A genotipagem rápida de tecido Mouse Usando Extract-N-Amp Tissue Sigma PCR Kit

Resumo

A genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, é feito em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp Tissue PCR kit.

Resumo

Detecção genômica de DNA via PCR de amplificação e detecção em gel de eletroforese é uma maneira padrão que o genótipo de uma amostra de tecido é determinada. Preparação convencional de tecidos para PCR-DNA pronto muitas vezes levar várias horas ou dias, dependendo da amostra de tecido. O genótipo da amostra pode, assim, ser adiado por vários dias, o que não é uma opção para muitos tipos diferentes de experiências. Aqui demonstramos a genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp PCR Tissue Kit. Em primeiro lugar, demonstramos a extração de quinze minutos de DNA da amostra de tecido. Então, nós demonstramos o tempo real de leitura fora da amplificação por PCR da amostra, que permite a identificação de uma amostra positiva, uma vez que está sendo ampliado. Juntos, a leitura de extração e em tempo real permitem uma rápida identificação imediata do genótipo de uma variedade diferente de tipos de tecidos através do método confiável de PCR.

Protocolo

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Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR Kit	Reagent Kit	Sigma-Aldrich	XNATG	Includes: Extraction Solution Neutralization Solution B Tissue Preparation Solution Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix