Os efeitos anti-hipertensivos e mecanismos da decocção de Huotan Jiedu Tongluo em ratos com hipertensão tipo H

Resumo

Aqui, apresentamos um protocolo para induzir hipertensão do tipo H e avaliamos os efeitos anti-hipertensivos da decocção de Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) administrada por via intragástrica. Em ratos com hipertensão do tipo H, o HTJDTLD teve efeitos anti-hipertensivos eficazes, possivelmente associados à inibição da ativação da via de apoptose induzida pelo estresse do retículo endoplasmático (ER).

Resumo

A hipertensão do tipo H, que é uma forma específica de hipertensão caracterizada por níveis elevados de homocisteína plasmática (Hcy), tornou-se um grande desafio de saúde pública em todo o mundo. Este estudo investigou os efeitos hipotensores e os mecanismos subjacentes da decocção Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), uma fórmula de medicina tradicional chinesa altamente eficaz comumente usada para tratar estenose vascular. A metionina foi usada para induzir hipertensão do tipo H em ratos, e o HTJDTLD foi administrado por via intragástrica. Em seguida, as pressões arteriais sistólica e diastólica da artéria caudal de ratos foram medidas por manometria caudal não invasiva de ratos. A avaliação histológica da aorta foi realizada pela coloração de hematoxilina-eosina (HE). O ensaio imunoenzimático (ELISA) foi usado para medir os níveis de Hcy, e a reação em cadeia da polimerase via transcriptase reversa quantitativa (qRT-PCR) e western blotting foram usados para determinar os níveis de mRNA e proteína da proteína reguladora de glicose 78 (GRP78), fator de necrose tumoral (TNF) fator associado ao receptor 2 (TRAF2), c-Jun N-terminal quinases (JNK) e caspase-3. Os resultados mostraram que o HTJDTLD reduziu significativamente a pressão arterial, aliviou as lesões histopatológicas e diminuiu os níveis de Hcy após o tratamento com metionina. Além disso, o HTJDTLD inibiu significativamente a expressão gênica e proteica de GRP78, JNK, TRAF2 e caspase 3, que estão envolvidos principalmente na via de apoptose induzida por estresse do retículo endoplasmático (ER). No geral, os resultados indicaram que o HTJDTLD teve efeitos anti-hipertensivos eficazes em ratos com hipertensão do tipo H e revelaram os mecanismos anti-hipertensivos associados à inibição da ativação da via de apoptose induzida pelo estresse do RE.

Introdução

A hipertensão, um importante fator de risco para ataque cardíaco, acidente vascular cerebral e insuficiência renal, tornou-se um importante desafio de saúde pública que afeta 1 bilhão de pessoas em todo o mundo¹. A homocisteína (Hcy), um aminoácido contendo grupo tiol, é um intermediário metabólico vital do metabolismo da metionina. A hipertensão com níveis plasmáticos elevados de Hcy é definida como hipertensão do tipo H, que pode ser um fator de risco significativo para a ocorrência e recorrência de doenças cardiocerebrovasculares, como o acidente vascular cerebral ^2,3. Estudos recent....

Protocolo

Todos os experimentos com animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) da Universidade de Medicina Chinesa de Changchun. Os materiais estão listados na Tabela de Materiais.

1. Animais e tratamento

1. Divida aleatoriamente um total de 50 ratos adultos espontaneamente hipertensos (SHRs) (machos, 50 dias de idade) em cinco grupos, incluindo grupos controle (CON), metionina (MET), MET + HTJDTLD + maleato de enalapril (EM), MET + EM e MET + HTJDTLD.
   NOTA: Os ratos experimentais foram alojados em um ambiente controlado projetado para garantir seu conforto e bem-....

Discussão

A hipertensão é um dos distúrbios cardiovasculares mais comuns que afeta um terço da população adulta e aumenta o risco de acidente vascular cerebral, doença cardíaca coronária e insuficiência cardíaca e renal⁸. A hipertensão do tipo H é um tipo especial de hipertensão que se refere à co-ocorrência de hipertensão primária e aumento dos níveis de homocisteína e tem atraído ampla atenção ao longo dos anos⁹. Nos últimos anos, o uso de EM oral combinado .......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B