Para começar, abra o software compatível com o instrumento de quadro de carga e selecione um arquivo de controle existente para análise. Ligue o atuador. No menu de calibração, rasgue a leitura de força da célula de carga e defina o deslocamento do atuador para zero.
Depois de garantir que o mouse esteja totalmente anestesiado pelo dedo do pé ou pela cauda, coloque-o em uma posição prona na plataforma. Posicione a perna verticalmente entre dois dispositivos de carga. Encaixe o pé no recorte do acessório superior e o joelho no copo do acessório inferior.
Ajuste manualmente a altura do acessório inferior para aplicar uma pré-carga de um a dois Newton e aperte o parafuso ajustado para manter o mouse na posição. Em seguida, aplique uma única carga de compressão a uma força alvo de 12 a 15 Newton. Defina a taxa de carregamento no arquivo de controle e confirme usando os dados de deslocamento de força.
Se uma taxa de carga mais lenta for aplicada, pare a carga compressiva imediatamente após a lesão para evitar qualquer dano a outros tecidos articulares. Prepare uma seringa de insulina de calibre 29 para injetar solução de sonda ativada por fluorescência. Coloque o rato anestesiado de lado com o focinho em um cone nasal.
Com a mão não injetável, retraia suavemente a pele ao redor do olho para estabilizar a cabeça e projetar o olho. Usando a mão injetora, incline o bisel da seringa em direção ao olho. Incline a seringa paralelamente ao corpo do rato e proceda avançando cautelosamente a seringa para além do olho até que a resistência rígida seja encontrada.
Injete lentamente a solução da sonda no seio retro-orbital e puxe a agulha da cavidade ocular. Finalmente, aplique pomada no olho injetado.