No dia da coleta de sangue, coloque o rato na gaiola às 8:00 da manhã. Pese os alimentos e a água e coloque-os na gaiola. Defina a amostragem de sangue bem-sucedida com base nos seguintes critérios. Peça a um pesquisador cego que registre o peso, o consumo de alimentos e a ingestão de água do rato diariamente às 8:00 da manhã. Em seguida, acaricie suavemente a pele das costas do rato e aperte seu pescoço repetidamente para ajudar o rato a relaxar.
Usando o polegar e o indicador da mão não dominante, segure e levante a pele do pescoço do rato. Usando os três dedos restantes e a palma da mão não dominante, prenda a pele posterior do rato e, com a ajuda da mão dominante, imobilize seus membros dianteiros. Usando o dedo indicador da mão não dominante, empurre suavemente para baixo a pele da cabeça do rato.
Gire a articulação do ombro para fora com os outros dedos ao longo da palma da mão, enquanto a mão dominante estende totalmente a articulação do ombro. Segure o rato firmemente com a mão não dominante para alinhar a cabeça e o corpo em linha reta. Localize a clavícula com a mão dominante e confirme o local de injeção.
Desinfete o local com álcool e, em seguida, lave a seringa com heparina sódica. Segure a seringa paralela ao corpo do rato e a mão dominante com a ponta da agulha voltada para cima e a escala da seringa em direção ao experimentador. Insira a agulha 0,5 centímetros abaixo da incisura da clavícula.
Retire suavemente a seringa para criar pressão negativa, recolhendo 0,1 a 1 mililitros de sangue a uma velocidade constante. Aplique um cotonete para hemostasia e devolva o rato à sua gaiola. Os tempos médios de coleta de sangue para os grupos A e B foram semelhantes ao longo de 96 horas.
As taxas de sucesso na coleta de sangue foram de 93,8% para o grupo A e 95,8% para o grupo B, sem diferença significativa. O grupo A apresentou menor tempo médio de coleta de sangue no segundo dia em relação ao quarto dia. O número de tentativas para coleta de sangue com sucesso foi em média 1,21 para o grupo A e 1,17 para o grupo B. Mais tentativas e maior tempo de punção indicaram maiores taxas de falha.
Ambos os grupos apresentaram ganho de peso constante ao longo de quatro dias. A ingestão de água e ração permaneceu relativamente constante entre ratos do mesmo sexo.
