Laser Capture Microdissection of Oral Submucous Fibrosis Tissues for Morphology and Spatial Information Analysis

Para começar, ligue o sistema e o software de Microdissecção a Laser. Coloque a lâmina A contendo cortes corados de três mícrons de tecidos de fibrose submucosa oral no estágio da lâmina. Observar a morfologia histológica para identificar a área de interesse para microdissecção a laser.

Remova a lâmina A e coloque a lâmina B com o lado do tecido voltado para baixo no palco da lâmina. Em seguida, clique no botão Descarregar para enviar o dispositivo de coleta. Insira um tubo de PCR no dispositivo de coleta e certifique-se de que o tubo esteja fixo.

Em seguida, clique no botão OK. Selecione uma tampa clicando no círculo vermelho correspondente, marcando o dispositivo coletor para tampas de tubo e aguarde até que o círculo selecionado fique verde. Em seguida, clique no botão Desenhar e no botão Desenhar mais Recortar e use o mouse para esboçar a área de interesse.

Clique em Start Cut para capturar a área de interesse, que será coletada pelo boné. Em seguida, pressione o botão inferior para garantir que a amostra capturada seja coletada. Clique no botão da amostra para capturar a próxima amostra.

Finalmente, clique em Descarregar para descarregar o tubo de PCR com a amostra capturada. Neste estudo, utilizando microdissecção a laser da fibrose submucosa oral, são captados tecidos de epitélio e estroma com diferentes padrões. Alterações no número de cópias estavam presentes nas amostras epiteliais, mas não nas amostras de estroma.

O padrão de alternância do número de cópias no epitélio displásico foi observado nos cromossomos três e oito, enquanto as alterações no número de cópias foram detectadas em menor frequência no cromossomo oito do epitélio atrófico.