mediante microscopia a forza atomica. Forza misurazioni hanno rivelato un aumento del lavoro di de-adhesion con la temperatura che &egrave; stato accoppiato ad una graduale diminuzione della rigidit&agrave; cellulare. Di interesse, le misure singola molecola ha rivelato che la forza di rottura del complesso LFA-1/ICAM-1 &egrave; diminuito con la temperatura. Un&#39;analisi dettagliata delle curve forza indicato che adesione cellulare temperatura modulata era principalmente dovuta la maggiore capacit&agrave; delle cellule di deformarsi e di formare un maggior numero di attacchi di membrana pi&ugrave; lunghi a temperature fisiologiche. Insieme, questi risultati sottolineano l&#39;importanza dell&#39;interazione meccanica e membrana-citoscheletro cellulare sulla modulazione di adesione delle cellule.

Modulazione della temperatura di adesione integrina-mediata delle cellule.

&#x5728;&#x5BF9;&#x5916;&#x90E8;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x548C;&#x5185;&#x5728;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;/&#x914D;&#x4F53;&#x503A;&#x5238;&#x8C03;&#x8282;&#x5176;&#x80F6;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x5728;&#x623F;&#x95F4;&#x6216;&#x751F;&#x7406;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x964D;&#x4F4E;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8C03;&#x8282;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x5E95;&#x5C42;&#x673A;&#x5236;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5C1A;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; THP-1 &#x53F7;&#x7EBF;&#x5230;&#x8868;&#x9762;&#x6D82;&#x6577;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 (&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1&#xFF09; &#x4F5C;&#x4E3A;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;Thp-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1 (LFA-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1&#x3002;&#x7528;&#x539F;&#x5B50;&#x529B;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8FDB;&#x884C;&#x76F4;&#x9500;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F39;&#x6027;&#x3002;&#x529B;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x589E;&#x52A0;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7684; de-adhesion &#x8026;&#x5408;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x521A;&#x5EA6;&#x9010;&#x6E10;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3002;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#x6DCB;&#x5DF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6297;&#x539F;-1/&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1 &#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x7834;&#x88C2;&#x529B;&#x4E0B;&#x964D;&#x4E0E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3002;&#x529B;&#x66F2;&#x7EBF;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x6307;&#x51FA;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x5F62;&#x5E76;&#x5F62;&#x6210;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x957F;&#x819C;&#x7CFB;&#x7EF3;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x7684;&#x589E;&#x5F3A;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8C03;&#x63A7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F3A;&#x8C03;&#x5BF9;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;

&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8C03;&#x8282;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

In response to external stimuli, cells modulate their adhesive state by regulating the number and intrinsic affinity of receptor/ligand bonds. A number of studies have shown that cell adhesion is dramatically reduced at room or lower temperatures as compared with physiological temperature. However, the underlying mechanism that modulates adhesion is still unclear. Here, we investigated the adhesion of the monocytic cell line THP-1 to a surface coated with intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) as a function of temperature. THP-1 cells express the integrin lymphocyte function-associated antigen-1 (LFA-1), a receptor for ICAM-1. Direct force measurements of cell adhesion and cell elasticity were carried out by atomic force microscopy. Force measurements revealed an increase of the work of de-adhesion with temperature that was coupled to a gradual decrease in cellular stiffness. Of interest, single-molecule measurements revealed that the rupture force of the LFA-1/ICAM-1 complex decreased with temperature. A detailed analysis of the force curves indicated that temperature-modulated cell adhesion was mainly due to the enhanced ability of cells to deform and to form a greater number of longer membrane tethers at physiological temperatures. Together, these results emphasize the importance of cell mechanics and membrane-cytoskeleton interaction on the modulation of cell adhesion.

Temperature modulation of integrin-mediated cell adhesion.

En r&eacute;ponse &agrave; des stimuli externes, cellules modulent leur &eacute;tat adh&eacute;sif en r&eacute;glementant le nombre et l&#39;affinit&eacute; intrins&egrave;que des liaisons de r&eacute;cepteur/ligand. Plusieurs &eacute;tudes ont montr&eacute; qu&#39;adh&eacute;sion cellulaire est consid&eacute;rablement r&eacute;duite &agrave; la chambre ou des temp&eacute;ratures plus basses par rapport &agrave; la temp&eacute;rature physiologique. Toutefois, le m&eacute;canisme sous-jacent qui module l&#39;adh&eacute;rence est encore incertain. Ici, nous avons &eacute;tudi&eacute; l&#39;adh&eacute;rence de la lign&eacute;e monocytaire THP-1 &agrave; une surface enduite avec la mol&eacute;cule d&#39;adh&eacute;sion intercellulaire-1 (ICAM-1) en fonction de la temp&eacute;rature. THP-1 cellules expriment l&#39;int&eacute;grine lymphocyte function-associated antig&egrave;ne-1 (LFA-1), un r&eacute;cepteur ICAM-1. Mesure de la force directe d&#39;adh&eacute;sion cellulaire et l&#39;&eacute;lasticit&eacute; de la cellule ont &eacute;t&eacute; effectu&eacute;es par microscopie &agrave; force atomique. Mesure de la force a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une augmentation du travail du possible avec la temp&eacute;rature qui est coupl&eacute;e &agrave; une diminution progressive de la rigidit&eacute;. D&#39;int&eacute;r&ecirc;t, mesures de simple-mol&eacute;cule ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que la force de rupture du complexe LFA-1/ICAM-1 diminue avec la temp&eacute;rature. Une analyse d&eacute;taill&eacute;e des courbes force a indiqu&eacute; que l&#39;adh&eacute;sion cellulaire temp&eacute;rature modul&eacute;e &eacute;tait principalement en raison de la capacit&eacute; des cellules &agrave; se d&eacute;former et de former un plus grand nombre de sangles de membrane plus longtemps aux temp&eacute;ratures physiologiques. Ensemble, ces r&eacute;sultats soulignent l&#39;importance de l&#39;interaction m&eacute;canique et membrane-cytosquelette cellulaire sur la modulation de l&#39;adh&eacute;sion cellulaire.

Modulation de la temp&eacute;rature d&#39;adh&eacute;rence cellulaire int&eacute;grine.

Reaktion auf &auml;u&szlig;ere Reize modulieren Zellen ihren Klebstoff Zustand durch die Regelung die Anzahl und die immanente Affinit&auml;t Rezeptor/Ligand Anleihen. Eine Reihe von Studien haben gezeigt, die Zelladh&auml;sion am Zimmer oder niedrigeren Temperaturen im Vergleich zu physiologischen Temperatur substanziell ist. Der zugrunde liegende Mechanismus, der die Adh&auml;sion Verz&ouml;gerung ist jedoch noch unklar. Hier untersuchten wir die Haftung von der monozyt&auml;ren Zelllinie THP-1 zu einer Oberfl&auml;che beschichtet mit der Adh&auml;sion Molek&uuml;l-1 (ICAM-1) als Funktion der Temperatur. THP-1 Zellen schnelles der Integrin Lymphozyte Funktion-assoziierte Antigen-1 (LFA-1), ein Rezeptor f&uuml;r ICAM-1. Direkte Kraft Messungen der Zelladh&auml;sion und Zelle Elastizit&auml;t wurden von Rasterkraftmikroskopie ausgef&uuml;hrt. Kraft-Messungen ergeben eine Steigerung der Arbeit des de-adhesion mit der Temperatur, die zu einem allm&auml;hlichen R&uuml;ckgang der zellul&auml;ren Steifigkeit gekoppelt war. Von Interesse sind offenbart Einzelmolek&uuml;l-Messungen, dass die Bruch-Kraft der LFA-1/ICAM-1-Anlage mit Temperatur verringert. Eine detaillierte Analyse der Kraft Kurven zeigten, dass Temperatur-modulierte Zelladh&auml;sion vor allem auf die verbesserte F&auml;higkeit der Zellen zu verformen und eine gr&ouml;&szlig;ere Anzahl l&auml;nger Membran Anbindehaltung bei physiologischen Temperaturen zu bilden. Zusammen, unterstreichen diese Ergebnisse die Bedeutung der Zelle Mechanik und Membran-Zytoskeletts Interaktion &uuml;ber die Beeinflussung von Zelladh&auml;sion.

Temperatur-Modulation der Integrin-vermittelte Zelladh&auml;sion.

&#xC678;&#xBD80; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC140; &#xC218;&#xC640; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;/&#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xCC44;&#xAD8C;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xC811;&#xCC29; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xBCC0;&#xC870;. &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC29; &#xB610;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC628;&#xB3C4; &#xBE44;&#xD574; &#xB0AE;&#xC740; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC811;&#xCC29;&#xC744; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC544;&#xC9C1; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC0AC; monocytic &#xC140; &#xB77C;&#xC778; THP 1 &#xC628;&#xB3C4;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;-1 (ICAM-1)&#xC73C;&#xB85C; &#xCF54;&#xD305; &#xB41C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;. THP-1 &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; integrin &#xB9BC;&#xD504; &#xAD6C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD56D; &#xC6D0;-1 (LFA-1), ICAM-1 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604;. &#xC9C1;&#xC811; &#xD798;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xC140; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xC140; &#xD0C4;&#xC131; &#xC6D0;&#xC790; &#xD798; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD798;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xACC4;&#xC2DC;&#xC758; &#xC791;&#xD488;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; de-adhesion &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xAC15;&#xC131;&#xC5D0; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xC628;&#xB3C4;. &#xAD00;&#xC2EC;, &#xB2E8;&#xC77C; &#xBD84;&#xC790; &#xCE21;&#xC815; LFA-1/ICAM-1 &#xB2E8;&#xC9C0;&#xC758; &#xD30C;&#xC5F4; &#xD798; &#xC628;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xD798; &#xACE1;&#xC120;&#xC758; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC628;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBCC0;&#xD615; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC628;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xB9C9; &#xBC27;&#xC904;&#xC758; &#xD070; &#xC218;&#xB97C; &#xC140;&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB2A5;&#xB825; &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;,&#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xC140; &#xC5ED;&#xD559; &#xBC0F; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; cytoskeleton &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

Integrin &#xC911;&#xC7AC; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En respuesta a est&iacute;mulos externos, c&eacute;lulas modulan su estado adhesivo regulando el n&uacute;mero y la afinidad intr&iacute;nseca de bonos ligando/receptor. Varios estudios han demostrado que la adhesi&oacute;n celular se reduce dram&aacute;ticamente en sala o en temperaturas m&aacute;s bajas en comparaci&oacute;n con la temperatura fisiol&oacute;gica. Sin embargo, el mecanismo subyacente que modula la adherencia es todav&iacute;a incierto. Aqu&iacute;, hemos investigado la adhesi&oacute;n de la l&iacute;nea monoc&iacute;tica c&eacute;lulas THP-1 a una superficie recubierta de mol&eacute;cula 1 de adhesi&oacute;n intercelular (ICAM-1) en funci&oacute;n de la temperatura. Las c&eacute;lulas THP-1 expresan la integrina linfocito funci&oacute;n-asociada antigen-1 (LFA-1), un receptor de ICAM-1. Se realizaron mediciones de la fuerza directa de adhesi&oacute;n celular y la elasticidad de la c&eacute;lula por microscop&iacute;a de fuerza at&oacute;mica. Las medidas de fuerza revelaron un aumento del trabajo de de-adhesion con temperatura que estaba junto a una disminuci&oacute;n gradual en la rigidez celular. De inter&eacute;s, medidas de una sola mol&eacute;cula revelaron que disminuye la fuerza de ruptura del complejo LFA-1/ICAM-1 con la temperatura. Un an&aacute;lisis detallado de las curvas de fuerza indicaron que la adhesi&oacute;n celular temperatura modulada era principalmente debido a la mayor capacidad de las c&eacute;lulas a deformar y a formar un mayor n&uacute;mero de amarres de membrana m&aacute;s temperaturas fisiol&oacute;gicas. Juntos, estos resultados acent&uacute;an la importancia de la interacci&oacute;n mec&aacute;nica y membrana-citoesqueleto de la c&eacute;lula en la modulaci&oacute;n de la adhesi&oacute;n celular.

Modulaci&oacute;n de la temperatura de la adhesi&oacute;n celular mediada por integrinas.

&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x9012;&#x8D28;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x7684;&#x80F0;&#x817A; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x817A;&#x3001; &#x80F0;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x80C6;&#x78B1;&#x80FD;&#x6295;&#x5165;&#x5230; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x76EE;&#x524D;&#x4E0D;&#x6E05;&#x695A;&#x662F;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x5728; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x9F20;&#x6807;&#x7684;&#x5C0F;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0E;&#x80C6;&#x78B1;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x662F;&#x7A00;&#x758F;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x5230;&#x7684;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B; &alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x4F9B;&#x5230;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x80C6;&#x78B1;&#x80FD;&#x8F93;&#x5165;&#x3002;Alpha &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x5C0F;&#x6CE1;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x8F6C;&#x8FD0;&#x548C;&#x91CA;&#x653E;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E0E;&#x6D77;&#x4EBA;&#x9178;&#x6216;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x964D;&#x4F4E;&#x65F6;&#x3002;Alpha &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x5206;&#x6CCC;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x589E;&#x654F;&#x5BF9;&#x8461;&#x8404;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; &beta; &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5728;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x7D20;&#x6570; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EE5;&#x6700;&#x4F73;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5E94;&#x5BF9;&#x968F;&#x540E;&#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7CD6;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3002;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x80C6;&#x78B1;&#x80FD;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8868;&#x793A;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#xFF0C;&#x7A81;&#x51FA;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x5C55;&#x5230;&#x672A;&#x6765;&#x836F;&#x7269;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x5173;&#x8054;&#x6027;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x9776;&#x70B9;&#x3002;

&Alpha; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x4E59;&#x9170;&#x80C6;&#x78B1;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x975E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x542F;&#x52A8; beta &#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Acetylcholine is a neurotransmitter that has a major role in the function of the insulin-secreting pancreatic beta cell. Parasympathetic innervation of the endocrine pancreas, the islets of Langerhans, has been shown to provide cholinergic input to the beta cell in several species, but the role of autonomic innervation in human beta cell function is at present unclear. Here we show that, in contrast to the case in mouse islets, cholinergic innervation of human islets is sparse. Instead, we find that the alpha cells of human islets provide paracrine cholinergic input to surrounding endocrine cells. Human alpha cells express the vesicular acetylcholine transporter and release acetylcholine when stimulated with kainate or a lowering in glucose concentration. Acetylcholine secretion by alpha cells in turn sensitizes the beta cell response to increases in glucose concentration. Our results demonstrate that in human islets acetylcholine is a paracrine signal that primes the beta cell to respond optimally to subsequent increases in glucose concentration. Cholinergic signaling within islets represents a potential therapeutic target in diabetes, highlighting the relevance of this advance to future drug development.

Alpha cells secrete acetylcholine as a non-neuronal paracrine signal priming beta cell function in humans.

L&#39;ac&eacute;tylcholine est un neurotransmetteur qui a un r&ocirc;le majeur dans le fonctionnement de la cellule b&ecirc;ta pancr&eacute;atique s&eacute;cr&eacute;tant de l&#39;insuline. Innervation parasympathique du pancr&eacute;as endocrine, les &icirc;lots de Langerhans, s&#39;est av&eacute;r&eacute;e d&#39;apporter sa contribution cholinergique de la cellule b&ecirc;ta chez plusieurs esp&egrave;ces, mais le r&ocirc;le de l&#39;innervation autonome en fonction des cellules b&ecirc;ta humain est actuellement incertaine. Nous d&eacute;montrons que, contrairement &agrave; l&#39;affaire dans les &icirc;lots de la souris, l&#39;innervation cholinergique des &icirc;lots humains est rares. Au lieu de cela, nous constatons que les cellules alpha des &icirc;lots humains contribuer paracrine cholinergique &agrave; entourant les cellules endocrines. Les cellules alpha humains expriment le transporteur v&eacute;siculaire de l&#39;ac&eacute;tylcholine et lib&eacute;rer l&#39;ac&eacute;tylcholine quand ils sont stimul&eacute;s avec ka&iuml;nate ou un abaissement de la concentration de glucose. S&eacute;cr&eacute;tion d&#39;ac&eacute;tylcholine par les cellules alpha sensibilise &agrave; son tour la r&eacute;ponse de la cellule b&ecirc;ta aux augmentations de la concentration de glucose. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent que, dans les &icirc;lots humains, l&#39;ac&eacute;tylcholine est un signal paracrines qui amorce la cellule b&ecirc;ta pour r&eacute;pondre parfaitement &agrave; toute augmentation ult&eacute;rieure de la concentration de glucose. Signalisation cholinergiques dans les &icirc;lots repr&eacute;sente une cible th&eacute;rapeutique potentielle dans le diab&egrave;te, en soulignant la pertinence de cette avanc&eacute;e pour le d&eacute;veloppement de futurs m&eacute;dicaments.

Les cellules alpha s&eacute;cr&egrave;tent l&#39;ac&eacute;tylcholine comme une fonction des cellules b&ecirc;ta d&#39;amor&ccedil;age signal paracrine non neuronales chez l&#39;homme.

Acetylcholin ist ein Neurotransmitter, der eine wichtige Rolle in der Funktion des Insulin-sezernierende Betazellen hat. Nachweislich parasympathische Innervation des endokrinen Pankreas, Langerhans-Inseln, cholinerge Input f&uuml;r die Beta-Zelle in mehrere Arten liefern, aber die Rolle der vegetativen Innervation in menschlichen Beta-Zelle-Funktion ist derzeit unklar. Hier zeigen wir, dass im Gegensatz zu der Fall in Maus-Inselchen, cholinerge Innervation des menschlichen Inselchen mit geringer Dichte ist. Stattdessen finden wir, dass die Alphazellen der menschlichen Inselchen Parakrine cholinerge Input zu den umliegenden endokriner Zellen liefern. Alpha Humanzellen express den vesikul&auml;ren Acetylcholin-Transporter und freigeben Acetylcholin wenn mit Kainate oder eine Senkung im Glukosekonzentration angeregt. Acetylcholin Sekretion von Alphazellen sensibilisiert wiederum die Beta-Zelle Antwort zu einem Anstieg der Glukosekonzentration. Unsere Ergebnisse zeigen, dass in menschlichen Inselchen Acetylcholin eine parakrine-Signal, das die Beta-Zelle, um optimal reagieren zu einem sp&auml;teren Anstieg der Glukosekonzentration Primzahlen. Cholinerge Signalisierung innerhalb Inselchen stellt ein potenzielles therapeutisches Ziel bei Diabetes, Hervorhebung die Relevanz dieser Vorschuss auf zuk&uuml;nftige Medikamentenentwicklung.

Alpha-Zellen sezernieren Acetylcholin als nicht-neuronale parakrine Signal Grundierung Beta-Zelle Funktion beim Menschen.

L&#39;acetilcolina &egrave; un neurotrasmettitore che ha un ruolo importante nella funzione della cellula beta del pancreas che secernono insulina. Innervazione parasimpatico del pancreas endocrino, le isole di Langerhans, ha dimostrato di fornire input colinergico nella cella beta in diverse specie, ma il ruolo dell&#39;innervazione autonomica in funzione delle cellule beta umane &egrave; attualmente poco chiaro. Qui ci mostrano che, in contrasto con il caso nelle isolette del mouse, innervazione colinergica di isolotti umane &egrave; scarsa. Invece, troviamo che le cellule alfa delle isolette umani forniscono input colinergico paracrina che circonda le cellule endocrine. Le cellule alfa umane esprimono il trasportatore vescicolare di acetilcolina e rilasciare acetilcolina quando stimolato con Kainato o un abbassamento della concentrazione di glucosio. Secrezione di acetilcolina da parte delle cellule alfa a sua volta sensibilizza la risposta delle cellule beta ad un aumento della concentrazione di glucosio. I nostri risultati dimostrano che in isolotti umani l&#39;acetilcolina &egrave; un segnale paracrina che innesca le cellule beta per rispondere in modo ottimale ai successivi aumenti della concentrazione di glucosio. Colinergici segnalazione all&#39;interno di isolotti rappresenta un potenziale bersaglio terapeutico nel diabete, evidenziando l&#39;importanza di questo progresso per lo sviluppo di futuri farmaci.

Le cellule alfa secernono acetilcolina in funzione delle cellule beta non neuronale paracrina segnale adescamento in esseri umani.

&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3; &beta; &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x4F1D;&#x9054;&#x7269;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x81B5;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x5CF6;&#x306E;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306F;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x5165;&#x529B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E; &beta; &#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E; &beta; &#x7D30;&#x80DE;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x73FE;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x81B5;&#x306E;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x304C;&#x5E0C;&#x8584;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81B5;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x5165;&#x529B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x30AB;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3068;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x9806;&#x756A;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E; &beta; &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;.&#x81B5;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3; &#x30BB;&#x30EB;&#x6700;&#x9069;&#x7CD6;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;&#x7248;&#x306E;&#x7D20;&#x6570;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5CF6;&#x5185;&#x306E;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x7CD6;&#x5C3F;&#x75C5;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4E8B;&#x524D;&#x672A;&#x6765;&#x5275;&#x85AC;&#x3078;&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8868;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC804;&#xB2EC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5;, &#xB3C5;&#xB3C4; Langerhans&#xC758; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; innervation cholinergic &#xC785;&#xB825; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC140;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC790;&#xC728; innervation &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD88;&#xBD84;&#xBA85;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC758; cholinergic innervation &#xC2A4;&#xD30C;&#xC2A4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; paracrine cholinergic &#xC785;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xACF5;&#xC744; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; &#xC804;&#xC1A1; &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xB20C;&#xB800;&#xB2E4; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0; kainate &#xB610;&#xB294; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC800;&#xD558;&#xC640; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xC54C;&#xD30C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xB294; &#xCC28;&#xB840;&#xB85C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5; sensitizes. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xC740; &#xC774;&#xD6C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xC751; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC140; &#xC18C;&#xC218; paracrine &#xC2E0;&#xD638; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3C5;&#xB3C4; &#xB0B4; cholinergic &#xC2E0;&#xD638; &#xBBF8;&#xB798; &#xC2E0;&#xC57D; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC774;&#xC774; &#xBC1C;&#xC804;&#xC758; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xB2F9;&#xB1E8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xB300;&#xC0C1;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC54C;&#xD30C; &#xC140; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBE44; &#xC2E0;&#xACBD; paracrine &#xC2E0;&#xD638; &#xBABB;&#xC4F0;&#xAC8C; &#xBCA0;&#xD0C0; &#xC138;&#xD3EC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC544; &#xC138; &#xD2F8; &#xCF5C;&#xB9B0;&#xC744; &#xBD84; &#xBE44; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La acetilcolina es un neurotransmisor que tiene un papel importante en la funci&oacute;n de la c&eacute;lula beta pancre&aacute;tica secretoras de insulina. Inervaci&oacute;n parasimp&aacute;tica del p&aacute;ncreas endocrino, los islotes de Langerhans, se ha demostrado para aportar colin&eacute;rgicos a la c&eacute;lula beta en varias especies, pero el papel de la inervaci&oacute;n auton&oacute;mica en funci&oacute;n de la c&eacute;lula beta humana es actualmente confuso. Aqu&iacute; se muestra que, en contraste con el caso en islotes de rat&oacute;n, inervaci&oacute;n colin&eacute;rgica de islotes humanos es escasa. En cambio, nos encontramos con que las c&eacute;lulas alfa de los islotes humanos aportar paracrina colin&eacute;rgicos para que rodea las c&eacute;lulas endocrinas. Las c&eacute;lulas alfa humanas expresan el transportador vesicular de acetilcolina y liberan acetilcolina al ser estimulados con kainato o una disminuci&oacute;n en la concentraci&oacute;n de glucosa. Secreci&oacute;n de acetilcolina por las c&eacute;lulas alfa sensibiliza a su vez la respuesta de la c&eacute;lula beta a aumentos en la concentraci&oacute;n de glucosa. Nuestros resultados demuestran que en islotes humanos la acetilcolina es una se&ntilde;al paracrina que prepara la c&eacute;lula beta para responder &oacute;ptimamente a los posteriores aumentos en la concentraci&oacute;n de glucosa. Se&ntilde;alizaci&oacute;n colin&eacute;rgicos en islotes representa una potencial diana terap&eacute;utica en diabetes, destacando la importancia de este avance para el desarrollo de futuros medicamentos.

Las c&eacute;lulas alfa secretan acetilcolina como una funci&oacute;n de c&eacute;lulas beta no neuronales paracrina se&ntilde;al cebado en los seres humanos.

&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8C03;&#x8282;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x817A;&#x3001; &#x80F0;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5F71;&#x54CD;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8C22;&#x7684;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x3002;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x80F0;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x7CBE;&#x786E;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x89C4;&#x5F8B;&#x662F;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x4EBA;&#x6743;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x80F0;&#x5C9B;&#x548C;&#x4E0D;&#x7B26;&#x5408;&#x73B0;&#x6709;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x8F74;&#x7A81;&#x4E09;&#x4E2A;&#x7EF4;&#x5EA6;&#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x5F25;&#x6F2B;&#x6027;&#x8F74;&#x7D22;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x548C;&#x5185;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7A00;&#x5C11;&#x8054;&#x7CFB;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x3002;&#x51E0;&#x4E2A;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x80C6;&#x78B1;&#x80FD;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7A7F;&#x900F;&#x4EBA;&#x4F53;&#x80F0;&#x5C9B;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5165;&#x4FB5;&#x7684;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x4F18;&#x5148;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x5185;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x5E73;&#x6ED1;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x8C03;&#x8282;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5206;&#x6CCC;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236;&#x5C40;&#x90E8;&#x8840;&#x6D41;&#x6216;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E8E;&#x80F0;&#x5C9B;&#x533A;&#x57DF;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x4E0B;&#x6E38;&#x3002;

&#x795E;&#x7ECF;&#x652F;&#x914D;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x80F0;&#x817A;&#x81EA;&#x4E3B;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

The autonomic nervous system regulates hormone secretion from the endocrine pancreas, the islets of Langerhans, thus impacting glucose metabolism. The parasympathetic and sympathetic nerves innervate the pancreatic islet, but the precise innervation patterns are unknown, particularly in human. Here we demonstrate that the innervation of human islets is different from that of mouse islets and does not conform to existing models of autonomic control of islet function. By visualizing axons in three dimensions and quantifying axonal densities and contacts within pancreatic islets, we found that, unlike mouse endocrine cells, human endocrine cells are sparsely contacted by autonomic axons. Few parasympathetic cholinergic axons penetrate the human islet, and the invading sympathetic fibers preferentially innervate smooth muscle cells of blood vessels located within the islet. Thus, rather than modulating endocrine cell function directly, sympathetic nerves may regulate hormone secretion in human islets by controlling local blood flow or by acting on islet regions located downstream.

Innervation patterns of autonomic axons in the human endocrine pancreas.

Le syst&egrave;me nerveux r&eacute;gule la s&eacute;cr&eacute;tion de l&#39;hormone du pancr&eacute;as endocrine, les &icirc;lots de Langerhans, donc un impact sur le m&eacute;tabolisme du glucose. Les nerfs parasympathiques et sympathiques innervent les &icirc;lots pancr&eacute;atiques, mais les patrons de l&#39;innervation pr&eacute;cis sont inconnus, en particulier chez l&#39;homme. Nous d&eacute;montrons que l&#39;innervation des &icirc;lots humains est diff&eacute;rente de celle des &icirc;lots de souris et qu&#39;il n&#39;est pas conforme &agrave; des mod&egrave;les existants de contr&ocirc;le autonome de la fonction de l&#39;&icirc;lot. En visualisant les axones en trois dimensions et quantification des densit&eacute;s axonales et contacts &agrave; l&#39;int&eacute;rieur des &icirc;lots pancr&eacute;atiques, nous avons constat&eacute; que, contrairement aux cellules endocrines souris, humains cellules endocrines sont faiblement contact&eacute; directement par les axones autonomes. Quelques axones cholinergiques parasympathiques p&eacute;n&egrave;trent dans les &icirc;lots pancr&eacute;atiques humains, et les envahisseurs fibres sympathiques innervent pr&eacute;f&eacute;rentiellement les cellules musculaires lisses des vaisseaux sanguins, situ&eacute;s &agrave; l&#39;int&eacute;rieur de l&#39;&icirc;lot. Ainsi, plut&ocirc;t que de moduler directement &agrave; la fonction des cellules endocrines, nerfs sympathiques pourraient r&eacute;guler la s&eacute;cr&eacute;tion de l&#39;hormone dans les &icirc;lots humains en contr&ocirc;lant le d&eacute;bit sanguin local ou en agissant sur les r&eacute;gions d&#39;&icirc;lots situ&eacute;s en aval.

Patrons d&#39;innervation des axones autonomes dans le pancr&eacute;as endocrinien humain.

Das autonome Nervensystem reguliert Hormon Sekretion von Pankreas, Langerhans-Inseln, so beeinflussen Glukosestoffwechsel. Die parasympathischen und sympathischen Nerven anregen das Pankreas Inselchen, aber die genaue Innervation-Muster sind unbekannt, vor allem im Menschen. Hier zeigen wir, dass die Innervation des menschlichen Inselchen unterscheidet sich von der Maus Inselchen und nicht vorhandene Modelle der autonome Kontrolle der Inselchen Funktion entspricht. Durch die Visualisierung Axone in drei Dimensionen und quantifizieren axonale dichten und Kontakte innerhalb Pankreas Inselchen, fanden wir, dass im Gegensatz zu Maus endokrine Zellen, endokrine Humanzellen d&uuml;nn von autonome Axone kontaktiert werden. Paar parasympathische cholinerge Axone durchdringen das menschliche Inselchen, und die eindringenden sympathischen Fasern bevorzugt anregen glatten Muskelzellen der Blutgef&auml;&szlig;e innerhalb der Insel. Somit k&ouml;nnen anstatt moduliert endokrine Zelle Funktion direkt, sympathische Nerven Hormon Sekretion in menschlichen Inselchen durch lokale Durchblutung oder durch Einwirkung auf die Inselchen Regionen flussabw&auml;rts regulieren.

Innervation Muster der autonome Axone im menschlichen Pankreas.

Il sistema nervoso autonomo regola la secrezione di ormoni da parte del pancreas endocrino, le isole di Langerhans, quindi un impatto metabolismo del glucosio. I nervi del simpatici e parasimpatici innervano le isole pancreatiche, ma i pattern di innervazione precise sono sconosciuti, particolarmente nell&#39;uomo. Qui dimostriamo che l&#39;innervazione di isolotti umani &egrave; diverso da quello delle isolette del mouse e non conformi ai modelli esistenti di controllo autonomico della funzione isolotto. Visualizzando assoni in tre dimensioni e densit&agrave; assonale misurando e contatti all&#39;interno di isole pancreatiche, abbiamo scoperto che, a differenza delle cellule endocrine di topo, cellule endocrine umane sono scarsamente contattate da assoni autonomiche. Alcuni assoni parasimpatici colinergici penetrano l&#39;isolotto umana, e le fibre del simpatiche invasore preferenzialmente innervano le cellule muscolari lisce dei vasi sanguigni che si trova all&#39;interno dell&#39;isoletta. Cos&igrave;, piuttosto che modulando la funzione endocrina delle cellule direttamente, simpatici nervi possono disciplinare secrezione dell&#39;ormone in isolotti umane mediante il controllo del flusso sanguigno locale o agendo sulle regioni isolotto situato a valle.

Pattern di innervazione degli assoni autonomiche del pancreas endocrino umano.

&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x81B5;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x7CD6;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x5CF6;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x3092;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x81B5;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5CF6;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x81B5;&#x5CF6;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x81EA;&#x5F8B;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x9069;&#x5408;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x6B21;&#x5143;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x81B5;&#x5CF6;&#x5185;&#x306E;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x3070;&#x3089;&#x3067;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x3092;&#x9023;&#x7D61;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x3057;&#x3001;&#x4FB5;&#x7565;&#x306E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306F;&#x512A;&#x5148;&#x7684;&#x5185;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5E73;&#x6ED1;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x5909;&#x8ABF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x81B5;&#x306B;&#x5C40;&#x6240;&#x8840;&#x6D41;&#x91CF;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5CF6;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x81B5;&#x81D3;&#x306E;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3002;

&#xC790;&#xC728; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3C5;&#xB3C4; Langerhans, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB300;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBD84; &#xBE44;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; innervate &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; innervation &#xD328;&#xD134;&#xC740; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;, &#xD2B9;&#xD788; &#xC778;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC778;&#xAC04; &#xB3C5;&#xB3C4; innervation &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xACE0; &#xC12C; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xC790;&#xC728; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC758; &#xAE30;&#xC874; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC900;&#xC218; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xCE21;&#xC815; axonal &#xBC00;&#xB3C4; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xB0B4; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xCD95; &#xC0AD;&#xC744; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558; &#xC5EC;, &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB744;&#xC5C4;&#xB744;&#xC5C4; &#xC5F0;&#xB77D;&#xC744; &#xC790;&#xC728; axons&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA87; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; cholinergic axons &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC5D0; &#xCE68;&#xD22C; &#xD558; &#xACE0; &#xCE68;&#xC785; &#xAD50;&#xAC10; &#xC12C;&#xC720; &#xC6B0;&#xC120;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; innervate&#xB294; &#xC12C; &#xB0B4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xD3C9;&#xD65C; &#xADFC; &#xC138;&#xD3EC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xBCC0;&#xC870; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xC2E0; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBD84; &#xBE44; &#xB610;&#xB294; &#xD558;&#xB958;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; &#xC791;&#xC740; &#xC12C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xD608;&#xC561;&#xC758; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC790;&#xC728; axons&#xC758; innervation &#xD328;&#xD134;.

El sistema nervioso aut&oacute;nomo regula la secreci&oacute;n de la hormona del p&aacute;ncreas endocrino, los islotes de Langerhans, afectando as&iacute; el metabolismo de la glucosa. Los nervios simp&aacute;ticos y parasimp&aacute;ticos inervan el islote pancre&aacute;tico, pero desconocen los patrones de inervaci&oacute;n precisa, particularmente en el ser humano. Aqu&iacute; demostramos que la inervaci&oacute;n de islotes humanos es diferente a la de los islotes de rat&oacute;n y no se ajusta a los modelos existentes de control auton&oacute;mico de la funci&oacute;n del islote. Visualizando axones en tres dimensiones y densidades axonal cuantificaci&oacute;n y contactos dentro de islotes pancre&aacute;ticos, encontramos que, a diferencia de las c&eacute;lulas endocrinas del rat&oacute;n, las c&eacute;lulas endocrinas humanas son escasamente contactadas por axones auton&oacute;micos. Algunos axones colin&eacute;rgicos parasimp&aacute;ticas penetran el islote humano, y las fibras simp&aacute;ticas invasores preferencial inervan las c&eacute;lulas de m&uacute;sculo liso de los vasos sangu&iacute;neos en el islote. As&iacute;, en lugar de modular la funci&oacute;n de las c&eacute;lulas endocrinas directamente, los nervios simp&aacute;ticos pueden regular la secreci&oacute;n de la hormona en islotes humanos controlando el flujo sangu&iacute;neo local o actuando sobre las regiones de islote situado aguas abajo.

Patrones de inervaci&oacute;n de axones auton&oacute;micos en el p&aacute;ncreas endocrino humano.

&#x6D3B;&#x4F53;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x548C;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x591A;&#x79CD;&#x6210;&#x50CF;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x76D1;&#x6D4B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5F53;&#x524D;&#x6280;&#x672F;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7814;&#x7A76;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7EA7;&#x522B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x6D3B;&#x4F53;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5904;&#x7406;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E00;&#x9650;&#x5236;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x5BF9;&#x751F;&#x7269;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x7EB5;&#x5411;&#x7814;&#x7A76;&#x540C;&#x4E00;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x65E0;&#x521B;&#x6027;&#x8BBF;&#x95EE;&#x53CD;&#x590D;&#x4ECD;&#x7136;&#x662F;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x5F97;&#x4E0D;&#x5230;&#x6EE1;&#x8DB3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x62A5;&#x544A;&#x4EE5;&#x524D;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x5165;&#x9F20;&#x6807;&#x773C;&#x7684;&#x524D;&#x623F;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x79FB;&#x690D;&#x672F;&#x540E;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x542F;&#x7528; (i) &#x7EB5;&#x5411;&#x3001; &#x65E0;&#x521B;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x79FB;&#x690D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4F53;&#x5185; &#xFF1B;(&#x4E8C;) &#x4F53;&#x5185; cytolabeling &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x539F;&#x4F4D; &#xFF1B; &#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x8FDB;&#x884C;&#x8BC4;&#x4F30;(&#x4E09;) &#x5730;&#x65B9;&#x5E72;&#x9884;&#x5916;&#x7528;&#x6216;&#x773C;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04; &#xFF1B;&#x53CA; (iv) &#x6E17;&#x900F;&#x76EE;&#x6807;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x8DDF;&#x8E2A;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x3001; &#x65E0;&#x521B;&#x7EB5;&#x5411;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Intravital imaging emerged as an indispensible tool in biological research, and a variety of imaging techniques have been developed to noninvasively monitor tissues in vivo. However, most of the current techniques lack the resolution to study events at the single-cell level. Although intravital multiphoton microscopy has addressed this limitation, the need for repeated noninvasive access to the same tissue in longitudinal in vivo studies remains largely unmet. We now report on a previously unexplored approach to study immune responses after transplantation of pancreatic islets into the anterior chamber of the mouse eye. This approach enabled (i) longitudinal, noninvasive imaging of transplanted tissues in vivo; (ii) in vivo cytolabeling to assess cellular phenotype and viability in situ; (iii) local intervention by topical application or intraocular injection; and (iv) real-time tracking of infiltrating immune cells in the target tissue.

High-resolution, noninvasive longitudinal live imaging of immune responses.

Imagerie intravitale a &eacute;merg&eacute; comme un outil indispensable dans la recherche biologique, et une vari&eacute;t&eacute; de techniques d&#39;imagerie ont &eacute;t&eacute; d&eacute;velopp&eacute;s pour surveiller non invasive des tissus in vivo. Cependant, la plupart des techniques actuelles n&#39;ont pas la r&eacute;solution pour &eacute;tudier les &eacute;v&eacute;nements au niveau de la cellule unique. Bien que la microscopie intravitale multiphoton a abord&eacute; cette limitation, la n&eacute;cessit&eacute; d&#39;un acc&egrave;s r&eacute;p&eacute;t&eacute; non invasif pour le tissu m&ecirc;me des &eacute;tudes in vivo longitudinale demeure largement insatisfaite. Nous pr&eacute;sentons maintenant une approche pr&eacute;c&eacute;demment inexplor&eacute;e pour &eacute;tudier les r&eacute;ponses immunitaires apr&egrave;s transplantation d&#39;&icirc;lots pancr&eacute;atiques dans la chambre ant&eacute;rieure de l&#39;oeil de la souris. Cette approche a permis (i) longitudinale, non invasive d&#39;imagerie des tissus transplant&eacute;s in vivo ; (ii) cytolabeling in vivo pour &eacute;valuer le ph&eacute;notype cellulaire et viabilit&eacute; sur place ; (iii) intervention locale par application topique ou par injection intraoculaire ; et le suivi en temps r&eacute;el (iv) d&#39;infiltration de cellules immunitaires dans le tissu cible.

Haute r&eacute;solution et non invasif longitudinale direct imagerie des r&eacute;ponses immunitaires.

Intravital Bildgebung entstand als ein unverzichtbares Werkzeug in der biologischen Forschung und eine Vielzahl von bildgebenden Verfahren wurden entwickelt, um Gewebe in-vivo Bauteilqualit&auml;t zu &uuml;berwachen. Die meisten aktuellen Techniken fehlt jedoch die Aufl&ouml;sung Ereignisse auf der Ebene der einzelnen Zelle zu studieren. Obwohl intravital multiphoton-Mikroskopie diese Einschr&auml;nkung &uuml;berwunden hat, bleibt die Notwendigkeit wiederholter nichtinvasiven Zugriff auf die gleichen Gewebe im in-vivo L&auml;ngsschnittstudien weitgehend ungedeckten. Wir berichten nun auf einem bisher unerforschten Ansatz Immunantworten nach der Transplantation der Bauchspeicheldr&uuml;se Inselchen in der Vorderkammer des Auges Maus zu studieren. Dieser Ansatz aktiviert (i) l&auml;ngs, nicht-invasive transplantierten Gewebe in-vivo imaging; (Ii) in-vivo Cytolabeling zellul&auml;re Ph&auml;notyp und Lebensf&auml;higkeit in-situ zu beurteilen; (Iii) lokale Intervention durch topische Anwendung oder intraokulare Injektion; und (iv) Echtzeit-Verfolgung von infiltrierende Immunzellen im Zielgewebe.

Hochaufl&ouml;sende, nichtinvasiven l&auml;ngs live Bildgebung Immunantworten.

Intravital imaging &egrave; emerso come uno strumento indispensabile nella ricerca biologica, e una variet&agrave; di tecniche di imaging sono stati sviluppati per il monitoraggio non invasivo dei tessuti in vivo. Tuttavia, la maggior parte delle attuali tecniche di mancanza della risoluzione per studiare gli eventi a livello di cella singola. Anche se intravital microscopia multifotonica ha affrontato questa limitazione, la necessit&agrave; di accesso ripetuto non invasiva al tessuto stesso in studi longitudinali in vivo rimane in gran parte insoddisfatta. Segnaliamo ora su un approccio in precedenza inesplorato per studiare la risposta immunitaria dopo trapianto di isole pancreatiche nella camera anteriore dell&#39;occhio del mouse. Questo approccio abilitato (i) longitudinale, non invasivo di imaging dei tessuti trapiantati in vivo; (ii) cytolabeling in vivo per valutare il fenotipo cellulare e vitalit&agrave; in situ; (iii) locale intervento di applicazione topica o iniezione intraoculare; e (iv) di monitoraggio in tempo reale di infiltrazione di cellule immunitarie nel tessuto bersaglio.

Non invasiva, ad alta risoluzione longitudinale live imaging delle risposte immunitarie.

&#x751F;&#x4F53;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x6280;&#x8853;&#x7D44;&#x7E54; in vivo &#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x4F53;&#x591A;&#x5149;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7E26;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x540C;&#x3058;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x306E;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;&#x6E80;&#x305F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x307E;&#x307E;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x4ECA;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x76EE;&#x306E;&#x524D;&#x623F;&#x3078;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x8E0F;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1; (i) &#x7E26;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E; in vivo &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;;(ii) in vivo &#x306E; cytolabeling &#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E; in situ &#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;;(&#x5C40;&#x6240;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3084;&#x773C;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04; iii) &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x4ECB;&#x5165;;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64; (iv) &#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x8FFD;&#x8DE1;&#x3002;

&#x9AD8;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3001;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684;&#x7E26;&#x65AD;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; &#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3002;

Intravital &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xD559;&#xC801; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xAE30;&#xC220; noninvasively &#xC870;&#xC9C1; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB3C4;&#xB85D; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xD604;&#xC7AC; &#xAE30;&#xC220;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBD80;&#xC871; &#xACF5;&#xBD80; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Multiphoton intravital &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC774; &#xC81C;&#xD55C;&#xC774; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xD574;&#xACB0; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACBD;&#xB3C4; in vivo &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xD544;&#xC694;&#xC131; &#xD06C;&#xAC8C; &#xCDA9;&#xC871; &#xB418;&#xC9C0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xB208;&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xCC54;&#xBC84;&#xB85C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC758; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC774;&#xC804; &#xBBF8;&#xAC1C;&#xCC99;&#xB41C; &#xC811;&#xADFC;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; (i) &#xACBD;&#xB3C4;, &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC774;&#xC2DD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;; (&#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xD604; &#xD615; &#xBC0F; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758;; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xD3C9;&#xAC00; ii) &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; cytolabeling (&#xAD6D; &#xC18C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC774; &#xB098; &#xC548; &#xAD6C;&#xB0B4; &#xC8FC;&#xC0AC;; iii) &#xC9C0;&#xC5ED; &#xAC1C;&#xC785; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; (iv) &#xCE68;&#xD22C; &#xB300;&#xC0C1; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xCD94;&#xC801;.

&#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4;, &#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB3C4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758;.

Im&aacute;genes intravital surgieron como una herramienta indispensable en la investigaci&oacute;n biol&oacute;gica, y una variedad de t&eacute;cnicas de imagen se han desarrollado para monitorear de forma no invasiva los tejidos in vivo. Sin embargo, la mayor&iacute;a de las t&eacute;cnicas actuales carece de la resoluci&oacute;n para el estudio de eventos a nivel unicelular. Aunque microscopia intravital de multifot&oacute;n ha abordado esta limitaci&oacute;n, la necesidad de acceso repetido no invasiva al mismo tejido en estudios longitudinales en vivo sigue siendo en gran medida insatisfecha. Ahora divulgamos sobre un enfoque previamente inexplorado para estudiar las respuestas inmunitarias despu&eacute;s del trasplante de islotes pancre&aacute;ticos en el compartimiento anterior del ojo del rat&oacute;n. Este enfoque permitido (i) longitudinal, no invasiva de la proyecci&oacute;n de imagen de los tejidos trasplantados en vivo; (ii) cytolabeling in vivo para determinar el fenotipo celular y viabilidad in situ; (iii) intervenci&oacute;n local de aplicaci&oacute;n t&oacute;pica o la inyecci&oacute;n intraocular; y el seguimiento en tiempo real (iv) de infiltrar las c&eacute;lulas inmunes en el tejido diana.

Imagen vivo longitudinal alta resoluci&oacute;n, no invasivo de la respuesta inmune.

&#x65B0;&#x9C9C;&#x79BB;&#x4F53;&#x80F0;&#x817A;&#x80F0;&#x5C9B;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5305;&#x542B; intraislet &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (ECs)&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C06;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x79FB;&#x690D;&#x672F;&#x540E;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x8840;&#x7BA1;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x5982;&#x4F55;&#x6350;&#x52A9;&#x80F0;&#x5C9B;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE; (DIECs) &#x53EF;&#x80FD;&#x8D21;&#x732E;&#x8840;&#x8FD0;&#x91CD;&#x5EFA;&#x7387;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x548C;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x79FB;&#x690D;&#x529F;&#x80FD;&#x540E;&#x7684;&#x65B0;&#x9C9C;&#x5206;&#x79BB;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x80F0;&#x5C9B;&#x79FB;&#x690D;&#x3002;

&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x80F0;&#x5C9B;&#x80F0;&#x5C9B;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Freshly isolated pancreatic islets contain, in contrast to cultured islets, intraislet endothelial cells (ECs), which can contribute to the formation of functional blood vessels after transplantation. We have characterized how donor islet endothelial cells (DIECs) may contribute to the revascularization rate, vascular density, and endocrine graft function after transplantation of freshly isolated and cultured islets.

Donor islet endothelial cells in pancreatic islet revascularization.

Des &icirc;lots pancr&eacute;atiques fra&icirc;chement isol&eacute;es contiennent, contrairement aux &icirc;lots cultiv&eacute;s, intraislet les cellules endoth&eacute;liales (ECs), qui peuvent contribuer &agrave; la formation de vaisseaux sanguins fonctionnels apr&egrave;s la transplantation. Nous avons caract&eacute;ris&eacute; comment (DIECs) des cellules endoth&eacute;liales des &icirc;lots donateurs peuvent contribuer aux taux de revascularisation, densit&eacute; vasculaire et fonction endocrine greffon apr&egrave;s transplantation d&#39;&icirc;lots fra&icirc;chement isol&eacute;es et cultiv&eacute;es.

Donateurs &icirc;lot cellules endoth&eacute;liales dans la revascularisation des &icirc;lots pancr&eacute;atiques.

Frisch isolierte Pankreas Inseln enthalten, im Gegensatz zum kultivierten Inselchen Intraislet Endothelzellen (ECs), die zur Bildung von funktionalen Blutgef&auml;&szlig;e nach der Transplantation beitragen k&ouml;nnen. Wir haben gekennzeichnet, wie Spender endothelial Inselzellen (DIECs) und die Revascularization Komplettpreise, vaskul&auml;re Dichte und endokrine Funktionsaufnahme nach der Transplantation von frisch isoliert und kultiviert Inselchen beitragen k&ouml;nnen.

Spender endothelial Inselzellen im Pankreas Inselchen Revascularization.

Isole pancreatiche appena isolati contengono, in contrasto con isolotti colte, cellule endoteliali intraislet (ECs), che possono contribuire alla formazione di vasi sanguigni funzionale dopo il trapianto. Noi abbiamo caratterizzato come cellule endoteliali dell&#39;isolotto donatore (DIECs) possono contribuire alla velocit&agrave; di rivascolarizzazione, densit&agrave; vascolare e funzione endocrina innesto dopo il trapianto di isolotti appena colte e isolati.

Cellule endoteliali di isolotto del donatore nella rivascolarizzazione di isole pancreatiche.

&#x65B0;&#x9BAE;&#x5358;&#x96E2;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x5C0F;&#x5CF6;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; intraislet &#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (Ec) &#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE; (DIECs) &#x8840;&#x884C;&#x518D;&#x5EFA;&#x7387;, &#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x79FB;&#x690D;&#x7247;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x65B0;&#x9BAE;&#x306A;&#x5206;&#x96E2;&#x3068;&#x57F9;&#x990A;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x8CA2;&#x732E;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x7279;&#x5FB4;&#x304C;&#x3042;&#x308B;.

&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x5CF6;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x8840;&#x884C;&#x518D;&#x5EFA;&#x306E;&#x3002;

&#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD608;&#xAD00;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; intraislet &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (ECs) &#xD3EC;&#xD568;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC12C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; (DIECs)&#xB294; &#xAC13; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; &#xAD50;&#xC591; &#xB3C5;&#xB3C4;&#xC758; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; revascularization &#xC18D;&#xB3C4;, &#xD608;&#xAD00; &#xBC00;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC774;&#xC2DD; &#xD568;&#xC218;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; revascularization&#xC5D0; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790; &#xC12C; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Reci&eacute;n aislados islotes pancre&aacute;ticos contienen, en contraste con islotes cultivados, c&eacute;lulas endoteliales intraislet (ECs), que pueden contribuir a la formaci&oacute;n de vasos sangu&iacute;neos funcionales despu&eacute;s del trasplante. Hemos caracterizado como c&eacute;lulas endoteliales del islote de donantes (DIECs) pueden contribuir a la funci&oacute;n endocrina del injerto, tasa de revascularizaci&oacute;n y densidad vascular despu&eacute;s del trasplante de islotes reci&eacute;n aislados y cultos.

C&eacute;lulas endoteliales del islote de donantes en la revascularizaci&oacute;n del islote pancre&aacute;tico.

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&#x65E0;&#x521B;&#x4F53;&#x5185;&#x6A21;&#x578B;&#x5C55;&#x793A;&#x81EA;&#x4E3B;&#x652F;&#x914D;&#x5BF9;&#x80F0;&#x5C9B;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

The autonomic nervous system is thought to modulate blood glucose homeostasis by regulating endocrine cell activity in the pancreatic islets of Langerhans. The role of islet innervation, however, has remained elusive because the direct effects of autonomic nervous input on islet cell physiology cannot be studied in the pancreas. Here, we used an in vivo model to study the role of islet nervous input in glucose homeostasis. We transplanted islets into the anterior chamber of the eye and found that islet grafts became densely innervated by the rich parasympathetic and sympathetic nervous supply of the iris. Parasympathetic innervation was imaged intravitally by using transgenic mice expressing GFP in cholinergic axons. To manipulate selectively the islet nervous input, we increased the ambient illumination to increase the parasympathetic input to the islet grafts via the pupillary light reflex. This reduced fasting glycemia and improved glucose tolerance. These effects could be blocked by topical application of the muscarinic antagonist atropine to the eye, indicating that local cholinergic innervation had a direct effect on islet function in vivo. By using this approach, we found that parasympathetic innervation influences islet function in C57BL/6 mice but not in 129X1 mice, which reflected differences in innervation densities and may explain major strain differences in glucose homeostasis. This study directly demonstrates that autonomic axons innervating the islet modulate glucose homeostasis.

Noninvasive in vivo model demonstrating the effects of autonomic innervation on pancreatic islet function.

Le syst&egrave;me nerveux autonome est pens&eacute; pour moduler l&#39;hom&eacute;ostasie du glucose du sang en r&eacute;glementant l&#39;activit&eacute; des cellules endocrines dans les &icirc;lots de Langerhans du pancr&eacute;as. Le r&ocirc;le de l&#39;innervation de l&#39;&icirc;lot, cependant, est rest&eacute; insaisissable parce que les effets directs de l&#39;apport nerveux autonome sur la physiologie des cellules &icirc;lots pancr&eacute;atiques ne peuvent &ecirc;tre &eacute;tudi&eacute;s dans le pancr&eacute;as. Ici, nous avons utilis&eacute; un mod&egrave;le in vivo pour &eacute;tudier le r&ocirc;le de l&#39;hom&eacute;ostasie du glucose d&#39;input dans nerveux &icirc;lot. Nous avons transplant&eacute; des &icirc;lots dans la chambre ant&eacute;rieure de le &oelig;il et trouv&eacute; que greffes d&#39;&icirc;lots pancr&eacute;atiques est devenu dens&eacute;ment innerv&eacute;es par le riche approvisionnement nerveux parasympathique et sympathique de l&#39;iris. Innervation parasympathique a &eacute;t&eacute; mis en image intravitally en utilisant des souris transg&eacute;niques exprimant la GFP dans les axones cholinergiques. Pour manipuler de mani&egrave;re s&eacute;lective l&#39;&icirc;lot nerveux d&#39;entr&eacute;e, nous avons augment&eacute; l&#39;Eclairage pour augmenter le parasympathique d&#39;entr&eacute;e pour les greffes d&#39;&icirc;lots via le r&eacute;flexe pupillaire de la lumi&egrave;re. Cela r&eacute;duit le jeun de la glyc&eacute;mie et am&eacute;liore la tol&eacute;rance au glucose. Ces effets pourraient &ecirc;tre bloqu&eacute;s par l&#39;application topique de l&#39;atropine muscarinique antagoniste &agrave; le &oelig;il, ce qui indique que l&#39;innervation cholinergique locale avait un effet direct sur la fonction d&#39;&icirc;lot in vivo. En utilisant cette approche, nous avons constat&eacute; qu&#39;innervation parasympathique influence fonction &icirc;lot chez les souris C57BL/6, mais pas chez les souris 129 X 1, qui refl&egrave;te les diff&eacute;rences de densit&eacute; de l&#39;innervation et peut expliquer les diff&eacute;rences de d&eacute;formation majeure dans l&#39;hom&eacute;ostasie du glucose. Directement, cette &eacute;tude d&eacute;montre que les axones autonomes qui innervent l&#39;&icirc;lot modulent l&#39;hom&eacute;ostasie du glucose.

Non invasive mod&egrave;le in vivo d&eacute;montrant les effets de l&#39;innervation autonome sur la fonction des &icirc;lots pancr&eacute;atiques.

Das autonome Nervensystem ist gedacht, um Blut-Glukose-Hom&ouml;ostase durch die Regelung des endokrinen Zellaktivit&auml;t in der Langerhans-Inseln der Bauchspeicheldr&uuml;se zu modulieren. Die Rolle der Inselchen Innervation, ist jedoch tr&uuml;gerisch geblieben, weil die direkten Auswirkungen der vegetativen Nervensystem Eingabe auf Inselchen Zellphysiologie der Bauchspeicheldr&uuml;se untersucht werden k&ouml;nnen nicht. Hier haben wir ein in-vivo-Modell verwendet, um die Rolle der Inselchen nerv&ouml;s Eingang in Glukose Hom&ouml;ostase zu studieren. Wir transplantierte Inselchen in der Vorderkammer des Auges und festgestellt, dass die Inselchen Transplantationen von der reichen parasympathische und sympathische Nervensystem Versorgung der Iris dicht innerviert wurde. Parasympathische Innervation war intravitally abgebildet, mit Transgene M&auml;usen, die GFP in cholinerge Axone zum Ausdruck zu bringen. Um gezielt manipulieren konnten wir das Inselchen nerv&ouml;s Eingang, Stimmungslicht um den Eingang zu den Inselchen Transplantate &uuml;ber den Pupillen Licht-Reflex parasympathische zu erh&ouml;hen. Dies reduziert Fasten Glyk&auml;mie und verbesserte Glukosetoleranz. Diese Effekte konnten durch topische Anwendung von der Muskarinischer Antagonist Atropin f&uuml;r das Auge, die angibt, dass diese lokalen cholinerge Innervation hatte direkte Auswirkungen auf die Inselchen Funktion in-vivo geblockt werden. Mithilfe dieses Ansatzes, fanden wir, dass die parasympathische Innervation Inselchen Funktion bei C57BL/6 M&auml;usen beeinflusst aber nicht bei der 129 X 1 Maus, reflektiert Unterschiede in der Dichte Innervation und Hauptform&auml;nderung Unterschiede in der Glukose-Hom&ouml;ostase erkl&auml;ren kann. Diese Studie zeigt direkt, dass autonome Axone nervenst&auml;rkend Ilet Glukose Hom&ouml;ostase modulieren.

Nicht-invasive in Vivo Modell zeigen die Auswirkungen der vegetativen Innervation auf Pankreas Inselchen-Funktion.

Il sistema nervoso autonomo &egrave; pensato per modulare l&#39;omeostasi del glucosio sangue regolando l&#39;attivit&agrave; endocrina delle cellule nelle isole di Langerhans del pancreas. Il ruolo dell&#39;innervazione isolotto, tuttavia, &egrave; rimasta elusivo perch&eacute; gli effetti diretti dell&#39;input nervoso autonomo sulla fisiologia cellulare isolotto non possono essere studiati nel pancreas. Qui, abbiamo utilizzato un modello in vivo di studiare il ruolo dell&#39;omeostasi del glucosio in input nervoso isolotto. Abbiamo trapiantato isolotti in camera anteriore dell&#39;occhio e ha trovato che innesti isolotto &egrave; diventato densamente innervate dalla ricca offerta nervoso simpatico e parasimpatico dell&#39;iride. Innervazione parasimpatico &egrave; stato ripreso intravitally utilizzando topi transgenici che esprimono GFP in assoni colinergici. Per modificare in modo selettivo l&#39;isolotto nervoso di ingresso, abbiamo aumentato l&#39;illuminazione ambientale per aumentare il parasimpatico input per gli innesti isolotto via il riflesso pupillare alla luce. Questo riduce la glicemia digiuno e migliorato la tolleranza al glucosio. Questi effetti potrebbero essere bloccati da applicazione topica dell&#39;atropina antagonista muscarinico all&#39;occhio, che indica che quel locale innervazione colinergica ha avuto un effetto diretto sulla funzione isolotto in vivo. Utilizzando questo approccio, abbiamo trovato che innervazione parasimpatico influenze funzione isolotto nei topi C57BL/6 ma non nei topi 129 X 1, che riflette le differenze nella densit&agrave; di innervazione e potrebbe spiegare le differenze di sforzo importante nell&#39;omeostasi del glucosio. Questo studio dimostra direttamente che autonomiche assoni che innervano l&#39;isolotto modulano l&#39;omeostasi del glucosio.

Modello in vivo non invasiva che dimostrano gli effetti della innervazione autonomica sulla funzione di isole pancreatiche.

&#x81B5;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B9;&#x5CF6;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8840;&#x6DB2;&#x30D6;&#x30C9;&#x30A6;&#x7CD6;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA;&#x30B9;&#x30BF;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x304C;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x5165;&#x529B;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x81B5;&#x81D3;&#x52C9;&#x5F37;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x3067;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x7D9A;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x81B5;&#x795E;&#x7D4C;&#x5165;&#x529B;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B; in vivo &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x773C;&#x623F;&#x5185;&#x306B;&#x81B5;&#x5CF6;&#x3092;&#x79FB;&#x690D;&#x3001;&#x81B5;&#x5CF6;&#x79FB;&#x690D;&#x304C;&#x5BC6;&#x96C6;&#x3001;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3068;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DCA;&#x5F35;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3001;&#x8679;&#x5F69;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306F;&#x3001;intravitally &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x8EF8;&#x7D22; GFP &#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81B5;&#x5CF6;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5165;&#x529B;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x81B5;&#x5CF6;&#x79FB;&#x690D;&#x77B3;&#x5B54;&#x306E;&#x5149;&#x53CD;&#x5C04;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5165;&#x529B;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306E;&#x7167;&#x660E;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7A7A;&#x8179;&#x6642;&#x8840;&#x7CD6;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3001;&#x8010;&#x7CD6;&#x80FD;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;, &#x6297;&#x30E0;&#x30B9;&#x30AB;&#x30EA;&#x30F3;&#x85AC;&#x30A2;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D4;&#x30F3;&#x306E;&#x5C40;&#x6240;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EB;&#x306E;&#x30B3;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F5C;&#x52D5;&#x6027;&#x795E;&#x7D4C;&#x3044;&#x305F; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x81B5;&#x5CF6;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x76EE;&#x306B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x526F;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D; c57bl/6 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x81B5;&#x5CF6;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x306A;&#x3044; 129 X 1 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x76F4;&#x63A5;&#x81B5;&#x5CF6;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x7684; in vivo &#x306E;&#x81EA;&#x5F8B;&#x795E;&#x7D4C;&#x652F;&#x914D;&#x81B5;&#x5CF6;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC790;&#xC728; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xB294; &#xCDCC; &#xC7A5; &#xB3C5;&#xB3C4; Langerhans&#xC758; &#xB0B4; &#xBD84; &#xBE44; &#xC138;&#xD3EC; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC; &#xD608;&#xC561; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xBCC0;&#xC870;&#xB294; &#xC0DD;&#xAC01;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC12C; innervation &#xC5ED;&#xD560;, &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xB2E4; &#xAE30;&#xBB18;&#xD55C; &#xC12C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xD559;&#xC5D0; &#xC790;&#xC728; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC785;&#xB825;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCDCC; &#xACF5;&#xBD80; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. &#xC5EC;&#xAE30;, in vivo &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC12C; &#xAE34;&#xC7A5; &#xC785;&#xB825;&#xB41C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC5ED;&#xD560; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB208;&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xCC54;&#xBC84;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB3C4; &#xC774;&#xC2DD; &#xD558; &#xACE0; &#xC12C; &#xC774;&#xC2DD; &#xB41C; &#xD64D; &#xCC44;&#xC758; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACF5;&#xAE09;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; innervated &#xBC00;&#xB3C4;&#xAC00; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; innervation cholinergic axons&#xC5D0;&#xC11C; GFP&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; intravitally &#xBA87; &#xAD70;&#xB370;&#xB294;. &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC791; &#xD558; &#xC12C; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC744; &#xC785;&#xB825;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB3D9; &#xACF5; &#xBE5B; &#xBC18;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC12C; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785;&#xB825; parasympathetic &#xC99D;&#xAC00; &#xC570;&#xBE44;&#xC5B8;&#xD2B8; &#xC870;&#xBA85; &#xC99D;&#xAC00;. &#xC774; &#xAE08;&#xC2DD; glycemia &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xB0B4;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB208;&#xC73C;&#xB85C;, &#xADF8; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; cholinergic innervation &#xD588;&#xB2E4; &#xC12C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; muscarinic &#xC801;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC544;&#xD2B8;&#xB85C; &#xD540;&#xC758; &#xAD6D; &#xC18C; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBD80; &#xAD50;&#xAC10; &#xC2E0;&#xACBD; innervation C57BL/6 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xC12C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE69;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; 129 X 1 &#xC950;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; innervation &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xBC18;&#xC601; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC8FC;&#xC694; &#xAE34;&#xC7A5;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xC790;&#xC728; axons innervating&#xB294; &#xC12C; &#xD3EC;&#xB3C4; &#xB2F9; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; &#xC870;&#xC808; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBE44; &#xCE68; &#xD22C; &#xC801;&#xC778; in vivo &#xBAA8;&#xB378; &#xC790;&#xC728; innervation &#xCDCC; &#xC7A5; &#xC12C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC1C;&#xD718; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El sistema nervioso aut&oacute;nomo se cree que modulan la homeostasis de la glucosa de sangre mediante la regulaci&oacute;n de la actividad de las c&eacute;lulas endocrinas en los islotes de Langerhans pancre&aacute;ticos. El papel de la inervaci&oacute;n del islote, sin embargo, sigue siendo dif&iacute;cil debido a los efectos directos de entrada nerviosa auton&oacute;mica en la fisiolog&iacute;a de la c&eacute;lula del islote no pueden estudiarse en el p&aacute;ncreas. Aqu&iacute;, utilizamos un modelo in vivo para estudiar el papel de la homeostasis de la glucosa entrada en nervioso del islote. Nosotros transplantadas de islotes en el compartimiento anterior del ojo y encontramos que islote injertos se convirtieron densamente inervados por el rico suministro nervioso simp&aacute;tico y parasimp&aacute;tico del iris. Inervaci&oacute;n parasimp&aacute;tica era reflejada intravitally mediante el uso de ratones transg&eacute;nicos que expresaban la GFP en axones colin&eacute;rgicos. Para manipular selectivamente el islote nervioso entrado, aumentamos la iluminacion para aumentar el parasimp&aacute;tico de entrada a los injertos de islotes mediante el reflejo pupilar de la luz. Esto redujo la glucemia ayuno y mejora la tolerancia a la glucosa. Estos efectos podr&iacute;an ser bloqueados por el uso t&oacute;pico de la atropina antagonista muscar&iacute;nico al ojo, indicando que inervaci&oacute;n colin&eacute;rgica local ten&iacute;a un efecto directo sobre la funci&oacute;n del islote in vivo. Mediante este enfoque, se encontr&oacute; que la inervaci&oacute;n parasimp&aacute;tica influye en funci&oacute;n de los islotes pancre&aacute;ticos en ratones C57BL/6 pero no en ratones 129 X 1, que refleja las diferencias en la densidad de la inervaci&oacute;n y puede explicar las diferencias de tensi&oacute;n importante en la homeostasis de la glucosa. Este estudio demuestra directamente que los axones auton&oacute;micos inervan el islote modulan la homeostasis de la glucosa.

Midhat H. Abdulreda

Diabetes Research Institute,
Department of Surgery

University of Miami Miller School of Medicine

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

Midhat H. Abdulreda

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Diabetes Research Institute,Department of Surgery

University of Miami Miller School of Medicine

Transplantation into the Anterior Chamber of the Eye for Longitudinal, Non-invasive In vivo Imaging with Single-cell Resolution in Real-time

Diabetes Research Institute,
Department of Surgery