Para começar, coloque o rato anestesiado em decúbito lateral na mesa cirúrgica estéril. Remova os pelos dos membros inferiores com um barbeador elétrico. Desinfetar a área cirúrgica em movimentos circulares com solução de 5% iota quatro, seguida de álcool a 75%.
Depois de localizar o fêmur proximal e distal, faça uma incisão de 2,5 centímetros ao longo do eixo longo do fêmur para cortar o tecido da pele. Usando uma pinça oftálmica e uma tesoura de tecido, separe a camada de pele da fáscia. Exponha a abordagem lateral do fêmur através do bíceps, fêmures e músculos femorais laterais.
Localize a intersecção dos dois septos musculares e separe cuidadosamente com uma lâmina cirúrgica descartável ao longo da borda do músculo até que a superfície femoral seja alcançada. Em seguida, aplique um separador periosteal para separar sem rodeios os músculos da superfície femoral e expor o meio da diáfise femoral. Usando uma caneta marcadora estéril, marque a área do local do defeito na superfície média da diáfise femoral.
Em seguida, usando uma peça de mão oral de baixa velocidade, faça um pequeno orifício perpendicular à superfície óssea no local marcado, destruindo o periósteo e o córtex ósseo até atingir a cavidade da medula óssea. Expanda o orifício em todas as direções para obter uma forma de cavidade de caixa. Agora segure uma sonda oral rotulada paralela à borda do defeito para determinar o diâmetro e a morfologia do defeito.
Sutura para fechar as camadas muscular e cutânea. Por fim, desinfete a área cirúrgica com 5%iota quatro de dentro para fora.