1. Instalação e Preparação de Materiais

1. Colete uma amostra de sedimentos marinhos congelados, congelados, esmagados e homogeneizados. Uma amostra como esta contém muitos dos compostos necessários para os padrões.
   1. As normas são muitas vezes feitas a partir de sedimentos que são deixados após uma expedição ou análise de coring. Por exemplo, neste experimento, é extraído o sedimento obtido do 'Patch de Lama' localizado ao sul de Cape Cod. Este sedimento foi tomado como parte de uma expedição de coring, mas não será usado para responder a perguntas científicas. Podemos, portanto, usá-lo para fazer um padrão.
   2. Coloque um pedaço de ~100 g do sedimento no congelador durante a noite para que ele congele.
   3. Uma vez que o sedimento esteja completamente congelado, ligue o secador congelado (disponível em muitos varejistas de equipamentos científicos como Fisher) e espere até que o condensador atinja o ponto de ajuste (muitas vezes ~-30 °C).
   4. Coloque a amostra de sedimentos no secador congelado e feche o expurgo para começar a puxar um vácuo na amostra.
   5. Dependendo da quantidade de água no sedimento e do tamanho da amostra, pode levar vários dias para a amostra secar.
   6. Uma vez que a amostra esteja seca, desligue o secador congelado, desligue-o e remova a amostra.
   7. Coloque a amostra em uma argamassa enxaguada solvente e triture em pó usando um pilão. Faça isso com toda a amostra e guarde em um pote de vidro no congelador até ficar pronto para extrair.
2. Dependendo do tamanho da amostra, utilize frascos com volumes que variam de 4 a 60 mL. Para este experimento, utilize frascos de vidro borossilicato (40 mL) e tampas seguras de solventes. Combustão dos frascos, pipetas de vidro borossilicato e latas de pesagem a 550 °C por 6h antes de garantir a remoção de possíveis contaminantes orgânicos.
3. Obtenha diclorometano e metanol (ambos são comuns na maioria dos laboratórios de geoquímica orgânica), em seguida, use-os individualmente para enxaguar ferramentas de laboratório e vidros antes do uso. Uma mistura de diclorometano (DCM) ao metanol (MeOH; 9:1) é usada em muitos laboratórios para extrair biomarcadores eficientemente com uma ampla gama de polaridades. Os solventes devem estar livres de contaminantes orgânicos.
4. Adquira um aparelho soxhlet para usar neste experimento (estes podem ser comprados da Fisher Scientific ou outro varejista científico), em seguida, lave-o e exploda-o a 550 °C por 6 h antes de usá-lo.
5. Obtenha dedal de fibra de vidro (pode ser adquirido da Whatman) e combustão a 550 °C por 6 h antes de usá-lo.

2. Preparação da Amostra

1. Coloque uma lata de pesagem queimada na escala do laboratório e depois na piche.
2. Enxágüe a espátula de laboratório com solvente, em seguida, use-a para transferir uma massa apropriada de amostra para a lata de pesagem, e regissão a massa.
   1. A massa da amostra varia dependendo do seu teor de matéria orgânica. Material magro de matéria relativamente orgânica (lama marinha) pode exigir vários gramas, enquanto material rico em matéria orgânica (tecido de folha) pode exigir muito menos.
3. Transfira todo o material na lata de pesagem para um dedal de fibra de vidro queimado.

3. Extração

1. Transfira ~400 mL da mistura DCM:MeOH (9:1) para o frasco de fundo redondo (o frasco deve estar mais da metade cheio) e coloque no manto de aquecimento. Adicione vários chips de ebulição (5-10) enxaguados com solventes.
2. Coloque o dedal da amostra, de ponta aberta, na peça central do aparelho Soxhlet.
3. Coloque a peça central em cima do frasco de fundo redondo e fixe com um grampo de vidro.
4. Instale o condensador em cima da peça central do Soxhlet e fixe com um grampo de vidro.
5. Conecte uma das linhas de água fria do condensador à linha de água fria no capô usando um grampo de mangueira. Encaminhe o outro para o ralo.
6. Ligue a água para garantir a circulação adequada e a drenagem.
7. Ligue o manto de aquecimento e ajuste a temperatura até que o solvente no frasco de fundo redondo esteja fervendo levemente.
8. Monitore a extração algumas vezes durante a próxima hora.
   1. Verifique se a temperatura está bem definida em uma fervura baixa, o solvente está condensando no condensador e pingando na peça central, a peça central está enchendo e esvaziando corretamente, e a água está drenando corretamente para o ralo do capô.
9. Monitore a extração nas próximas 36 horas.
   1. Certifique-se de que a temperatura esteja adequadamente colocada em um pouco de fervura, o solvente está condensando no condensador e pingando na peça central, a peça central está enchendo e esvaziando corretamente, a água está drenando corretamente para o ralo do capô, e o nível de solvente no frasco de fundo redondo ainda está cerca de meio cheio.
10. Depois de 36 horas, pare a extração desligando o manto de aquecimento.
11. Rotule o frasco de "TLE".