Comece colocando o tecido cerebral isolado de camundongos em 1 mililitro de tampão de digestão por cérebro em placas de Petri separadas no gelo. Pique completamente os tecidos cerebrais em pequenos pedaços usando uma lâmina de bisturi limpa. Usando uma pipeta de transferência de plástico com sua ponta cortada, transfira cuidadosamente cérebros picados para poços individuais dentro de uma placa de 24 poços no gelo.
Cubra a placa com um pedaço grande de filme transparente e flexível, feche a tampa e incube no gelo por 30 minutos. Em seguida, transfira a solução cerebral digerida para homogeneizadores individuais de vidro gelado de 7 mililitros em gelo contendo 5 mililitros de tampão FACS frio. Despeje suavemente cada cérebro com um pilão solto até obter uma suspensão de célula única.
Salte suavemente com o pilão apertado três a quatro vezes para garantir uma suspensão de célula única antes de transferir para tubos de polipropileno de 15 mililitros.