Traqueotomia: Um Método para Transplante de Células-Tronco para o pulmão

Resumo

Avanços significativos na identificação de células-tronco estão sendo continuamente feitos. Para traduzir estas descobertas, no entanto, novos métodos para a entrega de celular devem ser concebidos. Aqui eu relato que as vias aéreas proporcionar uma rota segura para o transplante de células-tronco para os pulmões.

Resumo

Doença pulmonar é a principal causa de morte e provavelmente se tornará uma epidemia dado aumentos na poluição e no mundo de fumar. Avanços na terapia de células-tronco podem aliviar muitos dos sintomas associados à doença pulmonar e induzem a reparação alveolar em adultos. Concomitante com a busca contínua de células-tronco aplicável ao tratamento humano, a entrega precisa e homing (para o local da doença) deve ser assegurado para a terapia bem sucedida. Aqui, eu relatar que as células-tronco pode seguramente ser instilado através da traquéia abrindo uma rota non-stop para o pulmão. Este método envolve uma incisão na pele, inserção caudal de uma cânula para dentro e ao longo da luz traqueal, ea injeção de uma mistura de veículos com células-tronco em vias aéreas do pulmão. Uma ampla gama de soluções de mídia e estabilizadores pode ser incutido por meio de traqueotomia, resultando na capacidade de oferecer uma ampla gama de tipos de células. Com o epitélio alveolar confinando essas células para o lúmen, expansão pulmonar e pressão negativa durante a inalação também pode ajudar na integração de células-tronco. Entrega traqueal de células-tronco, com uma absorção rápida ea habilidade de lidar com uma grande variedade de tratamentos, poderia acelerar o desenvolvimento de terapias baseadas em células, abrindo novos caminhos para o tratamento de doença pulmonar.

Protocolo

Pré-operatório

1. Rato destinatário e células do doador
2. Plataforma operacional com rosca de fita e sutura
3. Seringa 1cc
4. Agulha de 23G
5. Anestésico: Avertin 25 mg / ml (alternativamente quetamina 9 mg / ml e xilazina 1 mg / ml)
6. Máquina de cortar cabelo com lâmina # 40
7. Luvas estéreis
8. Compressas com álcool
9. Iodo
10. Esterilizados instrumentos cirúrgicos
11. Fio de sutura
12. Cateter 22G
13. 200 ul pipeta (estéril)
14. Ponteiras esterilizadas
15. Pomada antibiótica cola
16. Sharpie container

Operativo

Técnicas assépticas são utilizados em todo este procedimento.

1. Pesar mouse.
2. Injeção intraperitoneal de anestésicos (250 mg / kg Avertin ou, alternativamente, ketamina 90 mg / kg e xilazina 10 mg / kg) em doses suficientes para permitir a respiração espontânea, mas fornecem concentração-cirúrgico de anestesia. Para a cirurgia para começar o aperto do dedo do pé foi usada como um indicador de dor profunda sem resposta do animal anestesiado.
3. Lay mouse com incisivos dobrada em fio de sutura e cauda de fita para estabilizar.
4. Cabelo clip utilizando uma lâmina # 40 clipper.
5. Luvas de mudança (continuar com luvas estéreis).
6. Desinfectar com álcool duas vezes antes de incisão na pele.
7. Esterilizar área com um iodophore.
8. Utilizando instrumentos esterilizados fazer uma pequena incisão (<1 cm) paralela à traquéia.
9. Cuidadosamente separado do tecido de cartilagem.
10. Um empate é inserido debaixo da traquéia.
11. Suavemente para cima e levantar tie inserir a agulha em traquéia exposta.
12. Remova a agulha e introduza o tubo suavemente, mas rapidamente, até sentir uma ligeira resistência.
13. Células pipeta (até 50 microlitros volume) diretamente no cateter.
14. Remover imediatamente tubo e gravata enquanto rato libertar aparato operacional.
15. Se for necessário segurar delicadamente o rato na vertical (vertical) pelo apego suas patas anteriores e mover-se delicadamente.
16. Fechar a ferida com uma sutura ou cola de antibióticos.

Pós-operatório

1. Mantenha mouse quente.
2. Buprenorfina (0,05 mg / kg) deve ser administrado como analgesia pós-operatória a cada 12 horas durante as primeiras 24 horas após este procedimento.

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Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
23 G needle
1 cc syringe
22 G catheter
suture thread
antibiotic glue ointment
Anesthetic			Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml.