Indução de hipofisite Auto-Imune Experimental em Ratos SJL

Resumo

Este vídeo mostra como induzir hipofisite auto-imunes em camundongos SJL e como avaliar sua gravidade pela histopatologia.

Resumo

Hipofisite auto-imune pode ser reproduzida experimentalmente pela injeção de proteínas pituitária misturado com adjuvante em camundongos suscetíveis ^1. Modelos de ratos nos permitem estudar a forma como se desenrolam as doenças, muitas vezes fornecendo uma boa réplica dos mesmos processos que ocorrem nos seres humanos. Para algumas doenças auto-imunes, como diabetes tipo 1A, existem modelos (o mouse NOD) que, espontaneamente, desenvolver uma doença semelhante à contraparte humana. Para muitas outras doenças auto-imunes, no entanto, o modelo precisa ser induzida experimentalmente. Uma abordagem comum a este respeito é injetar o mouse com um antígeno dominante derivado do órgão em estudo. Por exemplo, os investigadores interessados ​​em tireoidite auto-imune injetar camundongos com tireoglobulina ^2, e os interessados ​​em miastenia gravis injetá-las com o receptor de acetilcolina ^3. Se o autoantígeno para uma determinada doença auto-imune não é conhecido, os investigadores injetar um extrato de proteína bruta do órgão alvo da reação auto-imune. Para hipofisite auto-imunes, a auto-antígeno patogênicos (s) continuam a ser identificados ^4, e, assim, uma preparação de proteína bruta pituitária é usado. Neste artigo de vídeo demonstramos como induzir hipofisite auto-imune experimental em camundongos SJL.

Protocolo

Protocolo Experimental

Uma vez que o imunógeno pituitária está preparada (ver artigo companheiro), é administrado por via subcutânea em camundongos SJL (The Jackson Laboratories, estoque 000.686). Uma segunda injeção idêntico é repetido sete dias depois. Ratos são então usados ​​para coletar in vivo e post-mortem resultados.

Etapa 1. A injecção subcutânea de imunógeno em camundongos SJL pituitária

Ratos são os primeiros anestesiados pela injeção de 0,5 ml de 20 mg / ml 2,2,2 tribromoetanol (Avertin, TCI América, T-1420) por via intraperitoneal. Camundongos são injetados por vi....

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Discussão

Quatro técnicas têm sido relatadas para induzir hipofisite em animais experimentais. A técnica descrita neste artigo, que é a injeção de proteínas pituitária misturado com adjuvante Freund s, é o mais antigo, que remonta a 1967 ^6, e foi melhorado mais recentemente ^1. Outras técnicas são a injeção de glicoproteínas do vírus da rubéola solúveis em 1992 ^7, a injeção estereotáxica de um adenovírus diretamente na glândula pituitária, em 2002 ^8, eo transplante.......

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Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
SJL mice (The Jackson Laboratories)		stock 000686
2,2,2-Tribrom–thanol (Avertin)	TCI America	T-1420
Beckstead’s fixative