Fonte: Laboratório de Jeff Salacup - Universidade de Massachusetts Amherst

Como mencionado em vídeos anteriores, o produto de uma extração de solvente orgânico, um extrato lipídeca total (TLE), é muitas vezes uma mistura complexa de centenas, se não milhares, de compostos diferentes. O pesquisador muitas vezes só está interessado em um punhado de compostos. No caso de nossos dois paleotermômetros orgânicos (U^k'₃₇ e MBT/CBT), o interesse é em apenas 6 compostos (2 alkenones e 4 tetraethers de glicerol isorenoidal). Como discutido nos dois vídeos anteriores desta série, técnicas de purificação podem ser aplicadas a fim de reduzir o número de compostos em uma amostra analisada. Essas técnicas podem alterar quimicamente os componentes indesejados (saponificação), aproveitar as diferentes químicas compostas (cromatografia de coluna) ou usar as diferentes formas e tamanhos das moléculas para incluir ou excluir certos componentes da análise (adução da ureia). A estrutura atômica de diferentes produtos químicos leva alguns compostos orgânicos a formar cadeias longas, estreitas e retas (n-alkanes e alkenones), outros compostos orgânicos para formar estruturas cíclicas complexas, outros para formar estruturas altamente ramificadas, e outros que formam estruturas cíclicas e ramificadas (GDGTs)(Figura 1). As diferentes formas e tamanhos dos compostos em uma amostra podem ser usados para separá-los uns dos outros, da mesma forma que um classificador de moedas separa moedas de diferentes denominações (tamanhos).

Figura 1. Comparação de diferentes estruturas químicas. Decane, um alcano de cadeia reta (A; de http://www.bpc.edu/mathscience/chemistry), ciclohexano, um alkano cíclico (B; de http://www.bpc.edu/mathscience/chemistry), um esteroide, um hidrocarboneto policíclico (C; de www.wikiwand.com), e 2,2 dimetilbutano, um alkano ramificado (D; www.wikimedia.com). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

1. Instalação e Preparação de Materiais

1. Obtenha um extrato lipídeco total (TLE) usando um método de extração de solvente (Sonication, Soxhlet ou Accelerated Solvent Extraction (ASE).
2. Comprar os seguintes materiais de qualquer revendedor químico: pipetas e lâmpadas de vidro borossilicato queimados; água pura; hexana; diclorometano (DCM); metanol; ureia.
   1. Os reagentes devem ser puros e livres de hidrocarbonetos. Alternativamente, a água pura pode ser feita em um laboratório usando um sistema de p

Esta técnica de purificação produz dois frascos diferentes; um aduto rotulado, contendo compostos de cadeia reta e raramente ramificações, e outro não aduto rotulado, contendo compostos altamente ramificados e cíclicos. Este procedimento diminuiu consideravelmente a complexidade de qualquer amostra a ser analisada em um instrumento. Essa diminuição da complexidade é muitas vezes crucial para a análise precisa dos compostos-alvo. Por exemplo, em ambientes próximos à costa apó...

A adução da ureia é frequentemente usada na purificação de n-alkanes, constituintes comuns da cera de folha, a fim de remover compostos de co-eluição antes da análise de isótopos. As proporções de isótopos de carbono e hidrogênio de ceras de folhas nas plantas contêm informações sobre as vias metabólicas e as condições ambientais em que a planta utilizou e viveu, respectivamente. Para determinar as relações de isótopos, grandes quantidades de composto devem ser carregadas em um GC. Tais grandes quan...