Coloque a célula eletroquímica preparada com o substrato SERS de modo gap no palco de um microscópio óptico invertido. Fixe o substrato ao estágio do microscópio grampeando as bordas para evitar o movimento durante as medições eletroquímicas do espectro, devido à tensão dos fios que conectam a célula ao potenciostato. Coloque o eletrodo de referência de cloreto de prata-prata no suporte construído em casa e fixe sua posição apertando o parafuso no suporte do suporte do eletrodo.
Conecte o eletrodo de referência ao clipe de jacaré do eletrodo de referência do potenciostato. Em seguida, conecte o contra-eletrodo de fio de platina ao clipe de jacaré do contra-eletrodo do potenciostato. Finalmente, prenda o fio de cobre preso ao filme de prata ao clipe de jacaré do eletrodo de trabalho do potenciostato.
Insira o fio de platina e o clipe do jacaré no suporte do eletrodo e aperte o parafuso para fixar sua posição. Coloque o suporte do eletrodo sobre a célula eletroquímica para inserir os eletrodos. Em seguida, ligue o laser de 642 nanômetros e ajuste a potência para 500 microwatts.
Em seguida, adicione uma gota de óleo de imersão à lente objetiva. Em seguida, mova o botão de foco para elevar a objetiva até que o óleo entre em contato com o fundo do substrato. Focalize o laser na superfície do substrato SERS do modo gap.
Depois de remover um dos pedaços de olho do microscópio, insira o adaptador em seu lugar. Altere o modo para vídeo no aplicativo da câmera e aumente o zoom o máximo possível. Escaneie o substrato SERS do modo gap movendo o estágio do microscópio para procurar um padrão de emissão SERS isolado em forma de rosquinha.
Uma vez localizado o padrão de emissão em forma de rosquinha, mova a alavanca do desviador de luz do microscópio para direcionar a luz admitida para o espectrômetro. Defina a posição de classificação para 1000 números de onda para detectar a dispersão de lámen deslocada de Stokes de 400 para 1600 região de número de onda. Mantendo a luz laser focada no padrão de emissão em forma de rosquinha, adicione 3 mililitros de um tampão fosfato 0,1 molar de pH 5 na célula eletroquímica.
No software do potenciostato, prepare um experimento de voltamograma cíclico com pelo menos três ciclos de 0 a menos 0,6 volts versus cloreto de prata-prata e uma taxa de varredura de 50 milivolts por segundo. Em seguida, execute os experimentos simultâneos de voltametria cíclica e SERS. Finalmente, mova a alavanca do desviador de luz, para que a luz seja direcionada para a câmera do telefone e comece a gravar um vídeo enquanto executa o experimento de voltametria cíclica.
Nanopartículas de prata individuais no filme fino de prata podem ser identificadas inequivocamente por um padrão de emissão em forma de rosquinha em contraste com um padrão de emissão sólido produzido por dímeros de nanopartículas, trímeros ou multímeros. Os voltamogramas cíclicos SERS foram medidos para nanopartículas individuais, e as moléculas de azul do Nilo dentro e ao redor da lacuna entre a nanopartícula de prata e o filme de prata foram eletroquimicamente reduzidas. As medidas espectroeletroquímicas foram realizadas com a mesma faixa de potencial aplicada.
A modulação eletroquímica do espectro SERS azul do Nilo através do escalonamento do potencial faz com que o pico de intensidade na região do número de ondas 592 diminua com o tempo devido à redução das moléculas de azul do Nilo. A magnitude do viés elétrico alterou a cinética de redução, evidenciada pelo decaimento da área sob o pico da região do número de onda 592.