Para começar, abra o software de análise de dados. No canto superior esquerdo, clique no botão de arquivo e selecione abrir. Para selecionar os arquivos de sua escolha, clique com o botão direito do mouse no nome do arquivo e selecione propriedades.
Em seguida, selecione o status da calibração. Na caixa suspensa, selecione calibração interna para o espectrômetro de massa. Certifique-se de que todos os erros sejam inferiores a uma parte por milhão.
Depois disso, selecione a calibração de mobilidade interna e confirme se o erro é inferior a uma parte por milhão. Em seguida, clique com o botão direito do mouse no cromatograma e selecione editar cromatograma. Em digitar, clique na caixa suspensa e selecione o cromatograma de íons extraídos.
Em filtro, selecione todos os MS e, para o modo de varredura, selecione todos para exibir os picos da molécula de interesse, em vez de apenas seus fragmentos. Existem duas opções de filtro para seleção de moléculas, massas ou fórmula. Se massas for selecionada, escolha o M teórico sobre Z da molécula de interesse, que neste caso é 829,7985.
Se a fórmula for selecionada, escolha a fórmula para a molécula e as formas iônicas de interesse, que neste caso é o amônio. Para largura, selecione mais ou menos um. Para polaridade, certifique-se de que mantém o modo positivo.
Em mobilidade, selecione 1,455 a 1,465 para isolar a molécula de interesse e filtrar as moléculas que não se enquadram nesses valores. Depois que os parâmetros forem selecionados, clique em alterar seguido de ok no canto superior direito. Após um breve período de tempo, o software processará as seleções e produzirá um cromatograma.
Clique com o botão direito do mouse na linha de base da origem do pico de interesse e arraste enquanto segura até o final do pico para obter um espectro de massa vivo de fragmentos dentro desse tempo de retenção. Clique com o botão direito do mouse à esquerda da tela no mobilograma e selecione editar mobilograma. Uma janela chamada editar rastros de mobilograma aparecerá.
Siga as etapas demonstradas anteriormente. Para o tempo de retenção, insira o tempo de retenção do pico de interesse. Depois que os parâmetros forem selecionados, clique em adicionar e ok no canto superior direito.
Aguarde até que o software processe as seleções e produza um cromatograma. Para extrair íons, repita as etapas demonstradas anteriormente até que uma lista de íons seja formada. Na parte inferior da janela MS, selecione o perfil MS e fragmente o MS para permitir uma visão do espectro de íons de uma varredura completa e passiva.
Para a visualização do espectro, clique com o botão direito do mouse e selecione copiar espectros compostos. Os dados de espectro que aparecem à direita podem fornecer mais informações sobre o composto, como poder de resolução de resolução, intensidade e relação sinal-ruído. Para processar os dados, integre manualmente o cromatograma e os picos de mobilidade para fornecer informações valiosas sobre a molécula de interesse.
Clique com o botão direito do mouse para encontrar e selecionar compostos manualmente cromatograma ou mobilograma. Clique com o botão esquerdo e destaque o pico desejado. As informações obtidas incluem tempo de retenção, área, relação sinal-ruído e mobilidade.
