Para começar, coloque um camundongo C57 preto seis machos anestesiado de oito a 10 semanas no banco cirúrgico. Usando pinças rombas, puxe a língua e segure-a com os dedos. Insira um laringoscópio na boca e visualize a corda vocal.
Estabilize o queixo do mouse no laringoscópio e segure o cateter intravenoso de calibre 20 ou IV com um fio-guia inserido nele. Em seguida, insira levemente o fio-guia na corda vocal e empurre lentamente o cateter IV de calibre 20 na traqueia até que sua parte da asa fique uniforme com a ponta do nariz. Uma vez conectado o mouse ao ventilador, mantenha-o em decúbito lateral com a área temporal direita voltada para cima.
Mantenha a temperatura retal em 37 graus Celsius usando uma almofada de aquecimento e uma lâmpada de calor. Após localizar o arco zigomático e incisar o músculo temporal, utilizar duas pinças para dissecar o arco zigomático subjacente e expor a articulação entre os ossos maxilar e zigomático. Em seguida, usando tesoura, corte uma porção de três milímetros do arco zigomático e remova-o.
Por fim, separe o músculo masseter da base do crânio. Posicionar quatro pequenos afastadores em direções diferentes e expor a base do crânio com um afastador puxando lateralmente os ramos do nervo trigêmeo. Aplicar uma gota de soro fisiológico no crânio acima da artéria cerebral média, ou tronco da ACM e proximal ao ramo do córtex rinal.
Use um moedor elétrico para afinar o crânio até que uma pequena fratura seja visível. E com a ponta da pinça, retire o crânio fino. Coloque um laço de fio único de seda trançada preta em cima do MCA.
Em seguida, insira um 8-O agulha microcirúrgica para levantar o tronco da ACM e amarrar a sutura sob a agulha, deixando as duas extremidades da agulha em cima do nó da alça do fio de seda. Para oclusão transitória da artéria cerebral média, ou MCAO, aperte levemente o nó do fio de seda sob a agulha para bloquear o fluxo sanguíneo arterial, representando o início da MCAO. Use a pinça para segurar a sutura e remova lentamente a agulha no final da isquemia.
A imagem de contraste speckle laser confirmou o suprimento sanguíneo reduzido na ACM direita. Para MCAO transitória após a remoção da sutura, a reperfusão do fluxo sanguíneo cerebral foi evidente, melhorando ainda mais após 24 horas. A coloração TTC do cérebro após 24 horas do AVC demonstrou a geração de tecido infartado nas áreas cortical e do estriado lateral em camundongos jovens e idosos.
O tamanho do infarto foi moderado em relação ao filamento MCAO.
