Para começar, segure o corpo de um rato firme e estique sua pata traseira. Esfregue o local da injeção com álcool. Em seguida, insira uma seringa de um mililitro, equipada com uma agulha calibre 26 na base da dobra cutânea entre o polegar e o dedo.
Puxe o êmbolo da seringa para aspirar a agulha. Retire e reposicione a agulha, se necessário. Injetar 0,5 mililitros de cloreto de sódio a 0,9% com ou sem brometo de escopolamina em um único movimento constante.
Para realizar o teste de secreção lacrimal, primeiro corte metade de uma tira de papel filtro ao longo da linha central. Corte a cabeça da tira para deixá-la lisa. Coloque a tira de papel de filtro no terço externo do saco conjuntival da pálpebra inferior do rato.
Após cinco minutos, use uma pinça para prender a tira de papel filtro em um tubo de microcentrífuga. Coloque uma marca na parede do tubo para registrar o volume de lágrima. Para manchar a córnea do olho do rato, solte 0,5 microlitros de solução de fluoresceína sódica a 0,5% no saco conjuntival inferior de cada olho.
Após três minutos, observe a córnea sob luz azul. Pegue a conjuntiva bulbar dos olhos de um rato eutanasiado. Excisar a córnea do lado direito de cada rato e fixá-la imediatamente em paraformaldeído a 4%.
Recorte a epiderme cefálica do tecido subcutâneo ao longo da linha que liga a orelha e o canto externo do olho. Em seguida, expanda a incisão para ambos os lados e isole a glândula orbital extra amarelada. Em seguida, remova completamente o pelo do rato e separe a glândula orbital extra com solução de cloreto de sódio a 0,9%.
A secreção lacrimal do grupo escopolamina foi significativamente reduzida. A escopolamina não causou defeitos epiteliais corneanos, evidenciado pela ausência de coloração corneana. O epitélio corneano dos grupos escopolamina foi relativamente mais fino que o grupo controle.
O grupo 7,5 também apresentou frouxa conexão intracelular e estrutura vacular na camada basal. Os grupos controle apresentaram epitélios corneanos significativamente mais espessos. A escopolamina pareceu causar alterações inflamatórias nas glândulas lacrimais, indicativas de danos funcionais às glândulas lacrimais.
Substância mucinosa reduzida foi observada nos grupos 2,5 e cinco, com infiltração livre de linfócitos. Além disso, o grupo 7.5 mostrou arranjo irregular das células com células epiteliais de forma irregular. A escopolamina também causou alterações morfológicas na conjuntiva.
