Para começar, transfira as plantas de batata infectadas pelo vírus para uma câmara de crescimento mantida a 22 graus Celsius. Escolha uma planta para observação e use fita adesiva para imobilizar totalmente a segunda folha inoculada. Em seguida, conecte o microscópio digital ao computador e inicie o software de captura de imagem.
Coloque a folha sob o microscópio. Em seguida, use o mostrador para focar na superfície da folha. Para ajustar as configurações da câmera, clique no botão Configurações.
Agora, defina o brilho para 64, o contraste para 14 e a tonalidade para zero. Em seguida, ajuste o balanço de branco. Em seguida, defina a saturação para 47, a nitidez para zero e a gama para cinco.
Clique no ícone de captura de imagem e selecione a opção Time-lapsed Video. Em seguida, defina a captura de imagem para cada 15 minutos por um total de 24 horas. Pressione o botão Iniciar para iniciar a captura da imagem.
Para salvar as imagens capturadas, selecione todas as imagens e clique no ícone Salvar. Agora, escolha as opções de exportação. Em seguida, defina pontos por polegada para o máximo.
Uma vez salvas, exclua todas as imagens do programa. Para editar as imagens, inicie um software de edição como o ImageJ. Clique em Arquivo, selecione Importar e escolha Sequência de imagens para importar as sequências de tempo das imagens de um único campo de visão.
Cole o caminho do diretório de imagens salvas e pressione OK. Quando a conversão estiver concluída, o ImageJ iniciará automaticamente um player de vídeo interno exibindo o vídeo concluído. Clique em Arquivo, depois em Salvar como e selecione o formato AVI para exportar o arquivo de vídeo.
Quando uma pequena janela for aberta, defina a taxa de quadros para 0,3 FPS e pressione OK para salvar o vídeo como um arquivo AVI. Plantas de batata inoculadas com pelo menos três a quatro semanas de idade com pelo menos três a quatro folhas totalmente desenvolvidas foram usadas para análise microscópica digital. A mesma área na folha inoculada foi observada em intervalos de 15 minutos para determinar a ocorrência e expansão da lesão ao longo do tempo.
Às 14 horas de observação, nenhuma lesão era visível. Cerca de 90 minutos depois, uma lesão visível foi registrada. A lesão começou a se expandir duas horas depois, e continuou a expansão nas oito horas e meia seguintes.
