Para começar, plaqueie o tumor de bainha de nervo periférico maligno 80% confluente ou células MPNST a uma densidade de 1200 células por poço em placas de 96 poços de paredes pretas. Depois de preparar as diluições do medicamento a ser testado, adicione cada diluição ou veículo a pelo menos três células replicadas. Para avaliar o número direto de células, adicione 33342 hoaxed, a uma concentração final de um a cinco microgramas por mililitro às placas.
E incube as placas por 30 minutos a 37 graus Celsius. Coloque as placas em um citômetro de imagem de alto rendimento e digitalize as placas usando a opção de contagem direta de células para número total de células com tempos de exposição de 100.000 a 600.000 milissegundos. Analise as leituras utilizando o software, exporte-as para uma planilha eletrônica e utilize softwares apropriados para análises estatísticas.
