Comece escolhendo uma larva errante de terceiro ínstar de Drosophila usando pinças longas e rombas. Lave a larva com soro fisiológico semelhante à hemolinfa e, em seguida, seque-a com um lenço. Em seguida, posicione a larva dorsal ou ventralmente em uma placa de dissecção sob o microscópio estéreo.
Dependendo do tecido a ser observado, opte pela dissecção dorsal ou ventral. Fixe os ganchos da boca e a cauda da larva para manter o posicionamento estendido. Em seguida, adicione uma gota do soro fisiológico semelhante à hemolinfa para evitar que a larva seque.
Com tesoura de dissecção, faça uma pequena incisão transversal próxima à extremidade posterior sem cortá-la completamente. Proceder ao corte ao longo da linha média ventral, movendo-se em direção à extremidade anterior. Agora insira quatro pinos de insetos cada um nos cantos da larva.
Faça os ajustes necessários nos pinos do inseto para maximizar o estiramento da larva. Use fórceps para remover suavemente os órgãos internos, evitando danos aos músculos. Para fixar a larva, imergir as carcaças em 100 L de paraformaldeído a 4%, ainda afixadas na placa dissecante.
Depois disso, desmonte os pinos. Em seguida, transfira a amostra para um tubo de microcentrífuga de 2 mL preenchido com PBST a 0,2%. Coloque o tubo em um agitador por 10 minutos a 15 RPM.