Imprima uma receita contendo ingredientes de pesagem para a preparação de dieta artificial. Pese todos os ingredientes secos, exceto ágar, em um recipiente. Coloque a mistura de ingredientes secos no liquidificador e adicione cinco mililitros de óleo de linhaça à mistura de ingredientes.
Misture 15 gramas de ágar de malha fina para cada lote de dieta com 400 mililitros de água destilada em um copo de um litro. Aqueça a mistura no micro-ondas até que o ágar esteja perto de ferver, com bolhas finas por toda a mistura. Depois de ferver, adicione 400 mililitros de água destilada à temperatura da torneira para baixar a temperatura para misturar com os ingredientes secos.
Em seguida, coloque copos dietéticos de 74 onças no balcão com as bordas tocando. Adicione a mistura de ágar ao liquidificador e misture bem. Após a mistura, despeje as misturas em xícaras diet, garantindo que a dieta cubra o fundo de cada xícara.
Depois que a dieta esfriar, coloque tampas nas xícaras. Rotule as xícaras com o tipo de dieta e empilha-as em bandejas. Folhas da planta hospedeira da casa com ovos de borboleta em copos de 30 onças com uma cobertura de malha dentro de uma câmara climática de 24 graus Celsius.
Após uma semana, inspecione as xícaras em busca de larvas tardias de primeiro ou início do segundo ínstar. Usando um pincel, transfira as larvas para a dieta artificial. Coloque três larvas em cada copo de quatro onças.
Coloque os copos de lado em uma lixeira plástica, permitindo que o frass caia para o fundo e se afaste da dieta, reduzindo o risco de mofo e doenças. Aconchegue as xícaras dietéticas em condições de temperatura controlada, com níveis de luz baixos a moderados. Monitore os copos quanto a mofo ou doença a cada um ou dois dias, inspecionando através das tampas transparentes dos copos.
Deixe as larvas puparem e emergirem nos copos de dieta. Retire cuidadosamente as borboletas adultas dos copos com as mãos limpas, segurando as quatro asas perto de seu corpo para uma fixação estável. Para marcar as borboletas, segure os indivíduos secos pela cabeça e tórax.
Em seguida, usando uma ponta afiada, marque um número na asa traseira. Determine o sexo das borboletas combinando marcas de asas e exame da genitália. Em seguida, segure o adulto pela cabeça e tórax usando uma mão enquanto abre um envelope de vidro de cera com a outra mão.
Em seguida, transfira o adulto para o envelope e prenda as asas através do envelope. Mantenha as borboletas entre cinco e seis graus Celsius por até uma semana antes da experimentação. Neste estudo de caso, a taxa de sobrevivência das borboletas não foi afetada pelo aumento da concentração de níquel, mas houve um efeito significativo tanto para o cobre quanto para o zinco.
A taxa de desenvolvimento das borboletas foi influenciada pelo cobre e zinco. Com o aumento da concentração de cobre, houve aumento no tempo de desenvolvimento, com desvio significativo do controle a partir de 50 ppm. Com o aumento da concentração de zinco, houve aumento no tempo de desenvolvimento, com desvio significativo da testemunha a partir de 100 ppm.