Para começar, semeie células DAKIKI em placas de 96 poços a uma densidade de 0,4 milhão de células por poço. Configurar os diferentes grupos experimentais e, posteriormente, os tratamentos correspondentes com base no método de agrupamento. Incube as placas por 24 horas a 37 graus Celsius e 5% de dióxido de carbono.
Para o ensaio de citotoxicidade da lactato desidrogenase, adicione cinco microlitros de lisado a cada poço no grupo de controle alto. E incube a placa a 5% de dióxido de carbono e 37 graus Celsius por 15 minutos. Em seguida, adicione 100 microlitros da mistura de reação a cada poço.
Para extinguir a reação, adicione 50 microlitros da solução de parada de reação por poço. Para o ensaio do Kit de Contagem de Células-8, ou CCK-8, após a incubação inicial de 24 horas, adicione 20 microlitros de reagente CCK-8 a cada poço. E devolva as placas à incubadora a 5% de dióxido de carbono e 37 graus Celsius por duas horas.
Os resultados do ensaio de citotoxicidade da lactato desidrogenase mostraram citotoxicidade insignificante induzida pela dioscina em concentrações de 0,25 a 1,0 microgramas por mililitro, que tiveram taxas de liberação de lactato desidrogenase abaixo de 10% O ensaio CCK-8 mostrou que, em comparação com o grupo modelo, a dioscina inibiu a proliferação de células DAKIKI induzida por LPS de maneira dependente da concentração, com as concentrações de 0,5 e 1,0 microgramas por mililitro mostrando inibição significativa.
