Midline Laparotomy Surgery in Recipient Mice for Orthotopic Liver Transplantation

Depois de raspar e desinfetar o sítio cirúrgico de um camundongo receptor anestesiado, use uma laparotomia mediana para expor a artéria hepática adequada, ou PHA. Uma vez mobilizado o fígado, ligadura da vasculatura frênica esquerda e paraesofágica com fio de náilon 10-O. Em seguida, retrair o fígado inferiormente e dissecar a veia cava inferior supra-hepática, ou SHIVC, do retroperitônio.

Retrair o fígado superiormente e dissecar a veia cava inferior infra-hepática, ou IHIVC, do retroperitônio. Em seguida, ligadura da veia adrenal direita e expor o hilo hepático. Ligate o PHA com fio de náilon 10-O.

Dissecar o ducto biliar comum, ou CBD, da veia porta, ou PV, e ligá-lo com uma sutura de 7-O perto da bifurcação, criando espaço adequado para a anastomose com CBD. Uma vez pinçado o IHIVC, ligadura temporária do PV com um fio de 7-O. Usando uma agulha de calibre 30, lave 0,5 mililitros de soro fisiológico de heparina na veia porta do fígado nativo.

Uma vez que o SHIVC e IHIVC são pinçados, corte o SHIVC, IHIVC, PV nativo e quaisquer anexos ligamentares restantes para o fígado nativo do receptor. Colocar o aloenxerto hepático do doador na cavidade abdominal e retrair o hilo do aloenxerto do doador para expor o PV. Uma vez que o PV doador e nativo são liberados, insira o manguito previamente feito do PV doador no lúmen do PV hepático receptor. Após a fixação da anastomose, realizar a anastomose feita à mão com fio de náilon 10O com o SHIVC doador e nativo. Finalmente, anastomose completa da parede superior.

Em seguida, remova a sutura de ligadura do PV, seguida das pinças vasculares do SHIVC para iniciar a reperfusão. Realizar anastomose costurada à mão para IHIVC como demonstrado para SHIVC. Após completar a reconstrução, retirar a micropinça ou sutura do IHIVC para reperfundir.

Uma vez criada uma ductotomia, insira o stent de CBD do doador na luz do CBD do receptor e fixe a anastomose com uma sutura de 10-O.